CN102366432A - 雪莲培养物提取物及其新用途 - Google Patents
雪莲培养物提取物及其新用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102366432A CN102366432A CN2011103407798A CN201110340779A CN102366432A CN 102366432 A CN102366432 A CN 102366432A CN 2011103407798 A CN2011103407798 A CN 2011103407798A CN 201110340779 A CN201110340779 A CN 201110340779A CN 102366432 A CN102366432 A CN 102366432A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- saussurea involucrata
- involucrata culture
- extracting solution
- temperature
- saussurea
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241001145025 Saussurea involucrata Species 0.000 title claims abstract description 103
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 60
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 50
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 claims abstract description 42
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 claims abstract description 42
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 claims abstract description 31
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 claims abstract description 31
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 27
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 claims description 33
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 26
- 206010013935 Dysmenorrhoea Diseases 0.000 claims description 22
- 238000007689 inspection Methods 0.000 claims description 18
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 17
- 238000012856 packing Methods 0.000 claims description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 17
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 16
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 16
- 208000005171 Dysmenorrhea Diseases 0.000 claims description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 9
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 7
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 7
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 25
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 12
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 5
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 abstract description 4
- 241000133134 Saussurea Species 0.000 abstract description 3
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 abstract description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 abstract description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 abstract description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 abstract description 3
- 238000010792 warming Methods 0.000 abstract description 3
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 abstract 1
- 208000019255 Menstrual disease Diseases 0.000 abstract 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 abstract 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 abstract 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 abstract 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 abstract 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 abstract 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 abstract 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 abstract 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 46
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 9
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 8
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 230000027758 ovulation cycle Effects 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 3
