CN104542895B - 一种复合冷鲜肉保鲜剂及其制备方法 - Google Patents
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Landscapes
- Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
- Meat, Egg Or Seafood Products (AREA)
Abstract
本发明涉及食品保鲜剂技术领域，具体公开了一种复合冷鲜肉保鲜剂及其制备方法。所述的复合冷鲜肉保鲜剂包含原花青素低聚体、原花青素高聚体、乳酸链球菌素、六磷酸钠、水溶性膜基、植物多糖等组分。本发明复合冷鲜肉保鲜剂不仅改善现有保鲜剂抗菌性能，而且赋予其抗氧化的新功能，能够有效延长冷鲜肉的货架期，很好地保证冷鲜肉的营养和风味。
Description
技术领域
本发明涉及食品保鲜剂技术领域，具体涉及一种复合冷鲜肉保鲜剂及其制备方法。
背景技术
冷鲜肉制品最大限度地保存了肉的原有营养成分和固有风味，冷鲜肉低温肉制品加工是我国肉类工业的发展方向。但冷鲜肉低温肉制品存在货架期短、销售半径小等缺陷，延长其货架期是扩大销售半径的关键，也是一些具有地域特色的肉类产品实现从原料优势转化为产品优势的重要途径。肉品保鲜常采用的方法是控制贮藏条件和化学处理。控制肉的贮藏条件最常用的方法是低温保藏，虽然肉在低温条件下能抑制多数微生物生长，但一些嗜冷菌在低温条件下仍可生长，并引起冷藏肉发生腐败。而化学方法通常是在肉制品中添加防腐剂，但化学防腐剂的副作用越来越引起重视，其应用范围也越来受到限制。微生物多糖大部分由细菌、真菌和蓝藻类产生，具有安全无毒、理化性质独特等特点。微生物产生的多糖由于容易与菌体分离，因而可通过大量发酵实现工业化生产，已作为成膜剂和保鲜剂在食品、制药等多个领域得到广泛应用。因此安全高效的天然生物保鲜剂在肉品保鲜中备受亲睐。
短梗霉多糖是由出芽短梗霉分泌的胞外多糖，是一种可食的无色、无味、无毒、对人体无任何副作用的微生物多糖。具有优良的水溶性、成膜性、氧气不渗透性，制成的薄膜和涂层是防止高脂肪食品氧化酸败和酸价升高的一种有效隔膜。海藻糖又称酵母糖，是非还原性双糖，广泛存在与动植物和微生物体内。海藻糖对肉类的保鲜原理是可以在常温下形成一种特殊的膜将肉类密封，同时还会析出粘液将其黏结和滋润，并将原有的细菌和随后沾染的细菌杀死。
原花青素是一种有着特殊分子结构的生物类黄酮，是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂。该物质抗氧化能力为维他命C的20倍，维他命E的50倍。在结构上，原花青素是由不同数量的儿茶素（catechin）或表儿茶素（epicatechin）结合而成。最简单的原花青素是儿茶素、或表儿茶素、或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体，此外还有三聚体、四聚体等直至十聚体。按聚合度的大小，通常将二～五聚体称为低聚原花青素（简称OPC），将五聚体以上的称为高聚原花青素（简称PPC）。
由栅栏技术可知，单一的防腐剂或保鲜方法通常都存在一定的缺陷，必须采用综合保鲜技术，才能发挥互补和相乘效果，有效地阻滞微生物的生长和其它不利因素，达到优势互补、相得益彰的目的。因此开发出一种复合生物保鲜剂很有必要。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，为了克服现有技术中单一成分保鲜剂的保
