CN105982962A - 肉桂叶抗肿瘤提取物及其组合物的医药用途和制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药肉桂叶抗肿瘤提取物及其组合物的医药用途和制备方法以及它在制备预防及治疗乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤、肝癌等恶性肿瘤药物中的应用。所述的提取物通过如下方法获得：先用氯仿：甲醇混合溶剂（氯仿：甲醇，100:0，体积比）洗脱，继用氯仿：甲醇混合溶剂（氯仿：甲醇，100:5，体积比）洗脱，洗脱得到的氯仿：甲醇混合溶剂（氯仿：甲醇，100:0-100:5，体积比）洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为抗肿瘤活性提取物。
Description
技术领域
本发明属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药肉桂叶抗肿瘤提取物及其组合物的医药用途和制备方法以及它在制备预防及治疗肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤等恶性肿瘤药物中的应用。
背景技术
本品为樟科植物肉桂，学名Cinnamomum cassia Presl，樟科植物肉桂的叶子。我国南北名地都有分布。肉桂，常绿乔木，高12-17m。树皮灰褐色，芳香，幼枝略呈四棱形。叶互生，革质；长椭圆形至近披针形；叶柄粗壮，长1-2cm。圆锥花序腋生或近顶生；浆果椭圆形或倒卵形。种子长卵形，紫色。生态环境：生于常绿阔叶林中、但多为栽培。具特异香气、味微辛、辣，叶柄味较浓。
肉桂叶功效温中散寒；解表发汗。主外感风寒；头痛恶寒；咳嗽；胃寒胸闷；脘痛呕吐；腹痛泄泻；冻疮。
本发明通过系统地筛选研究，意外地发现肉桂叶提取物具有显著抗肿瘤活性，即肉桂叶提取物对乳腺癌、宫颈癌、肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、脑胶质瘤等恶性肿瘤的具有很好的预防及治疗作用，可以应用于癌症的预防和治疗。
发明内容
本发明所解决的技术问题是提供一种提取物。
本发明还提供了以提取物为主要活性成分的组合物。
本发明同时提供了肉桂叶提取物及其组合物的制备和在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明是通过如下技术方案实现的：
维吾尔药肉桂叶经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，用氯仿：甲醇混合溶剂梯度洗脱(氯仿：甲醇，具体比例见表1)，各氯仿：甲醇比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发现先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:1-100:5，体积比)洗脱，氯仿：甲醇100:5洗脱液干燥后，具有显著地抗肿瘤活性，优选地，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱，氯仿：甲醇100:5洗脱液干燥即得抗肿瘤活性的化合物，可以通过以上方法，得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该活性提取 物从未见文献报道，其100:5洗脱液TLC分析表征如图1，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：氯仿：乙酸乙酯：甲醇＝4:1:1，显色方法：香草醛浓硫酸显色。
具体，发现过程如下：
1、肉桂叶经甲醇超声提取物的制备
取维吾尔药肉桂叶20g，经溶剂超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物SN00151.1009g。
2、氯仿：甲醇混合溶剂梯度洗脱方法和结果
取维吾尔药肉桂叶20g，经溶剂超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物SN00151.1009g。上柱，甲醇溶解，共用甲醇15ml。上硅胶柱色谱，拌样硅胶1.2g，空白硅胶10g，玻璃柱内径2.0cm，氯仿：甲醇系统梯度洗脱(氯仿：甲醇，体积比，见表1)，每个梯度洗脱200ml，得到，各个浓度提取洗脱液的洗脱物，回收溶剂，即得，氯仿：甲醇梯度洗脱提取物，TLC分析结果见图2，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：氯仿：乙酸乙酯：甲醇＝4:1:1，显色方法：香草醛浓硫酸显色。
表1
| 梯度(氯-甲) | 体积(mL) | 编号 | 重量(g) |
| 100:0 | 200 | SN001501 | 0.0140 |
| 100:01 | 200 | SN001502 | 0.0337 |
| 100:02 | 200 | SN001503 | 0.0158 |
| 100:03 | 200 | SN001504 | 0.0080 |
| 100:04 | 200 | SN001505 | 0.0117 |
| 100:05 | 200 | SN001506 | 0.0655 |
| 100:06 | 200 | SN001507 | 0.0088 |
| 100:08 | 200 | SN001508 | 0.0129 |
| 100:10 | 200 | SN001509 | 0.0176 |
| 100:0 | 200 | SN001510 | 0.0189 |
| 100:14 | 200 | SN001511 | 0.0181 |
| 100:5 | 200 | SN001512 | |
| 100:20 | 200 | SN001513 | |
| 100:25 | 200 | SN001514 | |
| 100:30 | 200 | SN001515 | |
