CN104686886A - 一种高效雪莲培养物蜂蜜膏及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种高效雪莲培养物蜂蜜膏及其制备方法，属于保健食品领域，本发明将性味相同且口味、功能互补的蜂蜜与雪莲培养物提取物科学复配，同时添加调节和维持人体肠道菌群的定植时间、显著提高人体免疫力和蜂蜜及雪莲培养物有效成分消化和吸收率的改性膳食纤维，并且添加具有柔和适口酸味、显著抑菌特性和强抗氧化性的天然果胶分解物，最终制备一种雪莲培养物和蜂蜜功效显著、酸甜适口、稳定性强的蜂蜜膏。

Description

一种高效雪莲培养物蜂蜜膏及其制备方法

技术领域

本发明涉及蜂蜜膏的制备，具体涉及一种高效雪莲培养物蜂蜜膏及其制备方法。

背景技术

天山雪莲，中药名为雪莲花，又称雪荷花、石莲，为世界上中国独有的珍稀植物，在我国仅分布在新疆。横贯新疆中部的天山山脉，冰峰雪岭逶迤连绵，海拔四千米以上是终年积雪地带，被称为雪线。雪莲就生长在雪线以下海拔三千至四千米气候寒冷，土壤贫瘠，空气稀薄，生境条件十分恶劣的的悬崖峭壁上，是高寒地区民间常用的一类名贵中草药。

在中国古代，相传“天山雪莲”能治百病、解百毒，不仅可以强身健体，而且是驻颜美容的灵丹妙药，被伟大的唐朝边塞诗人岑参为“西域奇花”。雪莲最早记载于《山海经》，距今已两千多年历史，其被服食历史也有两干余年。因具有神奇的生物学特征又具有独特的药理学作用，故被海内外誉为“百草之王”、“药中极品”。早在八世纪藏族古代药物文献《月王药珍》就有雪莲的记载，后来在《西部医典》、《西北域记》、《兰琉璃》、《晶珠本草》以及清代《本草纲目拾遗》中均有记载。具有通经活血，暖宫散瘀，散寒除湿和强筋助阳的功能。性味甘、苦、温，入肝、脾、肾三经。临床主要用于治疗风湿性关节炎，肺寒咳嗽，宫寒腹痛，闭经，胎衣不下，阳痿和麻疹不透等病症。雪莲含生物碱、黄酮、多糖、甾醇、挥发油、还原糖和16种氨基酸、雪莲内酯等，对治疗风湿类疾病有特殊疗效。

目前市场上的雪莲产品或专利，如中国专利申请号为93107278.6公开的枸杞雪莲口服液，中国专利申请号为96115235.4公开的雪莲保健茶等，用野生雪莲或人工种植的雪莲作为原料，由于野生雪莲资源蕴藏量锐减4/5，且过度的采挖对雪莲的繁衍、植物种群的完整、区域生态环境等方面造成极大的影响，雪莲已被列为国家3级濒危物种而受到保护；而人工栽培的雪莲受地域的限制，规模化种植仍然是雪莲产业化发展的“瓶颈”。雪莲资源的缺乏最终导致雪莲产品的产量受制，无法大规模长期生产供应。近年来各公司的雪莲产品由于原料受限都呈现销售额下降的趋势，市场出现供不应求的情况。

为保护天山雪莲物种，采用具有我国独立知识产权的植物细胞工程技术制备雪莲替代功能性新资源——雪莲细胞培养物获得成功，培养周期只要12天，且生产不受地域、气候等自然条件影响，不占用耕地面积。经系统研究表明，雪莲细胞培养物中黄酮含量远远超过野生和人工栽培雪莲，不仅含有与天山雪莲相近的活性成分，且亦具有与之相当的多方面药理活性。其主要药理作用为：镇痛、抗炎、抗风湿；抑制血小板聚集、降血脂、改善血液循环；对免疫系统具有调节作用；同时还有抗氧化、抗辐射和抗疲劳等多方面的药效学作用。且雪莲细胞培养物不再含有对人体有副作用的秋水仙碱，卫生部已于2010年5月20日批准雪莲培养物为新资源食品，对推动我国中药现代化、保护野生植物资源、发展社会经济具有重要意义。

