CN104447670A

CN104447670A - 雏菊叶龙胆酮的晶型及其制备方法与药物组合物

Info

Publication number: CN104447670A
Application number: CN201410626138.2A
Authority: CN
Inventors: 吕丽娟; 李旻辉; 李振华; 韩华锐; 殷永联; 赵维
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2014-11-10
Filing date: 2014-11-10
Publication date: 2015-03-25

Abstract

本发明涉及雏菊叶龙胆酮（bellidifolin）的晶型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ及其制备方法与药物组合物。其制备方法为：在溶剂中加热搅拌或回流溶解后，趁热过滤，溶液在常压或减压条件下去除溶剂，收集样品，30～50℃干燥即得；所述的溶剂的体积为相应雏菊叶龙胆酮质量的20～120倍；所述的溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、2-丁酮、乙酸乙酯、乙腈、异丙醇、四氢呋喃或水中。本发明所述雏菊叶龙胆酮的晶型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ纯度高，稳定性好，制备方法操作简单，重现性好，对该化合物的深入研究及综合开发利用具有重要意义。

Description

雏菊叶龙胆酮的晶型及其制备方法与药物组合物

技术领域

本发明属于医药技术领域，更具体地说，是涉及雏菊叶龙胆酮（bellidifolin）或1,5,8-三羟基-3-甲氧基口山酮的晶型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ，及其制备方法、含有它的药物组合物及其在制造抗心律失常药物中的用途。

背景技术

雏菊叶龙胆酮（bellidifolin），化学名为1,5,8-三羟基-3-甲氧基口山酮，是从龙胆属，假龙胆属，獐牙菜属等属的植物中分离得到的一种口山酮类化合物。口山酮类化合物多具有中枢神经兴奋或抑制、利尿、强心、抑制单胺氧化酶、抗炎及抗病毒等作用。目前研究表明，雏菊叶龙胆酮具有广泛的生物活性，如降血糖，抗菌，抗氧化，抗心律失常，促进神经功能修复，对脑损伤具有保护作用等，已引起科研工作者的广泛关注。

化学结构式：

关于雏菊叶龙胆酮（bellidifolin）的制备方法已有文献报道，如“1,5,8-三羟基-3-甲氧基山口酮的制备方法”（CN102743374B）；“Terpenoids, flavonoids and xanthones from Gentianella acuta (Gentianaceae)”[Biochemical Systematics and Ecology,2009,37(4):497-500.]；“尖叶假龙胆化学成分研究”[包头医学院学报,2011, 27(2):13-14.]；“尖叶假龙胆中的雏菊叶龙胆酮提取分离”[包头医学院学报, 2012,28(2):5-6.]等文献中均记载了雏菊叶龙胆酮的制备方法。但到目前为止，尚无文献报道过雏菊叶龙胆酮晶型的特征及其制备方法。

众所周知，同一物质分子具有2种或2种以上的空间排列和晶胞参数，形成多种晶型的现象称为多晶型现象。即多晶型物质就是拥有同一个分子式的不同固体，并且每一种晶型可能有其独特的物理性质。本发明通过采用不同的制备方法，获得了雏菊叶龙胆酮（bellidifolin）的4种晶型物质，并得到其粉末X射线衍射图及红外光谱图，从而完成了本发明。固体药物由于空间排列和晶胞参数不同而形成的多晶型现象，可能造成其外观、熔点、溶解特性、稳定性和生物利用度等方面显著不同，最终可能导致药物疗效及安全性出现差异，因此必须在药物研发的初期就开始药物的晶型研究与筛选工作，并最终达到对多晶型固体药物进行质量控制的目的。可见，研究并制得纯度高、具有确定晶型、稳定性好且重现性好的雏菊叶龙胆酮晶型化合物具有重要意义。

发明内容

本发明目的是研究、发现并提供雏菊叶龙胆酮的晶型物质，并提供其制备方法与药物组合物。

首先，本发明研究、发现并提供了雏菊叶龙胆酮的4种晶型，即雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ、雏菊叶龙胆酮晶型Ⅱ、雏菊叶龙胆酮晶型Ⅲ和雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ。

粉末X射线衍射法是国际上公认的研究和表征药物晶型的技术。晶型鉴别时利用供试品衍射峰的数量、位置（2θ或d）、强度（相对或绝对）、各峰强度之比等参量变化实现对晶型物质状态的鉴别。