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- BNGXYYYYKUGPPF-UHFFFAOYSA-M (3-methylphenyl)methyl-triphenylphosphanium;chloride Chemical compound [Cl-].CC1=CC=CC(C[P+](C=2C=CC=CC=2)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)=C1 BNGXYYYYKUGPPF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 description 2
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010060891 General symptom Diseases 0.000 description 2
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 2
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 description 2
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 description 2
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 description 2
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 description 2
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 description 2
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 235000021050 feed intake Nutrition 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 2
- 230000002175 menstrual effect Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 206010000087 Abdominal pain upper Diseases 0.000 description 1
- 208000008035 Back Pain Diseases 0.000 description 1
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 208000008930 Low Back Pain Diseases 0.000 description 1
- 208000029082 Pelvic Inflammatory Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000028017 Psychotic disease Diseases 0.000 description 1
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000061458 Solanum melongena Species 0.000 description 1
- 208000007271 Substance Withdrawal Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000000812 cholinergic antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000011443 conventional therapy Methods 0.000 description 1
- 230000032459 dedifferentiation Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000002607 hemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 1
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000003821 menstrual periods Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 208000037920 primary disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002089 prostaglandin antagonist Substances 0.000 description 1
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 description 1
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 description 1
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 1
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 description 1
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 description 1
- 229940087332 rutin 10 mg Drugs 0.000 description 1
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 230000002048 spasmolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012109 statistical procedure Methods 0.000 description 1
- -1 sterilization Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- QJVXKWHHAMZTBY-GCPOEHJPSA-N syringin Chemical compound COC1=CC(\C=C\CO)=CC(OC)=C1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 QJVXKWHHAMZTBY-GCPOEHJPSA-N 0.000 description 1
- QJVXKWHHAMZTBY-KSXIZUIISA-N syringin Natural products COc1cc(C=CCO)cc(OC)c1O[C@H]2O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]2O QJVXKWHHAMZTBY-KSXIZUIISA-N 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 208000025421 tumor of uterus Diseases 0.000 description 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明提供了雪莲培养物提取物及其新用途，治疗痛经，疗效好，治愈率较高，且未发现明显毒副作用。雪莲培养物具有温肾助阳，祛风胜湿，通经活血。用于风寒湿痹痛、类风湿性关节炎，小腹冷痛，月经不调等病的治疗。本发明雪莲培养物提取物采用醇提、浓缩、喷干的方法获得纯度较高的雪莲黄酮、雪莲多糖，通过临床观察发现，对治疗原发痛经疗效确切，值得临床参考和推广使用。