蜂蜜是蜜蜂采集植物花蜜酿成的一种理想的天然保健品。其主要成分有：(1)葡萄糖、果糖：这两种糖在蜂蜜中占65％以上。它赋予蜂蜜的甜味、吸湿性和能量的价值及有形的特征。(2)酸类：蜂蜜中的酸类包括有机酸、无机酸和氨基酸。有机酸主要是葡萄糖酸和柠檬酸。无机酸包括磷酸、盐酸、硼酸和碳酸。蜂蜜中的氨基酸大约有17种，其中脯氨酸是主要的氨基酸，其次是赖氨酸和天门冬氨酸。(3)酶类：主要是转化酶和淀粉酶。(4)维生素：蜂蜜中的维生素以B族最为丰富，其次是维生素C。常见的维生素有核黄素、吡多酸(VB6)、烟酸、叶酸、抗坏血酸。还有生物素、生育酚等。蜂蜜中的维生素主要来自蜂蜜中的花粉，少量来自花蜜。(5)矿物质：蜂蜜中的矿物质含量差异很大，与植物生长的土壤有密切关系。蜂蜜中的矿物质含量和种类与人体血液中的含量、种类十分相近，而且深色蜂蜜中的矿物质含量比浅色蜂蜜高。枣花蜜属深色蜜，经测定其含有的矿物质、微量元素均高于其它蜂蜜。如钾、钠、钙、磷等比其它蜂蜜高出4～10倍。铁、铜、硒高10倍左右。(6)蛋白质：蜂蜜中的蛋白质有4～7种，其中3种来自花蜜，另有4种来自蜜蜂。蜂蜜中含有一种胶体物质，它是由蛋白质、蜡类、戊聚糖和无机物组成，在深色蜂蜜中含量约为1％。它对蜂蜜的色泽和浑浊度有影响。(7)芳香物质：蜂蜜中的芳香物质主要是醇和醛的衍生物及其相应的脂类化合物。这些芳香物质大部分来自花蜜，少部分在蜂蜜酿制过程中产生的，它赋予蜂蜜独特的香气。(8)其它物质：蜂蜜中还含有色素、花粉、糖醇类、丹宁类、树脂及其它生物活性物质。

蜂蜜膏是以蜂蜜为主要原料配以其它功能性食品或药品原料而制备的一种膏剂，目前，蜂蜜膏的品种较多，中国专利CN 103039774 B公开了一种复方罗汉果蜜膏的加工方法。将罗汉果、百合、川贝和甘草加水洗净，加水煮沸提取3次，合并提取液，滤过，滤液浓缩至流浸膏；将流浸膏加入蜂蜜中混匀，加热煮沸，趁热装瓶，密封，即得复方罗汉果蜜膏。本发明产品具有润肺、清肺利咽、化痰止咳的功效。适合演员、教师、广播员、营业员等需保护发音器官者、慢性咽炎患者。增加了罗汉果精深加工产品品种，利于工业化生产。中国专利CN 101869235 B公开了一种营养蜂蜜制品的配方及制备方法，具体来说就是用具有营养保健作用的几味中药和蜂蜜来制备的，本发明公开了中药的配方，包括决明子、茯苓、枸杞子、菊花、白果、郁李仁、火麻仁、苏叶、甘草。成分是以重量计，制品含有3.0％～5.0％的中药提取物，含有95％～97％的蜂蜜。本发明还公开了该制品的制备方法，制备方法是将决明子、茯苓、枸杞子、菊花、白果、郁李仁、火麻仁、苏叶、甘草混合后提取，提取液浓缩后加到蜂蜜中，并将二者混合均匀，再浓缩、装瓶。在服用蜂蜜制品的过程中可以将上述几味中药的有效成分摄入到体内，既减少了服用这几味中药的麻烦，也减轻了不同药味对人体的刺激，同时又增强了蜂蜜和中药的保健作用。中国专利CN 102366432B公开了一种雪莲培养物提取物及其新用途，治疗痛经，疗效好，治愈率较高，且未发现明显毒副作用。雪莲培养物具有温肾助阳，祛风胜湿，通经活血。用于风寒湿痹痛、类风湿性关节炎，小腹冷痛，月经不调等病的治疗。本发明雪莲培养物提取物采用醇提、浓缩、喷干的方法获得纯度较高的雪莲黄酮、雪莲多糖，通过临床观察发现，对治疗原发痛经疗效确切，值得临床参考和推广使用。

目前，相关雪莲培养物的功能性食品及保健品较多，但还未见将雪莲培养物制备为蜂蜜膏的相关报道或产品。

发明内容

本发明所解决的技术问题是将性味相同且口味、功能互补的蜂蜜与雪莲培养物提取物科学复配，同时添加调节和维持人体肠道菌群、显著提高人体免疫力和蜂蜜及雪莲培养物有效成分消化和吸收率的改性膳食纤维，并且添加具有柔和适口酸味和强抗氧化性的天然食品防腐剂果胶分解物，最终制备一种功效显著、酸甜适口、稳定性强的高效雪莲培养物蜂蜜膏。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种高效雪莲培养物蜂蜜膏，由以下重量份数的原料制备：蜂蜜40-70份，雪莲培养物提取物15-35份，改性膳食纤维20-30份，果胶分解物5-20份；

