CN104673865A - 具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽及其制备方法和用途,其制备方法包括以下步骤:将秋刀鱼绞碎,然后加热搅拌,再调节pH值至4.2,离心分离取沉淀,加入蛋白酶酶解,酶解产物离心后取上清,过超滤膜后得到秋刀鱼肽液;将秋刀鱼肽液浓缩后加入还原糖反应,即得到秋刀鱼美拉德肽。本发明方法结合生物酶解技术、生物膜技术和美拉德反应技术,从秋刀鱼蛋白中释放出具有降尿酸活性的生物活性肽,然后通过超滤膜富集目标活性肽,最后再通过美拉德反应技术提升目标生物活性肽的降尿酸活性。采用本发明方法制得的秋刀鱼美拉德肽的降尿酸功效明显,可显著降低经氧嗪酸钾诱致高尿酸血症的大鼠血清尿酸水平,并具有明显的保护肾脏的功效。
Description
技术领域
本发明属于秋刀鱼精深加工领域,具体涉及具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽及其制备方法和用途。
背景技术
尿酸(C5H4N4O3)是内源性嘌呤和饮食中嘌呤的代谢产物。在人体的嘌呤代谢中,ATP等经过一系列的代谢反应,生成次黄嘌呤及黄嘌呤,两者皆会被黄嘌呤氧化酶(XOD)氧化生成尿酸。而当血尿酸水平过高时,将会导致高尿酸血症,继而导致尿酸盐析出结晶并沉积在关节处,引起痛风的发生。
在目前的药物治疗中,急性痛风发作时,常使用西药进行消炎、镇痛,从而达到治疗的目的,如秋水仙碱、非甾体抗炎药物及泼尼松龙(促肾上腺皮质激素)起效快,效果明显。此外,还有前列腺素合成酶抑制剂——萘普生具有抗炎、解热、镇痛的功效,对类风湿性关节炎和痛风也有一定的效果。
西药治疗方法虽然起效快,但大多数西药具有明显的毒副作用。如秋水仙碱会造成患者的肾脏和肝脏功能衰竭及中枢神经损伤;非甾体抗炎药物可能会引起尿蛋白甚至间质性肾炎、胃肠道和肝脏的功能紊乱;泼尼松龙则会导致糖代谢异常、肌肉萎缩、骨质疏松和中枢神经系统损伤等多种毒副作用。因此,寻找降尿酸功效显著的、安全的降尿酸药物已成为必然的趋势。
蛋白多肽安全无毒副作用,长期以来都被看作是健康的食品配料或药物的重要来源,且小分子多肽比蛋白和氨基酸更容易被人体吸收,并具有良好的加工性能。蛋白多肽对于人体是必不可少的,它们具有不同的生理作用,如降血压、降胆固醇、抗血栓、抗癌、抗氧化等,随着科技的发展,从蛋白肽中发现的功效越来越多。
海洋生物不仅蛋白质含量丰富,而且在长期的进化中,其蛋白质的组成、结构和功能与陆地生物相比有较大的差异,是生物活性肽很好的来源。秋刀鱼生活在亚洲和美洲沿岸的太平洋亚热带和温带的水域中,主要分布于太平洋北部温带水域,是一种经济价值较高的海洋鱼种。如果能将秋刀鱼蛋白中功能性物质提取,并通过其他工艺将其生物活性进一步提升,既可提高其附加值,又可拓宽其应用范围。
因此,以秋刀鱼为原料,结合生物酶解技术及美拉德反应技术制备具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽产品,具有较大的经济和社会意义。
发明内容
本发明的首要目的在于提供一种具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽的制备方法,该方法的要点在于采用生物酶解技术释放秋刀鱼蛋白中的降尿酸活性成分,并利用超滤膜分离富集目标降尿酸肽,以及通过美拉德反应提升降尿肽的降尿酸活性。
本发明的另一目的在于提供由上述方法制得的具有降尿酸功效的秋刀鱼美拉德肽。
本发明的再一目的在于提供上述的秋刀鱼美拉德肽的用途。
本发明的目的通过下述技术方案实现:
一种具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽的制备方法,包括以下步骤:
(1)秋刀鱼肽的制备:秋刀鱼去头去内脏,过绞肉机绞碎,加水在40~50℃下加热搅拌1~2小时,然后调节体系pH值至4.2,继续加热搅拌1~1.5小时,离心分离,弃除上清液和上层油脂,取沉淀物;加入沉淀物质量1~1.5倍的水,调节体系pH值至7.0,加入蛋白酶在50~55℃下保温水解6~9小时,灭酶,离心,取上清液经膜通量为5000Da的超滤膜进行分离,取透过液即秋刀鱼肽液;