Description
技术领域
本发明涉及雪莲培养物提取物的制备方法及其应用，特别涉及雪莲培养物提取物在制备用于预防和治疗痛经的药物中的新用途。
背景技术
原发性痛经指女性在行经前或后、行经期出现腹痛、腰痛、下腹坠胀或其他不适，影响生活和工作者，多见于未婚未孕女性。在发展中国家约25％～50％成年女性和75％的青少年发生痛经，其中5％-20％为严重痛经。痛经的常规治疗主要用前列腺素拮抗剂、激素或水杨酸等，但止痛、解痉药物疗效不满意。因此寻找有效的药物预防及治疗痛经是非常重要的。
雪莲培养物是选取雪莲愈伤组织做为继代种子，通过细胞培养技术继代培养获得的，即中国专利ZL200510115902.0说明了雪莲培养物大规模培养的方法，雪莲培养物含有黄酮、多糖、绿原酸、紫丁香苷、微量元素及萜类等多种有效成份，雪莲培养物提取液采用醇提的方法获得纯度较高的雪莲黄酮，具有温肾助阳，祛风胜湿，通经活血的作用。现有文献和专利都没有其在治疗痛经方面的报道。
发明内容
本发明目的就是为了解决以上问题，提供一种雪莲培养物提取物及其制备方法，本发明另一目的在于提供雪莲培养物提取物用于制备预防和治疗原发性痛经的药物的新用途。
雪莲培养物是按照专利号：ZL200510115902.0，CN1961650上记载的工艺制备，选取雪莲离体组织，经脱分化形成的愈伤组织作为继代种，给与一定条件进行大规模继代培养获得的紫红色团块状颗粒，或该颗粒经干燥粉碎得到的粉末。本发明中雪莲培养物提取物是指经过提取、浓缩、灭菌、喷干等工艺得到的雪莲培养物提取液、雪莲培养物提取液喷干粉等。
本发明雪莲培养物提取液制备工艺为：
在雪莲培养物中加入30-95％乙醇溶液，雪莲培养物与乙醇的体积比为1∶10-1∶40，超声提取，温度为30-95℃，每次提取30-180min，连续提取2-3次，所得液体采用50-70℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％；再在100-130℃下，高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。
本发明雪莲培养物提取液制备工艺可以优选为：
在雪莲培养物中加入30％乙醇溶液，雪莲培养物与乙醇的体积比为1∶15，超声提取，温度为85℃，每次提取60min，连续提取2次，两次所得液体采用60℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％，120℃高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。
雪莲培养物提取液的制备工艺可以优选为：
在雪莲培养物中加入30％乙醇溶液，雪莲培养物与乙醇的体积比为1∶15，超声提取，温度为45℃，每次提取60min，连续提取2次，两次所得液体采用60℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％；110℃高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。
雪莲培养物提取液的制备工艺可以优选为：
在雪莲培养物中加入30％乙醇溶液，雪莲培养物与乙醇的体积比为1∶15，超声提取，温度为45℃，每次提取60min，连续提取3次，三次所得液体采用60℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％；110℃高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。将雪莲培养物提取液在温度40-50℃，-0.05--0.10MPa条件下浓缩，浓缩至固形物含量25％-35％，喷干，真空度2500Pa，60-130℃，冷却至室温包装检验，按照常规工艺制成口服液、胶囊、片剂。
雪莲培养物提取液喷干粉经检测含有总黄酮大于30％，多糖大于20％、绿原酸大于1％，具有温肾助阳，祛风胜湿，通经活血。
本发明提供了雪莲培养物提取液及其新用途，治疗痛经，疗效好，治愈率较高，且未发现明显毒副作用。
下面实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。
实验例1：
本实验以总黄酮含量为考察指标，采用正交实验的方法对超声波提取雪莲培养物总黄酮的工艺条件进行了研究。
雪莲培养物提取液中总黄酮的测定：
以槲皮素为标准对照品、硝酸铝为显色剂，进总黄酮的测定。
1、溶液的配制：对照品溶液的制备
精密称取经120℃干燥至恒重的芦丁对照品10mg，置50mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀。
2、标准曲线的制备
精密吸取对照品溶液1、2、3、4、5与6mL，分别置25mL量瓶中，各加水至6mL，加入5％亚硝酸钠溶液1mL，摇匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6分钟，加4％氢氧化钠试液10mL加水至刻度，摇匀，放置15min，以相应试剂为空白，照分光光度法(中国药典2005版二部附录VB)，在500nm的波长处测定吸收度，以吸收度与其对应的浓度计算线性回归方程。得方程：y＝kx+b
3、供试品溶液的制备
取本发明约2克，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流至提取液无色，放冷，提取液定量移入100mL量瓶中，并用甲醇少量洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。
4、测定法
精密吸取供试品溶液3mL，置25mL量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至6mL”起，依法操作；另取相应试剂为空白，在500nm的波长处测定吸收度，从线性回归方程计算总黄酮含量以芦丁计
含量计算公式：
X＝(A样-b)×V样/(k×M样)×100％……………………………(A.1)
式中X——样品中含有雪莲总黄酮的百分含量：
A样——样品测定的吸收度值
k、b——标准曲线中斜率及截距
V样——样品提取过程中稀释的倍数
M样——样品测定时样品的取样量
单因素实验由于乙醇作为提取溶剂具有选择性好，渗透性强，浸出率较高的优点，因此本实验选择一定浓度的乙醇溶液作为提取剂，并分别考察了雪莲培养物与乙醇的体积比、萃取温度、超声波萃取时间及萃取次数等因素对提取率的影响。
(1)提取溶剂的影响
提取溶剂：95％乙醇、70％乙醇、30％乙醇，水提，Ph2.7提取，Ph12提取。雪莲培养物与乙醇的体积比：1∶15
原料：粉碎，每份30g(总黄酮含量：12％)
提取温度：85℃
提取时间：1h
提取液过滤后定容到500ml
评价指标：固形物得率、总黄酮含量
结论：
30％乙醇提取黄酮得率最高，固形物得率也最高，因此选定30％乙醇作为提取溶剂。
(2)提取温度的影响(同时对比超声提取)
提取溶剂：30％乙醇
雪莲培养物与乙醇的体积比：1∶15
原料：粉碎，每份30g(总黄酮含量：12％)
提取温度：45℃、75℃、95℃
提取时间：1h
超声提取(45℃，30min，提取两次)
提取液过滤后定容到500ml
结论：
45℃与75℃、95℃的提取率(总黄酮和固形物)差异不大，因此提取温度定为45℃。
超声提取的一次提取得率稍低于常规提取的，但二次提取的黄酮含量高达71.39％。
(3)提取时间
提取溶剂：30％乙醇
提取温度：45℃
提取时间：1h、2h、3h
雪莲培养物与乙醇的体积比：1∶15
原料：粉碎，每份30g(总黄酮含量：12％)
提取液过滤定容至500ml
结论：
提取时间延长，提取率无明显变化，因此提取时间定为1h.