| 100:50 | 200 | SN001516 | |
| 100:100 | 200 | SN001517 | |
| 甲醇 | 200 | SN001518 |
3、抗肿瘤活性筛选方法和结果
1)实验条件
a)细胞株信息
大鼠脑胶质瘤细胞株C6购于中国典型培养物保藏中心细胞库。
b)药品及试剂
样品无菌条件下，DMSO溶解配置成母液浓度为100mg/mL，使用时用RPMI-1640培养液稀释至所需浓度(DMSO≤1‰)。
RPMI Medium 1640培养基干粉购于美国GIBCO公司。胎牛血清购于北京元亨圣马生物技术研究所。Trypsin 1:250、二甲基二苯基四氮唑溴盐(MTT)。
c)仪器
CO2培养箱(SANYO，日本)
垂直层流洁净工作台(上海上净净化设备有限公司)
倒置生物显微镜(重庆光电仪器有限公司)
低/高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)
电子天平(奥豪斯仪器有限公司)
酶标仪(伯乐生命医学产品有限公司)
立式压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂)
鼓风干燥箱(上海跃进医疗器械厂)
PH计(SARTORIUS，德国)
2)实验方法和过程
大鼠脑胶质瘤细胞株C6以4000/孔的密度铺于96孔板，每孔100ul，12h后使用。各组分以DMSO溶解为100mg/mL储存液，保存于-20℃待用。铺板后12h，观察细胞汇合率约为40％，加药，浓度均为100μg/mL，每个组分3个复孔。每板细胞设立二个对照组(培养基+细胞；含0.1％DMSO培养基+细胞)，3个空白孔(只有培养基)。加入药物24小时后，加入20μl四甲基偶氮唑盐化学名为3-(4,5-二甲基噻唑)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-dimethyl-2thiazolyl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide，MTT)，继续培养4小时。完全弃去上清液，加入100μl DMSO，混匀使MTT完全溶解，去气泡。490nm测定OD值。
3)实验结果
表2
结果发现：维吾尔药肉桂叶经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱，氯仿：甲醇100:5洗脱液经回收有机溶剂，干燥，得到高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物。优选地，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱，氯仿：甲醇100:5洗脱液干燥即得抗肿瘤活性的化合物，可以通过以上方法，得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该活性提取物从未见文献报道，其100:5洗脱液TLC分析表征如图1。
4、抗肿瘤有效提取物的提取方法研究
1)提取溶剂的种类研究
分别用甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂等有机溶剂提取，并测试提取物的对C6细胞的抗肿瘤活性，结果如下：
表3
研究结果表明：提取用有机溶剂可以为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂。
2)提取溶剂的用量研究
分别用1、2、5、10、20、30、40、50倍(重量/体积比)有机溶剂提取，并测试提取物对C6细胞的的抗肿瘤活性，结果如下：
表4
提取物提取用有机溶剂用量为药材重量的2-50倍(重量/体积比)。
3)干燥方法的研究
分别用真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法等方法，对得到的抗肿瘤活性提取物进行干燥，以含水量、TLC、活性测试为指标，发现真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法适用于对C6细胞抗肿瘤活性提取物进行干燥，其中，最优为真空干燥法、冷冻干燥法。
表5
优选地，肉桂叶抗肿瘤提取物的制备方法为：
维吾尔药肉桂叶经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱2-50倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱2-50倍柱体积，氯仿：甲醇100:5洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物。以上条件最优为先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱10倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱15倍柱体积。
优选地，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱2-50倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱2-50倍柱体积，氯仿：甲醇 100:5洗脱液干燥即得抗肿瘤活性的化合物，更优选地，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱10倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱15倍柱体积，氯仿：甲醇100:5洗脱液干燥即得。
其中，
1)提取物提取用溶剂可以为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂，最优条件为甲醇和95％乙醇。提取物提取用溶剂用量为药材重量的2-50倍(重量/体积比)。
2)提取物干燥方法可以为真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法等，最优为真空干燥法、冷冻干燥法。
