CN104688824A - 白蜡树子抗肿瘤提取物及其组合物的医药用途和制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药白蜡树子抗肿瘤提取物及其组合物的医药用途和制备方法以及它在制备预防及治疗宫颈癌、乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、脑胶质瘤、肝癌等恶性肿瘤药物中的应用。所述的提取物通过如下方法获得：先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:17，体积比）洗脱，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:30，体积比）洗脱，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥即为该抗肿瘤活性提取物。
Description
技术领域
本发明属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药白蜡树子抗肿瘤提取物及其组合物的制备方法以及它在肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤等恶性肿瘤的预防及治疗上的用途。
背景技术
本品为木犀科植物白蜡树，学名 Fraxinus chinensis Roxb ，苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophylla Hance及其同属多种植物干燥的种子。我国南北名地都有分布。白腊树是白腊虫的最适寄主。历史上西昌等地建有许多白蜡树园放养白蜡虫，以取白蜡，过去西昌白蜡虫交易的“虫会”闻名全国。另，白蜡树木材坚韧，供制家俱、农具、车辆、胶合板等；枝条可编筐；树皮称“春皮”，中医学上用为清热药。
白蜡树子功效生干生热，填精壮阳，补肾固精，止咳平喘，补心安神，利尿消石，驱寒助孕。现在药理学研究证明白蜡树子具有肝癌、肺癌、胃癌、肠癌、胰腺癌等恶性肿瘤的预防及治疗。
本发明在深入地研究白蜡树子的抗癌活性时意外地发现，白蜡树子除了具有诱导白血病细胞凋亡的功效外，亦具有很好的乳腺癌、宫颈癌、肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、脑胶质瘤等恶性肿瘤的预防及治疗作用，该活性提取物及其组合物有望应用到多种癌症的预防和治疗上。
发明内容
本发明所解决的技术问题是提供一种白蜡树子提取物。
本发明还提供了以白蜡树子提取物为主要活性成分的组合物。
本发明同时提供了白蜡树子提取物及其组合物的制备和应用。
本发明是通过如下技术方案实现的：
维吾尔药白蜡树子经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶（SiO2）柱分离，上样后的硅胶柱，用石油醚：丙酮混合溶剂梯度洗脱（石油醚：丙酮，比例见表1），各石油醚：丙酮比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发现先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱，洗脱得到的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为抗肿瘤活性提取物，而其他比例的洗脱组分，不具有抗肿瘤活性。特别地，优选为先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:30，体积比）洗脱25倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:30，体积比）洗脱30倍柱体积，洗脱液干燥即为本发明抗肿瘤活性的提取物。抗肿瘤活性的提取物可以通过以上方法得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该抗肿瘤活性提取物从未见文献报道，其薄层谱色谱（TLC）分析表征如图1，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（6:1:1）显色方法：香草醛-硫酸显色。
具体，发现过程如下：
1、白蜡树子经甲醇超声提取物的制备
取维吾尔药白蜡树子20 g，经100 ml甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，得提取物SN0058A 763.8 mg，留样34.4 mg，剩余729.4 mg，石油醚-丙酮系统洗脱。
2、石油醚：丙酮混合溶剂梯度洗脱方法和结果
取维吾尔药白蜡树子20 g，经100 ml甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，得提取物SN0058A 763.8 mg，留样34.4 mg，剩余729.4 mg。上柱，甲醇溶解，共用甲醇15 ml。上硅胶柱色谱，拌样硅胶1 g，空白硅胶10 g，玻璃柱内径1.5 cm，石油醚：丙酮系统梯度洗脱（条件见表1），柱体积12.5 ml，每个梯度洗脱100 ml，得到，各个浓度提取洗脱液的洗脱物，回收溶剂，即得，石油醚：丙酮梯度洗脱提取物，TLC分析结果见图2，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（6:1:1），显色方法：香草醛-硫酸显色。
3、抗肿瘤活性筛选方法和结果
1）实验条件
a) 细胞株信息
人子宫颈癌细胞株Hela购于中国典型培养物保藏中心细胞库。
b) 药品及试剂
样品无菌条件下，DMSO 溶解配置成母液浓度为100mg/mL，使用时用RPMI-1640 培养液稀释至所需浓度（DMSO≤1 ‰）。
RPMI Medium 1640培养基干粉购于美国GIBCO公司。胎牛血清购于北京元亨圣马生物技术研究所。Trypsin 1:250、二甲基二苯基四氮唑溴盐（MTT）。
c) 仪器
CO2培养箱（SANYO，日本）
垂直层流洁净工作台（上海上净净化设备有限公司）
