CN104546713A - 一种含有葫芦素的药用组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种稳定的含有葫芦素的组合物，该组合物含有葫芦素、油溶剂以及稳定剂；所述的稳定剂为抗坏血酸棕榈酸酯或抗坏血酸棕榈酸酯与维生素E的混合物；该组合物不但生物利用度高，更可显著提高了葫芦素制剂的稳定性。

Description

一种含有葫芦素的药用组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药领域的药用制剂，具体是一种含有葫芦素的药用组合物及其制备方法。

背景技术

葫芦素为葫芦素类(Cucurbitacins)成分混合物的通称，其是从植物中提取的一类高度氧化的四环三萜类化合物，至今已发现40多种，该类化合物的基本骨架结构为：

葫芦素B(CuB)：R1-OH,R2-＝O,R3-H,R4-Ac,Δ23,24；

异葫芦素B(异CuB):R1-＝O,R2-OH,R3-H,R4-Ac,Δ23,24；

葫芦素D(CuD)：R1-OH,R2-＝O,R3-H,R4-H,Δ23,24；

葫芦素E(CuE):R1-OH,R2-＝O,R3-H,R4-Ac,Δ1,2,Δ23,24；

葫芦素I(CuI)：R1-OH,R2-＝O,R3-H,R4-H,Δ1,2,Δ23,24。

它们之间的区别在于C2、C3、C19、C24位的羟基化，C3的羰基，C1～C2之间的双键，C23～C24之间的双键以及C25位羟基的乙酰化。另外，葫芦素衍生物还包括葫芦素糖苷等。

从结构式中不难看出，该类化合物存在多个不饱和键和/或酯键，这导致葫芦素易被氧化和/或水解，即，葫芦素稳定性较差，遇光、水、高温均易分解。

市场上已有的含有葫芦素的制剂为片剂和胶囊剂，主要用于湿热毒盛所致迁延性肝炎、慢性肝炎及原发性肝癌的辅助治疗。但该两种制剂的葫芦素均是以粉末的形式入药，因葫芦素的疏水性等特性导致该已有制剂存在生物利用度低、毒性高等问题。因此，研究人员尝试通过各种途径来提高葫芦素的生物利用度、降低毒性，如：“纳米葫芦素制剂药物及其制备方法，申请号：01103658.3”、“葫芦素环糊精包合物及其制剂，申请号：02153647.3”、“葫芦素脂质体组方及其制剂，申请号：02144633.4”、“葫芦素滴丸及其制备方法，申请号：200310100943.3”等。

也有科研人员注意到了葫芦素的稳定性问题，如“稳定型葫芦素液体组方及其制剂，申请号：200710011513.2”及“一种稳定的葫芦素液体制剂及其生产方法，申请号：200810106532.8”，通过添加稳定剂维生素E或选用特定油溶剂并配合维生素E的方式来提高葫芦素的稳定性。其中，“稳定型葫芦素液体组方及其制剂”虽然其达到了稳定葫芦素的目的，但相比于本发明提供的方案(维生素E的用量只有0.004％～0.06％)，维生素E的用量高达5％～30％的，远超其作为抗氧剂使用时的常规用量。尽管维生素E对人体有许多好处，但绝不能随意服用。有科研成果显示，滥用维生素E对身体不仅无益，而且可能有害，长期大剂量应用会有潜在毒性。此外的“一种稳定的葫芦素液体制剂及其生产方法”，以鸦胆子油作为油溶剂，众所周知，鸦胆子油本身就是一种抗癌药，因此，该专利申请实际上公开了一种复方制剂，其功效等均已发生变化，无法直接与葫芦素单方制剂进行稳定性比较。

稳定性是对药物制剂的基本要求，药物若分解变质，不仅使药效降低，而且很可能产生毒副作用，所以，药物制剂的稳定性对保证其安全有效是十分重要的。因此，提供一种更为安全、稳定的葫芦素组合物至关重要。

发明内容

本发明的目的是提供一种更加稳定的含有葫芦素的药用组合物，该药用组合物在提高其生物利用度的同时，进一步提高了葫芦素的稳定性，为制备更为安全有效的葫芦素制剂奠定基础。