优选地，所述高效雪莲培养物蜂蜜膏，由以下重量份数的原料制备：蜂蜜50-60份，雪莲培养物提取物28-32份，改性膳食纤维22-26份，果胶分解物10-15份，

更优选地，所述高效雪莲培养物蜂蜜膏，由以下重量份数的原料制备：蜂蜜55份，雪莲培养物提取物30份，改性膳食纤维24份，果胶分解物12份，

优选地，所述蜂蜜至少包含质量比为60％的洋槐蜜；

更优选地，所述蜂蜜的质量百分比组成为洋槐蜜70％，枣花蜜20％，荔枝蜜10％；

所述雪莲培养物购自大连普瑞康生物技术有限公司，为紫红色团块状颗粒，种源系“天山雪莲”；

所述雪莲培养物提取物是以雪莲培养物为原料经冷冻、粉碎、微波辅助超声提取、低温酶解、高压脉冲电场提取等低温提取技术而制得，可最大限度地保留金合欢素、粗毛豚草素、芦丁、槲皮素等黄酮类物质和其它抗氧化、易挥发、热敏性有效成分；

优选地，所述雪莲培养物提取物的制备方法包括如下步骤：取雪莲培养物，浸入盛有质量百分比浓度为0.8-1.2％的无菌低聚果糖水溶液的容器中，取出，然后于-18—-23℃冷冻5-10min；立即粉碎至粒径0.3-1mm；置容器中并添加3-5倍重量的水或35-75％的乙醇，得混合物料，用乳酸调节pH值为3.5-5.5，于室温下在电场强度25-35kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理；然后升温至30-40℃，保温，在功率150-300W、频率2000Hz条件下进行微波提取，其中，每次微波辐照总时间60-80s,进行间隔式辐照：辐照10s，间隔10s，如此辐照10次，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；继续升温至40-50℃，保温，然后加入混合物料总重量2-5％的混合酶酶解30-50min，过滤，得滤液；滤渣用1-3倍重量76-80℃水漂洗3次，漂洗液与滤液合并，均匀混合，于室温下在电场强度35-45kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理即得雪莲培养物提取物；

所述混合酶由果胶酶、纤维素酶、单宁酶、淀粉酶和蛋白酶按质量比3-5:2-4:2-4:1-3:1-2均匀混合。

进一步地，所述改性膳食纤维是将膳食纤维经物理、化学或生物的方法处理而得到的，可溶性纤维素含量高、生物活性强、对肠道益生菌群有重要的、积极作用的纤维素，与普通膳食纤维相比，其生物活性作用更强大：1)可溶性纤维素含量高，更容易被益生菌利用，可提高益生菌在肠道的生长及繁殖能力，增加益生菌菌群的种类和数量，降低大肠pH值，改善肠道微生态环境；2)强大的吸附能力，经改性后，纤维素的比表面积增大，网格结构丰富，吸附力增强，螯合、吸附胆固醇和胆汁酸类的有机分子能力更强、抑制人体对它们的吸收；3)离子交换能力增强，对金属元素，特别是重金属元素吸附效果更强；3)持水性、膨胀性、增稠性更强且不受酸、碱、盐的影响，4)调节和维持肠道菌群的定植时间，增强肠道的消化和吸收能力，提高人体免疫力，最终显著提高蜂蜜及雪莲培养物有效成分的消化和吸收率；5)促进胃肠蠕动，减缓并消除因食用蜂蜜而造成的胃胀、腹胀等不良反应；

优选地，所述改性纤维是由菊粉、苹果纤维、燕麦纤维、小麦纤维、米糠、麸皮中的一种或多种经生物酶酶解而得到的；

更优选地，所述改性膳食纤维的制备方法包括以下步骤：将菊粉、苹果纤维、燕麦纤维、小麦纤维、米糠、麸皮按质量比7-12:7-10:4-6:3-5:2-4:1-3均匀混合，加入其质量3-7倍的水，室温200-300W、35-40KHz条件超声提取10-15min,然后在电场强度20-40kV/cm，脉冲时间400-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场提取；用乳酸调节pH值为4.5-6.5，加入混合物质量0.1-0.3％的生物酶，于45-55℃酶解20-48min；酶解液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得改性膳食纤维；

所述生物酶为木聚糖酶、纤维素酶、漆酶、果胶酶、单宁酶、淀粉酶和蛋白酶按质量比5-7:3-6:2-4:1-3:1-3:1-3:0.3-0.5均匀混合。

所述果胶分解物具有天然、柔和适口的酸味和显著的抑菌特性，尤其对大肠杆菌抑制作用最强，同时还具有较强的抗氧化性，浓度达到0.01％时即可作用，对超氧自由基、羟自由基和DPPH自由基都表现出很强的消除作用，当浓度达到1.0％时，消除效果达到100％；