5.肉桂叶抗肿瘤有效提取物(先用100:0的氯仿：甲醇洗脱，再用100:5的氯仿：甲醇洗脱得到的洗脱液干燥后的提取物)的抗肿瘤活性研究
利用各种肿瘤细胞，如乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤、肝癌等恶性肿瘤细胞株，分别测试肉桂叶抗肿瘤提取物的抗肿瘤活性，IC50结果如下：
表6
因此，我们发现，肉桂叶抗肿瘤提取物具备抗肿瘤活性，可望用于各种肿瘤如乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤、肝癌等恶性肿瘤细胞株的预防及治疗。
6、肉桂叶抗肿瘤有效提取物的组合物及其制备方法研究
1)固体分散体
处方
制备方法：
称取肉桂叶提取物和载体聚乙烯吡咯烷酮(PVP)按比例、1:2、1:4、1:6的质量比分别放入烧杯中，加入无水乙醇，磁力搅拌器搅拌至肉桂叶提取物和载体完全溶解，转入旋蒸仪中除去溶剂，干燥，粉碎过80目筛，即得肉桂叶提取物PVP包合物。
2)环糊精包合物
处方：
制备方法：
将β-环糊精与1-5倍水研匀,加肉桂叶提取物(水难溶性的应先溶于少量有机溶剂中)充分研磨至成糊状物,低温干燥即得。
3)分散片处方:
制备方法：
1.肉桂叶提取物淀粉分散体的制备，精密称取肉桂叶提取物，加入适量的十二烷基硫酸钠，用70％的乙醇溶解加入等比例的可溶性淀粉混合均匀后，在70℃的温度下蒸干，粉碎，过100目筛；
2.称取处方量，肉桂叶提取物淀粉分散体，交联聚维酮，预胶化淀粉，用70％乙醇做湿润剂，边加入边搅拌，制成湿颗粒过14目筛，室温下放置15min后，60℃烘箱烘干45min，16目筛整粒，加入滑石粉和微分硅胶，混合均匀后，压片。
7、肉桂叶抗肿瘤有效提取物的检测方法研究
我们发现，可以用薄层色谱的方法，很好地检测和标示肉桂叶抗肿瘤有效提取物的特征， 见图1。
具体TLC条件为：GF254硅胶板，展开系统：氯仿：乙酸乙酯：甲醇＝4:1:1，显色方法：香草醛浓硫酸显色
附图说明：
图1肉桂叶C6抑制活性提取物的TLC色谱图；
图2肉桂叶得到的化学组分的TLC色谱图。
具体实施方式
以下实施例表示本发明的实用性，本发明不受此限制。
实施例1：
取维吾尔药肉桂叶20g，经100ml甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱10倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱15倍柱体积，用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥，得到的高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物，经测试，其C6细胞的抑制活性为IC50＝18.2μg/mL。
实施例2：
取维吾尔药肉桂叶20g，经100ml乙醇超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱10倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱15倍柱体积，用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，得到的高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物，经测试，其C6细胞的抑制活性为IC50＝15.7μg/mL。
实施例3：
取维吾尔药肉桂叶20g，经100ml丙酮超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱10倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱15倍柱体积，用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，鼓风干燥，得到的高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物，经测试，其C6细胞的抑制活性为IC50＝19.1μg/mL。
实施例4：
取维吾尔药肉桂叶20g，经100ml氯仿超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱10倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱15倍柱体积，用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，离心干燥，得到的高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物，经测试，其C6细胞的抑制活性为IC50＝19.9μg/mL。
实施例5：
取维吾尔药肉桂叶20g，经100ml乙酸乙酯超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱10倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱15倍柱体积，用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，旋蒸干燥，得到的高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物，经测试，其C6细胞的抑制活性为IC50＝16.4μg/mL。
实施例6：
取维吾尔药肉桂叶20g，经100ml甲醇水混合溶剂(甲醇：水＝1:1)超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱10倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱15倍柱体积，用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，得到的高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物，经测试，其C6细胞的抑制活性为IC50＝18.3μg/mL。