鲜效果的不足，提供一种复合冷鲜肉保鲜剂。
本发明所要解决的上述技术问题通过以下技术方案予以实现：
一种复合冷鲜肉保鲜剂，包含如下组分：原花青素低聚体、原花青素高聚体、乳酸链球菌素、六磷酸钠、水溶性膜基、植物多糖。
作为一种优选方案，所述的复合冷鲜肉保鲜剂，包含如下重量份的组分：原花青素低聚体0.5~1份、原花青素高聚体1~5份、乳酸链球菌素0.2~0.7份、六磷酸钠30~60份、水溶性膜基50~150份、植物多糖50~70份。
作为一种进一步优选方案，所述的复合冷鲜肉保鲜剂，包含如下重量份的组分：原花青素低聚体0.75~1份、原花青素高聚体3~5份、乳酸链球菌素0.35~0.5份、六磷酸钠45~60份、水溶性膜基50~100份、植物多糖60~70份。
作为一种最优选方案，所述的复合冷鲜肉保鲜剂，包含如下重量份的组分：原花青素低聚体0.75份、原花青素高聚体3份、乳酸链球菌素0.35份、六磷酸钠45份、水溶性膜基75份、植物多糖60份。
作为一种优选方案，所述的原花青素低聚体为原花青素单体、原花青素二聚体或原花青素三聚体或三者的混合；所述的原花青素高聚体为原花青素四聚体或聚合度为4以上的原花青素高聚体或其混合。
作为一种进一步优选方案，原花青素低聚体和原花青素高聚体通过如下方法制备得到：取马尾松树皮，用乙醇提取得马尾松树皮提取物，将马尾松树皮提取物上LSA-10树脂，在pH为6.0-6.5条件下，先以水洗除杂，然后用体积分数为50~70%的乙醇洗脱；收集乙醇洗脱部位、浓缩，再用乙酸乙酯或/和无水乙醚萃取1~4次，合并有机层、浓缩干燥得原花青素低聚体，合并水层得原花青素高聚体。通过其他方法得到的原花青素低聚体和原花青素高聚体也可以实现本发明。但是，经过本发明方法制备得到的原花青素低聚体和原花青素高聚体应用于本发明的保鲜剂中具有更好的防腐及保鲜效果。
作为一种最优选方案，原花青素低聚体和原花青素高聚体通过如下方法制备得到：取经自然干燥的马尾松树皮，用机械粉碎设备粉碎并过20目筛后，按料液比1:20(g/L)加入60%(v/v)的食用酒精于60℃回流提取70min，过滤，滤渣重复提取2次，合并3次滤液得马尾松树皮提取物；用LSA-10树脂在pH为6.0-6.5条件下，控制松树皮原花青素浓度为0.5-1.0mg/mL，过柱流速为2BV/h，对马尾松树皮提取物进行纯化；马尾松树皮提取物过 LSA-10树脂吸附后，先用水洗除去一部分杂质，再用50-70% 醇溶液解附，控制洗脱流速为2BV/h收集乙醇洗脱部位，低温真空浓缩，回收醇溶剂得到松树皮多酚浓缩液；采用乙酸乙酯/无水乙醚（1/1， v/v）萃取分离松树皮多酚浓缩液1~4次，分别合并有机层和水层，有机层低温真空浓缩（40℃），回收有机溶剂，得到松树皮原花青素低聚体；水层低温真空浓缩（45℃），得到松树皮原花青素高聚体；优选地，所述的树脂，在使用前需用重蒸馏水洗去细小树脂及破碎树脂，湿法装柱，用无水乙醇浸泡24h，液面高于树脂层10cm，放出浸液，然后用95%乙醇冲洗至洗出液加水(1:2)不出现混浊，再用重蒸水洗至无醇味；用3%的HCL溶液以2BV/h的流速通过树脂层进行酸洗，而后用水洗至中性；再以2%的NaOH以2BV/h的流速进行碱洗，用水洗至中性，优选地，本发明所述的pH值通过3%HCl或2%Na0H溶液调节。
