CN104523863B - 一种中药灌注液及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种中药灌注液，所述中药灌注液由以下重量份的各物质组成：马蹄草提取物1‑10份，丙二醇3‑5份，V_C 0.01‑0.02份，纯水50‑100份。本发明还提供其制备方法和其在制备治疗乳牛乳腺炎的药物中的应用。本发明采用马蹄草提取物作为有效成分，具有很好的清热解毒、抗菌消炎的作用，治疗奶牛乳腺炎效果极好，同时由于采用纯中药制剂，不含任何化药成分，故有利于奶制品的安全；通过液体搅拌得澄清溶液，性质稳定且质量可控，非常有利于工业化生产；作为一种中药药物，其效果确切，无残留及毒副作用，并在泌乳期可用，将成为抗生素良好的替代品。本发明的中药灌注液在兽医临床上有较高的应用价值。

Description

一种中药灌注液及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于兽药技术领域，具体涉及一种中药灌注液及其制备方法和应用。

背景技术

在奶牛饲养中奶牛乳腺炎是发病率高，经济损失最大的一种疾病，同时也在危害着人类的身体健康。据报道，乳腺炎的发病率在20%-80%之间，造成的经济损失相当严重。根据美国学者的估计，美国患乳腺炎的牛造成经济损失就高达40亿美元。按资料报道，目前现状为，我国现有奶牛1800 万头左右，每年因乳腺炎造成的经济损失超过5.16亿元。目前尚无近几年这方面的确切统计资料，由于这几年我国加快畜牧业的发展，奶牛头数猛增，因此我国近些年每年因乳腺炎造成的经济损失将更多。

抗生素疗法目前仍是国内外所采用的治疗乳腺炎最常用的方法，在乳腺炎治疗及控制奶品质量的综合防治中具有重要作用。国外有学者研究表明，使用青霉素G治疗由细菌引起的奶牛乳腺炎487例，其中，由大肠杆菌引起的乳腺炎的治愈率为 74%，由金黄色葡萄球菌引起的乳腺炎的治愈率为 34%，而对于其他革兰氏阳性葡萄球菌和链球菌引起的乳腺炎的治愈率分别为 76%和 65%，并且，初次泌乳的奶牛的治愈率明显高于较老的奶牛；国内学者使用乳酸环丙沙星治疗乳腺炎，有效率为 100%，治愈率达到 90%。随着抗菌药大量广泛的使用，耐药菌株也越来越多，使得常用药物疗效下降，特别是对金黄色葡萄球菌治愈率较低。青霉素或青-链霉素已不再是治疗乳腺炎的首选药。青霉素治疗金黄色葡萄球菌性乳腺炎，初次治疗率可达50%，第二次为25%，第三次为15%以下。临床中发现喹诺酮类药物特别是诺氟沙星、环丙沙星对奶牛乳腺炎多种致病菌有较好的抑菌作用，而平时治疗乳腺炎应用较多的青霉素、链霉素、磺胺类、大环内酯类等药物对一些常见的奶牛乳腺炎病原菌几乎无效。故研究用中药治疗奶牛乳腺炎将是一个非常有效的方法。

发明内容

本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供一种能够有效治疗奶牛乳腺炎的中药灌注液。

本发明提供一种中药灌注液，所述中药灌注液由以下重量份的各物质组成：马蹄草提取物1-10份，丙二醇3-5份，Vc 0.01-0.02份，纯水50-100份。

丙二醇为助剂，能够增加对马蹄草提取物的溶解。

Vc为抗氧化剂，增加该药物的稳定性。

优选地，所述中药灌注液由以下重量份的各物质组成：马蹄草提取物10份，Vc0.02份，丙二醇5份，纯水100份。

进一步地，所述马蹄草提取物是将马蹄草通过水提获得。

进一步地，所述马蹄草提取物是每10公斤马蹄草水提得到1公斤马蹄草提取物。

本发明的第二个目的是提供一种药物，其为上述的中药灌装液，所述药物的剂型为灌注液。

本发明的第三个目的是提供上述中药灌注液的制备方法，步骤如下：

（1）无菌条件下，将配方量的马蹄草提取物、Vc、丙二醇、纯水混合，得到原料混合液；

（2）将步骤（1）得到的原料混合液搅拌得到澄清溶液后，蒸汽灭菌得到本发明的中药灌注液。

优选地，所述蒸汽灭菌的温度为100℃，时间为10min。

本发明的第四个目的是提供上述中药灌注液、药物在制备治疗乳牛乳腺炎的药物中的应用。

优选地，所述乳牛乳腺炎为无乳链球菌性乳腺炎、金黄色葡萄球菌性乳腺炎或大肠杆菌感染的乳腺炎。

本发明的有益效果为：本发明提供的一种中药灌注液，具有以下优点：

1、采用马蹄草提取物作为有效成分，具有很好的清热解毒、抗菌消炎的作用，治疗奶牛临床型乳腺炎效果极好，治愈率90.90%，有效率达100%；同时由于采用纯中药制剂，不含任何化药成分，故有利于奶制品的安全；也不易产生耐药性；