倒置生物显微镜（重庆光电仪器有限公司）
低/高速台式离心机（上海安亭科学仪器厂）
电子天平（奥豪斯仪器有限公司）
酶标仪（伯乐生命医学产品有限公司）
立式压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂）
鼓风干燥箱（上海跃进医疗器械厂）
PH计（SARTORIUS，德国）
2）实验方法和过程
人子宫颈癌细胞株Hela以4000/孔的密度铺于96孔板，每孔100ul，12h后使用。各组分以DMSO溶解为100mg/mL储存液，保存于-20℃待用。铺板后12h，观察细胞汇合率约为40%，加药，浓度均为100μg/mL，每个组分3 个复孔。每板细胞设立二个对照组(培养基+细胞；含0.1%DMSO培养基+细胞)，3个空白孔(只有培养基)。加入药物24小时后，加入20μl四甲基偶氮唑盐化学名为3-(4,5-二甲基噻唑)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-dimethyl-2thiazolyl)-2, 5-diphenyl-tetrazolium bromide，MTT)，继续培养4小时。完全弃去上清液，加入100μl DMSO，混匀使MTT完全溶解，去气泡。490nm测定OD值。
抑制率 ( IR) =（A对照－A试验）／(A对照－A空白)×100%
3）实验结果
表2
结果发现
本发明最优方案为：维吾尔药白蜡树子经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱，用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，得到的高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物。该抗肿瘤活性提取物从未见文献报道，其TLC分析表征如图1。
4、抗肿瘤有效提取物的提取方法研究
1）提取溶剂的种类研究
分别用甲醇、乙醇、水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂等有机溶剂提取，并测试提取物对MCF7细胞的抗肿瘤活性，结果如下：
表3
研究结果表明：提取用有机溶剂可以为甲醇、乙醇、水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂。
2）提取溶剂的用量研究
分别用1、2、5、10、20、30、40、50倍（重量/体积比）有机溶剂提取，并测试提取物对Hela细胞的的抗肿瘤活性，结果如下：
表4
提取物提取用有机溶剂用量为药材重量的2-50倍（重量/体积比）。
3）干燥方法的研究
分别用真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法等方法，对得到的抗肿瘤活性提取物进行干燥，以含水量、TLC、活性测试为指标，发现真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法适用于对MCF7细胞抗肿瘤活性提取物进行干燥，其中，最优为真空干燥法、冷冻干燥法。
表5
优选地，白蜡树子抗肿瘤提取物的制备方法为：
维吾尔药白蜡树子经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱2-50倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱2-50倍柱体积，用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，得到的高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物。以上条件最优为先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱15倍柱体积。其中，
1) 提取物提取用溶剂可以为甲醇、乙醇、丙酮、水、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂，最优条件为甲醇和95%乙醇。提取物提取用溶剂用量为药材重量的2-50倍（重量/体积比）。
2) 提取物干燥方法可以为真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法等，最优为真空干燥法、冷冻干燥法。
5. 白蜡树子抗肿瘤有效提取物（洗脱液100：30时干燥所得）的抗肿瘤活性研究
利用各种肿瘤细胞，如乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤、肝癌等恶性肿瘤细胞株，分别测试白蜡树子抗肿瘤提取物的抗肿瘤活性，IC50结果如下：
表6
因此，我们发现，白蜡树子抗肿瘤提取物具备抗肿瘤活性，可望用于各种肿瘤如乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤、肝癌等恶性肿瘤细胞株的预防及治疗。
6、白蜡树子抗肿瘤有效提取物的组合物及其制备方法研究
1）固体分散体
处方
白蜡树子提取物 20g
聚乙烯吡咯烷酮 80g
固体分散100g
制备方法：
称取白蜡树子提取物和载体聚乙烯吡咯烷酮（PVP）按比例、1:2、1:4、1:6的质量比分别放入烧杯中，加入无水乙醇，磁力搅拌器搅拌至白蜡树子提取物和载体完全溶解，转入旋蒸仪中除去溶剂，干燥，粉碎过80目筛，即得白蜡树子提取物PVP包合物。
2）环糊精包合物
处方：
白蜡树子提取物 20g
β-环糊精 80g
包合物100g
制备方法：
将β-环糊精与1-5倍水研匀，加白蜡树子提取物（水难溶性的应先溶于少量有机溶剂中）充分研磨至成糊状物，低温干燥即得。
3）分散片处方:
白蜡树子提取物 100
十二烷基硫酸钠 1
预胶化淀粉 10
可溶性淀粉 100
交联聚维酮 10
微晶纤维素 10
微分硅胶 0.3
滑石粉 1
100片
制备方法：
1. 白蜡树子提取物淀粉分散体的制备，精密称取白蜡树子提取物，加入适量的十二烷基硫酸钠，用70%的乙醇溶解加入等比例的可溶性淀粉混合均匀后，在70℃的温度下蒸干，粉碎，过100目筛；