上述方法制备得到的原花青素低聚体中包含单体、原花青素二聚体和原花青素三聚体，具体分离步骤如下：松树皮原花青素低聚体萃取液经聚酰胺柱层析，先用去离子水洗脱，再用 10％、30％、50％、95％乙醇洗脱，流速约 2～4mL/min，用 100mL 三角瓶收集洗脱液，每收集 50mL 换瓶，香草醛-盐酸法显色，TLC 检测后相近组分合并，得到4个组分（I、II、III、IV）。对4个组分上聚酰胺柱，葡聚糖凝SephadexLH-20，不同比例的乙醇/水梯度洗脱，按10%的比例递增乙醇的浓度，每收集 15mL 换瓶，分部收集后 TLC 检测，经质谱及核磁鉴定，最后从组分 I 中得到松树皮原花青素单体，从组分 II 中得到原花青素二聚体，组分 III、IV得到原花青素二聚体和原花青素三聚体。
作为一种优选方案，所述水溶性膜基包括短梗霉多糖和海藻糖，其中短梗霉多糖和海藻糖复配比例为1:3~3:1。
作为一种最优选方案，短梗霉多糖和海藻糖复配比例为1:3。
作为一种优选方案，所述的植物多糖为柚皮多糖。
作为一种进一步优选方案，所述的柚皮多糖通过如下方法制备得到：将柚皮经超临界二氧化碳萃取设备萃取脱脂处理，然后加水浸泡得第一次柚皮浸提液；将第一次柚皮浸提液用纤维素酶和果胶酶酶解、离心、过滤；再将滤液过截留分子量为10万的中空纤维膜，收集透过液，得柚皮提取液；将柚皮提取液调节pH值为9.0~14.0用体积分数为40~80%乙醇分别醇沉，得到40%乙醇沉淀多糖a、60%乙醇沉淀多糖b、80%乙醇沉淀多糖c；将40%乙醇沉淀多糖a、60%乙醇沉淀多糖b、80%乙醇沉淀多糖c以重量比1~2:1~3:1~2的比例复配得柚皮多糖；优选地，40%乙醇沉淀多糖a、60%乙醇沉淀多糖b、80%乙醇沉淀多糖c以重量比1:1~2:1的比例复配得柚皮多糖。通过其他方法提取得到的柚皮多糖也能够实现本发明，但是，通过本发明制备方法得到的柚皮多糖应用于本发明的保鲜剂中具有更好的防腐剂保鲜效果。
作为一种最优选方案，所述的柚皮多糖通过如下方法制备得到：选取新鲜秋季采摘的沙田柚、剥皮、干燥、粉碎，用超临界二氧化碳萃取设备脱脂处理60分钟，压力45MPa，温度45℃，CO2流量30L／h；脱脂处理后以kg/L计，加入质量体积比为1:10~20的蒸馏水，浸泡30min，得到第一次柚皮浸提液；向柚皮第一浸提液中加入酸调节pH值为3.0~4.0，将温度加热至45~55℃，每kg柚皮中分别加入4~6g纤维素酶和果胶酶(1:2)，超声波辅助酶解2~3h后，加热进行酶灭活。然后提取液用卧螺式离心机以1800~2000r/min的速度进行固液分离，收集滤液和残渣，得到第一滤液；再将残渣加入质量体积比为1:5~10的蒸馏水，浸泡30min，用超声波处理2-3h后，离心，收集滤液，得到第二滤液，混合所述第一滤液和第二滤液，将此混合滤液过截留分子量为10万的中空纤维膜，收集透过液经减压浓缩，得到柚皮提取液；将柚皮提取液调节pH值为9.0~14.0用体积分数为40~80%乙醇分别醇沉，经真空冻干后粉碎成60目固体粉末，得到40%乙醇沉淀多糖a、60%乙醇沉淀多糖b、80%乙醇沉淀多糖c；将40%乙醇沉淀多糖a、60%乙醇沉淀多糖b、80%乙醇沉淀多糖c以重量比1:2:1的比例复配得柚皮多糖；
作为一种优选方案，所述的冷鲜肉保鲜剂的剂型为水剂形式，其中各组分的浓度为：原花青素低聚体0.05~0.10g/L、原花青素高聚体0.1~0.5 g/L、乳酸链球菌素0.02~0.07g/L、六磷酸钠3~6 g/L、水溶性膜基5~15 g/L、植物多糖5~7g/L。
作为一种进一步优选方案，各组分的浓度为：原花青素低聚体0.075~0.10g/L、原花青素高聚体0.3~0.5 g/L、乳酸链球菌素0.035~0.05 g/L、六磷酸钠4.5~6 g/L、水溶性膜基5~10 g/L、植物多糖6~7g/L。