本发明提供了一种稳定的含有葫芦素的药用组合物，该组合物包括重量比为1:200～1:5000的葫芦素和油溶剂，以及稳定剂；所述的稳定剂为油溶剂用量0.001％-0.015％(w/w，下同)的抗坏血酸棕榈酸酯，或该用量抗坏血酸棕榈酸酯与维生素E的混合物。

为进一步提高含有葫芦素的制剂或组合物的稳定性，本发明人经过大量的科学研究，得到了上述组合物。该组合物以油溶剂为基质，使葫芦素溶解在油溶剂中呈分子状态存在，提高了生物利用度，更重要的是，发明人发现在该油溶剂中添加微量的坏血酸棕榈酸酯或抗坏血酸棕榈酸酯与维生素E的混合物可显著提高葫芦素的稳定性，比使用常规用量的同种稳定剂或其他种类稳定剂(如，叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、维生素E)，葫芦素稳定性提高了10％以上。

抗坏血酸棕榈酸酯，又称维生素C棕榈酸酯，其作为稳定剂时的常用量为0.02％～0.5％(w/w)。而本发明进行的破坏试验研究显示，该常规用量的抗坏血酸棕榈酸酯应用于葫芦素油溶剂中稳定性效果并不太理想，特别是其用量偏高时还对葫芦素的稳定性还会起破坏作用，反而是通常被本领域技术人员认为无效的微小剂量达到了很好的效果。当其用量为0.001％时，较不使用稳定剂时含量提高约26％，较其单独使用BHA或维生素E时含量提高15％以上。由此可见，本发明所述组合物中的稳定剂种类及其用量的选择是特意性的，并不是所有稳定剂或简单的随意挑选一个抗坏血酸棕榈酸酯常规用量范围中的某一用量就可以实现的。特别是，当该用量的抗坏血酸棕榈酸酯与特定用量的维生素E配合时，可进一步提高了葫芦素的稳定性。

上述的葫芦素为自葫芦科植物、十字花科、玄参科、秋海棠科、杜英科、四数本科植物或真菌中提取的四环三萜化合物，为单体葫芦素B或葫芦素E，或以葫芦素B为主混合物；该混合物包含葫芦素A、葫芦素B、葫芦素C、葫芦素D、葫芦素E、葫芦素BE、葫芦素I、葫芦素Q、葫芦素S、双氢葫芦素A、双氢葫芦素B、双氢葫芦素C、双氢葫芦素D、双氢葫芦素E、双氢葫芦素I、双氢葫芦素Q、双氢葫芦素S、异葫芦素A、异葫芦素B、异葫芦素C、异葫芦素D、异葫芦素E、异葫芦素I、异葫芦素Q、异葫芦素S和其糖苷或其中的一部分。

所述的油溶剂选自玉米油、椰子油、花生油、精制杏仁油、芝麻油、橄榄油、葵花籽油、茶油、大豆油、油酸乙酯、中链甘油三酸酯、中长链脂肪酸结构油中的一种或几种。经试验验证，选用上述不同种类的油溶剂，组合物中葫芦素的稳定性有些许不同，但没有表现出显著性差异。

当所述稳定剂为抗坏血酸棕榈酸酯时，稳定剂的用量优选为油溶剂用量的0.001％-0.01％，进一步优选为油溶剂用量的0.003％-0.008％。该范围内的抗坏血酸棕榈酸酯较不使用稳定剂，葫芦素含量提高了25％以上。

当所述稳定剂为抗坏血酸棕榈酸酯与维生素E的混合物时，所述的维生素E的用量为抗坏血酸棕榈酸酯的4～6倍(w/w)；在一优选实施例中，所述的维生素E的用量为抗坏血酸棕榈酸酯的5倍。在该比例维生素E的配合下，组合物中葫芦素的含量进一步提高了约7％。

考虑到葫芦素单次服用剂量很小，兼顾尽量减少没有必要的辅料摄入的制药宗旨，所述葫芦素和油溶剂的重量比优选为1:300～1:3000，进一步优选为1:800～1:2000。