本发明首先采用粉末X射线衍射法研究和表征了雏菊叶龙胆酮的晶型。测试仪器：Rigaku D/max-2500 粉末X射线衍射仪。测试条件： CuKα辐射，石墨单色器，管压40kV，管流200mA，2q扫描范围3-80°，扫描速率8°/min，步长0.02°。

本发明提供的雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ，其粉末X射线衍射图如图1、2所示，其特征在于，具有如下表所示的粉末X射线衍射图谱特征：

本发明提供的雏菊叶龙胆酮晶型Ⅱ，其粉末X射线衍射图如图4、5所示，其特征

在于，具有如下表所示的粉末X射线衍射图谱特征：

本发明提供的雏菊叶龙胆酮晶型Ⅲ，其粉末X射线衍射图如图7、8所示，其特征在于，具有如下表所示的粉末X射线衍射图谱特征：

本发明提供的雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ，其粉末X射线衍射图如图10、11所示，其特征在于，

具有如下表所示的粉末X射线衍射图谱特征：在红外光谱法中，利用供试品不同晶型物质分子振动时特有的偶极矩变化，引起指定波长范围的红外光谱吸收峰的位置、强度、峰形几何拓扑等参量变化可实现对晶型物质状态的鉴别。

因此，本发明还采用红外光谱法研究和表征了雏菊叶龙胆酮的晶型。仪器：Bruker TENSOR 27 傅里叶变换红外光谱仪。测定方法：KBr压片法，光谱范围400-4000cm^-1，分辨率为4cm^-1。

本发明提供的雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ，其红外光谱图如图3所示，其特征在于，红外光谱图在3438、3104、3017、2986、2950、2848、2381、2349、1872、1657、1632、1613、1594、1563、1497、1433、1399、1356、1314、1267、1244、1208、1185、1158、1094、1049、1032、993、960、882、835、824、806、757、698、672、634、590、520、481、460cm^-1处有吸收峰。

本发明提供的雏菊叶龙胆酮晶型Ⅱ，其红外光谱图如图6所示，其特征在于，红外光谱图在3438、3104、3017、2986、2950、2848、2373、2345、1871、1764、1657、1632、1613、1594、1497、1433、1398、1385、1356、1313、1267、1244、1207、1185、1158、1093、1049、1031、992、959、881、836、824、806、756、699、671、633、589、519、481、459cm^-1处有吸收峰。

本发明提供的雏菊叶龙胆酮晶型Ⅲ，其红外光谱图如图9所示，其特征在于，红外光谱图在3856、3737、3673、3438、3101、2959、2925、2850、2381、2349、2313、1868、1762、1658、1630、1595、1499、1434、1399、1355、1312、1263、1205、1186、1153、1090、1027、954、876、822、752、697、630、585、515、455cm^-1处有吸收峰。

本发明提供的雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ，其红外光谱图如图12所示，其特征在于，红外光谱图在3740、3677、3439、3102、3017、2984、2948、2846、2378、2314、1871、1660、1633、1613、1592、1499、1472、1433、1399、1355、1315、1267、1244、1207、1184、1155、1091、1048、1030、992、957、880、829、755、698、635、588、520、482、461cm^-1处有吸收峰。

本发明还提供了雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ、晶型Ⅱ、晶型Ⅲ和晶型Ⅳ的制备方法。

本发明所提供的雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ的制备方法，包括：将雏菊叶龙胆酮在溶剂中加热搅拌或回流溶解后，趁热过滤，溶液在常压或减压条件下去除溶剂，收集样品，干燥即得。所述的溶剂的体积为相应雏菊叶龙胆酮质量的20～120倍，mL/g；所述的溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、2-丁酮、乙酸乙酯、乙腈、异丙醇、四氢呋喃、水中的一种或几种的混合溶剂；所述的加热搅拌溶解温度为40℃～溶剂沸点；所述干燥优选为真空干燥，所述干燥温度优选为30～50℃。

本发明所提供的雏菊叶龙胆酮晶型Ⅱ的制备方法，包括：将雏菊叶龙胆酮在溶剂中加热搅拌或回流溶解后，趁热过滤，溶液在常压或减压条件下去除溶剂，收集样品，干燥即得。所述的溶剂的体积为相应雏菊叶龙胆酮质量的5-20倍，mL/g；所述的溶剂为吡啶；所述的加热搅拌溶解温度为40℃～溶剂沸点；所述干燥优选为真空干燥，所述干燥温度优选为30～50℃。

