CN104435379A - 一种具有抑菌抗炎、止血和止痛的植物提取物复合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有抑菌抗炎、止血和止痛的植物提取物复合物及其应用。其是由裸花紫珠提取物和茶黄酮按照质量比1～5∶5～1组成。本发明的裸花紫珠提取物具有抗炎、抗菌、抗病毒、止血、止痛、调节免疫和清除自由基抗氧化的功效，裸花紫珠的提取物对大多数的病原菌都有不同程度的抑菌作用。茶黄酮还能抑制龋齿，能有效降解细菌内毒素，可用于牙周炎的预防和治疗。植物提取物复合物经过抗菌、抗炎、镇痛和止血实验证明，具有效果确切，天然健康，易于生产，并且使用效果明显优于现有口腔清洁产品的组成成分。因此，该植物提取物复合物具有较好的市场开发前景。

Description

一种具有抑菌抗炎、止血和止痛的植物提取物复合物及其应用

技术领域：

本发明属于口腔保健品领域，具体涉及一种具有抑菌抗炎、止血和止痛的植物提取物复合物及其应用。 

背景技术：

当前社会物质生活已经非常丰富，人们在消费水平提高的同时，健康理念也日益强烈，尤其是口腔问题，备受关注。所谓病从口入，换言之即口腔是人体健康的门户，良好的口腔环境不仅能保证肌体不受病菌的侵入，更能够在人际交往时塑造轻松愉悦的交谈氛围，为对方留下美好的印象。目前，人们对于口腔卫生的诉求主要表现在三个方面：第一，合适的牙膏，尤其是天然植物牙膏，满足早晚清洁口腔和抑制细菌等繁殖的需要；第二，清爽的漱口水，适用于饭后或简单的吃过食物之后的漱洗口腔，清除食物残留；第三，简单轻便易携带的口腔喷雾，主要用于与人接触、交谈、会议报告等场所前的清爽口腔，取代口香糖咀嚼的麻烦和丢弃的不便。 

中药系列牙膏以云南白药牙膏为代表，具有预防牙龈出血的功能。两面针牙膏有护龈健齿作用，西瓜霜牙膏有消炎作用。舒克也推出了大青叶、红花降火牙膏，迎合中药牙膏的消费市场。因此，牙膏的功能主要是针对口腔疾病而分门别类的以对应的中草药提取物为组成配方而成，其有效成分的含量和功能还有待于考证。冠名中药成分的漱口水有威露士，而薄荷清凉漱口水里的薄荷成分，只是为了使口感更好。黑妹漱口水冰爽薄荷，虽然宣称由超临界萃取技术提取野菊花精华，配合多种天然清热去火成分，但野菊花对口腔护理功能尚未知。目前仍然缺乏成分明确，疗效清楚的功能性漱口水。中药成分系列口腔喷雾目前主要有蜂胶 口洁素，藏青果、云南白药口腔喷雾等，主要适用于口腔炎症，研究不是很成熟，还处于探索阶段，功能不明确。 

综上所述，成分明确，功能清楚，使用效果突出的中药提取物口腔用品依然很缺乏，有很大的开发空间。因此，提供一种能同时具有清洁、抑菌、防龋齿和清新口气作用，并且易于制作、方便携带、性能稳定，满足早晚使用的中药牙膏、漱口水和口腔喷雾实为必要。 

天然来源的植物提取物具有丰富的生物功能，如乳化作用、抑菌、除臭、止血、抗炎、防止龋齿和口腔溃疡等疾病，合理有效的将具有以上功能的植物活性提取物复合使用，往往能达到意想不到的效果。因为植物活性分子之间具有强烈的协同增效作用，两种或者两种以上的提取物按照一定的比例混好后，可以充分的将各自活性分子的生物特性发挥到极致，达到单一使用一种提取物无法比拟的效果，称之为叠加效应。 

