CN104686190A - 博湖苇蘑人工料袋栽培模式的建立 - Google Patents

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沈海涛
林翠
马欢
姚华
陈庆宽
祝建波
王爱英
焦天奇
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Agricultural [technology Center Manas County
Shihezi University
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Shihezi University
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G18/00—Cultivation of mushrooms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05G—MIXTURES OF FERTILISERS COVERED INDIVIDUALLY BY DIFFERENT SUBCLASSES OF CLASS C05; MIXTURES OF ONE OR MORE FERTILISERS WITH MATERIALS NOT HAVING A SPECIFIC FERTILISING ACTIVITY, e.g. PESTICIDES, SOIL-CONDITIONERS, WETTING AGENTS; FERTILISERS CHARACTERISED BY THEIR FORM
    • C05G1/00—Mixtures of fertilisers belonging individually to different subclasses of C05
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor

Abstract

本发明涉及博湖苇蘑人工料袋栽培模式的建立，包括菌种分离鉴定、母种扩繁、填料配方、培养条件、菌丝体转化子实体条件的建立。利用本发明所述方法可进行生产化栽培具有生产成本低、操作简单，出菇率高等优点。新疆特有蘑菇品种博湖苇蘑料袋栽培模式的建立对新疆特有食用菌具有极高的开发、推广价值。本发明所涉及栽培方法所培育的博湖苇蘑栽培周期为90天左右，生物产量极高，子实体呈淡黄色或白色，肉质紧实，蛋白质含量高，味道鲜美，营养成分与野生蘑菇无显著差异，具有较强的抗氧化和抗衰老的功能，是一种极具市场开发价值的食用菌。