本发明所提供的雏菊叶龙胆酮晶型Ⅲ的制备方法，包括：将雏菊叶龙胆酮在溶剂中加热搅拌或回流溶解后，趁热过滤，溶液在常压或减压条件下去除溶剂，收集样品，干燥即得。所述的溶剂的体积为相应雏菊叶龙胆酮质量的100-160倍，mL/g；所述的溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷；所述的加热搅拌溶解温度为35℃～溶剂沸点；所述干燥优选为真空干燥，所述干燥温度优选为30～50℃。

本发明所提供的雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ的制备方法，包括：使用晶态雏菊叶龙胆酮为原料，采用物理方法破坏晶格，制备获得雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ。其中所述的破坏晶格指的是：将雏菊叶龙胆酮放入研磨机中，设定转速为300-500r/min，每10-20min后暂停1-5min，研磨4-10h后，制备获得雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ。

本发明进一步提供了一种预防和治疗心律失常的药物组合物，由本发明所述雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ、晶型Ⅱ、晶型Ⅲ和/或晶型Ⅳ和常规的药用辅料组合制成。按照常规的制剂工艺，本发明所述雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ、晶型Ⅱ、晶型Ⅲ和/或晶型Ⅳ与至少一种常规的药用辅料混合，制备成任何一种适用于临床应用的口服制剂或注射制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、膏剂、分散剂、颗粒剂、注射剂、冻干粉针剂等。所述药用辅料包括柠檬酸钠、磷酸钙、填充剂、粘合剂、保湿剂、崩解剂、阻滞剂、吸收促进剂、湿润剂、吸收剂或润滑剂及它们的混合物。其中，填充剂如淀粉，乳糖，蔗糖，葡萄糖，甘露醇和硅酸；粘合剂如羧甲基纤维素，藻酸盐，明胶，聚乙烯吡咯酮，蔗糖和阿拉伯胶；保湿剂如甘油；崩解剂如琼脂，碳酸钙，土豆淀粉或木薯淀粉，海藻酸，某些硅酸盐和碳酸钠，低取代羟丙基纤维素；阻滞剂溶液如石蜡；吸收促进剂如季胺类化合物；湿润剂如十六醇和单硬脂酸甘油酯；吸收剂如白陶土和皂土；润滑剂如滑石粉，硬脂酸钙，硬脂酸镁，固体聚乙二醇，月桂硫酸钠。

雏菊叶龙胆酮晶型（晶型Ⅰ、晶型Ⅱ、晶型Ⅲ和晶型Ⅳ）样品于25℃，60%相对湿度下放置12个月，外观、有关物质、含量与0个月同批样品比较，均未有明显变化，均在合格范围内，说明本品25℃长期留样试验基本稳定。

本发明公开的雏菊叶龙胆酮晶型（晶型Ⅰ、晶型Ⅱ、晶型Ⅲ和晶型Ⅳ）所具有的积极效果在于：

（1）本发明制备的雏菊叶龙胆酮的晶型是全新的晶型，具有纯度高，制备方法操作简单，收率高，重现性好，质量好，长时间储存对温度、光、湿度稳定等优点，特别是具有良好的制剂性能。

（2）本发明提供的雏菊叶龙胆酮的晶型制备方法，所需工业设备简单，生产周期短，生产成本低廉，易于工业化生产。

（3）本发明提供的雏菊叶龙胆酮的晶型制备方法污染小，利于环境保护。

附图说明

图1 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ粉末X射线衍射图谱；

图2 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ粉末X射线衍射峰表；

图3 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ红外光谱图；

图4 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅱ粉末X射线衍射图谱；

图5 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅱ粉末X射线衍射峰表；

图6 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅱ红外光谱图；

图7 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅲ粉末X射线衍射图谱；

图8 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅲ粉末X射线衍射峰表；

图9 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅲ红外光谱图；

图10 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ粉末X射线衍射图谱；

图11 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ粉末X射线衍射峰表；

图12 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ红外光谱图。

具体实施方式

本发明实施例公开了雏菊叶龙胆酮新晶型及其制备方法与药物组合物。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的产品、方法和应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的产品、方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明进行详细说明。其中，雏菊叶龙胆酮的制备方法见中国专利CN102743374B。粉末X射线衍射检测采用Rigaku D/max-2500 粉末X射线衍射仪。测试条件为CuKα辐射，石墨单色器，管压40kV，管流200mA，2q扫描范围3-80°，扫描速率8°/min，步长0.02°。红外光谱检测采用Bruker TENSOR 27 傅里叶变换红外光谱仪。测定方法为KBr压片法，光谱范围400-4000cm^-1，分辨率为4cm^-1。