作为一种最优选方案，各组分的浓度为：原花青素低聚体0.075g/L、原花青素高聚体0.3g/L、乳酸链球菌素0.35 g/L、六磷酸钠4.5g/L、水溶性膜基7.5 g/L、植物多糖6g/L。
所述复合冷鲜肉保鲜剂的水剂的制备方法为：
（1）取原花青素低聚体、原花青素高聚体溶解于蒸馏水中配制成原花青素复合溶液。取质量分数65-75%上述原花青素复合溶液，边搅拌边添加膜基材料（短梗霉多糖和海藻糖比例为1:3~3:1），搅拌至膜基物质全部溶解，制得膜基溶液；
（2）将柚皮多糖、六磷酸钠与乳酸链球菌素混合均匀，然后与剩下的松树皮原花青素复合溶液混合，充分搅拌至溶解、制得乳酸链球菌素溶液；
（3）将膜基溶液与乳酸链球菌素溶液混合均匀即为复合冷鲜肉保鲜剂水剂。
有益效果：本发明将水溶性膜基、天然防腐剂、天然抗氧化剂进行科学组合而得到一种全新的天然冷鲜肉复合保鲜剂，优点在于操作简单，不仅改善保鲜剂抗菌性能，而且赋予其抗氧化的新功能，能够有效延长冷鲜肉的货架期，很好地保证冷鲜肉的营养和风味。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步解释本发明，但实施例对发明不做任何形式的限定。
实施例1
将原花青素低聚体0.05g、原花青素高聚体0.3g、乳酸链球菌素0.07g、六磷酸钠4.5g、水溶性膜基（短梗霉多糖和海藻糖重量比为1:3）10g、柚皮多糖6g，蒸馏水1L，配制成复合冷鲜肉保鲜剂的水剂。
配制方法：
（1）取原花青素低聚体、原花青素高聚体溶解于蒸馏水中配制成原花青素复合溶液。取质量分数65-75%上述原花青素复合溶液，边搅拌边添加膜基材料，搅拌至膜基物质全部溶解，制得膜基溶液；
（2）将柚皮多糖、六磷酸钠与乳酸链球菌素混合均匀，然后与剩下的松树皮原花青素复合溶液混合，充分搅拌至溶解、制得乳酸链球菌素溶液；
（3）将膜基溶液与乳酸链球菌素溶液混合均匀即为复合冷鲜肉保鲜剂水剂。
本实施例中原花青素低聚体和原花青素高聚体通过如下方法制备得到：取经自然干燥的马尾松树皮，用机械粉碎设备粉碎并过20目筛后，按料液比1:20(g/L) 加入60%(v/v)的食用酒精于60℃回流提取70min，过滤，滤渣重复提取2次，合并3次滤液得马尾松树皮提取物；用LSA-10树脂在pH为6.0-6.5条件下，控制松树皮原花青素浓度为0.5-1.0mg/mL，过柱流速为2BV/h，对马尾松树皮提取物进行纯化；马尾松树皮提取物过 LSA-10 树脂吸附后，先用水洗除去一部分杂质，再用50-70% 醇溶液解附，控制洗脱流速为2BV/h收集乙醇洗脱部位，低温真空浓缩，回收醇溶剂得到松树皮多酚浓缩液；采用乙酸乙酯/无水乙醚（1/1，v/v）萃取分离松树皮多酚浓缩液1~4次，分别合并有机层和水层，有机层低温真空浓缩（40℃），回收有机溶剂，得到松树皮原花青素低聚体；水层低温真空浓缩（45℃），得到松树皮原花青素高聚体；优选地，所述的树脂，在使用前需用重蒸馏水洗去细小树脂及破碎树脂，湿法装柱，用无水乙醇浸泡24h，液面高于树脂层10cm，放出浸液，然后用95%乙醇冲洗至洗出液加水(1:2)不出现混浊，再用重蒸水洗至无醇味；用3%的HCL溶液以2BV/h的流速通过树脂层进行酸洗，而后用水洗至中性；再以2%的NaOH以2BV/h的流速进行碱洗，用水洗至中性，所述的pH值通过3%HCl或2%Na0H溶液调节。