所述果胶分解物与蜂蜜科学复配，酸甜适口，可有效提高雪莲培养物蜂蜜膏的适口性，最主要的是其显著的抑菌特性和抗氧化性避免了蜂蜜膏中雪莲培养物有效成分的氧化和微生物侵害，稳定和提高了雪莲培养物蜂蜜膏的生物活性，延长了产品的保质期；

进一步地，所述果胶分解物是以柠檬、橙、柚、柑桔、葡萄等果皮或山楂、甜菜、苹果等废渣经超声清洗、高压脉冲提取、热水浸提、醇沉获得果胶，然后经果胶酶酶解而制得的；

优选地，所述果胶分解物的制备方法，包括如下步骤：将新鲜的山楂果渣、柑桔皮、苹果渣分别放入装有1.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、40KHz清洗5-10min，沥干，切分成相等规格,长、宽为5-10mm，厚度3-5mm的片或丁，按质量比4-9:3-5:3-5均匀混合，然后于-21—-25℃冷冻10-30min；立即进行粉碎，粒径为0.1-1mm；加入粉碎物质量3-5倍的去离子水，混合均匀，用柠檬酸调节pH值为2-3，于室温下在电场强度35-45kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理，接着常压煮沸30-50min，布袋过滤，滤渣用其质量1-3倍的滤液常压煮沸40-60min,布袋过滤，合并滤液，硅藻土过滤，使滤液澄清，在75℃下减压浓缩至固形物含量为6-10％，迅速冷却至室温，加入浓缩液1.5倍体积的pH值为2-3的95％乙醇，静置20-30min,使果胶沉淀出来，4000r/min离心5-10min，回收沉淀，用2倍体积的无水乙醇洗脱，离心，回收沉淀，如此操作2次，得到的沉淀于40-60℃真空干燥2-3h,获得果胶，加入果胶质量4-5倍的40-50℃水，搅拌，均匀混合，保温，用乳酸调节pH值为4.5-5.5，加入0.3-0.8U/mL的果胶酶酶解2-4h,酶解液过滤，滤液于沸水中灭酶10-15min，冷却至室温，超滤浓缩、冷冻干燥即得果胶分解物。

所述高效雪莲培养物蜂蜜膏的制备方法，包括如下步骤：

按配方比例，首先将蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有50-60℃水的预溶装置中，预溶30-50min,过100-120目筛，转入调配罐，保温50-60℃，边搅拌边依次加入改性膳食纤维、果胶分解物，充分溶解10-15min；接着加入雪莲培养物提取物充分溶解4-6min得初混料；然后过胶体磨研磨4-6min，调整物料细度，过160-200目筛，入灭菌罐80-83℃灭菌28-32min，转入贮罐降温至48-52℃，最后灌装、封口、包装即得高效雪莲培养物蜂蜜膏。

有益效果：

本发明将性味相同且口味、功能互补的蜂蜜与雪莲培养物提取物科学复配，同时添加调节和维持人体肠道菌群的定植时间、显著提高人体免疫力和蜂蜜及雪莲培养物有效成分消化和吸收率的改性膳食纤维，并且添加具有柔和适口酸味、显著抑菌特性和强抗氧化性的天然果胶分解物，最终制备一种雪莲培养物和蜂蜜功效显著、酸甜适口、稳定性强的蜂蜜膏。

具体原理为：

1.本发明制备的雪莲培养物提取物是以天山雪莲为种源的雪莲培养物为原料经冷冻、粉碎、微波辅助超声提取、低温酶解、高压脉冲电场提取等低温提取技术而制得，可最大限度地保留金合欢素、粗毛豚草素、芦丁、槲皮素等黄酮类物质和其它抗氧化、易挥发、热敏性有效成分，有效成分获取率高，工艺简单、时间短，提高了原料利用率，降低了生产成本，提高了生产效率。试验证明，本发明制备的雪莲培养物提取物黄酮得率可达97％，固形物得率可达65％。

2.本发明制备的改性膳食纤维是天然膳食纤维采用高压脉冲电场技术和生物酶解技而制备的，所得改性膳食纤维可溶性纤维素含量高，更容易被益生菌利用，提高了益生菌在肠道的生长及繁殖能力，增加了益生菌菌群的种类和数量，降低了大肠pH值，改善了肠道微生态环境，提高人体整体免疫力，促进了蜂蜜及雪莲培养物有效成分的消化和吸收，同时还可促进胃肠蠕动，减缓并消除因食用蜂蜜而造成的胃胀、腹胀等不良反应。

