CN104448047A - 一种提高依诺肝素纯度方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种依诺肝素的提纯制备方法，属于生物工程领域。主要包括阴离子交换树脂，疏水层析树脂。此工艺操作简单，安全可控，成本低。

Description

一种提高依诺肝素纯度方法

技术领域

本发明涉及一种生物药用原料的制备方法，属于生物工程领域，具体是一种生产依诺肝素钠的工艺。

技术背景

依诺肝素钠属于低分子肝素，主要特征为分子中有一个４一烯吡喃糖醛酸结构。本品抗血栓作用强、出血危险性小，是目前抗凝血、抗血栓形成的主要治疗药物之一，曾经法国Aventis公司研发，并于1993年申请过制备工艺的专利。但该专利未涉及生产过程中酯化率、成环率　及产物纯化等关键工艺。采用该专利方法生产的样品无法达到欧洲药典4.0版规定的标准。本工艺究通过控制上述反应条件，得到适于工业生产的工艺，所得依诺肝素钠成品均符合欧洲药典。

发明内容

本发明在于解决上述问题，提供一种纯度高，安全性好的依诺肝素钠的制备方法。

本发明的技术方案为：

（1）将粗品依诺肝素钠溶解于1.5-2.0%氯化钠溶液中，得到依诺肝素的溶液，向滤液中加碱液直至产生沉淀，，静置，过滤去除不溶物，得滤液；

（2）将步骤（1）中滤液用盐酸调Ph到6.5-8.0，上疏水层析柱，收集洗脱液；

（3）将步骤（2）中收集的洗脱液用纯化水稀释，将稀释的洗脱液上样到阴离子交换柱，上样结束后，分别用0.005mol/L-0.02mol/L的和0.2mol/L-0.5mol/L的氯化钠溶液洗涤柱体直至钡盐检测无白色浑浊，最后以1mol/L-3mol/L的氯化钠溶液洗涤，收集洗脱液；

（4）将步骤（3）中的洗脱液进行纳滤脱盐浓缩；

（5）将步骤（4）中得到的浓缩液沉淀，干燥即得到依诺肝素钠成品。

具体实施方式

实施例1

将50g一诺肝素钠溶于质量百分浓度2.0%氯化钠溶液中，得到依诺肝素的溶液，向滤液中加碱液直至产生沉淀，，静置，过滤去除不溶物，得滤液；

将滤液用3-5mol/L盐酸调Ph到7.5，上疏水层析柱，收集洗脱液；将收集的洗脱液用纯化水稀释，将稀释的洗脱液上样到阴离子交换柱，上样结束后，分别用0.01mol/L的和0.3mol/L的氯化钠溶液洗涤柱体直至钡盐检测无白色浑浊，最后以2mol/L的氯化钠溶液洗涤，收集洗脱液；洗脱液用纳滤膜孔径≤1000的纳滤脱盐浓缩，直至浓缩液中肝素钠的浓度为10wt%-25wt%；将得到的浓缩液沉淀，干燥即得到依诺肝素钠成品。最终得到的一诺肝素钠各项指标符合《欧洲药典7.0》。

Claims (4)

1.一种提高依诺肝素纯度方法，其特征在于其工艺步骤如下：

将粗品依诺肝素钠溶解于1.5-2.0%氯化钠溶液中，得到依诺肝素的溶液，向滤液中加碱液直至产生沉淀，，静置，过滤去除不溶物，得滤液；

将步骤（1）中滤液用盐酸调Ph到6.5-8.0，上疏水层析柱，收集洗脱液；

将步骤（2）中收集的洗脱液用纯化水稀释，将稀释的洗脱液上样到阴离子交换柱，上样结束后，分别用0.005mol/L-0.02mol/L的和0.2mol/L-0.5mol/L的氯化钠溶液洗涤柱体直至钡盐检测无白色浑浊，最后以1mol/L-3mol/L的氯化钠溶液洗涤，收集洗脱液；

将步骤（3）中的洗脱液进行纳滤脱盐浓缩；

将步骤（4）中得到的浓缩液沉淀，干燥即得到依诺肝素钠成品。

2.根据权利要求1所述的依诺肝素钠的制备方法，其特征在于：步骤（1）中的氯化钠溶液的质量百分浓度为1.5-2.0%。

3.根据权利要求1所述的依诺肝素钠的制备方法，其特征在于：步骤（2）中盐酸调节Ph范围为6.5-8.0。

4.根据权利要求1所述的依诺肝素钠的制备方法，其特征在于：步骤（3）中所述的氯化钠浓度范围分别为0.005mol/L-0.02mol/L和0.2mol/L-0.5mol/L。