(2)美拉德反应肽的制备:将秋刀鱼肽液真空浓缩至固形物35~55%,然后加入还原糖,在100~121℃下加热0.5~1.5小时;进行喷雾干燥,得秋刀鱼美拉德肽;以秋刀鱼肽浓缩液固形物质量为计算基准,还原糖的添加量占1.0~3.0%;
所述的离心是5000r/min离心15~20min;
步骤(1)中,加水是加入秋刀鱼碎肉质量3~5倍的水;
步骤(1)所述的调节体系pH值是用0.5mol/L的NaOH溶液或HCl溶液调节;
步骤(2)所述的蛋白酶是商业用的碱性蛋白酶和风味蛋白酶,优选诺维信公司的碱性蛋白酶(Alcalase 2.4L)和风味蛋白酶(Flavourzyme 500MG),碱性蛋白酶的添加量为秋刀鱼沉淀物质量的0.6~1.2%,风味蛋白酶添加量为秋刀鱼沉淀物质量的1.0~2.0%;
步骤(2)中,所述的还原糖为食品级葡萄糖、木糖或核糖。
由上述方法制得的秋刀鱼美拉德肽可用于制备具有降尿酸和/或抗痛风功效的药物和保健品,在应用时,可以将其与具有降尿酸作用的中草药复配。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:
(1)由于秋刀鱼中的油脂含量较高(约为18%),会影响蛋白酶解的进行,且会降低蛋白肽的纯度,增加产品油脂腐败变质的机率。本发明方法首先对秋刀鱼水溶液进行加热搅拌,促使秋刀鱼中的油脂与其他成分分离开来,然后通过改变体系中的酸碱环境,使溶液中的蛋白质在等电点范围内沉淀下来,从而达到高效分离油脂的目的。
(2)本发明方法结合生物酶解技术、生物膜技术和美拉德反应技术,从秋刀鱼蛋白中释放出具有降尿酸活性的生物活性肽,然后通过超滤膜富集目标活性肽,最后再通过美拉德反应技术提升目标生物活性肽的降尿酸活性。采用本发明方法制得的秋刀鱼美拉德肽的降尿酸功效明显,可显著降低经氧嗪酸钾诱致高尿酸血症的大鼠血清尿酸水平,并具有明显的保护肾脏的功效。
(3)本发明工艺操作简单、生产成本低、没有任何污染,所得秋刀鱼美拉德肽的降尿酸活性强。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。
本发明实施例中所涉及的试验指标其实验方法如下:
(1)还原力的测定
2mL样品加到2mL 0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH=6.6)和2mL 1%(g/L)的铁氰化钾溶液的混合液中。混合物在50℃保温20min,然后在反应混合物中加入2mL 10%(g/L)的三氯乙酸,混合后以3000r/min离心10min,取2mL上清液与2mL蒸馏水以及0.4mL 0.1%(g/L)氯化铁溶液在反应试管中反应,10min后测定其在700nm处的吸光值。吸光值越大则表明该样品的还原力越强。
(2)氧自由基清除能力(ORAC)测定方法
基于ORAC反应在75mmol/L磷酸盐缓冲液(pH=7.4)环境中进行,FL(荧光素钠盐)、AAPH(自由基产生剂)、标准抗氧化物质Trolox(维生素E水溶性类似物)以及待测样品均用该缓冲液溶解和稀释。具体测定操作为:在96孔板各微孔中分别加入待测样品20μL后添加缓冲溶液20μL及FL(70nmol/L)20μL,在37℃下预置15min后,用多道移液器迅速在各孔中加入AAPH(12.8mmol/L)140μL启动反应,并将微孔板置于荧光分析仪中在37℃下以激发波长485nm,发射波长528nm进行连续测定,每2min测定一次各孔荧光强度,测定108min,荧光强度分别记为f0,f1,f2···f54。将记录的各微孔不同时间点的绝对荧光强度数据fi与初始荧光强度f0相比,折算成相对荧光强度,并根据公式如下公式统计荧光熄灭曲线下面积(AUCsample)值,
然后根据公式:net AUC=AUCsample-AUCblank分别计算不同浓度Trolox和抗氧化剂net AUC值,其中AUC blank为没有抗氧化剂存在时自由基作用对照的AUC值。