裸花紫珠(CallicarpanudifloraHook)是马鞭草科紫珠属植物，是我国海南省黎族地区的特色中草药，在广东和广西等省地也有分布。裸花紫珠以地上干燥部分入药，具有止血消炎、散瘀消肿、解毒、驱风湿之功效，民间主要用于治疗创伤出血、呼吸道及消化道出血、化脓性炎症等，外用治烧、烫伤及外伤出血。裸花紫珠收载于1977年版《中国药典》，以裸花紫珠水提物为主要成分的成药有裸花紫珠片、裸花紫珠分散片、裸花紫珠颗粒和裸花紫珠胶囊等。裸花紫珠的化学成分和药理作用研究表明，其主要含有黄酮、鞣质、三萜类和酚类等成分，其中总黄酮提取物具有抗血栓形成、降低全血粘度、抑制血小板凝集和抗炎、抗菌等作用。 

绿茶的种植和饮用在我国已有几千年的历史，陆羽《茶经》曰：“诸药为诸病之药，茶为万病之药”，可见茶在我国中医药文化中的重要地位。美国医药基金会主席J.H.Welsbuger 认为：“儿茶素是21世纪对人类健康产生巨大效果的化合物”，从另一个角度确定了茶的保健作用，并且以茶叶中所富含的儿茶素为主要活性成分。儿茶素，又名茶黄酮，包括EGCG、EGC、ECG、EC、GCG和GC，具有抗氧化、抗菌、抗肿瘤、防治心血管疾病等作用。茶黄酮能强烈抑制生龋菌(Streptococcus mutans)，临床上也证明茶黄酮可明显减少菌斑及牙周指数。由于茶黄酮对除去甲硫醇臭味有良好效果，日本已利用茶黄酮制成商品化之除臭口香糖、香烟滤嘴，以除去抽烟者之口臭。此外进行的猪、鸡及人体试验显示喂食儿茶素二周后，排泄粪臭味有显著减轻，此原因在儿茶素类对肠内产生恶臭细菌有抗菌效果。 

发明内容：

本发明的目的是提供一种具有抑菌抗炎、缓解牙龈出血、止痛，除臭，清爽口腔的植物提取物复合物。 

本发明的具有抑菌抗炎、止血、止痛的植物提取物复合物，其特征在于，由裸花紫珠提取物和茶黄酮按照质量比1～5∶5～1组成。 

优选，所述的具有抑菌抗炎、止血、止痛的植物提取物复合物由裸花紫珠提取物和茶黄酮按照质量2∶1组成。 

裸花紫珠提取物和茶黄酮可以是现有技术中的裸花紫珠提取物和茶黄酮。 

所述的裸花紫珠提取物优选通过以下方法制备：将裸花紫珠用水煎煮若干次后，合并煎煮液，煎煮液经浓缩成在70～80℃时的相对密度为1.2的浸膏，浸膏中加入乙醇至乙醇含量为质量百分比60％，混合搅拌后，静置，滤取上清液，调pH值至6～7，滤渣继续用体积分数75％乙醇水溶液浸提，静置，滤取上清液，合并上清液，浓缩去除乙醇后冷冻干燥后得到裸花紫珠提取物。 

所述的茶黄酮优选通过以下方法制备：将绿茶粉碎后用体积分数80％乙醇水溶液浸提，过滤，滤液经浓缩得浸膏，在浸膏中加入质量分数10％的氯化钠溶液，静置，过滤去沉淀得滤液，滤液调pH值为4～5，在60℃反应2小时，反应液与乙酸乙酯按体积比1∶1混合萃取，萃取液浓缩冷冻干燥后得到茶黄酮。 