本发明所述的柚皮多糖通过如下方法制备得到：选取新鲜秋季采摘的沙田柚、剥皮、干燥、粉碎，用超临界二氧化碳萃取设备脱脂处理60分钟，压力45MPa， 温度45℃，CO2流量30L／h；脱脂处理后以kg/L计，加入质量体积比为1:10~20的蒸馏水，浸泡30min，得到第一次柚皮浸提液；向柚皮第一浸提液中加入酸调节pH值为3.0~4.0，将温度加热至45~55℃，每kg柚皮中分别加入4~6g纤维素酶和果胶酶(1:2)，超声波辅助酶解2~3h后，加热进行酶灭活。然后提取液用卧螺式离心机以1800~2000r/min的速度进行固液分离，收集滤液和残渣，得到第一滤液；再将残渣加入质量体积比为1:5~10的蒸馏水，浸泡30min，用超声波处理2-3h后，离心，收集滤液，得到第二滤液，混合所述第一滤液和第二滤液，将此混合滤液过截留分子量为10万的中空纤维膜，收集透过液经减压浓缩，得到柚皮提取液；将柚皮提取液调节pH值为9.0~14.0用体积分数为40~80%乙醇分别醇沉，经真空冻干后粉碎成60目固体粉末，得到40%乙醇沉淀多糖a、60%乙醇沉淀多糖b、80%乙醇沉淀多糖c；将40%乙醇沉淀多糖a、60%乙醇沉淀多糖b、80%乙醇沉淀多糖c以重量比1:2:1的比例复配得柚皮多糖；
具体应用试验：将新屠宰的猪肉在-18℃下冷冻1小时，然后在2℃冷藏8小时，使其中心温度将至0-4℃。提前将所用的刀具和案板经75%的酒精消毒杀菌并紫外照射15min，在无菌操作下，剃掉猪肉的筋膜及多余的脂肪，切成25g（用于细菌总数试验）和50g(用于其他指标试验)左右的肉块，随即分组，分别用保鲜液处理，即在保鲜液中浸泡2min, 取出沥干后装入PE保鲜袋中，在0-4℃冰箱中贮藏7天测定细菌总数、TVB-N值。菌总数测定：按照4789.2-2010«食品微生物学检验-菌落总数测定»的方法测定。TVB-N值测定：按GB/T5009-44-2003«肉与肉制品卫生标准的分析方法»中的微量扩散法测定。
检测结果显示：7天之内，本实施例的细菌总数的对数由3.6上升为4.9，TVB-N值由8.6mg/100g上升到9.1mg/100g；空白对照细菌总数由3.6上升为5.8，TVB-N值由8.6mg/100g上升,19.8mg/100g。
实施例2
将原花青素低聚体0.10g、原花青素高聚体0.2g、乳酸链球菌素0.02g、六磷酸钠6g、水溶性膜基（短梗霉多糖和海藻糖重量比为1:3）13g、柚皮多糖6g，蒸馏水1L，配制成复合冷鲜肉保鲜剂的水剂。其中原花青素低聚体、原花青素高聚体及柚皮多糖的制备方法同实施例1。
配制方法：
（1）取原花青素低聚体、原花青素高聚体溶解于蒸馏水中配制成原花青素复合溶液。取质量分数65-75%上述原花青素复合溶液，边搅拌边添加膜基材料，搅拌至膜基物质全部溶解，制得膜基溶液；
（2）将柚皮多糖、六磷酸钠与乳酸链球菌素混合均匀，然后与剩下的松树皮原花青素复合溶液混合，充分搅拌至溶解、制得乳酸链球菌素溶液；
（3）将膜基溶液与乳酸链球菌素溶液混合均匀即为复合冷鲜肉保鲜剂水剂。
具体应用试验：将新屠宰的猪肉在-18℃下冷冻1小时，然后在2℃冷藏8小时，使其中心温度将至0-4℃。提前将所用的刀具和案板经75%的酒精消毒杀菌并紫外照射15min，在无菌操作下，剃掉猪肉的筋膜及多余的脂肪，切成25g（用于细菌总数试验）和50g(用于其他指标试验)左右的肉块，随即分组，分别用保鲜液处理，即在保鲜液中浸泡2min, 取出沥干后装入PE保鲜袋中，在0-4℃冰箱中贮藏7天测定细菌总数、TVB-N值。菌总数测定：按照4789.2-2010«食品微生物学检验-菌落总数测定»的方法测定。TVB-N值测定：按GB/T5009-44-2003«肉与肉制品卫生标准的分析方法»中的微量扩散法测定。