3.本发明制备的果胶分解物与蜂蜜科学复配，酸甜适口，可有效提高雪莲培养物蜂蜜膏的适口性，最主要的是其显著的抑菌特性和抗氧化性避免了蜂蜜膏中雪莲培养物有效成分的氧化和微生物侵害，稳定和提高了雪莲培养物蜂蜜膏的生物活性，延长了产品的保质期，替代了化学食品防腐剂的应用，同时采用超声清洗和高压脉冲提取技术，不仅提高了果胶分解物的提取率，而且降低和消除了农药和重金属残留，提高了产品的食品安全性。

具体实施方式

下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。

实施例1原料制备

1.雪莲培养物提取物的制备：

所述雪莲培养物提取物的制备方法，包括如下步骤：取雪莲培养物，浸入盛有质量百分比浓度为1％的无菌低聚果糖水溶液的容器中，取出，然后于-20℃冷冻8min；立即粉碎至粒径0.6mm；置容器中并添加4倍重量的50％乙醇，得混合物料，用乳酸调节pH值为4.5，于室温下在电场强度30kV/cm，脉冲时间400μs,脉冲频率250Hz条件下进行高压脉冲电场处理；然后升温至35℃，保温，在功率200W、频率2000Hz条件下进行微波提取，其中，每次微波辐照总时间70s,进行间隔式辐照：辐照10s，间隔10s，如此辐照10次，同时在功率250W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取；继续升温至45℃，保温，然后加入混合物料总重量3％的混合酶酶解40min，过滤，得滤液；滤渣用2倍重量78℃水漂洗3次，漂洗液与滤液合并，均匀混合，于室温下在电场强度40kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率250Hz条件下进行高压脉冲电场处理即得雪莲培养物提取物；

所述混合酶由果胶酶、纤维素酶、单宁酶、淀粉酶和蛋白酶按质量比4:3:3:2:1.5均匀混合。

2.改性膳食纤维的制备

所述改性膳食纤维的制备方法，包括以下步骤：将菊粉、苹果纤维、燕麦纤维、小麦纤维、米糠、麸皮按质量比10:8:5:4:3:2均匀混合，加入其质量5倍的水，室温300W、40KHz条件超声提取12min,然后在电场强度30kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场提取；用乳酸调节pH值为5.5，加入混合物质量0.2％的生物酶，于50℃酶解30min；酶解液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.2mm即得改性膳食纤维；

所述生物酶为木聚糖酶、纤维素酶、漆酶、果胶酶、单宁酶、淀粉酶和蛋白酶按质量比6:5:3:2:2:2:0.4均匀混合。

3.果胶分解物的制备

所述果胶分解物的制备方法，包括如下步骤：将新鲜的山楂果渣、柑桔皮、苹果渣分别放入装有1.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、40KHz清洗8min，沥干，切分成相等规格,长、宽为5-10mm，厚度3-5mm的片或丁，按质量比7:4:4均匀混合，然后于-23℃冷冻20min；立即进行粉碎，粒径为0.5mm；加入粉碎物质量4倍的去离子水，混合均匀，用柠檬酸调节pH值为2.5，于室温下在电场强度40kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率250Hz条件下进行高压脉冲电场处理，接着常压煮沸40min，布袋过滤，滤渣用其质量2倍的滤液常压煮沸50min,布袋过滤，合并滤液，硅藻土过滤，使滤液澄清，在75℃下减压浓缩至固形物含量为8％，迅速冷却至室温，加入浓缩液1.5倍体积的pH值为2.5的95％乙醇，静置25min,使果胶沉淀出来，4000r/min离心8min，回收沉淀，用2倍体积的无水乙醇洗脱，离心，回收沉淀，如此操作2次，得到的沉淀于50℃真空干燥2.5h,获得果胶，加入果胶质量4倍的45℃水，搅拌，均匀混合，保温，用乳酸调节pH值为5，加入0.5U/mL的果胶酶酶解3h,酶解液过滤，滤液于沸水中灭酶12min，冷却至室温，超滤浓缩、冷冻干燥即得果胶分解物。