(4)提取次数
提取溶剂：30％乙醇
提取温度：45℃
提取时间：1h
雪莲培养物与乙醇的体积比：1∶15
原料：粉碎，每份30g(总黄酮含量：12％)
提取液过滤定容至500ml
提取次数：三次(每次1h)
结论：
第三次提取的黄酮提取率尚可达到8.75％，鉴于原料价格昂贵，因此提取次数定为三次。
雪莲培养物的提取，提取次数越多，黄酮含量越高，可能是因为黄酮较不容易提取，而其他容易提取的成分在前面已经被提取出来，因此越到后面，黄酮含量越高。因此可以考虑，第一次用水提取。第二次、三次用酒精提取。。
实验例2：放大提取实验
1、提取条件
提取溶剂：30％乙醇，
提取次数：三次
提取温度：45℃
提取时间：每级1h。
出液后，离心，将二级与三级的混在一起，一级的单独分开，使用旋转蒸发浓缩
2、实验数据
投料：960g
一级浓缩后：24％＊2.2kg 黄酮含量：25.67mg/mL
二三级浓缩后：9％＊3.45kg 黄酮含量：11.99mg/mL
| 重量 | 黄酮含量 | 黄酮重量 | 黄酮得率 | |
| 投料 | 960g | 12％ | 115g | |
| 一级出液浓缩 | 2200g | 3.09％ | 67.97g | 59.1 |
| 二三级浓缩 | 3450g | 1.199％ | 41.36g | 36 |
| 合计 | 95.1 |
结论：通过放大试验进一步证明雪莲培养物提取液提取工艺为提取溶剂：30％乙醇，提取次数：三次提取温度：45℃提取时间：每级1h具有较大优点。本试验为生产提供了很好的依据。
实验例3：雪莲培养物提取液治疗痛经临床试验
1临床资料
自2010年1月至2010年12月，观察痛经患者58例。随机分为治疗组和对照组。治疗组30例，年龄15～37岁，平均年龄27.2岁；病程2个月至11年，平均4.5；病情分级：重度10例，中度15例，轻度5例。对照组28例，年龄为15～36岁，平均27.1岁；病程3个月至10年，平均4.4年；病情分级：重度11例，中度11例，轻度6例。两组病例在年龄、病程、病情基本一致，经统计学处理，无显著性差异(P＞0.05)，有可比性。
2纳入标准
2.1病例诊断标准[1-2]轻度：有疼痛但不影响日常活动，工作少受影响，无全
身症状，少用止痛药。
中度：疼痛使日常活动受影响，工作能力亦受一定影响，很少有全身症状，
需用止疼药，且有效。
重度：疼痛使日常活动及工作明显受影响，全身症状明显，止痛药效不显。
2.2病例排除标准
①经检查证实由盆腔炎、子宫内膜异位症、子宫肿瘤等器质性疾病所致继发性痛经；②对本药过敏者；③月经周期不规律影响治疗及疗效判断者；④合并有心血管、肝、肾和造血系统等严重原发性疾病及精神病患者；⑤不符合纳入标准，未按规定用药，无法判断疗效或资料不全等影响疗效或安全性判断者。
3治疗方法
3.1观察组雪莲培养物提取液(实施例1制备)：每次2ml，早晚各服一次，口服。饭后半小时服。
3.2对照组口服消炎痛片，每次25mg，每天3次，饭后半小时服。
两组均于每次经前10天开始服药，共服2周，疗程为3个月经周期。停药后观察3个月经周期，然后统计疗效。
4疗效观察
4.1疗效标准
治愈：疼痛消失，连续3个月经周期未见复发。
好转：疼痛减轻或消失，但不能维持3个月以上。
未愈：疼痛未见改善。
4.2治疗结果治疗组30例中临床治愈12例，显效11例，好转6例，无效2例，总有效率95.0；对照组28例中临床治愈7例，显效8例，好转7例，无效6例，总有效率85.7％。两组总有效率比较，治疗组明显优于对照组，差异有显著性意义(P＜0.05)。
结果可知，雪莲培养物提取液可用于制备治疗原发性痛经药物中的应用。
实施例1：雪莲培养物提取液的制备
在雪莲培养物中加入60％乙醇溶液，超声提取，超声波功率为60W，料液比为1∶20，每次提取30min，连续提取2次，两次所得液体采用60℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％，120℃高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。
实施例2：雪莲培养物提取液的制备
在雪莲培养物中加入70％乙醇溶液，超声提取，超声波功率为70W，料液比为1∶40每次提取30min，连续提取2次，两次所得液体采用60℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％；110℃高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。
实施例3：雪莲培养物提取液的制备
在雪莲培养物中加入70％乙醇溶液，雪莲培养物与乙醇比为1∶30，超声提取，超声波功率为70W，每次提取60min，连续提取2次，两次所得液体采用60℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％，120℃高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。实施例4：
雪莲培养物提取液，按照常规工艺制成口服液，原发性痛经患者口服，每次2ml，早晚各服一次，饭后半小时服。
实施例5：
将雪莲培养物提取液在温度40-50℃，-0.05--0.10MPa条件下浓缩，浓缩至固形物含量25％-35％，喷干，真空度2500Pa，60-130℃，冷却至室温，按照常规工艺制成胶囊，原发性痛经患者口服，早、晚饭后半小时各服2粒。
实施例6：
将雪莲培养物提取液在温度40-50℃，-0.05--0.10MPa条件下浓缩，浓缩至固形物含量25％-35％，喷干，真空度2500Pa，60-130℃，冷却至室温，按照常规工艺制成片剂，原发性痛经患者口服，早、晚饭后半小时各服2片。
Claims (13)