2、通过液体搅拌得澄清溶液，性质稳定且质量可控，非常有利于工业化生产；

3、作为一种有效治疗奶牛乳腺炎的中药药物，其效果确切。从本研究的药效学试验可以看出, 中药灌注液在兽医临床上有较高的应用价值。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。

本发明的马蹄草提取物购自西安斯诺特生物技术有限公司，生产批号20130912。

实施例1

本发明的中药灌注液的配方如下：

马蹄草提取物1kg，Vc 0.01kg，丙二醇3kg，纯水50kg。

本发明的中药灌注液的制备方法如下：

（1）无菌条件下，将马蹄草提取物1kg、Vc 0.01kg、丙二醇3kg、纯水50kg混合，得到原料混合液；

（2）将步骤（1）得到的原料混合液经液体搅拌机搅拌15分钟，得到澄清溶液后，进行分装，再以蒸汽灭菌（100℃，10分钟）得到本发明的中药灌注液。 实施例2

本发明的中药灌注液的配方如下：

马蹄草提取物5kg，Vc 0.015kg，丙二醇4kg，纯水75kg。

本实施例的中药灌注液的制备方法与实施例1相同。

实施例3

本发明的中药灌注液的配方如下：

马蹄草提取物10kg，Vc 0.02kg，丙二醇5kg，纯水100kg。

本实施例的中药灌注液的制备方法与实施例1相同。

一、本发明的中药灌注液的抑菌试验

1、材料与方法：

1.1试验药品：

中药灌注液1、2、3号药均由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药工程研究室按不同比例配制而成制备。分别为：1号药：马蹄草提取物（西安斯诺特生物技术有限公司生产20130912）1公斤，Vc 0.01公斤，丙二醇3公斤，纯水50公斤；2号药：马蹄草提取物（西安斯诺特生物技术有限公司生产20130912）5公斤，Vc 0.015公斤，丙二醇4公斤，纯水75公斤；3号药：马蹄草提取物（西安斯诺特生物技术有限公司生产20130912）10公斤，Vc 0.02公斤，，丙二醇5公斤，纯水100公斤。4号药：对照药：乳立宁（双丁注射液），河北远征药业生产(生产批号20131622)。

1.2奶牛乳腺炎病原菌的分离鉴定

1.2.1 样品的采集

乳样采自兰州市某奶牛场，共采集5头有明显乳腺炎症状患牛的牛乳各一份。奶牛乳房按常规消毒后，每个乳头挤去头2把乳，后无菌取乳样约15mL于灭菌采乳管中，标明牛号和日期后放入冰桶，送回实验室进行细菌检验，如当天不能检验，则放入4℃保存，不超过48h。

1.2.2 病原菌的分离

将乳样分别划线接种于普通琼脂培养基、鲜血琼脂培养基和麦康凯琼脂培养基，置37℃温箱培养24h后观察菌落形态特征，挑取典型菌落涂片，革兰氏染色，镜检。根据菌体形态及染色特性初步判定细菌类属，然后进一步纯化培养，培养方法同上，链球菌需要用血平板培养基进行培养，纯培养后进行镜检细菌，将无杂菌者保存于试管斜面培养基内，然后可按有关生化鉴定方法进行鉴定。

1.2.3 供试菌液的制备

将本试验中分离鉴定的临床型奶牛乳腺炎主要致病菌无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌3种细菌液，用接种环轻取接种于肉汤琼脂培养基，按照菌种所需的培养条件进行培养，在 37℃恒温培养箱中分别培养18-20h后，稀释，用分光光度计在波长为 625nm处比色，吸光度为0.08-0.1时的稀释浓度为所需浓度，即含细菌数约为 1-2×10⁸个/mL，备用。

1.2.4抑菌试验

将药品中药灌注液相应浓度，用管碟法进行试验，抑菌圈的大小表示抑菌作用的强弱；用二倍稀释法测定中药灌注液的最低抑菌浓度，抑菌浓度的高低表示抑菌作用的弱强。

2、结果：

2.1体外抑菌试验：

本发明的中药灌注液对无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的体外抑菌效果和对照药抑菌效果比较结果如表1、2所示。经过预实验确定中药灌注液3号对三种菌的抑菌效果最好，故正式试验以3号药为准。

