CN104448045A - 一种高纯度低分子肝素的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种低分子肝素的提纯制备方法，属于生物工程领域。主要包括阴离子交换树脂，疏水层析树脂。此工艺操作简单，安全可控，成本较低。

Description

一种高纯度低分子肝素的制备方法

技术领域

本发明涉及一种生物药用原料的制备方法，属于生物工程领域，具体是一种低分子肝素钠的生产工艺。

技术背景

依诺肝素钠属于低分子肝素，主要特征为分子中有一个4一烯吡喃糖醛酸结构。本品抗血栓作用强、出血危险性小，是目前抗凝血、抗血栓形成的主要治疗药物之一，2006年的全球销售额达24.3ML欧元。法国Aventis公司曾研发，并于1993年申请过制备工艺的专利。但该专利未涉及生产过程中酯化率、成环率　及产物纯化等关键工艺。采用该专利方法生产的样品无法达到欧洲药典4.0版规定的标准。本工艺究通过控制上述反应条件，得到适于工业生产的工艺，所得依诺肝素钠成品均符合欧洲药典。

发明内容

本发明在于解决上述问题，提供一种纯度高，安全性好的依诺肝素钠的制备方法。

本发明的技术方案为：

（1）    将粗品一诺肝素钠溶于质量百分浓度1.0--1.6%氯化钠溶液中，得到低分子肝素的溶液，向滤液中加碱液直至产生沉淀，静置，过滤去除不溶物，得到滤液；

（2）    将步骤（1）中滤液用盐酸调pH到7.1--7.6，上疏水层析柱，收集洗脱液；

（3）    将步骤（2）中收集的洗脱液用纯化水稀释，将稀释的洗脱液上样到阴离子交换柱，上样结束后，分别用0.005mol/l--0.02mol/l的和0.2mol/l--0.5mol/l的氯化钠溶液洗涤柱体直至钡盐检测无白色浑浊，最后以1mol/l--3mol/l的氯化钠溶液洗涤，收集洗脱液；

（4）    将步骤（3）中的洗脱液用纳滤膜孔径≤1000的纳滤脱盐浓缩，直至浓缩液中肝素钠的浓度为10wt%--25wt%；

（5）    将步骤（4）中得到的浓缩液沉淀，干燥即得到依诺肝素钠成品。

具体实施方式

实施例

将50g依诺肝素钠溶于质量百分浓度1.6%氯化钠溶液中，得到低分子肝素的溶液，向滤液中加碱液直至产生沉淀，静置，过滤去除不溶物，得到滤液；将滤液用盐酸调pH到7.2，上疏水层析柱，收集洗脱液；将收集的洗脱液用纯化水稀释，将稀释的洗脱液上样到阴离子交换柱，上样结束后，分别用0.01mol/l的和0.3mol/l的氯化钠溶液洗涤柱体直至钡盐检测无白色浑浊，最后以2mol/l的氯化钠溶液洗涤，收集洗脱液；洗脱液用纳滤膜孔径≤1000的纳滤脱盐浓缩，直至浓缩液中肝素钠的浓度为10wt%--25wt%；将得到的浓缩液沉淀，干燥即得到依诺肝素钠成品。最终得到的依诺肝素钠各项指标符合《欧洲药典7.0》。

Claims (3)

1. 一种高纯度低分子肝素的制备方法，其特征在于其工艺步骤如下：

将粗品低分子肝素钠溶于氯化钠溶液中，得到低分子肝素的溶液，向滤液中加碱液直至产生沉淀，静置，过滤去除不溶物，得到滤液；

将步骤（1）中滤液用盐酸调pH到7.1--7.6，上疏水层析柱，收集洗脱液；

将步骤（2）中收集的洗脱液用纯化水稀释，将稀释的洗脱液上样到阴离子交换柱，上样结束后，分别用0.005mol/l--0.02mol/l氯化钠和0.2mol/l--0.5mol/l的氯化钠溶液洗涤柱体直至钡盐检测无白色浑浊，最后以1mol/l--3mol/l的氯化钠溶液洗涤，收集洗脱液；

将步骤（3）中的洗脱液进行纳滤脱盐浓缩，直至浓缩液中肝素钠的浓度为10wt%--25wt%；

将步骤（4）中得到的浓缩液沉淀，干燥即得到低分子肝素钠成品。

2.根据权利要求1所述的低分子肝素钠的制备方法，其特征在于：步骤（1）中的氯化钠溶液的质量百分浓度为1.0--1.6%。

3.根据权利要求1所述的低分子肝素钠的制备方法，其特征在于：步骤（4）中所述的纳滤采用的纳滤膜孔径截留分子量≤1000。