(3)黄嘌呤氧化酶抑制率的测定
(a)溶液的配置
0.2mol/L(pH 7.5)磷酸缓冲液(PBS):准确称取30.0838g Na2HPO4·12H2O和2.4962g NaH2PO4·2H2O,用去离子水溶解,定容至500ml。
黄嘌呤溶液:准确称取6.4mg黄嘌呤,先用1ml 1M NaOH将其溶解,再加入100ml PBS,以1M HCl调节pH值至7.5。
黄嘌呤氧化酶:取120μl酶液,以PBS稀释至8ml。
尿酸标曲:准确称取10mg尿酸,加入10ml水,再稀释至0.1~0.9mg/ml。
醋酸胺-冰醋酸:准确称取醋酸胺3.85g定容至1000ml,然后加入4ml冰醋酸。
(b)样品预处理:
将样品稀释至40mg/ml,在96孔酶标板中依次加入50μl样品与50μl黄嘌呤,每个样品做3个平行,37℃保温10min后加入150μl黄嘌呤氧化酶,37℃继续保温20min后加入80μl 1M HCl终止反应,过0.25μm水性膜,待测。
色谱柱:Zorbax Eclipse XDB-C18柱(5μm,4.6×250mm,安捷伦),
液相条件:洗脱液为10%甲醇+90%醋酸胺-冰醋酸溶液,进样体积为20μL,流速1ml/min,检测波长为290nm,运行时间10min。
(c)计算公式
式中:
A0——未添加肽样品进行高效液相色谱分析,尿酸峰的峰面积
A——添加肽样品进行高效液相色谱分析,尿酸峰的峰面积
(4)大鼠功效验证试验
(a)实验材料
动物:SPF级SD大鼠88只,雄性,体重200±20g,购自广州中医药大学实验动物中心。
药品和试剂:别嘌醇片(广东彼迪药业有限公司);氧嗪酸钾(山东中科泰斗化学有限公司);羧甲基纤维素钠(上海赛璐珞厂);尿酸试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
仪器:TGL-16G型高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂);多功能酶标仪(BioTelc USA,Synergy HT)。
动物饲养状况:动物饲养于暨南大学SPF级实验动物中心,饲养鼠料、铺料均由暨南大学实验动物中心提供。自由食水,灯照12h,室温为(20±2)℃,相对湿度(60~70)%。
(b)实验方法
动物分组和造模:SPF级SD雄性大鼠88只,随机分为正常对照组(12只)和造模组(76只),造模组大鼠每天灌胃氧嗪酸钾(2g/kg),连续7天后,3%戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔注射麻醉,眼眶后静脉丛取血(0.5ml),以4℃、3000r/min、离心15min,取上层血清测定尿酸含量;正常对照组大鼠灌胃给予等容积的溶媒。将尿酸含量高于110umol/L的大鼠确定为造模成功。将造模成功的大鼠按尿酸含量随机分为模型对照组(等容积溶媒)、秋刀鱼美拉德肽A(250mg/kg)、秋刀鱼美拉德肽B(250mg/kg)、秋刀鱼美拉德肽C(250mg/kg)、秋刀鱼肽(250mg/k)和别嘌醇组(25mg/kg),每组大鼠14只,每只每天均灌胃氧嗪酸钾(2g/kg),灌胃给药(给药容积10ml/kg),模型大鼠给予等容积的蒸馏水。上述肽样品处理30d时,于末次给药50min,3%戊巴比妥钠(30mg·kg-1)腹腔注射麻醉后,腹主动脉取血(5ml),测定血清尿酸、肌酐和尿素氮含量。
血清尿酸测定:采用钨酸法并严格按试剂盒说明进行操作和测定。
血清尿素氮和肌酐测定:采用二乙酰肟法测定血清尿素氮含量;采用苦味酸法测定血清肌酐含量,具体操作严格按试剂盒说明进行测定。
统计学处理:所有数据均以表示,采用spss16.0统计软件处理,各组组间差异比较采用t检验方法,P<0.05为差异具有统计学意义。
实施例1
一种具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽的制备方法,包括以下步骤:
(1)将秋刀鱼去头去内脏,清洗干净,然后通过绞肉机将其搅碎,加入碎肉质量3倍的水搅拌均匀,在40℃下搅拌加热2小时,用0.5mol/L的HCl溶液将体系中pH调至4.2,继续加热搅拌1小时,离心(5000r/min,15~20min)分离,取沉淀物;然后加入沉淀物质量1.5倍的水,采用0.5mol/L的NaOH溶液将体系pH调至7.0,加入沉淀物质量0.6%的Alcalase 2.4L(诺维信公司)和2.0%Flavourzyme500MG(诺维信公司)在50℃下保温水解9小时,然后在95℃下加热15min灭酶,5000r/min下离心15~20min,取上清液通过膜通量为5000Da的超滤膜,取透过液,得到秋刀鱼肽液。
(2)采用真空浓缩将秋刀鱼肽液浓缩至固形物40%,加入秋刀鱼肽凝缩液固形物质量1.2%的食品级木糖,在110℃下加热0.8小时,然后喷雾干燥,得到秋刀鱼美拉德肽A。
秋刀鱼美拉德肽A的抗氧化值(还原力和ORAC值)和黄嘌呤氧化酶抑制率如表1。
秋刀鱼美拉德肽A对氧嗪酸钾诱致高尿酸血症大鼠血清尿酸含量的影响如表2。
秋刀鱼美拉德肽A对氧嗪酸钾诱致高尿酸血症大鼠血清肌酐及尿素氮含量的影响如表3。
实施例2
一种具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽的制备方法,包括以下步骤:
(1)将秋刀鱼去头去内脏,清洗干净,然后通过绞肉机将其搅碎,加入碎肉质量5倍的水搅拌均匀,在50℃下搅拌加热1小时,用0.5mol/L的HCl溶液将体系中pH调至4.2,继续加热搅拌1.5小时,离心(5000r/min,15~20min)分离,取沉淀物;然后加入沉淀物质量1倍的水,采用0.5mol/L的NaOH溶液将体系pH调至7.0,加入沉淀物质量1.0%的Alcalase 2.4L(诺维信公司)和1.0%Flavourzyme500MG(诺维信公司)在55℃下保温水解6小时,然后在95℃下加热15min灭酶,5000r/min下离心15~20min,取上清液通过膜通量为5000Da的超滤膜,取透过液,得到秋刀鱼肽液。
(2)采用真空浓缩将秋刀鱼肽液浓缩至固形物35%,加入秋刀鱼肽凝缩液固形物质量1.0%的食品级核糖,在100℃下加热1.5小时,然后喷雾干燥,得到秋刀鱼美拉德肽B。
秋刀鱼美拉德肽B的抗氧化值(还原力和ORAC值)和黄嘌呤氧化酶抑制率如表1。
秋刀鱼美拉德肽B对氧嗪酸钾诱致高尿酸血症大鼠血清尿酸含量的影响如表2。
秋刀鱼美拉德肽B对氧嗪酸钾诱致高尿酸血症大鼠血清肌酐及尿素氮含量的影响如表3。
实施例3
一种具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽的制备方法,包括以下步骤:
(1)将秋刀鱼去头去内脏,清洗干净,然后通过绞肉机将其搅碎,加入碎肉质量4倍的水搅拌均匀,在45℃下搅拌加热1.5小时,用0.5mol/L的HCl溶液将体系中pH调至4.2,继续加热搅拌1.2小时,离心(5000r/min,15~20min)分离,取沉淀物;然后加入沉淀物质量1.2倍的水,采用0.5mol/L的NaOH溶液将体系pH调至7.0,加入沉淀物质量1.2%的Alcalase 2.4L(诺维信公司)和1.5%Flavourzyme500MG(诺维信公司)在53℃下保温水解7小时,然后在95℃下加热15min灭酶,5000r/min下离心15~20min,取上清液通过膜通量为5000Da的超滤膜,取透过液,得到秋刀鱼肽液。
(2)采用真空浓缩将秋刀鱼肽液浓缩至固形物50%,加入秋刀鱼肽凝缩液固形物质量3.0%的食品级葡萄糖,在121℃下加热0.5小时,然后喷雾干燥,得到秋刀鱼美拉德肽C。
秋刀鱼美拉德肽C的抗氧化值(还原力和ORAC值)和黄嘌呤氧化酶抑制率如表1。
秋刀鱼美拉德肽C对氧嗪酸钾诱致高尿酸血症大鼠血清尿酸含量的影响如表2。
秋刀鱼美拉德肽C对氧嗪酸钾诱致高尿酸血症大鼠血清肌酐及尿素氮含量的影响如表3。
对比例1
一种秋刀鱼肽的制备方法,包括以下步骤:
(1)将秋刀鱼去头去内脏,清洗干净,然后通过绞肉机将其搅碎,加入碎肉质量5倍的水搅拌均匀,在50℃下搅拌加热1.0小时,用0.5mol/L的HCl溶液将体系中pH调至4.2,继续加热搅拌1.5小时,离心(5000r/min,15~20min)分离,取沉淀物;然后加入沉淀物质量1.0倍的水,采用0.5mol/L的NaOH溶液将体系pH调至7.0,加入沉淀物质量0.6%的Alcalase 2.4L(诺维信公司)和1.5%Flavourzyme500MG(诺维信公司)在55℃下保温水解6小时,然后在95℃下加热15min灭酶,5000r/min下离心15~20min,取上清液通过膜通量为5000Da的超滤膜,取透过液,得到秋刀鱼肽液。
(2)采用真空浓缩将秋刀鱼肽液浓缩至固形物35%,然后喷雾干燥,得到秋刀鱼肽。
秋刀鱼肽的抗氧化值(还原力和ORAC值)和黄嘌呤氧化酶抑制率如表1。
秋刀鱼肽对氧嗪酸钾诱致高尿酸血症大鼠血清尿酸含量的影响如表2。
秋刀鱼肽对氧嗪酸钾诱致高尿酸血症大鼠血清肌酐及尿素氮含量的影响如表3。
表1 实施例及对照例产品的抗氧化活性及黄嘌呤氧化酶抑制率
由表1可发现,对比例中的秋刀鱼肽的抗氧化性(还原力和ORAC值)较好,且对黄嘌呤氧化酶具有一定的抑制作用(13.20%),而通过添加不同还原糖进行美拉德反应后,其(实施例中的秋刀鱼美拉德肽A、B、C)抗氧化活性和黄嘌呤氧化酶抑制率均显著提高。这是因为美拉德反应使得蛋白多肽与还原糖发生糖基化反应,生成了具有较强抗氧化活性的新物质;表1中显示肽样品的黄嘌呤氧化酶抑制活性与其抗氧化活性成正相关关系,说明美拉德反应可能由于提高了某些组分的抗氧化性而使得最终产品的黄嘌呤氧化酶的抑制率显著提高。
表2 实施例及对照例产品作用不同时间对氧嗪酸钾诱致高尿酸血症大鼠血清尿酸含量的影响
注:与正常对照组比较:ap<0.01.与模型组比较:bp<0.01,cp<0.05,fp>0.05.
表3 实施例及对照例产品作用30d对氧嗪酸钾诱致高尿酸血症大鼠血清肌酐及尿素氮含量的影响
注:与正常对照组比较:ap<0.01.与模型组比较:bp<0.01,cp<0.05,fp>0.05.
抗氧化活性与黄嘌呤氧化酶抑制活性均为体外检测指标,并不能直接反映体内的真实降尿酸功效。而采用大鼠进行功效验证实验可较为直接体现真实的降尿酸水平。
表2和表3是本发明实施例和对比例产品对嗪酸钾诱致高尿酸血症大鼠的降尿酸影响。由于老鼠体内有尿酸酶,可将体内产生的尿酸降解排出体外,因此,本实验采用氧嗪酸钾抑制大鼠体内尿酸的分解,增加体内血清尿酸水平,造成高尿酸血症动物模型,实验用氧嗪酸钾(2g/kg)连续灌胃大鼠处理7天后,全部造模大鼠形成高尿酸血症模型,随着后续的氧嗪酸钾(2g/kg)处理10天、20天和30天时,模型大鼠血清尿酸含量无显著性变化,说明氧嗪酸钾(2g/kg)诱致的大鼠高尿酸血症模型是稳定的(表2)。
实施例的秋刀鱼美拉德肽(A、B、C)均在处理第10天时,可明显降低模型组大鼠血清尿酸含量(p<0.05),并随着时间的延长,当处理20天时,继续降低模型组大鼠血清尿酸含量(p<0.01),继续延长处理时间,其降尿酸作用效果稳定。但与秋刀鱼美拉德肽相比,秋刀鱼肽的降尿酸效果明显稍差,处理第20天后才出现显著降低模型组大鼠血清尿酸含量(p<0.05),且随着时间的延长,降尿酸的水平并不是很显著,说明秋刀鱼肽具有一定的降尿酸作用,而美拉德反应可显著提升秋刀鱼肽的降尿酸作用。
血肌酐是人体肌肉代谢的产物。尿素氮是人体蛋白质代谢的主要终产物。正常情况下,两者均由肾小球滤过后经肾脏排出体外,其血浆中的水平可以反映出肾脏功能的状态。
表3显示,模型大鼠在氧嗪酸钾处理近40天时,血清肌酐及尿素氮含量均明显增高,说明模型大鼠随着血中尿酸含量的持续增高,肾脏功能出现一定程度的损伤。除本发明对照例的秋刀鱼肽外,用本发明方法制备的秋刀鱼美拉德肽(A、B、C)处理30天时,有明显降低模型组大鼠血清肌酐的作用(p<0.05,p<0.01);而包括对比例和实施例产品均有明显的降低血清尿素氮的作用(p<0.05,p<0.01),且秋刀鱼美拉德肽的降大鼠血清肌酐和尿素氮作用更强,说明通过美拉德反应可以进一步提升降尿酸肽对该高尿酸模型大鼠的肾脏功能的保护作用。