下述实施例2-6所使用的雪莲培养物提取物、改性膳食纤维、果胶分解物均为实施例1制备。

实施例2

一种高效雪莲培养物蜂蜜膏，由以下重量份数的原料制备：蜂蜜55份，雪莲培养物提取物30份，改性膳食纤维24份，果胶分解物12份；

所述蜂蜜的质量百分比组成为洋槐蜜70％，枣花蜜20％，荔枝蜜10％；

所述高效雪莲培养物蜂蜜膏的制备方法，包括如下步骤：

按配方比例，首先将蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有55℃水的预溶装置中，预溶40min,过120目筛，转入调配罐，保温55℃，边搅拌边依次加入改性膳食纤维、果胶分解物，充分溶解12min；接着加入雪莲培养物提取物充分溶解5min得初混料；然后过胶体磨研磨5min，调整物料细度，过180目筛，入灭菌罐82℃灭菌30min，转入贮罐降温至50℃，最后灌装、封口、包装即得高效雪莲培养物蜂蜜膏。

实施例3

一种高效雪莲培养物蜂蜜膏，由以下重量份数的原料制备：蜂蜜40份，雪莲培养物提取物15份，改性膳食纤维20份，果胶分解物5份；

所述蜂蜜的质量百分比组成为洋槐蜜70％，枣花蜜20％，荔枝蜜10％；

所述高效雪莲培养物蜂蜜膏的制备方法，包括如下步骤：

按配方比例，首先将蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有50℃水的预溶装置中，预溶30min,过100目筛，转入调配罐，保温50℃，边搅拌边依次加入改性膳食纤维、果胶分解物，充分溶解10min；接着加入雪莲培养物提取物充分溶解4min得初混料；然后过胶体磨研磨4min，调整物料细度，过160目筛，入灭菌罐80℃灭菌28min，转入贮罐降温至48℃，最后灌装、封口、包装即得高效雪莲培养物蜂蜜膏。

实施例4

一种高效雪莲培养物蜂蜜膏，由以下重量份数的原料制备：蜂蜜70份，雪莲培养物提取物35份，改性膳食纤维30份，果胶分解物20份；

所述蜂蜜的质量百分比组成为洋槐蜜70％，枣花蜜20％，荔枝蜜10％；

所述高效雪莲培养物蜂蜜膏的制备方法，包括如下步骤：

按配方比例，首先将蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有60℃水的预溶装置中，预溶50min,过120目筛，转入调配罐，保温60℃，边搅拌边依次加入改性膳食纤维、果胶分解物，充分溶解15min；接着加入雪莲培养物提取物充分溶解6min得初混料；然后过胶体磨研磨6min，调整物料细度，过200目筛，入灭菌罐83℃灭菌32min，转入贮罐降温至52℃，最后灌装、封口、包装即得高效雪莲培养物蜂蜜膏。

实施例5

一种高效雪莲培养物蜂蜜膏，由以下重量份数的原料制备：洋槐蜜50份，雪莲培养物提取物28份，改性膳食纤维22份，果胶分解物10份；

所述高效雪莲培养物蜂蜜膏的制备方法，包括如下步骤：

按配方比例，首先将蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有60℃水的预溶装置中，预溶30min,过120目筛，转入调配罐，保温50℃，边搅拌边依次加入改性膳食纤维、果胶分解物，充分溶解15min；接着加入雪莲培养物提取物充分溶解4min得初混料；然后过胶体磨研磨6min，调整物料细度，过160目筛，入灭菌罐83℃灭菌28min，转入贮罐降温至52℃，最后灌装、封口、包装即得高效雪莲培养物蜂蜜膏。

实施例6

一种高效雪莲培养物蜂蜜膏，由以下重量份数的原料制备：洋槐蜜60份，雪莲培养物提取物32份，改性膳食纤维26份，果胶分解物15份；

所述高效雪莲培养物蜂蜜膏的制备方法，包括如下步骤：

按配方比例，首先将蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有50℃水的预溶装置中，预溶50min,过100目筛，转入调配罐，保温60℃，边搅拌边依次加入改性膳食纤维、果胶分解物，充分溶解10min；接着加入雪莲培养物提取物充分溶解6min得初混料；然后过胶体磨研磨4min，调整物料细度，过200目筛，入灭菌罐80℃灭菌32min，转入贮罐降温至48℃，最后灌装、封口、包装即得高效雪莲培养物蜂蜜膏。

实施例7本发明高效雪莲培养物蜂蜜膏的感官品评试验

邀请24名人员对本发明实施例2-6制备的高效雪莲培养物蜂蜜膏与市售两种蜂蜜膏进行品评，感官打分，其中专业和非专业人员各12名，专业人员青年、中年、老年各4名，男女各半，非专业人员少年、青年、中年、老年各3名，男女各半；打分包括外观(20分)、质地(25分)、风味(30分)、口感(25分)四个方面，打分人员独立进行，互不影响，以保证品评结果准确。对品评结果进行了统计，均分值取近似值，保留整数，具体见表1：

表1 感官品评统计结果

注：同一行内标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)，标不同大写字母表示差异极显著(P＜0.01)，标有相同字母表示差异不显著(P＞0.05)。