本发明所述的组合物可以是液体硬胶囊、软胶囊、栓剂、自微乳等制剂的形式，且该药物组合物还含有该制剂所需的常规辅料。所述的常规辅料包括半合成脂肪酸甘油酯、可可豆脂、聚氧乙烯硬脂酸酯、甘油明胶、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、吐温20、吐温40、吐温60、吐温80、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚、大豆磷脂(SPC)、卵磷脂(EPC)、聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯(HS15)、蓖麻油聚烃氧酯(Cremophor EL、Cremophor ELP)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(RH40)和聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)等。

本发明所述的组合物由葫芦素、油溶剂和抗坏血酸棕榈酸酯组成，其中，葫芦素与油溶剂的重量比为1:(300～3000)，所述的抗坏血酸棕榈酸酯的用量为油溶剂用量的0.001％～0.015％。

本发明所述的组合物由葫芦素、油溶剂、抗坏血酸棕榈酸酯及维生素E组成，其中，葫芦素与油溶剂的重量比为1:(300～3000)，所述的抗坏血酸棕榈酸酯的用量为油溶剂用量的0.001％～0.015％；维生素E用量为抗坏血酸棕榈酸酯用量的4～6倍。

本发明的另一个目的在于，提供所述组合物的制备方法，该制备方法为：取处方量的葫芦素及稳定剂，置于适当容器中，添加处方量的油溶剂，40～80℃水浴加热，搅拌，至葫芦素及稳定剂完全溶解并混合均匀，即得。

所述水浴温度优选为50～65℃。

上述制备方法进一步为：所述组合物为液体硬胶囊、软胶囊、栓剂、自微乳的制剂的形式，该制备方法还包括：在溶有葫芦素及稳定剂的油溶剂中添加目标制剂的常规辅料，以常规工艺制成所述制剂，该制剂即为所述的药物组合物。

发明人还对本发明组合物制成的产品进行了稳定性试验，经加速6个月放置，含量无明显变化。

发明人进一步通过试验验证稳定剂品种及用量选择对葫芦素稳定性的影响。

再次重申：以下试验只是本发明研制过程中众多试验中的例举性试验，并未涵盖和穷尽了发明人为本发明所做的所有实验，目的仅仅在于用那些数据来阐述不同稳定剂及用量对本发明组合物中葫芦素稳定性的影响。

一、本发明的含有葫芦素的组合物处方筛选

1、供试样品：按表1、表2中处方1-18及实施例1所述制备方法制备含有葫芦素的组合物。(所述的葫芦素为葫芦素原料药，购于天津药物研究院药业有限公司，批号为120301，葫芦素B含量为63.1％，下同。)

2、实验方法：分别取各处方样品2mL，置于3mL棕色西林瓶中，充氮、压盖密封后于130℃烘箱中放置8h加速破坏。通过下述条件测定组合物中葫芦素B的含量。

色谱条件：

色谱柱：Poroshell 120EC-C18柱(3.0×50mm，2.7-Micron，安捷伦)

流动相：乙腈-水(45:55，v/v)

检测波长：228nm 流速：0.2mL/min

柱温：30℃ 进样量：4μL

样品处理：

分别精密称取破坏前、后的供试样品溶液约150.0mg于10mL量瓶中，平行3份，用甲醇稀释至刻度，充分混匀后按上述色谱条件进样，测定葫芦素B含量，计算供试样品破坏前后葫芦素B的含量。

3、实验结果：实验数据表明，常规用量(0.02％～0.5％(w/w))的抗坏血酸棕榈酸酯作为葫芦素油溶液的稳定剂时，其对葫芦素的稳定作用不佳，用量偏高时甚至会对葫芦素产生破坏作用；但当抗坏血酸棕榈酸酯的用量在0.001％～0.015％范围时，葫芦素的含量下降程度明显降低，特别是用量低于0.01％时，组合物中的葫芦素更为稳定。而常规用量的BHA及维生素E对葫芦素的稳定性也只表现出较弱保护作用。详见表1～2。

