CN104415057A - 美洲大蠊油脂抗肿瘤的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了美洲大蠊油脂在制备抗肿瘤的药物中的用途。本发明研究发现，美洲大蠊油脂能够有效抑制乳腺癌、直肠癌、肝癌等肿瘤细胞的生长，具有良好的抗肿瘤活性，为临床用药提供了新的选择。

Description

美洲大蠊油脂抗肿瘤的用途
技术领域
本发明涉及一种美洲大蠊油脂及其制备方法和用途。
背景技术
据世界卫生组织(WHO)统计，每年世界有1000万人患上癌症，而死于癌症人数占全球死亡人数的12％。我国每年新增癌症患者180万，死亡140万，而且我国癌症发病率呈急剧上升趋势。在过去不到20年的时间里，我国癌症发病率上升69％，死亡率增长了29.4％。因此，癌症正在严重威胁到世界人民和中国人民的健康。中医药治疗肿瘤，是中国在肿瘤治疗领域的一大特色，且越来越受到重视。但目前很少见到直接用于肿瘤治疗的中成药，这种状况并不表明中医药中没有治疗肿瘤的药物，而是对这类药物的研发重视不够，还有巨大的潜力有待挖掘。
肿瘤细胞一个主要特征就是无限增殖，通过抑制真核生物肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，就可以有效控制肿瘤的增长，达到治疗肿瘤的目的。目前，抑制癌细胞生长和增殖是肿瘤治疗的重要策略。另外，诱导肿瘤细胞发生一种非凋亡的程序性死亡，即Necroptosis，为一种新的治疗肿瘤的途径。但在治疗肿瘤中，是各种途径综合作用结果。
本领域公知地，药物的抗癌机理复杂，目前报道的作用机理有：1、对肿瘤细胞的直接抑制和杀灭作用；2、抑制肿瘤细胞分裂、增殖、诱导分化和(或)诱导肿瘤细胞凋亡；3、逆转耐药性；4、抗微管作用；5、抑制拓扑异构酶；6、增进机体免疫功能；7、抑制肿瘤新生血管；8、其它途径(李忠，等，中医肿瘤学科现状分析与发展思路，中医学报，2010-01-15)。不同的肿瘤细胞，由于其染色体、基因、细胞表面标记等分子水平和病理特征均存在显著差异，针对不同癌细胞，药物产生的功效或机理可能不同，治疗一种癌症的药物，不一定对另一种癌症有效，因此，也就出现了广谱抗肿瘤药(如环磷酰胺)和窄谱抗肿瘤药(如盐酸氮芥)。
美洲大蠊油脂富含脂肪酸及其酯类化合物组成。其中以不饱和脂肪酸酯类化合物含量最高。本发明拟研究美洲大蠊油脂对肿瘤的影响。
发明内容
本发明提供了美洲大蠊油脂的新用途。
具体地，本发明提供了美洲大蠊油脂在制备抗肿瘤的药物中的用途。
进一步地，所述的抗肿瘤药物为抗乳腺癌、直肠癌或肝癌的药物。
优选地，所述的抗肿瘤药物为抗乳腺癌或直肠癌的药物。
其中，所述美洲大蠊油脂中含有12％～18％w/w十八碳烯酸、8％～12％w/w十八碳二烯酸、10％～13％w/w十六烷酸。
进一步地，所述美洲大蠊油脂由如下方法制备：
方法(1)：取干燥美洲大蠊，粉碎后，采用乙醇提取，合并提取液，减压浓缩，浓缩液再采用有机溶剂萃取，取萃取液，回收溶剂，即得美洲大蠊油脂；
方法(2)：取干燥美洲大蠊，粉碎后，采用CO2超临界流体萃取，收集油脂，即得；
方法(3)：取干燥美洲大蠊，粉碎后，采用蒸汽熔炼法提取美洲大蠊油脂，即得。
更进一步地，方法(1)中，乙醇浓度为70％～90％v/v，有机溶剂为正己烷、石油醚、丙酮等中的任一种或两种以上的组合。
本发明还提供了一种美洲大蠊油脂的注射液，它含有美洲大蠊油脂、渗透压调节剂、助溶剂。
进一步地，所述渗透压调节剂选自氯化钠、葡萄糖或甘露醇；所述助溶剂选自吐温、司盘或丙二醇。
更进一步地，每1000ml注射液中含有0.8～3g美洲大蠊油脂，5g氯化钠，3～7g聚山梨酯-80，余量为注射用水。
本发明还提供了一种制备上述美洲大蠊油脂注射液的制备方法，它包括如下步骤：
取美洲大蠊油脂，加入氯化钠、聚山梨酯-80，混匀，加注射用水，滤过，灌封，灭菌即得。
本发明还提供了一种美洲大蠊油脂的软胶囊，它含有美洲大蠊油脂和植物油。
进一步地，所述植物油为大豆油。
更进一步地，所述软胶囊剂内容物包含0.8～3重量份美洲大蠊油脂，500～700重量份的大豆油。
本发明还提供了制备上述美洲大蠊油脂软胶囊的方法，它包括如下步骤：
取美洲大蠊油脂，加入大豆油，混匀，压制软胶囊，干燥，即得。
本发明研究发现，美洲大蠊油脂能够有效抑制乳腺癌、直肠癌、肝癌等肿瘤细胞的生长，具有良好的抗肿瘤活性，为临床用药提供了新的选择。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
实施例1本发明美洲大蠊油脂的制备
(1)样品一：取干燥美洲大蠊全虫500g，经粉碎后采用70％～90％的乙醇热回流提取，合并后减压浓缩至小体积，再采用正己烷、石油醚、丙酮中任一溶剂进行萃取，将萃取物在室温下浓缩干，得到提取物一。
(2)样品二：取干燥美洲大蠊全虫500g，经粉碎后采用CO2超临界流体萃取，采用适当方法精制后得到提取物二。
(3)样品三：取干燥美洲大蠊全虫500g，经粉碎后采用蒸汽熔炼法提取美洲大蠊油脂，采用适当方法精制后得到提取物三。实验说明本发明制备的促伸进修复材料的修复作用强，稳定性好，安全性高，且制备方法简单，具有良好的工业应用前景。
采用GC-MS法对以上三种美洲大蠊油脂样品进行成分分析，结果发现，美洲大蠊油脂中脂肪酸为主。美洲大蠊油脂所含的脂肪酸中，含量较高的不饱和脂肪酸有：十八碳烯酸，十八碳二烯酸；含量较高的饱和脂肪酸有：十六烷酸。三份油脂样品中十八碳烯酸含量分别为：12.97％、17.66％、14.23％；十八碳二烯酸含量分别为：8.06％、11.23％、9.17％；十六烷酸含量分别为：10.12％、12.34％、11.35％。
实施例2本发明美洲大蠊油脂注射液的制备
【处方】原料：美洲大蠊油脂800～3000mg；辅料：氯化钠5g、聚山梨酯-805g；加注射用水至1000ml。
【制备方法】取美洲大蠊油脂，加入氯化钠、聚山梨酯-80，混匀，加注射用水至1000ml，滤过，灌封于2ml安剖瓶中，灭菌30分钟即得。
实施例3本发明美洲大蠊油脂软胶囊的制备
【处方】原料：美洲大蠊油脂800～3000mg；辅料：大豆油600g；制成1000粒软胶囊。
【制备方法】取美洲大蠊油脂，加入大豆油，混匀，压制成l000粒软胶囊，转笼定型，洗丸，干燥，即得。
以下通过试验例具体说明本发明的有益效果。
试验例1本发明美洲大蠊油脂抗癌活性的测定
方法：分别取对数生长期的MDA-MB-468乳腺癌细胞、H22肝癌细胞、CT26直肠癌细胞，用0.25％胰酶进行消化后，制成单细胞悬液，用培养液调整细胞浓度为5×104/ml，接种于96孔板，每孔200μL单细胞悬液(104个/孔)于5％CO2，37℃培养箱中培养24h。实验组为分别加入终浓度为0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.8mg/ml、l.6mg/ml的美洲大蠊油脂，每个浓度组含有12个复孔，同时设加入不含美洲大蠊油脂的完全培养基的对照孔，含有12个复孔。
分别于药物干预48h后，轻轻吸弃上清液，加入无血清DMEM高糖培养液每孔200μL，及MTT液每孔20μL(5g/L)于5％CO2，37℃恒温培养箱中继续培养4h。轻轻弃去上清液，各孔加入200μL二甲基亚砜(DMSO)，待结晶物完全溶解，立即用酶联免疫检测仪，测定各孔吸光度值(OD值)，波长为570nm；取12孔的平均值。
细胞增殖平均抑制率计算。其公式为：细胞增殖平均抑制率＝1-(实验组A570值/对照组A570值)/12×100％
实验结果：见表1。
表1美洲大蠊油脂对3种癌细胞增值抑制率
与对照组比较，**P<0.01。
由表1可知，美洲大蠊油脂三种样品对三种癌细胞均有极显著的抑制作用(P<0.01)。
综上可知：
(1)美洲大蠊油脂中以脂肪酸类物质为主，其中十八碳烯酸含量为：12.97％～17.66％w/w；十八碳二烯酸含量分别为：8.06％～11.23％w/w；十六烷酸含量分别为：10.12％～12.34％w/w。
(2)美洲大蠊油脂对MDA-MB-468乳腺癌细胞、H22肝癌细胞、CT26直肠癌细胞均有显著抑制作用。