1.一种雪莲培养物提取液，其特征在于该雪莲培养物提取液由如下方法制成：在雪莲培养物中加入30-95％乙醇溶液，雪莲培养物与乙醇的体积比为1∶10-1∶40，超声提取，温度为30-95℃，每次提取30-180min，连续提取2-3次，所得液体采用50-70℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％；再在100-130℃下，高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液；所述雪莲培养物是按照专利号：ZL200510115902.0，CN1961650上记载的工艺制备。
2.如权利要求1所述的雪莲培养物提取液，其特征在于该雪莲培养物提取液由如下方法制成：在雪莲培养物中加入30％乙醇溶液，雪莲培养物与乙醇的体积比为1∶15，超声提取，温度为85℃，每次提取60min，连续提取2次，两次所得液体采用60℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％，120℃高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。
3.如权利要求1所述的雪莲培养物提取液，其特征在于该雪莲培养物提取液由如下方法制成：在雪莲培养物中加入30％乙醇溶液，雪莲培养物与乙醇的体积比为1∶15，超声提取，温度为45℃，每次提取60min，连续提取2次，两次所得液体采用60℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％；110℃高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。
4.如权利要求1所述的雪莲培养物提取液，其特征在于该雪莲培养物提取液由如下方法制成：在雪莲培养物中加入30％乙醇溶液，雪莲培养物与乙醇的体积比为1∶15，超声提取，温度为45℃，每次提取60min，连续提取3次，三次所得液体采用60℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％；110℃高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。
5.如权利要求1-4任一所述的雪莲培养物提取液，其特征在于在温度40-50℃，-0.05--0.10MPa条件下浓缩，浓缩至固形物含量25％-35％，喷干，真空度2500Pa，60-130℃，冷却至室温包装检验，按照常规工艺制成口服液、胶囊、片剂。
6.一种雪莲培养物提取液的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：在雪莲培养物中加入30-95％乙醇溶液，雪莲培养物与乙醇的体积比为1∶10-1∶40，超声提取，温度为30-95℃，每次提取30-180min，连续提取2-3次，所得液体采用50-70℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％；再在100-130℃下，高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。
7.如权利要求6所述的雪莲培养物提取液的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：在雪莲培养物中加入30％乙醇溶液，雪莲培养物与乙醇的体积比为1∶15，超声提取，温度为85℃，每次提取60min，连续提取2次，两次所得液体采用60℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％，120℃高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。
8.如权利要求6所述的雪莲培养物提取液的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：在雪莲培养物中加入30％乙醇溶液，雪莲培养物与乙醇的体积比为1∶15，超声提取，温度为45℃，每次提取60min，连续提取2次，两次所得液体采用60℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％；110℃高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。
9.如权利要求6所述的雪莲培养物提取液的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：在雪莲培养物中加入30％乙醇溶液，雪莲培养物与乙醇的体积比为1∶15，超声提取，温度为45℃，每次提取60min，连续提取3次，三次所得液体采用60℃减压浓缩，浓缩至目标成分总黄酮含量1％-60％；110℃高温瞬时灭菌，冷却至室温，包装检验，即得雪莲培养物提取液。
10.如权利要求1-4任一所述的雪莲培养物提取液在制备预防和治疗痛经的药物中的应用。
11.如权利要求5所述的雪莲培养物提取液在制备预防和治疗痛经的药物中的应用。
12.如权利要求10所述的应用，其特征在于所述痛经指原发性痛经。
13.如权利要求11所述的应用，其特征在于所述痛经指原发性痛经。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110340779 CN102366432B (zh) | 2011-11-02 | 2011-11-02 | 雪莲培养物提取物及其新用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110340779 CN102366432B (zh) | 2011-11-02 | 2011-11-02 | 雪莲培养物提取物及其新用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102366432A true CN102366432A (zh) | 2012-03-07 |