综上所述,秋刀鱼肽具有一定的降尿酸作用,且对模型组大鼠的肾脏功能有保护作用,而经过美拉德反应后,其降尿酸作用和肾脏功能保护作用进一步加强。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)秋刀鱼肽的制备:秋刀鱼去头去内脏,过绞肉机绞碎,加水在40~50℃下加热搅拌1~2小时,然后调节体系pH值至4.2,继续搅拌加热1~1.5小时,离心分离,弃除上清液和上层油脂,取沉淀物;加入沉淀物质量1~1.5倍的水,调节体系pH值至7.0,加入蛋白酶在50~55℃下保温水解6~9小时,灭酶,离心,取上清液经膜通量为5000Da的超滤膜进行分离,取透过液即秋刀鱼肽液;
(2)美拉德反应肽的制备:将秋刀鱼肽液真空浓缩至固形物35~50%,然后加入还原糖,在100~121℃下加热0.5~1.5小时;进行喷雾干燥,得秋刀鱼美拉德肽;以秋刀鱼肽浓缩液固形物质量为计算基准,还原糖的添加量占1.0~3.0%;
步骤(2)中,所述的还原糖为食品级葡萄糖、木糖或核糖。
2.根据权利要求1所述的具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽的制备方法,其特征在于:所述的离心是5000r/min离心15~20min。
3.根据权利要求1所述的具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,加水是加入秋刀鱼碎肉质量3~5倍的水。
4.根据权利要求1所述的具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述的蛋白酶为碱性蛋白酶和风味蛋白酶。
5.根据权利要求4所述的具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽的制备方法,其特征在于:碱性蛋白酶的添加量为秋刀鱼沉淀物质量的0.6~1.2%,风味蛋白酶添加量为秋刀鱼沉淀物质量的1.0~2.0%。
6.根据权利要求4所述的具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽的制备方法,其特征在于:碱性蛋白酶为诺维信公司的Alcalase 2.4L,风味蛋白酶为诺维信公司的Flavourzyme 500MG。
7.一种具有降尿酸作用的秋刀鱼美拉德肽,其特征在于:是由权利要求1-6任一项所述的方法制备得到。
8.权利要求7所述的秋刀鱼美拉德肽在制备具有降尿酸和/或抗痛风功效的药物和保健品中的应用。
9.根据权利要求8所述的秋刀鱼美拉德肽在制备具有降尿酸和/或抗痛风功效的药物和保健品中的应用,其特征在于:所述的秋刀鱼美拉德肽与具有降尿酸作用的中草药复配使用。
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Cited By (5)
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CN105255978A (zh) * | 2015-10-13 | 2016-01-20 | 华南理工大学 | 具有改善记忆功效的凤尾鱼美拉德肽及其制备方法和用途 |
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- 2015-03-03 CN CN201510094901.6A patent/CN104673865B/zh active Active
Patent Citations (3)
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Non-Patent Citations (1)
Title |
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赵谋明,等。: "草鱼抗氧化肽的美拉德反应特性研究", 《现代食品科技》 * |
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