以上结果表明，本发明制备的高效雪莲培养物蜂蜜膏从外观、质地、风味和口感任何一方面都要明显优于市售蜂蜜膏，同时也适合不同年龄段、不同消费层次的消费者食用。

实施例8本发明雪莲培养物提取物总黄酮提取率的测定

将本发明实施例1制备的雪莲培养物提取物在温度40-50℃，-0.05--0.10MPa条件下浓缩，浓缩至固形物含量25％-35％，喷干，真空度2500Pa，60-130℃，冷却至室温包装检验，得喷干粉，以槲皮素为标准对照品、硝酸铝为显色剂，进总黄酮的测定。

1、溶液的配制：对照品溶液的制备

精密称取经120℃干燥至恒重的芦丁对照品10mg，置50mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀。

2、标准曲线的制备

精密吸取对照品溶液1、2、3、4、5与6mL，分别置25mL量瓶中，各加水至6mL，加入5％亚硝酸钠溶液1mL，摇匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6分钟，加4％氢氧化钠试液10mL加水至刻度，摇匀，放置15min，以相应试剂为空白，照分光光度法(中国药典2005版二部附录VB)，在500nm的波长处测定吸收度，以吸收度与其对应的浓度计算线性回归方程。得方程：y＝kx+b。

3、供试品溶液的制备

取上述喷干粉2克，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流至提取液无色，放冷，提取液定量移入100mL容量瓶中，并用甲醇少量洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。

4、测定方法

精密吸取供试品溶液3mL，置25mL量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至6mL”起，依法操作；另取相应试剂为空白，在500nm的波长处测定吸收度，从线性回归方程计算总黄酮含量以芦丁计

含量计算公式：

X＝(A样-b)×V样/(k×M样)×100％……………………………(A.1)

式中X——样品中含有雪莲总黄酮的百分含量

A样——样品测定的吸收度值

k、b——标准曲线中斜率及截距

V样——样品提取过程中稀释的倍数

M样——样品测定时样品的取样量

经折算，本发明实施例1制备的雪莲培养物提取物黄酮得率为97％，固形物得率65％。

实施例9本发明雪莲培养物提取物抗氧化性试验

将本发明实施例1制备的雪莲培养物提取物与市售生产日期、种源相同的雪莲培养物提取物以相同添加量(质量比5％)添加至相同质量的猪油中，相同条件下检测猪油的过氧化值，检测结果如表2：

表2 雪莲培养物提取物对猪油的抗氧化性(过氧化值)检测

以上结果表明：与市售雪莲培养物提取物相比，本发明制备的雪莲培养物提取物有非常强的抗氧化性，第25天，其抗氧化效果是市售的近10倍，同时说明本发明全程采用低温提取方法最大限度地保留了雪莲培养物中的生物活性物质，其药学功效和生物活性更强，更有利于提高人体免疫力，抗衰老。

Claims (10)

1.一种高效雪莲培养物蜂蜜膏，由以下重量份数的原料制备：蜂蜜40-70份，雪莲培养物提取物15-35份，改性膳食纤维20-30份，果胶分解物5-20份。

2.如权利要求1所述的高效雪莲培养物蜂蜜膏，其特征在于，由以下重量份数的原料制备：蜂蜜50-60份，雪莲培养物提取物28-32份，改性膳食纤维22-26份，果胶分解物10-15份。

3.如权利要求1或2所述的高效雪莲培养物蜂蜜膏，其特征在于，所述蜂蜜至少包含质量比为60％的洋槐蜜。

4.如权利要求3所述的高效雪莲培养物蜂蜜膏，其特征在于，所述蜂蜜的质量百分比组成为洋槐蜜70％，枣花蜜20％，荔枝蜜10％。

5.如权利要求1或2所述的高效雪莲培养物蜂蜜膏，其特征在于，所述雪莲培养物提取物的制备方法包括如下步骤：取雪莲培养物，浸入盛有质量百分比浓度为0.8-1.2％的无菌低聚果糖水溶液的容器中，取出，然后于-18—-23℃冷冻5-10min；立即粉碎至粒径0.3-1mm；置容器中并添加3-5倍重量的水或35-75％乙醇，得混合物料，用乳酸调节pH值为3.5-5.5，于室温下在电场强度25-35kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理；然后升温至30-40℃，保温，在功率150-300W、频率2000Hz条件下进行微波提取，其中，每次微波辐照总时间60-80s,进行间隔式辐照：辐照10s，间隔10s，如此辐照10次，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；继续升温至40-50℃，保温，然后加入混合物料总重量2-5％的混合酶酶解30-50min，过滤，得滤液；滤渣用1-3倍重量76-80℃水漂洗3次，漂洗液与滤液合并，均匀混合，于室温下在电场强度35-45kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理即得雪莲培养物提取物；