实施例7：
取维吾尔药肉桂叶20g，经100ml乙醇水混合溶剂(乙醇：水＝1:1)超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱10倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱15倍柱体积，用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥，得到的高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物，经测试，其C6细胞的抑制活性为IC50＝16.1μg/mL。
实施例8：
取维吾尔药肉桂叶20g，经100ml乙醇水混合溶剂(乙醇：水＝90:10)超声提取15min， 提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:0，体积比)洗脱10倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱15倍柱体积，用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:5，体积比)洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，得到的高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物，经测试，其C6细胞的抑制活性为IC50＝24.2μg/mL。
实施例9：固体分散体
称取实施例1肉桂叶提取物和载体聚乙烯吡咯烷酮(PVP)按比例、1:2、1:4、1:6的质量比分别放入烧杯中，加入适量的无水乙醇和Vc，磁力搅拌器搅拌至肉桂叶提取物和载体完全溶解，充分混合均匀后转入旋蒸仪中除去有机溶剂，干燥，粉碎过80目筛，即得肉桂叶提取物PVP包合物。
实施例10：环糊精包合物
将β-环糊精与1-5倍水研匀,加实施例1肉桂叶提取物(水难溶性的应先溶于少量有机溶剂中)充分研磨至成糊状物,低温干燥即得。
实施例11：分散片
1.称取干燥的肉桂叶提取物，加入适量的十二烷基硫酸钠，使用70％的乙醇充分溶解，加入水溶性淀粉与肉桂叶提取物(1:1)，搅拌混合均匀，在70℃下干燥，粉碎，过100目筛，得肉桂叶提取物分散体。
2.精密称取处方量，肉桂叶提取物分散体，交联聚维酮，可压性淀粉，用70％乙醇做湿润剂，边加入边搅拌，14目筛制成湿颗粒，室温下放置15min后，70℃烘箱烘干45min，16目筛整粒，加入滑石粉和微分硅胶，混合均匀后，压片。
Claims (10)
1. 一种维吾尔药肉桂叶提取物，其特征为，维吾尔药肉桂叶经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比为100:0的氯仿：甲醇混合溶剂洗脱，继用体积比100:1-100:5的氯仿：甲醇混合溶剂洗脱，用体积比为100:1-100:5的氯仿：甲醇混合溶剂洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥即为该提取物。
2. 如权利要求1所述的维吾尔药肉桂叶提取物，其特征为，提取用溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂或乙醇水混合溶剂，优选甲醇或95%乙醇。
3. 如权利要求1所述的维吾尔药肉桂叶提取物，其特征为，先用氯仿：甲醇混合溶剂（氯仿：甲醇，100:0，体积比）洗脱，继用氯仿：甲醇混合溶剂（氯仿：甲醇，100:5，体积比）洗脱，用氯仿：甲醇混合溶剂（氯仿：甲醇， 100:5，体积比）洗脱的洗脱液经回收溶剂，干燥即为该提取物。
4. 如权利要求1所述的维吾尔药肉桂叶提取物，其特征为，先用体积比为100:0的氯仿：甲醇混合溶剂2-50倍洗脱，继用体积比100:5的氯仿：甲醇混合溶剂2-50倍洗脱，优选先用体积比为100:0的氯仿：甲醇混合溶剂10倍洗脱，继用体积比100:5的氯仿：甲醇混合溶剂15倍洗脱。
5. 如权利要求2所述维吾尔药肉桂叶提取物，其特征为，先用体积比100:0的氯仿：甲醇混合溶剂洗脱2-50倍柱体积，继用体积比100:5的氯仿：甲醇混合溶剂洗脱2-50倍柱体积，优选先用体积比100:0的氯仿：甲醇混合溶剂洗脱10倍柱体积，继用体积比100:5的氯仿：甲醇混合溶剂洗脱15倍柱体积。
6.一种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的提取物和药学上可接受的载体。
7.一种药物制剂，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的提取物或权利要求6所述的药物组合物。
8.权利要求1-5任何一项所述的肉桂叶提取物或权利要求6所述的组合物或权利要求7所述的药物制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。
9. 如权利要求8所述维吾尔药肉桂叶提取物，其特征为，所述肿瘤为乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤或肝癌。
10. 权利要求1-5任何一项所述的一种维吾尔药肉桂叶提取物，其特征在于，用TLC法检测，其色谱条件为：GF254硅胶板，展开系统：氯仿：乙酸乙酯：甲醇=4:1:1，显色方法：香草醛浓硫酸显色。
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| 郭虹等: "肉桂叶挥发性成分分析", 《浙江中医药大学学报》 * |
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