表1 处方1-11及试验结果

注：*相对于不使用稳定剂(处方11)时葫芦素B含量提升百分比；

#处方6的抗坏血酸棕榈酸酯难以溶解，无数据。

表2 处方11～18用量及试验结果

注：*相对于不使用稳定剂(处方11)时葫芦素B含量提升百分比。

二、本发明的含有葫芦素的组合物处方优化

1、供试样品：按表3中处方19-29及实施例10所述制备方法制备含有葫芦素的组合物。

2、实验方法：同实验一。

3、实验结果：实验数据表明，用量为0.01％(w/w)的抗坏血酸棕榈酸酯与4～6倍量的维生素E配合使用产生了协同作用，进一步提高了组合物中葫芦素的稳定性；而用量为0.01％(w/w)的抗坏血酸棕榈酸酯与1、3倍及8、15、30倍量维生素E配合的组合物中葫芦素含量非但没有提高，反而有不同程度的降低，并且维生素E用量越多(15、30倍量)，葫芦素含量下降程度更大(高达10％左右)，即并不是维生素E的用量越多越有利于葫芦素的稳定；单独使用0.05％(w/w)的维生素E虽然起到了一定的保护作用(处方27与处方11相比较，相差约7％)，但它对葫芦素的保护作用要显著地小于其与抗坏血酸棕榈酸酯合用对葫芦素的保护作用(处方27与处方22比较，相差约15％)；另外，抗坏血酸棕榈酸酯与4～6倍量的维生素E配合使用比高剂量的维生素E(专利申请号200710011513.2中的用量为5％～30％，是本发明中维生素E用量的80～750倍)对葫芦素也表现出了更强的保护作用(处方28、29与处方22比较，相差3％左右，处方28、29中维生素E的用量分别为10％和20％)。详见表3。

表3 处方19-29及试验结果

注：※相对于不使用维生素E(处方17)时葫芦素B含量提升百分比。

为了验证本发明组合物的稳定性效果，发明人进行了大量重复性的实验，与上述实验不同的是，一些实验是选用的油溶剂种类不同，一些实验是葫芦素与油溶剂比例或稳定剂用量不同，以及组合物形式不同等，包括实施例1～14。

实验结果证明以下几点：

1、本发明所述的药物组合物中，葫芦素与油溶剂比例一定程度内的浮动对组合物中葫芦素的稳定性没有明显影响；

2、本发明所述的药物组合物中，当抗坏血酸棕榈酸酯的用量为油溶剂用量的0.001～0.015％(w/w)时，组合物中才葫芦素均表现出良好的稳定性，特别是当其用量为油溶剂用量的0.001～0.01％时效果更佳；辅以4～6倍量的维生素E可进一步提高葫芦素的稳定性。