实施例1

晶型Ⅰ的制备

称取雏菊叶龙胆酮1.0g，加入乙醇115mL，加热回流至溶解后，趁热过滤，溶液在减压条件下去除溶剂，收集样品，于30℃真空干燥，即得雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ。其粉末X射线衍射图谱见图1、2，红外光谱见图3。红外光谱图在3438、3104、3017、2986、2950、2848、2381、2349、1872、1657、1632、1613、1594、1563、1497、1433、1399、1356、1314、1267、1244、1208、1185、1158、1094、1049、1032、993、960、882、835、824、806、757、698、672、634、590、520、481、460cm^-1处有吸收峰。粉末X射线衍射图谱的主要特征参数见表1。

表1 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ粉末X射线衍射图谱的主要特征参数

实施例2

晶型I的制备

称取雏菊叶龙胆酮1.0g，加入丙酮45mL，加热至50℃，搅拌溶解后，趁热过滤，溶液在常压条件下去除溶剂，收集样品，于35℃真空干燥，即得雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ。其粉末X射线衍射和红外光谱检测结果与实施例1结果一致。

实施例3

晶型I的制备

称取雏菊叶龙胆酮1.0g，加入四氢呋喃20mL，加热至60℃，搅拌溶解后，趁热过滤，溶液在常压条件下去除溶剂，收集样品，于50℃真空干燥，即得雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ。其粉末X射线衍射和红外光谱检测结果与实施例1结果一致。

实施例4

晶型Ⅱ的制备

称取雏菊叶龙胆酮2.0g，加入吡啶20mL，加热至60℃，搅拌溶解后，趁热过滤，溶液在减压条件下去除溶剂，收集样品，于50℃真空干燥，即得雏菊叶龙胆酮晶型Ⅱ。其粉末X射线衍射图谱见图4、5，红外光谱见图6。红外光谱图在3438、3104、3017、2986、2950、2848、2373、2345、1871、1764、1657、1632、1613、1594、1497、1433、1398、1385、1356、1313、1267、1244、1207、1185、1158、1093、1049、1031、992、959、881、836、824、806、756、699、671、633、589、519、481、459cm^-1处有吸收峰。粉末X射线衍射图谱的主要特征参数见表2。

表2 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅱ粉末X射线衍射图谱的主要特征参数

实施例5

晶型Ⅲ的制备

称取雏菊叶龙胆酮1.0g，加入二氯甲烷145mL，加热回流至溶解后，趁热过滤，溶液在常压条件下去除溶剂，收集样品，于35℃真空干燥，即得雏菊叶龙胆酮晶型Ⅲ。其粉末X射线衍射图谱见图7、8，红外光谱见图9。红外光谱图在3856、3737、3673、3438、3101、2959、2925、2850、2381、2349、2313、1868、1762、1658、1630、1595、1499、1434、1399、1355、1312、1263、1205、1186、1153、1090、1027、954、876、822、752、697、630、585、515、455cm^-1处有吸收峰。粉末X射线衍射图谱的主要特征参数见表3。

表3 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅲ粉末X射线衍射图谱的主要特征参数

实施例6

晶型Ⅳ的制备

将10g雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ放入研磨机（德国Fritsch Pulverisette6研磨机）中，设定转速为400r/min，每15min后暂停2min，研磨8h后，制备获得雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ9.1g，收率91%。其粉末X射线衍射图谱见图10、11，红外光谱见图12。红外光谱图在3740、3677、3439、3102、3017、2984、2948、2846、2378、2314、1871、1660、1633、1613、1592、1499、1472、1433、1399、1355、1315、1267、1244、1207、1184、1155、1091、1048、1030、992、957、880、829、755、698、635、588、520、482、461cm^-1处有吸收峰。粉末X射线衍射图谱的主要特征参数见表4。

表4 雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ粉末X射线衍射图谱的主要特征参数

实施例7

每片含10mg活性成分的片剂制备如下：

将活性成分，淀粉和纤维素过筛，并充分混合，将聚乙烯吡咯烷酮溶液与上述的粉混合，过筛，制得湿颗粒于50℃干燥，将羧甲基淀粉钠盐，硬脂酸镁和滑石粉预先过筛，然后加入到上述的颗粒中压片。

实施例8

每片含10mg活性成分的片剂制备如下：

实施例9

每片含10mg活性成分的片剂制备如下：

实施例10

每片含10mg活性成分的片剂制备如下：

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims

1.一种雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ，其特征在于具有如下所示的粉末X射线衍射图谱特征，具有如图1、2所示的粉末X射线衍射图；

