CN105982939A

CN105982939A - 恰麻古抗肿瘤提取物及其组合物的制备方法和医药用途

Info

Publication number: CN105982939A
Application number: CN201510080784.8A
Authority: CN
Inventors: 王金辉; 黄健; 逄小博
Original assignee: Shenyang Pharmaceutical University
Current assignee: Shenyang Pharmaceutical University
Priority date: 2015-02-15
Filing date: 2015-02-15
Publication date: 2016-10-05

Abstract

本发明属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药恰麻古抗肿瘤提取物及其组合物的制备方法和其在制备预防及治疗脑胶质瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、肝癌等恶性肿瘤药物中的应用。所述的提取物通过如下方法制备：氯仿：甲醇混合溶剂（氯仿：甲醇，100：0-100:100，体积比）洗脱，洗脱液干燥后即得提取物。

Description

恰麻古抗肿瘤提取物及其组合物的制备方法和医药用途

技术领域

本发明属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药恰麻古抗肿瘤提取物及其组合物的制备方法和其在制备预防及治疗脑胶质瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、肝癌等恶性肿瘤细胞株药物中的应用。

背景技术

恰玛古属十字花科(Cruciferae)芸苔属芸苔种，恰玛古(Brassica rapa L.)又名芜菁或蔓菁，恰玛古系维吾尔文名称，为两年生草本植物，常用根入药。作为维吾尔族常用的药食两用植物，应用非常广泛。主产于中国新疆天山西南、塔里木西北地区，在新疆南部种植非常广泛，是新疆维吾尔等少数民族喜爱的,并有较长食用历史的传统药食同源植物。恰玛古因具有开胸顺气，健胃消食，解毒，抑制细菌、真菌、酵母及人的某些寄生虫的作用，常被维吾尔医用于治疗食欲不振、胃腹冷痛、消化不良、体虚多梦、气管炎、腹泻、疮疖肿毒等疾病。

但是，对其抗肿瘤的有效成分一直不清楚，本发明通过系统地筛选研究，发现了恰麻古的提取物，可以应用于肿瘤的预防和治疗。

发明内容

本发明所解决的技术问题是提供一种维吾尔药恰麻古抗肿瘤提取物及其制备方法，其对脑胶质瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、肝癌等恶性肿瘤细胞株具有抑制作用。

本发明的另一个目的是提供一种含有恰麻古抗肿瘤提取物的药物组合物。

本发明是通过如下技术方案实现的：

维吾尔药恰麻古经水提取，提取液浓缩后，用硅胶(SiO₂)柱分离，上样后的硅胶柱，用氯仿：甲醇(100：0-0：100)混合溶剂梯度洗脱(氯仿：甲醇，具体比例见表1)，各氯仿：甲醇比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发现用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100：0-100:100，体积比)洗脱，洗脱液干燥后得到的提取物，具有显著地抗肿瘤活性。

优选地，先用氯仿洗脱，再用体积比100:2的氯仿：甲醇洗脱，所得氯仿：甲醇100：2洗脱液干燥即为抗肿瘤活性的化合物。该活性部位从未见文献报道，其100：2洗脱液的TLC分析表征如图1,TLC分析色谱条件：GF₂₅₄硅胶板，展开系统：氯仿：乙酸乙酯：甲醇(3:1:1)显色方法：香草醛-硫酸显色。

或维吾尔药恰麻古经水提取，提取液浓缩后，用硅胶(SiO₂)柱分离，上样后的硅胶柱，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:30，体积比)洗脱，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:100，体积比)洗脱，氯仿：甲醇100:100洗脱液干燥后，具有显著地抗肿瘤活性。该活性部位从未见文献报道，其TLC分析表征如图2，TLC分析色谱条件：GF₂₅₄硅胶板，展开系统：氯仿：乙酸乙酯：甲醇(3:1:1)显色方法：香草醛-硫酸显色。