2. 称取处方量，白蜡树子提取物淀粉分散体，交联聚维酮，预胶化淀粉，用70%乙醇做湿润剂，边加入边搅拌，制成湿颗粒过14目筛，室温下放置15min 后， 60℃烘箱烘干45min，16目筛整粒，加入滑石粉和微分硅胶，混合均匀后，压片。
7、白蜡树子抗肿瘤有效提取物的检测方法研究
我们发现，可以用薄层色谱的方法，很好地检测和标示白蜡树子抗肿瘤有效提取物的特征。见图1
具体条件为：色谱条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮=3:1:1，显色方法：香草醛浓硫酸显色
附图说明：
图1 白蜡树子Hela抑制活性提取物的TLC色谱图；
图2 白蜡树子得到的化学组分的TLC色谱图。
具体实施方式
以下实施例表示本发明的实用性，本发明不受此限制。
实施例 1：
取维吾尔药白蜡树子20 g，经100 ml甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.5 cm 内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱15倍柱体积，用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥，得到的高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物。经测试，其抗肿瘤活性为IC50=79.0 μg/mL。
实施例 2：
取维吾尔药白蜡树子20 g，经100 mL乙醇超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.5 cm 内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱15倍柱体积，用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该活性提取物。经测试，其抗肿瘤活性为IC50=85.0 μg/mL。
实施例 3：
取维吾尔药白蜡树子20 g，经100 mL石油醚超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.5 cm 内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱15倍柱体积，用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，旋蒸干燥法，即为该活性提取物。经测试，其抗肿瘤活性为IC50=77.0 μg/mL。
实施例 4：
取维吾尔药白蜡树子20 g，经100 mL丙酮超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.5 cm 内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱15倍柱体积，用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，鼓风干燥，即为该活性提取物。经测试，其抗肿瘤活性为IC50=79.0 μg/mL。
实施例 5：
取维吾尔药白蜡树子20 g，经100 mL氯仿超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.5 cm 内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱15倍柱体积，用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，离心干燥，即为该活性提取物。经测试，其抗肿瘤活性为IC50=75.0 μg/mL。
实施例 6：
取维吾尔药白蜡树子20 g，经100 mL乙酸乙酯超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.5 cm 内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱15倍柱体积，用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该活性提取物。经测试，其抗肿瘤活性为IC50=65.0 μg/mL。
实施例 7：
取维吾尔药白蜡树子20 g，经100 mL甲醇水混合溶剂（甲醇：水=1：1）超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.5 cm 内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱15倍柱体积，用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该活性提取物。经测试，其抗肿瘤活性为IC50=83.0 μg/mL。
实施例 8：
取维吾尔药白蜡树子20 g，经100 mL乙醇水混合溶剂（乙醇：水=1：1）超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.5 cm 内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱15倍柱体积，用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该活性提取物。经测试，其抗肿瘤活性为IC50=53.0 μg/mL。
实施例 9：
取维吾尔药白蜡树子20 g，经100 mL乙醇-水混合溶剂（乙醇：水=90：10）超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.5 cm 内径小柱），先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱10倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱15倍柱体积，用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该活性提取物。经测试，其抗肿瘤活性为IC50=66.0 μg/mL。