其红外光谱图在3438、3104、3017、2986、2950、2848、2381、2349、1872、1657、1632、1613、1594、1563、1497、1433、1399、1356、1314、1267、1244、1208、1185、1158、1094、1049、1032、993、960、882、835、824、806、757、698、672、634、590、520、481、460cm^-1处有吸收峰，具有如3所示的红外光谱图。

2.一种权利要求1所述雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ的制备方法，其特征在于，将雏菊叶龙胆酮在溶剂中加热搅拌或回流溶解后，趁热过滤，溶液在常压或减压条件下去除溶剂，收集样品，干燥即得；所述的溶剂的体积为相应雏菊叶龙胆酮质量的20～120倍，mL/g；所述的溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、2-丁酮、乙酸乙酯、乙腈、异丙醇、四氢呋喃、水中的一种或几种的混合溶剂；所述的加热搅拌溶解温度为40℃～溶剂沸点；所述干燥优选为真空干燥，所述干燥温度优选为30～50℃。

3.一种雏菊叶龙胆酮晶型Ⅱ，其特征在于具有如下所示的粉末X射线衍射图谱特征，具有如图4、5所示的粉末X射线衍射图；

其红外光谱图在3438、3104、3017、2986、2950、2848、2373、2345、1871、1764、1657、1632、1613、1594、1497、1433、1398、1385、1356、1313、1267、1244、1207、1185、1158、1093、1049、1031、992、959、881、836、824、806、756、699、671、633、589、519、481、459cm^-1处有吸收峰，具有如图6所示的红外光谱图。

4.一种权利要求3所述雏菊叶龙胆酮晶型Ⅱ的制备方法，其特征在于，将雏菊叶龙胆酮在溶剂中加热搅拌或回流溶解后，趁热过滤，溶液在常压或减压条件下去除溶剂，收集样品，干燥即得；所述的溶剂的体积为相应雏菊叶龙胆酮质量的5-20倍，mL/g；所述的溶剂为吡啶；所述的加热搅拌溶解温度为40℃～溶剂沸点；所述干燥优选为真空干燥，所述干燥温度优选为30～50℃。

5.一种雏菊叶龙胆酮晶型Ⅲ，其特征在于具有如下所示的粉末X射线衍射图谱特征，具有如图7、8所示的粉末X射线衍射图；

其红外光谱图在3856、3737、3673、3438、3101、2959、2925、2850、2381、2349、2313、1868、1762、1658、1630、1595、1499、1434、1399、1355、1312、1263、1205、1186、1153、1090、1027、954、876、822、752、697、630、585、515、455cm^-1处有吸收峰，具有如图9所示的红外光谱图。

6.一种权利要求5所述雏菊叶龙胆酮晶型Ⅲ的制备方法，其特征在于，将雏菊叶龙胆酮在溶剂中加热搅拌或回流溶解后，趁热过滤，溶液在常压或减压条件下去除溶剂，收集样品，干燥即得；所述的溶剂的体积为相应雏菊叶龙胆酮质量的100-160倍，mL/g；所述的溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷；所述的加热搅拌溶解温度为35℃～溶剂沸点；所述干燥优选为真空干燥，所述干燥温度优选为30～50℃。

7.一种雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ，其特征在于具有如下所示的粉末X射线衍射图谱特征，具有如图10、11所示的粉末X射线衍射图；

其红外光谱图在3740、3677、3439、3102、3017、2984、2948、2846、2378、2314、1871、1660、1633、1613、1592、1499、1472、1433、1399、1355、1315、1267、1244、1207、1184、1155、1091、1048、1030、992、957、880、829、755、698、635、588、520、482、461cm^-1处有吸收峰，具有如图12所示的红外光谱图。

8.一种权利要求7所述雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ的制备方法，其特征在于，使用晶态雏菊叶龙胆酮为原料，采用物理方法破坏晶格，制备获得雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ；其中所述的破坏晶格指的是：将雏菊叶龙胆酮放入研磨机中，设定转速为300-500r/min，每10-20min后暂停1-5min，研磨4-10h后，制备获得雏菊叶龙胆酮晶型Ⅳ。

9.权利要求1、3、5、7所述雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ在制备预防和治疗心律失常药物中的应用。

10.一种预防和治疗心律失常的药物组合物，其特征在于，由权利要求1、3、5、7所述雏菊叶龙胆酮晶型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ和常规的药用辅料组合制成。