Description

博湖苇蘑人工料袋栽培模式的建立
技术领域
本发明涉及新疆特有食用菌栽料袋培技术，更确切地说，涉及博湖苇蘑人工料袋栽培模式的建立。
背景技术
博湖苇蘑是在新疆博斯腾湖区特殊环境条件下形成的一种珍稀食用菌。野生苇蘑生长在沙土内腐烂的芦苇根上。菌柄为纺锤形，基部杵状，肉质，中生，柄上有不明显的鳞片，空心，有膜状菌环。菌盖厚5cm左右，直径15cm左右，肉质具有浓郁的蘑菇香味。博湖苇蘑蛋白质含量丰富，氨基酸配比合理，营养成分优于双孢蘑菇、香菇、平菇及草菇，加之博湖苇蘑具有生长快、个体大、子实体形态好、质地紧密、味道鲜美等特点，是一种极为珍贵的食用菌资源。正是其优良的品质和较高的营养价值，广受当地人喜爱。目前，尚未有利用料袋栽培模式人工培育博湖苇蘑的报道。本发明的目的在于提供博湖苇蘑料袋人工培养方法，包括菌种分离鉴定、母种扩繁、填料配方、培养条件、菌丝体转化子实体条件的建立。通过本发明所述栽培方法生产所培育的博湖苇蘑栽培周期为90天左右，生物产量极高，子实体呈淡黄色或白色，肉质紧实，蛋白质含量高，味道鲜美，营养成分与野生蘑菇无显著差异，具有较强的抗氧化和抗衰老的功能，是一种极具市场开发价值的食用菌。
发明内容
本发明涉及博湖苇蘑人工料袋栽培模式的建立，包括菌种分离鉴定、母种扩繁、料袋填料配方、培养条件、菌丝体转化子实体条件的建立。该方法培育的博湖苇蘑栽培周期为90天左右，生物产量极高，子实体呈淡黄色或白色，肉质紧实，蛋白质含量高，味道鲜美，营养成分与野生蘑菇无显著差异，具有较强的抗氧化和抗衰老的功能，是一种极具市场开发价值的食用菌。该方法具有设备要求低，易于操作等特点，方便大规模推广。
本发明通过以下措施实现：
博湖苇蘑人工栽培菌种，它是蘑菇科；伞菌属的一个菌株，其特征在于：它是采集新疆博斯腾湖周边芦苇滩野生蘑菇做标本，采用组织分离法，经驯化，提纯而成，其生物学特性为菌盖表面光滑，白色或乳白色，生长初期呈半球形，成熟后圆形，中央平展或稍突，边缘光滑，直径达30 -30 mm ，厚5 - 30 mm，属大型食用真菌。菌柄中生，短粗圆柱状，上端表面有少量鳞片，下端基本光滑。空心，肉质，有双层菌环，无菌托，孢子为深棕色；母种培养基上菌丝呈乳白色，在20℃-25℃培养15天左右长满试管。
1.菌种的分离与鉴定
采用PDA培养基，组织分离法从野生博湖苇蘑的菌盖中部分离，然后取菌块接种于培养皿中，培养温度25℃培养10天左右获得白色原种；
利用ITS进行菌种鉴定，其测序结果经NCBI数据库比对，博湖苇蘑为真菌界；双核亚界；担子菌门；伞菌亚门；伞菌纲；伞菌亚纲；伞菌目；蘑菇科；伞菌属的一个菌种。
2.母种的液体扩繁：
液体摇瓶培养，液体培养基为：马铃薯200克，葡萄糖20克，磷酸氢二钾0.75克，硫酸镁0.75克，红糖5克，水1000克。培养温度25℃，180rmp，培养10天获得母种。
3.料袋培养基制作：
  （1）将收割芦苇的晒干后粉碎成0.5厘米左右的颗粒与小麦质量比4:1进行混合，放入2%的石灰水中浸泡24小时，捞出控干，装袋，控制料袋中水分为40%左右，121℃高压灭菌30分钟。
（2）将玉米芯40%-50%，牛粪35%-40%，玉米秆10%，过磷酸钙1%-1.5%，石膏1%-1.5%混合发酵后，装袋。
4.菌丝培养
      将步骤2母种接入步骤3栽培培养基中，然后将菌袋放入暗培养室中25℃培养60天，菌丝长满料袋。
5.诱导菌丝体转化子实体
变温刺激步骤4中的菌袋，变温设计为15℃ 8小时和25℃ 16小时变温培养处理一周，分化出子实体，原基分化后25℃暗培养3天获得伞盖直径为15厘米左右的子实体。
本发明所用PDA培养基为马铃薯200g/L、葡萄糖20g/L、 琼脂12g/L、水1L。
附图说明
图1为本发明博湖苇蘑出菇图片。
具体实施方式
实施例一：菌种的分离
组织分离法：在无菌室接种箱内或超净工作台上进行。选用好的博湖苇蘑子实体，表面用无菌水冲洗两次，随后用无菌干净纱布或滤纸将表面的水吸去，最后用无菌手术剪刀或镊子切取子座顶端部分或菌核内的组织块0.2-0.4cm接种于无菌PDA培养基上，放在25℃条件下培养，长出菌丝体备用。
实施例二：菌种的制备
利用液体摇瓶培养，液体培养基为：马铃薯200克，葡萄糖20克，磷酸氢二钾0.75克，硫酸镁0.75克，红糖5克，水1000克。从长满菌丝的PDA培养基上挑取直径0.5厘米左右大小菌块，放入液体培养基中对博湖苇蘑进行液体培养。接菌后置于往复式震荡机中，每分钟震荡180次，28℃培养 10天后，获得液体母种菌液。液体培养具有：第一，菌丝生长速度快，菌丝体产量高；第二，利用液体培养制备液体菌种时能有效减少污染；第三，利用液体菌接种固体料袋培养基质效率高。
实施例三：菌种鉴定
    利用CTAB法提取博湖苇蘑菌丝的    DNA，利用ITS2和ITS4引物，进行扩增，测序，结果经NCBI数据库比对，博湖苇蘑为真菌界；双核亚界；担子菌门；伞菌亚门；伞菌纲；伞菌亚纲；伞菌目；蘑菇科；伞菌属的一个菌种。
实施例四：料袋培养基制作
（1）将收割芦苇的晒干后粉碎成0.5厘米左右的颗粒与小麦质量比4:1进行混合，放入2%的石灰水中浸泡24小时，捞出控干，装袋，控制料袋中水分为40%左右，121℃高压灭菌30分钟。
（2）将玉米芯40%-50%，牛粪35%-40%，玉米秆10%，过磷酸钙1%-1.5%，石膏1%-1.5%混合发酵后，装袋。
实施例五：菌丝培养
      将适量加入液体母种菌液至已灭菌的料袋中，反复倒置数次使菌液均匀渗入填料中，封口，然后将菌袋开口朝上依次并排放入培养架中，25℃暗培养60天，菌丝长满料袋，在此期间控制室内湿度在50%左右。
实施例六：诱导菌丝体转化子实体
将长满菌丝的菌袋15℃暗处理8小时，然后迅速升高温度至24℃暗处理16小时，反复处理3次，分化出子实体， 25℃暗培养7天获得伞盖直径为15厘米左右的子实体，生物学效率为65%以上（生物学效率=鲜菇重量/培养干重Х100%）。
TGTCCCGTACCTCCTGTTCTAGTACGGCTTGTGACTGAGCTCTTTGGAGCATGTGCACACCTGTCTGGACTTCATTTTCATCCACCTGTGCACCTTTTGTAGTCTTTTTCAGGTATTGAGGGAAGTGGTCAGCCTATCAGCTCTTGCTGGATAAGGACTTGCAGTGTGTAAACAGTGCTGTCCTTGACCTTGACCATGGAATCTTTTTCCTGTCAGAGACTATGTTATTCATTATACTCTGTAGAATGTCATTGAATGTTTTTACGTGGGCTTATATGCCTATGAAAATTATTATACAACTTTCAGCAACGGATCTCTTGGCTCTCGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCATCTTGCGCTCCTTGGTATTCCGAGGAGCATGCCTGTTTGAGTGTCATTATATTCTCAACTCCCCAATACTTTGTTGTAAAGGAGAGCTTGGATTGTGGGGGCTTGCTGGCCACTTGCTTGGGGTCAGCTCCTCTGAAATGCATTAGCAGAACCGTCTGCGATCTGCCACAAGTGTGATAATTTATCTACACTGGCGAGGGGATTGCTTTCTGTGATGTTCAGCTTCTAATCGTCTCAGGACAATTTCTCGAATGCTTGACCTCAAATCAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGGAGGAA
 