本发明的第二个目的是提供具有抑菌抗炎、止血、止痛的植物提取物复合物在制备牙膏、漱口水或口腔喷雾中的应用。 

本发明的植物提取物复合物具有消炎抗菌，止血消肿，清洁口腔的作用效果。本发明的裸花紫珠提取物具有抗炎、抗菌、抗病毒、止血、止痛、调节免疫和清除自由基抗氧化的功效，裸花紫珠的提取物对大多数的病原菌都有不同程度的抑菌作用。茶黄酮还能抑制龋齿，能有效降解细菌内毒素，可用于牙周炎的预防和治疗。本发明的植物提取物复合物是由裸花紫珠提取物和茶黄酮组成，经过优化组合，具有协同增效的作用，可以将各自的生物活性发挥到极致。植物提取物复合物经过抗菌、抗炎、镇痛和止血实验证明，具有效果确切，天然健康，易于生产，并且使用效果明显优于现有口腔清洁产品的组成成分。因此，该植物提取物复合物具有较好的市场开发前景。 

具体实施方式：

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。 

实施例1：裸花紫珠提取物的制备方法 

裸花紫珠全株用水煎煮三次(料水质量比1∶10)，第一、二次各2小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩并在70-80摄氏度时的相对密度为1.20的浸膏，冷却后缓慢加入乙醇使乙醇质量百分比为60％，充分搅拌，静置12小时，滤取上清液，用氢氧化钠溶液调节 pH值至6.0-7.0，残渣加体积分数75％乙醇水溶液适量，搅拌均匀，静置12小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇得裸花紫珠浸膏，冷冻干燥，得到裸花紫珠提取物。 

实施例2：茶黄酮的制备方法 

绿茶粉碎，用体积分数80％乙醇水溶液浸泡2小时，过滤除茶渣，浓缩乙醇得浸膏，在浸膏中加入质量分数10％的氯化钠溶液，静置12小时，除去沉淀得滤液。调滤液的pH值为4-5，并在温度为60摄氏度下催化反应2小时。催化反应后的反应液与乙酸乙酯按1∶1体积比进行萃取，萃取三次，合并萃取液，浓缩萃取液并冷冻干燥，得总儿茶素即茶黄酮。 

实施例3：植物提取物复合物的制备 

本发明的植物提取物复合物由实施例1的裸花紫珠提取物和实施例2的茶黄酮组成，将裸花紫珠提取物和茶黄酮按照质量比1～5∶5～1组成，按照上述质量比，将裸花紫珠提取物和茶黄酮混合均匀后，即可得到本发明的具有抑菌抗炎、止血、止痛，除臭，清爽口腔的植物提取物复合物。 

将实施例1的裸花紫珠提取物和实施例2的茶黄酮按照质量比5∶1，4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3，1∶4和1∶5混合均匀后，得到不同配比的本发明的具有抑菌抗炎、止血、止痛，除臭，清爽口腔的植物提取物复合物。 

以下以由实施例1的裸花紫珠提取物和实施例2的茶黄酮按照质量比2∶1混合均匀的植物提取物复合物进行各种药效学实验，具体如下： 

1、抑菌作用 

菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、肺炎球菌、绿脓杆菌、乙型链球菌、丙 型链球菌和幽门螺旋杆菌。 

菌液制备：挑取斜面菌种接种于20％牛浸汁培养基中，37℃培养过夜，再用20％牛浸汁培养基将菌液稀释至10cfu/ml，立即接种。 

MIC测定：采用液体试管连续稀释法，用20％牛浸汁培养基将样品作连续对倍稀释。将1.0ml加入灭菌试管中，每管加入0.05ml标准新鲜菌液，并设菌株对照及溶媒对照组，37℃培养18～24小时，观察细菌生长情况，以无菌生长的最高稀释度为MIC。 

结论：通过体外抑菌试验，以最低抑菌浓度(MIC，mg/mL)指标评价本发明制备的植物提取物复合物对常见菌株的抗菌作用。 

试验结果见表1。 

表1：植物提取物复合物的抑菌活性 

结果表明本发明的植物提取物复合物具有强烈的抑菌活性，其MIC与单独提取物比较，有显著性差异，与对照组云南白药组比较有显著性差异。 

2、止血作用： 

用本发明制备的植物提取物复合物(由裸花紫珠提取物：茶黄酮按质量比2∶1混合均匀 而成)设置334、667mg/kg2个剂量组，空白对照组，裸花紫珠提取物组(实施例1的裸花紫珠提取物，下同)、茶黄酮组(实施例2的茶黄酮，下同)，云南白药组。将50只健康昆明小白鼠随机分5组(每组10只、雌雄各半)，连续给药7天，最后一天给药45min后，用剪尾法测定小鼠出血时间(BT)，用毛细玻管法测定凝血时间(CT)，评价药物止血效果。 