检测结果显示：7天之内，本实施例的细菌总数的对数由3.67上升为4.95，TVB-N值由8.75mg/100g上升到9.35mg/100g；空白对照细菌总数由3.67上升为6.01，TVB-N值由8.74mg/100g上升到20.8mg/100g。
实施例3
将原花青素低聚体0.08g、原花青素高聚体0.5g、乳酸链球菌素0.04g、六磷酸钠4g、水溶性膜基（短梗霉多糖和海藻糖重量比为1:3）15g、柚皮多糖5g，蒸馏水1L，配制成复合冷鲜肉保鲜剂的水剂。其中原花青素低聚体、原花青素高聚体及柚皮多糖的制备方法同实施例1。
配制方法：
（1）取原花青素低聚体、原花青素高聚体溶解于蒸馏水中配制成原花青素复合溶液。取质量分数65-75%上述原花青素复合溶液，边搅拌边添加膜基材料，搅拌至膜基物质全部溶解，制得膜基溶液；
（2）将柚皮多糖、六磷酸钠与乳酸链球菌素混合均匀，然后与剩下的松树皮原花青素复合溶液混合，充分搅拌至溶解、制得乳酸链球菌素溶液；
（3）将膜基溶液与乳酸链球菌素溶液混合均匀即为复合冷鲜肉保鲜剂水剂。
具体应用试验：将新屠宰的猪肉在-18℃下冷冻1小时，然后在2℃冷藏8小时，使其中心温度将至0-4℃。提前将所用的刀具和案板经75%的酒精消毒杀菌并紫外照射15min，在无菌操作下，剃掉猪肉的筋膜及多余的脂肪，切成25g（用于细菌总数试验）和50g(用于其他指标试验)左右的肉块，随即分组，分别用保鲜液处理，即在保鲜液中浸泡2min, 取出沥干后装入PE保鲜袋中，在0-4℃冰箱中贮藏7天测定细菌总数、TVB-N值。菌总数测定：按照4789.2-2010«食品微生物学检验-菌落总数测定»的方法测定。TVB-N值测定：按GB/T5009-44-2003«肉与肉制品卫生标准的分析方法»中的微量扩散法测定。
检测结果显示：7天之内，本实施例的细菌总数的对数由3.65上升为5.04，TVB-N值由8.78mg/100g上升到9.41mg/100g；空白对照细菌总数由3.65上升为5.92，TVB-N值由8.78mg/100g上升到19.5mg/100g。
实施例4
将原花青素低聚体（由原花青素单体、原花青素二聚体和原花青素三聚体组成，其重量比为1:1:1）0.05g、原花青素高聚体0.3g、乳酸链球菌素0.07g、六磷酸钠4.5g、水溶性膜基（短梗霉多糖和海藻糖重量比为1:3）10g、柚皮多糖6g，蒸馏水1L，配制成复合冷鲜肉保鲜剂的水剂。
配制方法：
（1）取原花青素低聚体、原花青素高聚体溶解于蒸馏水中配制成原花青素复合溶液。取质量分数65-75%上述原花青素复合溶液，边搅拌边添加膜基材料，搅拌至膜基物质全部溶解，制得膜基溶液；
（2）将柚皮多糖、六磷酸钠与乳酸链球菌素混合均匀，然后与剩下的松树皮原花青素复合溶液混合，充分搅拌至溶解、制得乳酸链球菌素溶液；
（3）将膜基溶液与乳酸链球菌素溶液混合均匀即为复合冷鲜肉保鲜剂水剂。
具体应用试验：将新屠宰的猪肉在-18℃下冷冻1小时，然后在2℃冷藏8小时，使其中心温度将至0-4℃。提前将所用的刀具和案板经75%的酒精消毒杀菌并紫外照射15min，在无菌操作下，剃掉猪肉的筋膜及多余的脂肪，切成25g（用于细菌总数试验）和50g(用于其他指标试验)左右的肉块，随即分组，分别用保鲜液处理，即在保鲜液中浸泡2min, 取出沥干后装入PE保鲜袋中，在0-4℃冰箱中贮藏7天测定细菌总数、TVB-N值。菌总数测定：按照4789.2-2010«食品微生物学检验-菌落总数测定»的方法测定。TVB-N值测定：按GB/T5009-44-2003«肉与肉制品卫生标准的分析方法»中的微量扩散法测定。