Claims (10)

1.美洲大蠊油脂在制备抗肿瘤的药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的抗肿瘤药物为抗乳腺癌、直肠癌或肝癌的药物。
3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于：所述美洲大蠊油脂中含有12％～18％w/w十八碳烯酸、8％～12％w/w十八碳二烯酸、10％～13％w/w十六烷酸。
4.根据权利要求1～3任意一项所述的用途，其特征在于：所述美洲大蠊油脂由如下方法制备：
方法(1)：取干燥美洲大蠊，粉碎后，采用乙醇提取，合并提取液，减压浓缩，浓缩液再采用有机溶剂萃取，取萃取液，回收溶剂，即得美洲大蠊油脂；
方法(2)：取干燥美洲大蠊，粉碎后，采用CO2超临界流体萃取，收集油脂，即得；
方法(3)：取干燥美洲大蠊，粉碎后，采用蒸汽熔炼法提取美洲大蠊油脂，即得。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于：方法(1)中，乙醇浓度为70％～90％v/v，有机溶剂为正己烷、石油醚、丙酮等中的任一种或两种以上的组合。
6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物为注射液，它含有美洲大蠊油脂、渗透压调节剂、助溶剂；或者，所述药物为软胶囊，它含有美洲大蠊油脂和植物油。
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述渗透压调节剂选自氯化钠、葡萄糖或甘露醇；所述助溶剂选自吐温、司盘或丙二醇。
8.根据权利要求6或7所述的注射液，其特征在于每1000ml注射液中含有0.8～3g美洲大蠊油脂，5g氯化钠，3～7g聚山梨酯-80，余量为注射用水。
9.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述植物油为大豆油。
10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于：所述软胶囊剂内容物包含0.8～3重量份美洲大蠊油脂，500～700重量份的大豆油。
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