具体，发现过程如下：

1、恰麻古经水提取物的制备

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物SN0179B,2.0312g。

2、氯仿：甲醇混合溶剂梯度洗脱方法和结果

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物SN0179B2.0312g，留样：0.0123g。上柱，甲醇溶解，共用甲醇15ml。上硅胶柱色谱，拌样硅胶200mg，空白硅胶10g，玻璃柱内径2.0cm，氯仿：甲醇系统梯度洗脱(条件见表1)，柱体积11ml，每个梯度洗脱100ml，得到，各个浓度提取洗脱液的洗脱物，回收溶剂，即得，氯仿：甲醇梯度洗脱提取物，TLC分析结果见图3，TLC分析色谱条件：GF₂₅₄硅胶板，展开系统：氯仿：乙酸乙酯：甲醇(3:1:1)显色方法：香草醛-硫酸显色。

表1

梯度名称	氯仿：甲醇	体积(ml)	样品重量(g)
				SN0179B01	氯仿	200	0.0038
SN0179B02	100：1	200	0.0077
				SN0179B03	100：2	200	0.0078
SN0179B04	100：3	200	0.0012
				SN0179B05	100：4	200	0.0070
SN0179B06	100：5	200	0.0278
				SN0179B07	100：6	200	0.0280
SN0179B08	100：8	200	0.0243
				SN0179B09	100：10	200	0.0196
SN0179B10	100：12	200	0.0413
				SN0179B11	100：14	200	0.0815
SN0179B12	100：17	200	0.1253
				SN0179B13	100：20	200	0.1381
SN0179B14	100：25	200	0.1745
				SN0179B15	100：30	200	0.0468
SN0179B16	100：50	200	0.4132
				SN0179B17	100：100	200	0.1980
SN0179B18	甲醇	200	0.0104

3、抗肿瘤活性筛选方法和结果

1)实验条件

a)细胞株信息

大鼠脑胶质瘤细胞株C6购于中国典型培养物保藏中心细胞库。

b)药品及试剂

样品无菌条件下，DMSO溶解配置成母液浓度为100mg/mL，使用时用RPMI-1640培养液稀释至所需浓度(DMSO≤1‰)。

RPMI Medium 1640培养基干粉购于美国GIBCO公司。胎牛血清购于北京元亨圣马生物技术研究所。Trypsin 1:250、二甲基二苯基四氮唑溴盐(MTT)。

c)仪器

CO₂培养箱(SANYO，日本)

垂直层流洁净工作台(上海上净净化设备有限公司)

倒置生物显微镜(重庆光电仪器有限公司)

低/高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)

电子天平(奥豪斯仪器有限公司)

酶标仪(伯乐生命医学产品有限公司)

立式压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂)

鼓风干燥箱(上海跃进医疗器械厂)

PH计(SARTORIUS，德国)

2)实验方法和过程

大鼠脑胶质瘤细胞株C6以4000/孔的密度铺于96孔板，每孔100ul，12h后使用。各组分以DMSO溶解为100mg/mL储存液，保存于-20℃待用。铺板后12h，观察细胞汇合率约为40％，加药，浓度均为100μg/mL，每个组分3个复孔。每板细胞设立二个对照组(培养基+细胞；含0.1％DMSO培养基+细胞)，3个空白孔(只有培养基)。加入药物24小时后，加入20μl四甲基偶氮唑盐化学名为3-(4,5-二甲基噻唑)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-dimethyl-2thiazolyl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide，MTT)，继续培养4小时。完全弃去上清液，加入100μl DMSO，混匀使MTT完全溶解，去气泡。490nm测定OD值。

3)实验结果

表2

结果发现：

本发明的最优技术方案为：维吾尔药恰麻古经水提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的SiO₂柱，先用氯仿洗脱，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:2，体积比)洗脱，氯仿：甲醇100:2洗脱液经回收有机溶剂，干燥，得到高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物。该活性部位从未见文献报道，其TLC分析表征如图1。

维吾尔药恰麻古经水提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的SiO₂柱，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:30，体积比)洗脱，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:100，体积比)洗脱，氯仿：甲醇100:100洗脱液经回收有机溶剂，干燥，得到高活性提取物，即为该抗肿瘤的提取物。该活性部位从未见文献报道，其TLC分析表征如图2。