检测结果显示：7天之内，本实施例的细菌总数的对数由3.6上升为5.1，TVB-N值由8.6mg/100g上升到11.3mg/100g；空白对照细菌总数由3.6上升为5.8，TVB-N值由8.6mg/100g上升,19.8mg/100g。
实施例5
将原花青素低聚体（由原花青素单体、原花青素二聚体和原花青素三聚体组成，其重量比为1:1:1）0.10g、原花青素高聚体0.2g、乳酸链球菌素0.02g、六磷酸钠6g、水溶性膜基（短梗霉多糖和海藻糖重量比为1:3）13g、柚皮多糖6g，蒸馏水1L，配制成复合冷鲜肉保鲜剂的水剂。
配制方法：
（1）取原花青素低聚体、原花青素高聚体溶解于蒸馏水中配制成原花青素复合溶液。取质量分数65-75%上述原花青素复合溶液，边搅拌边添加膜基材料，搅拌至膜基物质全部溶解，制得膜基溶液；
（2）将柚皮多糖、六磷酸钠与乳酸链球菌素混合均匀，然后与剩下的松树皮原花青素复合溶液混合，充分搅拌至溶解、制得乳酸链球菌素溶液；
（3）将膜基溶液与乳酸链球菌素溶液混合均匀即为复合冷鲜肉保鲜剂水剂。
具体应用试验：将新屠宰的猪肉在-18℃下冷冻1小时，然后在2℃冷藏8小时，使其中心温度将至0-4℃。提前将所用的刀具和案板经75%的酒精消毒杀菌并紫外照射15min，在无菌操作下，剃掉猪肉的筋膜及多余的脂肪，切成25g（用于细菌总数试验）和50g(用于其他指标试验)左右的肉块，随即分组，分别用保鲜液处理，即在保鲜液中浸泡2min, 取出沥干后装入PE保鲜袋中，在0-4℃冰箱中贮藏7天测定细菌总数、TVB-N值。菌总数测定：按照4789.2-2010«食品微生物学检验-菌落总数测定»的方法测定。TVB-N值测定：按GB/T5009-44-2003«肉与肉制品卫生标准的分析方法»中的微量扩散法测定。
检测结果显示：7天之内，本实施例的细菌总数的对数由3.67上升为5.17，TVB-N值由8.75mg/100g上升到13.32mg/100g；空白对照细菌总数由3.67上升为6.01，TVB-N值由8.74mg/100g上升到20.8mg/100g。
实施例6
将原花青素低聚体（由原花青素单体、原花青素二聚体和原花青素三聚体组成，其重量比为1:1:1）0.08g、原花青素高聚体0.5g、乳酸链球菌素0.04g、六磷酸钠4g、水溶性膜基（短梗霉多糖和海藻糖重量比为1:3）15g、柚皮多糖5g，蒸馏水1L，配制成复合冷鲜肉保鲜剂的水剂。
配制方法：
（1）取原花青素低聚体、原花青素高聚体溶解于蒸馏水中配制成原花青素复合溶液。取质量分数65-75%上述原花青素复合溶液，边搅拌边添加膜基材料，搅拌至膜基物质全部溶解，制得膜基溶液；
（2）将柚皮多糖、六磷酸钠与乳酸链球菌素混合均匀，然后与剩下的松树皮原花青素复合溶液混合，充分搅拌至溶解、制得乳酸链球菌素溶液；
（3）将膜基溶液与乳酸链球菌素溶液混合均匀即为复合冷鲜肉保鲜剂水剂。
具体应用试验：将新屠宰的猪肉在-18℃下冷冻1小时，然后在2℃冷藏8小时，使其中心温度将至0-4℃。提前将所用的刀具和案板经75%的酒精消毒杀菌并紫外照射15min，在无菌操作下，剃掉猪肉的筋膜及多余的脂肪，切成25g（用于细菌总数试验）和50g(用于其他指标试验)左右的肉块，随即分组，分别用保鲜液处理，即在保鲜液中浸泡2min, 取出沥干后装入PE保鲜袋中，在0-4℃冰箱中贮藏7天测定细菌总数、TVB-N值。菌总数测定：按照4789.2-2010«食品微生物学检验-菌落总数测定»的方法测定。TVB-N值测定：按GB/T5009-44-2003«肉与肉制品卫生标准的分析方法»中的微量扩散法测定。