试验结果见表2。 

表2：植物提取物复合物的止血活性 

结果表明，与空白对照和阳性对照组比较，本发明的植物提取物复合物高剂量组能够极显著的控制小鼠的凝血时间和出血时间，低剂量组能够控制小鼠的凝血时间和出血时间。裸花紫珠提取物对小鼠的凝血和出血时间有控制作用。茶黄酮提取物只对小鼠的出血时间表现显著的抑制作用。 

3.镇痛作用： 

选取健康的昆明种雄性小鼠60只，随机分成6组，每组10只。各组小白鼠用同一方法重复测量其2次的正常痛阀值，每次间隔15min。分别各组动物每组4个足趾涂予相应受试物0.2g/只，空白对照涂予生理盐水0.2ml/只，涂予受试物后15min、30min、45min，用同一 方法测定小白鼠的镇痛阀值，如小白鼠60s仍无反应，将小白鼠取出，其痛阀值以60s计。植物提取物复合物(由裸花紫珠提取物：茶黄酮按质量比2∶1混合均匀而成)对小白鼠的镇痛作用(热作用)(X±SD，n＝10)。 

试验结果见表3。 

表3：植物提取物复合物的镇痛作用 

讨论：由表3可以看出，本发明的植物提取物复合物高剂量组、低剂量组和双氟酚酸二乙胺乳胶组与给药前比较，均能显著提高小白鼠镇痛阀值。本发明的高剂量组与空白基质组比较，能显著提高小白鼠痛阀值，表明本发明的植物提取物复合物有明显的镇痛作用。 

4.抗炎作用 

对二甲苯致小鼠耳廓急性炎症肿胀的抗炎作用 

选取健康昆明种雄性小鼠60只，随机分成6组，每组10只。实验时，每组每只动物右耳廓内外两面均涂抹二甲苯0.1ml/只至发炎，左耳不做处理作为空白对照组。涂抹二甲苯30min后，每组每只动物右耳廓内外两面分别按剂量均匀涂抹各组受试物样品。给予受试物 1h后，小白鼠颈椎脱臼处死，剪下两耳廓，用生理盐水洗去右耳廓受试物样品，用干棉球擦净，用打孔器在同一部位凿取两圆耳片，右耳片重量减去左耳片重量为肿胀值。 

试验结果见表4。 

表4：植物提取物复合物的抗炎作用 

从表4可以看出，本发明的植物提取物复合物高剂量组和低剂量组与空白对照组比较，均能够显著的抑制二甲苯所致小白鼠耳廓极性炎症肿胀，表明本发明的复合物具有一定的抗炎作用。 

以上实验证明，本发明的植物提取物复合物具有抑菌抗炎、缓解牙龈出血、止痛，除臭，清爽口腔，其活性明显强于裸花紫珠提取物或茶黄酮单一组份，具有增效作用。能用于制备中药牙膏、漱口水和口腔喷雾等。 

实施例1的裸花紫珠提取物和实施例2的茶黄酮按照质量比5∶1，4∶1，3∶1，1∶1，1∶2，1∶3，1∶4和1∶5混合均匀后，得到不同配比的本发明的具有抑菌抗炎、止血、止痛，除臭，清爽口腔的植物提取物复合物，按照上述同样的实验证明，它们也具有抑菌抗炎、缓解牙龈出血、止 痛，除臭，清爽口腔的作用。 