4、抗肿瘤有效提取物的提取方法研究

1)提取溶剂的种类研究

分别用甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂等有机溶剂提取，并测试提取物对C6细胞的抗肿瘤活性，结果如下：

表3

研究结果表明：提取用有机溶剂可以为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂。

2)提取溶剂的用量研究

分别用1、2、5、10、20、30、40、50倍(重量/体积比)有机溶剂提取，并测试提取物对C6细胞的抗肿瘤活性，结果如下：

表4

提取物提取用有机溶剂用量为药材重量的2-50倍(重量/体积比)。

3)干燥方法的研究

分别用真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法等方法，对得到的抗肿瘤活性部位进行干燥，以含水量、TLC、活性测试为指标，发现真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法适用于对C6细胞抗肿瘤活性部位进行干燥，其中，最优为真空干燥法、冷冻干燥法。

表5

样品20g	真空干燥法	冷冻干燥法	鼓风干燥法	离心干燥法	旋蒸干燥法
						含水量(％)	9.3	11.5	11.1	12.3	11.3
抑制率(％)	40.5	30.3	28.9	21.9	32.8

因此，恰麻古抗肿瘤提取物的制备方法为：

维吾尔药恰麻古经水提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用有机溶剂氯仿洗脱2-50倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:2，体积比)洗脱2-50倍柱体积，氯仿：甲醇100:2洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物。以上条件最优为先用有机溶剂氯仿洗脱10倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:2，体积比)洗脱15倍柱体积。

维吾尔药恰麻古经水提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:30，体积比)洗脱2-50倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:100，体积比)洗脱2-50倍柱体积，氯仿：甲醇100:100洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物。以上条件最优为先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:30，体积比)洗脱20倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:100，体积比)洗脱25倍柱体积。其中，

1)提取物提取用有机溶剂可以为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂，最优条件为甲醇和95％乙醇。提取物提取用有机溶剂用量为药材重量的2-50倍(重量/体积比)。

2)提取物干燥方法可以为真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法等，最优为真空干燥法、冷冻干燥法。

5.恰麻古抗肿瘤有效提取物的抗肿瘤活性研究

利用各种肿瘤细胞，如脑胶质瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、肝癌等恶性肿瘤细胞株，分别测试恰麻古抗肿瘤提取物的抗肿瘤活性，IC₅₀结果如下：

表6

因此，我们发现，恰麻古抗肿瘤提取物具备抗肿瘤活性，可望用于各种肿瘤如脑胶质瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、肝癌等恶性肿瘤细胞株的预防及治疗。

6、恰麻古抗肿瘤有效提取物的组合物及其制备方法研究

1)固体分散体

处方

制备方法：

称取恰麻古提取物和载体聚乙烯吡咯烷酮(PVP)按比例、1:2、1:4、1:6的质量比分别放入烧杯中，加入无水乙醇，磁力搅拌器搅拌至恰麻古提取物和载体完全溶解，转入旋蒸仪中除去有机溶剂，干燥，粉碎过80目筛，即得恰麻古提取物PVP包合物。

2)环糊精包合物

处方：

制备方法：

将β-环糊精与1～5倍水研匀,加恰麻古提取物(水难溶性的应先溶于少量有机溶剂中)充分研磨至成糊状物,低温干燥即得。

3)分散片处方:

制备方法：

1.恰麻古提取物淀粉分散体的制备，精密称取恰麻古提取物提取物，加入适量的十二烷基硫酸钠，用70％的乙醇溶解加入等比例的可溶性淀粉混合均匀后，在70℃的温度下蒸干，粉碎，过100目筛；

2.称取处方量，恰麻古提取物淀粉分散体，交联聚维酮，预胶化淀粉，用70％乙醇做湿润剂，边加入边搅拌，制成湿颗粒过14目筛，室温下放置15min后，60℃烘箱烘干45min，16目筛整粒，加入滑石粉和微分硅胶，混合均匀后，压片。