实施例 10：固体分散体
称取白蜡树子提取物和载体聚乙烯吡咯烷酮（PVP）按比例、1:2、1:4、1:6的质量比分别放入烧杯中，加入适量的无水乙醇和Vc，磁力搅拌器搅拌至白蜡树子提取物和载体完全溶解，充分混合均匀后转入旋蒸仪中除去有机溶剂，干燥，粉碎过80目筛，即得白蜡树子提取物PVP包合物。
实施例 11：环糊精包合物
将β-环糊精与 1-5 倍水研匀,加白蜡树子提取物( 水难溶性的应先溶于少量有机溶剂中) 充分研磨至成糊状物, 低温干燥即得。
实施例12：分散片
1. 称取干燥的白蜡树子提取物，加入适量的十二烷基硫酸钠，使用70%的乙醇充分溶解，加入水溶性淀粉与白蜡树子提取物（1:1），搅拌混合均匀，在70℃下干燥，粉碎，过100目筛，得白蜡树子提取物分散体。
精密称取处方量，白蜡树子提取物分散体，交联聚维酮，可压性淀粉，用70%乙醇做湿润剂，边加入边搅拌，14目筛制成湿颗粒，室温下放置15min后，70℃烘箱烘干45min，16目筛整粒，加入滑石粉和微分硅胶，混合均匀后，压片。
Claims (11)
1.一种维吾尔药白蜡树子提取物，其特征为维吾尔药白蜡树子经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比为100:17的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，继用体积比为100:30的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，用体积比为100:30的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥即为该提取物。
2.如权利要求1所述维吾尔药白蜡树子提取物，其特征为，提取所用溶剂可以为甲醇、乙醇、水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂或乙醇水混合溶剂，最优条件为甲醇和95%乙醇。
3.如权利要求1所述维吾尔药白蜡树子提取物，其特征为维吾尔药白蜡树子经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:17，体积比）洗脱，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:30，体积比）洗脱2-50倍柱体，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥，即为该提取物。
4.如权利要求1-3任何一项所述的一种维吾尔药大戟脂提取物，其特征为，用于洗脱的石油醚-丙酮混合溶剂的洗脱体积为2-50倍柱体积。
5.如权利要求1所述提取物的制备方法，其特征为：维吾尔药白蜡树子经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:17，体积比）洗脱2-50倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:30，体积比）洗脱2-50倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:30，体积比）洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥，即为该提取物；以上条件最优为先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:30，体积比）洗脱25倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:30，体积比）洗脱30倍柱体积。
6. 一种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的维吾尔药白蜡树子提取物和药学上可接受的载体。
7.一种药物制剂，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的松香白蜡树子提取物或权利要求6所述的药物组合物。
8.如权利要求7所述的药物制剂，其特征在于，所述的制剂为固体分散体、环糊精包合物、分散片。
9.如权利要求1-5任何一项所述提取物或权利要求6所述的组合物或权利要求7所述的药物制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的肿瘤为脑胶质瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌或肝癌。
11.如权利要求1-5任何一项所述的白蜡树子提取物，其特征在于，用TLC法检测，其色谱条件为：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮=3:1:1，显色方法：香草醛浓硫酸显色。
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| CN101347470A (zh) * | 2008-08-01 | 2009-01-21 | 石任兵 | 女贞子总三萜提取物和总酚提取物及其同时制备方法 |
| CN101817864A (zh) * | 2010-04-08 | 2010-09-01 | 苏州宝泽堂医药科技有限公司 | 一种提取纯化齐墩果酸和女贞苷的方法 |
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2015
- 2015-02-04 CN CN201510058781.4A patent/CN104688824A/zh active Pending
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