| CN102366432B CN102366432B (zh) | 2013-06-26 |
Family
ID=45759052
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201110340779 Active CN102366432B (zh) | 2011-11-02 | 2011-11-02 | 雪莲培养物提取物及其新用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102366432B (zh) |
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103238841A (zh) * | 2013-05-23 | 2013-08-14 | 昆明宝特药用植物研究开发有限公司 | 一种含玛咖、雪莲培养物的食品组合物及应用 |
| CN103877140A (zh) * | 2014-04-04 | 2014-06-25 | 大连普瑞康生物技术有限公司 | 雪莲培养物在制备促进骨骼健康产品中的应用 |
| CN104522455A (zh) * | 2014-12-26 | 2015-04-22 | 北京蜜蜂堂生物医药股份有限公司 | 一种雪莲培养物蜂蜜膏及其制备方法 |
| CN104686886A (zh) * | 2015-02-13 | 2015-06-10 | 邵素英 | 一种高效雪莲培养物蜂蜜膏及其制备方法 |
| CN104719912A (zh) * | 2015-02-13 | 2015-06-24 | 邵素英 | 一种生物活性较高的雪莲培养物蜂蜜膏及其制备方法 |
| CN106036880A (zh) * | 2016-07-13 | 2016-10-26 | 广州正广生物科技有限公司 | 一种缓解痛经的组合物及其应用和由其制成的健康食品 |
| EP3127532A1 (en) * | 2015-08-06 | 2017-02-08 | TCI Co., Ltd. | Method for inhibiting melanogenesis and promoting collagen production and wound healing |
| CN108113926A (zh) * | 2017-12-29 | 2018-06-05 | 吉林农业科技学院 | 一种天山雪莲超声提取工艺 |
| CN108936181A (zh) * | 2018-08-27 | 2018-12-07 | 桐乡市博奥生物科技有限公司 | 一种雪莲培养物提取物的组合物 |
| CN109078033A (zh) * | 2018-08-08 | 2018-12-25 | 大连普瑞康生物技术有限公司 | 雪莲培养物抑制蛋白质非酶糖基化反应在抗衰老产品中的应用 |
| CN109350633A (zh) * | 2018-09-29 | 2019-02-19 | 大连普瑞康生物技术有限公司 | 一种雪莲培养物滴丸及其制备方法 |
| CN112353861A (zh) * | 2020-11-26 | 2021-02-12 | 河南五极中医药研究院 | 用于调理血瘀体质的微丸颗粒的制备方法 |
| CN116695273A (zh) * | 2023-05-17 | 2023-09-05 | 百事基材料（青岛）股份有限公司 | 含雪莲活性成分的锦纶大生物纤维及其制备方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1961650A (zh) * | 2005-11-11 | 2007-05-16 | 大连普瑞康生物技术有限公司 | 新疆雪莲细胞组织培养物及其大规模继代培养的方法 |
| CN101897656A (zh) * | 2010-07-13 | 2010-12-01 | 大连普瑞康生物技术有限公司 | 雪莲培养物作为新原料在日化用品中的应用 |
-
2011
- 2011-11-02 CN CN 201110340779 patent/CN102366432B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1961650A (zh) * | 2005-11-11 | 2007-05-16 | 大连普瑞康生物技术有限公司 | 新疆雪莲细胞组织培养物及其大规模继代培养的方法 |
| CN101897656A (zh) * | 2010-07-13 | 2010-12-01 | 大连普瑞康生物技术有限公司 | 雪莲培养物作为新原料在日化用品中的应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 贾景明等,1: "新疆雪莲组织培养物的抗辐射作用(英文)", 《沈阳药科大学学报》 * |
Cited By (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103238841A (zh) * | 2013-05-23 | 2013-08-14 | 昆明宝特药用植物研究开发有限公司 | 一种含玛咖、雪莲培养物的食品组合物及应用 |
| CN103238841B (zh) * | 2013-05-23 | 2014-05-28 | 昆明宝特药用植物研究开发有限公司 | 一种含玛咖、雪莲培养物的食品组合物及应用 |
| CN103877140A (zh) * | 2014-04-04 | 2014-06-25 | 大连普瑞康生物技术有限公司 | 雪莲培养物在制备促进骨骼健康产品中的应用 |
| CN104522455A (zh) * | 2014-12-26 | 2015-04-22 | 北京蜜蜂堂生物医药股份有限公司 | 一种雪莲培养物蜂蜜膏及其制备方法 |