检测结果显示：7天之内，本实施例的细菌总数的对数由3.65上升为5.22，TVB-N值由8.78mg/100g上升到9.41mg/100g；空白对照细菌总数由3.65上升为5.92，TVB-N值由11.68mg/100g上升到19.5mg/100g。
Claims (7)
1.一种复合冷鲜肉保鲜剂，其特征在于，包含如下重量份的组分：原花青素低聚体0.5~1 份、原花青素高聚体1~5 份、乳酸链球菌素0.2~0.7 份、六磷酸钠30~60份、水溶性膜基50~150 份、植物多糖50~70 份；
所述的原花青素低聚体为原花青素单体、原花青素二聚体或原花青素三聚体或三者的混合；所述的原花青素高聚体为原花青素四聚体或聚合度为4 以上的原花青素高聚体或其混合；
所述水溶性膜基包括短梗霉多糖和海藻糖，其中短梗霉多糖和海藻糖复配比例为1:3~3:1 ；
所述的植物多糖为柚皮多糖；
原花青素低聚体和原花青素高聚体通过如下方法制备得到：取马尾松树皮，用乙醇提取得马尾松树皮提取物，将马尾松树皮提取物上LSA-10 树脂，在pH 为6.0-6.5 条件下，先以水洗除杂，然后用体积分数为50~70% 的乙醇洗脱；收集乙醇洗脱部位、浓缩，再用乙酸乙酯或/ 和无水乙醚萃取1~4 次，合并有机层、浓缩干燥得原花青素低聚体，合并水层得原花青素高聚体；
所述的柚皮多糖通过如下方法制备得到：将柚皮经超临界二氧化碳萃取设备萃取脱脂处理，然后加水浸泡得第一次柚皮浸提液；将第一次柚皮浸提液用纤维素酶和果胶酶酶解、离心、过滤；再将滤液过截留分子量为10 万的中空纤维膜，收集透过液，得柚皮提取液；将柚皮提取液调节pH 值为9.0~14.0 用体积分数为40~80% 乙醇分别醇沉，得到40% 乙醇沉淀多糖a、60% 乙醇沉淀多糖b、80% 乙醇沉淀多糖c ；将40% 乙醇沉淀多糖a、60% 乙醇沉淀多糖b、80% 乙醇沉淀多糖c 以重量比1~2:1~3:1~2 的比例复配得柚皮多糖。
2.根据权利要求1所述的复合冷鲜肉保鲜剂，其特征在于，包含如下重量份的组分：原花青素低聚体0.75~1 份、原花青素高聚体3~5 份、乳酸链球菌0.35~0.5 份、六磷酸钠45~60 份、水溶性膜基50~100 份、植物多糖60~70 份。
3.根据权利要求1所述的复合冷鲜肉保鲜剂，其特征在于，包含如下重量份的组分：原花青素低聚体0.75 份、原花青素高聚体3 份、乳酸链球菌素0.35 份、六磷酸钠45 份、水溶性膜基75 份、植物多糖60 份。
4.根据权利要求1所述的冷鲜肉保鲜剂，其特征在于，短梗霉多糖和海藻糖复配比例为1:3。
5.根据权利要求1所述的冷鲜肉保鲜剂，其特征在于， 40% 乙醇沉淀多糖a、60% 乙醇沉淀多糖b、80% 乙醇沉淀多糖c 以重量比1:1~2:1 的比例复配得柚皮多糖。
6.根据权利要求1所述的冷鲜肉保鲜剂，其特征在于，所述的冷鲜肉保鲜剂的剂型为水剂形式，其中各组分的浓度为：原花青素低聚体0.05~0.10g/L、原花青素高聚体0.1~0.5 g/L、乳酸链球菌素0.02~0.07 g/L、六磷酸钠3~6 g/L、水溶性膜基5~15 g/L、植物多糖5~7g/L。
7.根据权利要求6所述的冷鲜肉保鲜剂，其特征在于，各组分的浓度为：原花青素低聚体0.075g/L、原花青素高聚体0.3g/L、乳酸链球菌素0.35 g/L、六磷酸钠4.5g/L、水溶性膜基7.5 g/L、植物多糖6g/L。
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