7、恰麻古抗肿瘤有效提取物的检测方法研究

我们发现，可以用薄层色谱的方法，很好地检测和标示恰麻古抗肿瘤有效提取物的特征。见图1、图2。

具体条件为：色谱条件：GF₂₅₄硅胶板，展开系统：氯仿：乙酸乙酯：甲醇＝3:1:1，显色方法：香草醛浓硫酸显色。

附图说明：

图1恰麻古C6抑制活性提取物的TLC色谱图；

图2恰麻古C6抑制活性提取物的TLC色谱图；

图3恰麻古得到的化学组分的TLC色谱图。

具体实施方式

以下实施例表示本发明的实用性，本发明不受此限制。

实施例1：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用有机溶剂氯仿洗脱20倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:2，体积比)洗脱25倍柱体积，氯仿：甲醇100:2洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥，即为该提取物，收率0.10％。

实施例2：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml乙醇超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用有机溶剂氯仿洗脱20倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:2，体积比)洗脱25倍柱体积，氯仿：甲醇100:2洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该提取物，收率0.078％。

实施例3：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml丙酮超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用有机溶剂氯仿洗脱20倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:2，体积比)洗脱25倍柱体积，氯仿：甲醇100:2洗脱液经回收有机溶剂，鼓风干燥，即为该提取物，收率0.063％。

实施例4：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml氯仿超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用有机溶剂氯仿洗脱20倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:2，体积比)洗脱25倍柱体积，氯仿：甲醇100:2洗脱液经回收有机溶剂，离心干燥，即为该提取物，收率0.056％。

实施例5：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml乙酸乙酯超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用有机溶剂氯仿洗脱20倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:2，体积比)洗脱25倍柱体积，氯仿：甲醇100:2洗脱液经回收有机溶剂，旋蒸干燥，即为该提取物，收率0.058％。

实施例6：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml甲醇水混合溶剂(甲醇：水＝1:1)超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用有机溶剂氯仿洗脱20倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:2，体积比)洗脱25倍柱体积，氯仿：甲醇100:2洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该提取物，收率0.087％。

实施例7：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml乙醇水混合溶剂(乙醇：水＝1:1)超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用有机溶剂氯仿洗脱20倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:2，体积比)洗脱25倍柱体积，氯仿：甲醇100:2洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥，即为该提取物，收率0.081％。

实施例8：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml乙醇水混合溶剂(乙醇：水＝90:10)超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用有机溶剂氯仿洗脱20倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:2，体积比)洗脱25倍柱体积，氯仿：甲醇100:2洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该提取物，收率0.083％。

实施例9：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:30，体积比)洗脱25倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:100，体积比)洗脱30倍柱体积，氯仿：甲醇100:100洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥，即为该提取物，收率3.1％。

实施例10：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml乙醇超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:30，体积比)洗脱25倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:100，体积比)洗脱30倍柱体积，氯仿：甲醇100:100洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该提取物，收率2.3％。

实施例11：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml丙酮超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:30，体积比)洗脱25倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:100，体积比)洗脱30倍柱体积，氯仿：甲醇100:100洗脱液经回收有机溶剂，鼓风干燥，即为该提取物，收率2.1％。

实施例12：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml氯仿超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:30，体积比)洗脱25倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:100，体积比)洗脱30倍柱体积，氯仿：甲醇100:100洗脱液经回收有机溶剂，离心干燥，即为该提取物，收率1.5％。

实施例13：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml乙酸乙酯超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:30，体积比)洗脱25倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:100，体积比)洗脱30倍柱体积，氯仿：甲醇100:100洗脱液经回收有机溶剂，旋蒸干燥，即为该提取物，收率1.7％。

实施例14：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml甲醇水混合溶剂(甲醇：水＝1:1)超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:30，体积比)洗脱25倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:100，体积比)洗脱30倍柱体积，氯仿：甲醇100:100洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥，即为该提取物，收率2.7％。