实施例4：植物提取物复合物在制备中药牙膏中的应用 

中药牙膏的组份配比如表5所示： 

表5：中药牙膏的组份 

本发明的中药牙膏基质选自于摩擦剂、保湿剂、增稠剂、胶黏剂、发泡剂、甜味剂、防腐剂、芳香剂、pH调节剂、抗氧化剂、色素、水和其他添加剂。每种添加剂在中药牙膏中的量可在本领域常规范围内变化。 

实施例5：植物提取物复合物在漱口水中的应用 

本发明的漱口水以本发明的植物提取物复合物为主要活性组分，配合消毒剂、清洁剂、 清香剂、甜味剂、稳定剂和去离子水组成，具体为： 

消毒剂为过氧化氢，重量百分比为0.1％-5％，优选0.5％-3％。 

清洁剂为吐温20，山梨醇、十二烷基磺酸钠中的一种或几种，重量百分比为0.5％-10％，优选1％-5％。 

清香剂为水溶性薄荷脑、薄荷精、茶香精中的一种或几种，重量百分比为0.01％-1％，优选0.1％-0.5％。 

去离子水含量为除去其它组分含量，余量为去离子水。 

具体的制备方法为将上述物质按适合比例涡旋混合后加入植物提取物复合物，充分混合搅拌后即得上述漱口水。 

该漱口水可用于预防或治疗口腔溃疡、龋齿和口臭；该漱口水还可用于制备预防或治疗口腔溃疡、龋齿和口臭的药物。 

日常口腔保健可取本品适量，加入清水中漱口，具有清新口气，消除口臭，预防口腔溃疡和龋齿作用；口臭、龋齿、口腔溃疡患者也可直接用其漱口。 

实施例6：本发明的植物提取物复合物在制备口腔喷雾中的应用 

口腔喷雾剂由植物提取物复合物、水溶性薄荷脑、绿茶香精、甜味剂和去离子水组成。 

具体组成比例为水溶性薄荷脑0.3％，绿茶香精0.3％，阿斯巴甜1.0％，乙醇1.0％，木糖醇5.0％，去离子水87.4％，活性植物提取物复合物5.0％。 

具体的制备方法为将上述物质按比例涡旋混合后加入植物提取物复合物，充分混合搅拌后剂得上述口腔喷雾。 

以上为非限制性实施例，各种物质的比例可以根据具体需要做适当调整。 

Claims (5)

1.一种具有抑菌抗炎、止血、止痛的植物提取物复合物，其特征在于，由裸花紫珠提取物和茶黄酮按照质量比1～5∶5～1组成。

2.根据权利要求1所述的植物提取物复合物，其特征在于，所述的具有抑菌抗炎、止血、止痛的植物提取物复合物由裸花紫珠提取物和茶黄酮按照质量2∶1组成。

3.根据权利要求1所述的植物提取物复合物，其特征在于，所述的裸花紫珠提取物通过以下方法制备：将裸花紫珠用水煎煮若干次后，合并煎煮液，煎煮液经浓缩成在70～80℃时的相对密度为1.2的浸膏，浸膏中加入乙醇至乙醇含量为质量百分比60％，混合搅拌后，静置，滤取上清液，调pH值至6～7，滤渣继续用体积分数75％乙醇水溶液浸提，静置，滤取上清液，合并上清液，浓缩去除乙醇后冷冻干燥后得到裸花紫珠提取物。

4.根据权利要求1或2或3所述的植物提取物复合物，其特征在于，所述的茶黄酮是通过以下方法制备：将绿茶粉碎后用体积分数80％乙醇水溶液浸提，过滤，滤液经浓缩得浸膏，在浸膏中加入质量分数10％的氯化钠溶液，静置，过滤去沉淀得滤液，滤液调pH值为4～5，在60℃反应2小时，反应液与乙酸乙酯按体积比1∶1混合萃取，萃取液浓缩冷冻干燥后得到茶黄酮。

5.权利要求1所述的具有抑菌抗炎、止血、止痛的植物提取物复合物在制备牙膏、漱口水或口腔喷雾中的应用。