Claims (8)

1.野生博湖苇蘑菌种分离及料袋栽培方法，包括菌种分离鉴定、母种扩繁、填料配方、菌丝培养条件、菌丝体转化子实体条件步骤。
2.权利要求1所述的博湖苇蘑人工栽培菌种，它是蘑菇科；伞菌属的一个菌株，其特征在于：它是采集新疆博斯腾湖周边芦苇滩野生蘑菇做标本，采用组织分离法，经驯化，提纯而成，其生物学特性为菌盖表面光滑，白色或乳白色，生长初期呈半球形，成熟后圆形，中央平展或稍突，边缘光滑，直径达30 -30 mm ，厚5 - 30 mm，属大型食用真菌。
3.菌柄中生，短粗圆柱状，上端表面有少量鳞片，下端基本光滑。
4.空心，肉质，有双层菌环，无菌托，孢子为深棕色；母种培养基上菌丝呈乳白色，在20℃-25℃培养15天左右长满试管。
5.权利要求1所述的博湖苇蘑的母种扩繁，其特征在于：液体摇瓶培养，液体培养基为马铃薯200克，葡萄糖20克，磷酸氢二钾0.75克，硫酸镁0.75克，红糖5克，水1000克。
6.权利要求1所述的博湖苇蘑料袋培养填料配方，其特征在于：（1）芦苇：小麦质量比为8：2。
7.（2）发酵料：玉米芯40%-50%，牛粪35%-40%，玉米秆10%，过磷酸钙1%-1.5%，石膏1%-1.5%。
8.权利要求1所述的博湖苇蘑料袋培养菌丝体转化子实体条件，其特征在于：将长满菌丝的菌袋15℃培养8小时和25℃培养16小时变温培养处理3天，诱导子实体的产生。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN113728875A (zh) * 2021-09-28 2021-12-03 天津师范大学 一种野生苇蘑批量化培殖方法及应用

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