表1

表2

3、结论：

从表1、2，中药灌注液的体外抑菌试验和体内抗菌活性试验结果可以看出, 中药灌注液3号的抑菌作用较乳立宁强,特别是对大肠埃希氏菌，故对奶牛乳腺炎有治疗作用。

二、本发明的中药灌注液的急性毒性试验

1、材料与方法：

1.1试验药品：中药灌注液3号由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药工程研究室制备。

2、急性毒性试验：

2.1实验动物：

体重18～21g的健康小白鼠60只，雌雄各半。

2.2方法：

将小白鼠随机分成5个剂量组和1个健康对照组,每组10只。中药灌注液按等比级数配成一定剂量浓度，腹腔注射给药。给药后观察7d，统计死亡率，计算LD₅₀。

3、结论：

急性毒性试验结果表明,给药后观察7d，统计死亡率，按改良寇氏法计算出中药灌注液3号的LD₅₀为34831mg/kg，95%置信区间为3271.16-3483.56mg/kg，属于基本无毒。

三、本发明的中药灌注液的临床型乳牛乳腺炎的治疗情况

1、材料与方法：

1.1试验药品：

中药灌注液3号由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药工程研究室制备。

对照组：乳立宁（双丁注射液），河北远征药业生产(20131622)。

1.2临床型乳牛乳腺炎治疗试验：

1.2.1实验动物：

兰州市段家滩奶牛繁殖场和伏龙坪奶牛场18头（51个患病乳区）临床型乳腺炎患病牛，通过细菌培养，感染菌主要是金黄色葡萄球菌60%，大肠杆菌30%，无乳链球菌8%，其余2%。

1.2.2方法：

在无菌条件下将中药灌注液配成20g/L的溶液。

乳腺炎的确诊：①外观有红、肿、热、痛感,乳汁稀薄或有血丝；②LMT 现场诊断确诊。取乳腺炎乳区的乳样，37℃培养24h后再挑选可疑菌落继续纯化培养48h，不长菌者可认定无菌，如有细菌生长即做出细菌鉴定。将患病乳区乳汁挤干，注入中药灌注液药液50mL，每日2次，3d 为一疗程，对照药按说明书应用。

1.2.3治愈判定标准：

①临床症状消失，乳汁正常；

②LMT 诊断阴性。

2 中药乳头灌注剂治疗临床型乳腺炎的临床药理学试验结果

2.1 疗效统计结果

2.1.1 疗效判定标准

痊愈：用药3d～5d后，乳腺红、肿、热、痛消失，乳汁肉眼观察无异常变化，产奶量恢复正常。

有效：用药3d～5d后，乳腺红、肿、热、痛等症状明显减轻，乳腺肿块明显减少，乳汁性状基本正常，产奶量仍没恢复。

无效：用药3d～5d后，乳腺红、肿、热、痛症状无明显减轻，乳汁肉眼观察有异常变化。

2.2 疗效统计结果

结果如表3所示。

表3 治疗效果统计

本发明的中药灌注液3号组和对照组均在用药4d后对奶牛乳区进行疗效统计，中药灌注液3号组治疗效果与对照组治疗效果差异显著（P＜0.05）。

3、结果：

中药灌注液治疗临床型乳牛乳腺炎的试验结果证明,本发明的中药灌注液对临床型乳牛乳腺炎的治愈率较高，治愈率90.90%,并且具有消肿快,回奶迅速,毒性低等特点，且3号药效果最好。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种用于治疗奶牛乳腺炎的中药灌注液，其特征在于：所述中药灌注液由以下重量份的各物质组成：马蹄草提取物10份，Vc 0.02份，丙二醇5份，纯水100份；所述马蹄草提取物是每10公斤马蹄草水提得到1公斤马蹄草提取物。

2.权利要求1所述的一种中药灌注液的制备方法，其特征在于：步骤如下：

（1）无菌条件下，将配方量的马蹄草提取物、Vc、丙二醇、纯水混合，得到原料混合液；

（2）将步骤（1）得到的原料混合液搅拌得到澄清溶液后，蒸汽灭菌得到中药灌注液。

3.根据权利要求2所述的中药灌注液的制备方法，其特征在于：所述蒸汽灭菌的温度为100℃，时间为10min。

4.权利要求1所述的中药灌注液在制备治疗乳牛乳腺炎的药物中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述乳牛乳腺炎为无乳链球菌性乳腺炎、金黄色葡萄球菌性乳腺炎或大肠杆菌感染的乳腺炎。