3、当本发明所述的药物组合物为液体硬胶囊、软胶囊、栓剂、自微乳等制剂形式时，不同剂型、常规工艺对组合物中的葫芦素稳定性没有明显的影响。

由于篇幅所限，上述实验的方法、步骤以及相关数据在此不再赘述。

具体实施方案

实施例1

1000个制剂量处方：

葫芦素(葫芦素B含量不低于60％) 0.1g

中链甘油三酸酯 100g

抗坏血酸棕榈酸酯 0.005g

制备方法：称取葫芦素及抗坏血酸棕榈酸酯，置于500ml烧杯杯中，添加中链甘油三酸酯，60℃水浴加热，搅拌至葫芦素及抗坏血酸棕榈酸酯完全溶解并混合均匀，即得。

实施例2

1000个制剂量处方：

葫芦素(葫芦素B含量不低于70％) 0.1g

大豆油 100g

抗坏血酸棕榈酸酯 0.005g

制备方法：同实施例1。

实施例3

1000个制剂量处方：

葫芦素(葫芦素B含量不低于80％) 0.1g

橄榄油 100g

抗坏血酸棕榈酸酯 0.005g

制备方法：同实施例1。

实施例4

1000个制剂量处方：

制备方法：同实施例1。

实施例5

1000个制剂量处方：

葫芦素A 0.1g

大豆油 200g

抗坏血酸棕榈酸酯 0.006g

制备方法：与实施例1不同的是，水浴加热温度为50℃。

实施例6

1000个制剂量处方：

葫芦素B 0.1g

中长链脂肪酸结构油 300g

抗坏血酸棕榈酸酯 0.003g

制备方法：与实施例1不同的是，水浴加热温度为65℃。

实施例7

1000个制剂量处方：

制备方法：与实施例1不同的是，选用1L烧杯，水浴加热温度为40℃。

实施例8

10000个制剂量处方：

葫芦素 1g

橄榄油 300g

抗坏血酸棕榈酸酯 0.045g

制备方法：与实施例1不同的是，水浴加热温度为80℃。

实施例9

10000个制剂量处方：

葫芦素(葫芦素B含量不低于98％) 1g

玉米油 200g

抗坏血酸棕榈酸酯 0.01g

制备方法：与实施例1不同的是，水浴加热温度为70℃。

实施例10

1000个制剂量处方：

制备方法：称取异葫芦素A、抗坏血酸棕榈酸酯及维生素E，置于500ml烧杯中，添加中茶油，55℃水浴加热，搅拌至葫芦素及抗坏血酸棕榈酸酯完全溶解并混合均匀，即得。

实施例11

10000个制剂量处方：

制备方法：同实施例10。

实施例12

1000个制剂量处方：

制备方法：同实施例10。

实施例13

1000粒液体胶囊

将实施例1所得的混合油溶液按常规工艺灌封制成硬胶囊剂。

实施例14

1000粒软胶囊处方

制备方法：称取处方量的葫芦素、抗坏血酸棕榈酸酯、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯、吐温80和大豆磷脂于500mL烧杯中，向其中加入处方量的中链甘油三酯，于60℃水浴上磁力搅拌至各物质完全溶解，继续搅拌10min，所得油溶液以常规工艺制备成自微乳软胶囊剂。

以上旨在进一步说明本发明，并不对本发明的范围加以限制。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。

Claims (11)

1.一种稳定的含有葫芦素的药用组合物，该组合物包括重量比为1:200～1:5000的葫芦素和油溶剂，以及稳定剂；所述的稳定剂为油溶剂用量0.001％～0.015％(w/w)的抗坏血酸棕榈酸酯，或该用量抗坏血酸棕榈酸酯与维生素E的混合物。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述抗坏血酸棕榈酸酯的用量为油溶剂用量的0.001％～0.01％。

3.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述抗坏血酸棕榈酸酯的用量为油溶剂的0.003％～0.008％。

4.如权利要求1-3中任一项所述的组合物，其特征在于，所述的维生素E的用量为抗坏血酸棕榈酸酯的4～6倍。

5.如权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述的维生素E的用量为抗坏血酸棕榈酸酯的5倍。

6.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述葫芦素和油溶剂的重量比为1:300～1:3000。

7.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的油溶剂选自玉米油、椰子油、花生油、精制杏仁油、芝麻油、橄榄油、葵花籽油、茶油、大豆油、油酸乙酯、中链甘油三酸酯和中长链脂肪酸结构油中的一种或几种。

8.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物是液体硬胶囊、软胶囊、栓剂、自微乳的制剂的形式，且该药物组合物还含有该制剂所需的常规辅料。

9.权利要求1所述组合物的制备方法，其特征在于，该制备方法为：取处方量的葫芦素及稳定剂，置于适当容器中，添加处方量的油溶剂，40～80℃水浴加热，搅拌，至葫芦素及稳定剂完全溶解并混合均匀，即得。

10.如权利要求9所述组合物的制备方法，其特征在于，所述组合物为液体硬胶囊、软胶囊、栓剂、自微乳的制剂的形式，该制备方法还包括：在溶有葫芦素及稳定剂的油溶剂中添加上述制剂的常规辅料，以常规工艺制成所述制剂，该制剂即为所述的药物组合物。

11.如权利要求1～10中任一项所述的葫芦素，其特征在于，所述葫芦素是从葫芦科植物、十字花科、玄参科、秋海棠科、杜英科、四数本科植物或真菌中提取的四环三帖化合物。