| CN104686886A (zh) * | 2015-02-13 | 2015-06-10 | 邵素英 | 一种高效雪莲培养物蜂蜜膏及其制备方法 |
| CN104719912A (zh) * | 2015-02-13 | 2015-06-24 | 邵素英 | 一种生物活性较高的雪莲培养物蜂蜜膏及其制备方法 |
| CN106551923A (zh) * | 2015-08-06 | 2017-04-05 | 百岳特生物科技（上海）有限公司 | 具黑色素产生抑制作用、胶原蛋白产生促进作用、以及促进伤口愈合速度的化合物 |
| EP3127532A1 (en) * | 2015-08-06 | 2017-02-08 | TCI Co., Ltd. | Method for inhibiting melanogenesis and promoting collagen production and wound healing |
| CN106551923B (zh) * | 2015-08-06 | 2019-03-19 | 百岳特生物科技（上海）有限公司 | 具黑色素产生抑制作用、胶原蛋白产生促进作用、以及促进伤口愈合速度的化合物 |
| CN106036880A (zh) * | 2016-07-13 | 2016-10-26 | 广州正广生物科技有限公司 | 一种缓解痛经的组合物及其应用和由其制成的健康食品 |
| CN106036880B (zh) * | 2016-07-13 | 2019-03-22 | 广州正广生物科技有限公司 | 一种缓解痛经的组合物及其应用和由其制成的健康食品 |
| CN108113926A (zh) * | 2017-12-29 | 2018-06-05 | 吉林农业科技学院 | 一种天山雪莲超声提取工艺 |
| CN109078033A (zh) * | 2018-08-08 | 2018-12-25 | 大连普瑞康生物技术有限公司 | 雪莲培养物抑制蛋白质非酶糖基化反应在抗衰老产品中的应用 |
| CN108936181A (zh) * | 2018-08-27 | 2018-12-07 | 桐乡市博奥生物科技有限公司 | 一种雪莲培养物提取物的组合物 |
| CN109350633A (zh) * | 2018-09-29 | 2019-02-19 | 大连普瑞康生物技术有限公司 | 一种雪莲培养物滴丸及其制备方法 |
| CN109350633B (zh) * | 2018-09-29 | 2021-05-14 | 大连普瑞康生物技术有限公司 | 一种雪莲培养物滴丸及其制备方法 |
| CN112353861A (zh) * | 2020-11-26 | 2021-02-12 | 河南五极中医药研究院 | 用于调理血瘀体质的微丸颗粒的制备方法 |
| CN116695273A (zh) * | 2023-05-17 | 2023-09-05 | 百事基材料（青岛）股份有限公司 | 含雪莲活性成分的锦纶大生物纤维及其制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102366432B (zh) | 2013-06-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102366432B (zh) | 雪莲培养物提取物及其新用途 | |
| CN1899361B (zh) | 贞芪药物组合及其制备 | |
| CN102145062A (zh) | 刺梨果活性提取物及其制备方法、检测方法和应用 | |
| CN101366721A (zh) | 一种治疗骨科疾病的原料药及其制备方法 | |
| CN104644697A (zh) | 灵芝超微粉的制备方法及其应用 | |
| EP3339285B1 (en) | A compound isolated from isodon forrestii var. forrestii and preparation method and applications thereof | |
| CN102085248B (zh) | 一种治疗宫颈疾病的中药组合物及其制备方法和检测方法 | |
| CN1331488C (zh) | 一种夏枯草提取物与用途 | |
| CN102617698B (zh) | 一种制备纤细薯蓣皂苷的方法及其用途 | |
| CN104940479A (zh) | 一种治疗ad病的中药组合物 | |
| CN102319291A (zh) | 一种构树叶总酚酸提取物及其在制备抗癌药物中的应用 | |
| CN103494846A (zh) | 海南冬青总三萜提取物及其制备方法与用途 | |
| CN101926815A (zh) | 一种芍药苷和甘草次酸组合物及其制备方法与应用 | |
| CN101991670A (zh) | 一种α-葡萄糖甙酶活性抑制剂及在制备糖尿病药物中的应用 | |
| CN110372732A (zh) | 白坚木碱-喹啉型二聚吲哚生物碱化合物及其应用 | |
| CN101152320A (zh) | 一种治疗妇科盆腔炎的中药制剂 | |
| CN101028336B (zh) | 一种头花蓼和独一味的药物组合物 | |
| CN107365284A (zh) | 一种从红豆杉中提取紫杉醇的方法 | |
| CN103330721A (zh) | 用于治疗女性卵巢早衰的海参花提取物及其制备方法 | |
| CN102085293B (zh) | 具有抗肿瘤作用的短葶山麦冬提取物及其制备方法 | |
| CN101791325B (zh) | 一种具有防治抗肺癌作用的猕猴桃胶囊的制备方法 | |
| CN105663150B (zh) | 一种苯丙素类化合物及其药学上可接受的盐在制备治疗炎症性疾病的药物中的应用 | |