所述混合酶由果胶酶、纤维素酶、单宁酶、淀粉酶和蛋白酶按质量比3-5:2-4:2-4:1-3:1-2均匀混合。

6.如权利要求5所述的高效雪莲培养物蜂蜜膏，其特征在于，所述乙醇浓度为50％。

7.如权利要求1或2所述的高效雪莲培养物蜂蜜膏，其特征在于，所述改性膳食纤维的制备方法包括以下步骤：将菊粉、苹果纤维、燕麦纤维、小麦纤维、米糠、麸皮按质量比7-12:7-10:4-6:3-5:2-4:1-3均匀混合，加入其质量3-7倍的水，室温200-300W、35-40KHz条件超声提取10-15min,然后在电场强度20-40kV/cm，脉冲时间400-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场提取；用乳酸调节pH值为4.5-6.5，加入混合物质量0.1-0.3％的生物酶，于45-55℃酶解20-48min；酶解液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3mm即得改性膳食纤维；

所述生物酶为木聚糖酶、纤维素酶、漆酶、果胶酶、单宁酶、淀粉酶和蛋白酶按质量比5-7:3-6:2-4:1-3:1-3:1-3:0.3-0.5均匀混合。

8.如权利要求1或2所述的高效雪莲培养物蜂蜜膏，其特征在于，所述果胶分解物的制备方法，包括如下步骤：将新鲜的山楂果渣、柑桔皮、苹果渣分别放入装有1.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、40KHz清洗5-10min，沥干，切分成相等规格,长、宽为5-10mm，厚度3-5mm的片或丁，按质量比5-8:3-5:2-4均匀混合，然后于-21—-25℃冷冻10-30min；立即进行粉碎，粒径为0.1-1mm；加入粉碎物质量3-5倍的去离子水，混合均匀，用柠檬酸调节pH值为2-3，于室温下在电场强度35-45kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理，接着常压煮沸30-50min，布袋过滤，滤渣用其质量1-3倍的滤液常压煮沸40-60min,布袋过滤，合并滤液，硅藻土过滤，使滤液澄清，在75℃下减压浓缩至固形物含量为6-10％，迅速冷却至室温，加入浓缩液1.5倍体积的pH值为2-3的95％乙醇，静置20-30min,使果胶沉淀出来，4000r/min离心5-10min，回收沉淀，用2倍体积的无水乙醇洗脱，离心，回收沉淀，如此操作2次，得到的沉淀于40-60℃真空干燥2-3h,获得果胶，加入果胶质量4-5倍的40-50℃水，搅拌，均匀混合，保温，用乳酸调节pH值为4.5-5.5，加入0.3-0.8U/mL的果胶酶酶解2-4h,酶解液过滤，滤液于沸水中灭酶10-15min，冷却至室温，超滤浓缩、冷冻干燥即得果胶分解物。

9.如权利要求1-8任一所述高效雪莲培养物蜂蜜膏的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：按配方比例，首先将蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有50-60℃水的预溶装置中，预溶30-50min,过100-120目筛，转入调配罐，保温50-60℃，边搅拌边依次加入改性膳食纤维、果胶分解物，充分溶解10-15min；接着加入雪莲培养物提取物充分溶解4-6min得初混料；然后过胶体磨研磨4-6min，调整物料细度，过160-200目筛，入灭菌罐80-83℃灭菌28-32min，转入贮罐降温至48-52℃，最后灌装、封口、包装即得高效雪莲培养物蜂蜜膏。

10.如权利要求9所述高效雪莲培养物蜂蜜膏的制备方法，其特征在于，所述高效雪莲培养物蜂蜜膏，由以下重量份数的原料制备：蜂蜜55份，雪莲培养物提取物30份，改性膳食纤维24份，果胶分解物12份；所述蜂蜜的质量百分比组成为洋槐蜜70％，枣花蜜20％，荔枝蜜10％；

所述高效雪莲培养物蜂蜜膏的制备方法，包括如下步骤：按配方比例，首先将蜂蜜放入不锈钢容器中，置于装有55℃水的预溶装置中，预溶40min,过120目筛，转入调配罐，保温55℃，边搅拌边依次加入改性膳食纤维、果胶分解物，充分溶解12min；接着加入雪莲培养物提取物充分溶解5min得初混料；然后过胶体磨研磨5min，调整物料细度，过180目筛，入灭菌罐82℃灭菌30min，转入贮罐降温至50℃，最后灌装、封口、包装即得高效雪莲培养物蜂蜜膏。