实施例15：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml乙醇水混合溶剂(乙醇：水＝1:1)超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:30，体积比)洗脱25倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:100，体积比)洗脱30倍柱体积，氯仿：甲醇100:100洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该提取物，收率2.5％。

实施例16：

取维吾尔药恰麻古20g，经100ml乙醇水混合溶剂(乙醇：水＝90:10)超声提取15min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱(2.0cm内径小柱)，先用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:30，体积比)洗脱25倍柱体积，继用氯仿：甲醇混合溶剂(氯仿：甲醇，100:100，体积比)洗脱30倍柱体积，氯仿：甲醇100:100洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥，即为该提取物，收率2.9％。

实施例17：固体分散体

称取恰麻古提取物和载体聚乙烯吡咯烷酮(PVP)按比例、1:2、1:4、1:6的质量比分别放入烧杯中，加入无水乙醇，磁力搅拌器搅拌至恰麻古提取物和载体完全溶解，转入旋蒸仪中出去有机溶剂，干燥，粉碎过80目筛，即得恰麻古提取物PVP包合物。

实施例18：环糊精包合物

实施例19：分散片

1.称取干燥的恰麻古提取物，加入适量的十二烷基硫酸钠，使用70％的乙醇充分溶解，加入水溶性淀粉与恰麻古提取物(1:1)，搅拌混合均匀，在70℃下干燥，粉碎，过100目筛，得恰麻古提取物分散体。

2.精密称取处方量，恰麻古提取物分散体，交联聚维酮，可压性淀粉，用70％乙醇做湿润剂，边加入边搅拌，14目筛制成湿颗粒，室温下放置15min后，70℃烘箱烘干45min，16目筛整粒，加入滑石粉和微分硅胶，混合均匀后，压片。

Claims

1.一种维吾尔药恰麻古提取物，其特征为，维吾尔药恰麻古经有机溶剂提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，用体积比100：0-100：100的氯仿：甲醇洗脱，洗脱液经干燥即得。

2.如权利要求1所述的维吾尔药恰麻古提取物，其特征为，上样后的硅胶柱，先用氯仿溶剂洗脱，继用体积比100:2的氯仿-甲醇混合溶剂洗脱，氯仿：甲醇100:2洗脱液经回收有机溶剂，干燥即为该提取物；

或上样后的硅胶柱，先用体积比100:30的氯仿：甲醇混合溶剂洗脱，继用体积比100:100的氯仿：甲醇混合溶剂洗脱，氯仿：甲醇100:100洗脱液干燥后即得。

3.如权利要求1或2所述的维吾尔药恰麻古提取物，其特征为，提取用有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂或乙醇水混合溶剂，优选甲醇或95%乙醇。

4.如权利要求1-3任何一项所述的一种维吾尔药恰麻古提取物，其特征为，洗脱溶剂的体积为2-50倍柱体积。

5.如权利要求2所述的一种维吾尔药恰麻古提取物，其特征为，氯仿-甲醇为100：0，100：2洗脱时，其洗脱体积分别为10倍柱体积和15倍柱体积。

6.如权利要求2所述的一种维吾尔药恰麻古提取物，其特征为，氯仿-甲醇为100：30，100：100洗脱时，其洗脱体积分别为20倍柱体积和25倍柱体积。

7.一种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1-6任何一项所述的恰麻古提取物和药学上可接受的载体。

8.一种药物制剂，其特征在于，包含权利要求1-6任何一项所述的恰麻古提取物或权利要求7所述的药物组合物。

9.权利要求1-6任何一项所述的恰麻古提取物或权利要求7所述的组合物或权利要求8所述的药物制剂在制备抗肿瘤药物中的应用，所述的肿瘤为脑胶质瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌或肝癌。

10.如权利要求1-6所述的一种维吾尔药恰麻古提取物，其特征为，用TLC法检测，其色谱条件为：GF₂₅₄硅胶板，展开系统：氯仿：乙酸乙酯：甲醇（3:1:1）显色方法：香草醛-硫酸显色。