| CN109350620B (zh) | 一种治疗卵巢癌的药物及其用途 | |
| CN102579756B (zh) | 含有穿山龙提取物与哈尔满碱及哈尔满碱类衍生物的药物组合物及其应用 | |
| CN102631386A (zh) | 柴胡解热镇痛制剂及其制备工艺 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: Extract from Saussurea involucrata culture and its new uses Effective date of registration: 20200930 Granted publication date: 20130626 Pledgee: Dalian Xigang District Enterprise Credit Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: DALIAN PRACTICAL BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2020210000054 |
|
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20210929 Granted publication date: 20130626 Pledgee: Dalian Xigang District Enterprise Credit Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: DALIAN PRACTICAL BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2020210000054 |
|
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: Saussurea involucrata culture extract and its new application Effective date of registration: 20210930 Granted publication date: 20130626 Pledgee: Dalian Xigang District Enterprise Credit Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: DALIAN PRACTICAL BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2021210000067 |
|
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20221213 Granted publication date: 20130626 Pledgee: Dalian Xigang District Enterprise Credit Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: DALIAN PRACTICAL BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2021210000067 |
|
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: The Extract of Saussurea involucrata Culture and Its New Use Effective date of registration: 20221214 Granted publication date: 20130626 Pledgee: Dalian Xigang District Enterprise Credit Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: DALIAN PRACTICAL BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2022210000215 |
|
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20231214 Granted publication date: 20130626 Pledgee: Dalian Xigang District Enterprise Credit Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: DALIAN PRACTICAL BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2022210000215 |
|
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: Snow Lotus Culture Extract and Its New Applications Effective date of registration: 20231218 Granted publication date: 20130626 Pledgee: Dalian Xigang District Enterprise Credit Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: DALIAN PRACTICAL BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2023980072352 |