CN103918800B - 文冠果油在制备抗疲劳调和油中的应用 - Google Patents
文冠果油在制备抗疲劳调和油中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种文冠果油在制备抗疲劳调和油中的应用,通过实验确定该文冠果油的二氧化碳超临界萃取最佳条件为:压力30Mpa、温度为50℃、萃取时间为120min。以文冠果油为主料,花生油、大豆油、橄榄油、菜籽油或者玉米油中的一种或多种为辅料按照一定比例所制成的调和油,不仅色泽透亮,香气浓郁,而且具有很好的保健价值。本实验中,确定以文冠果油与玉米油为原料,二者的比例优选为1∶1-1∶10;进一步优选为1∶8。通过动物实验对本文冠果油的保健功能进行验证,发现本文冠果油具有抗疲劳、抗氧化的作用。
Description
技术领域
本发明涉及到文冠果油在制备抗疲劳调和油中的应用,属功能性食品加工制造领域。
背景技术
过度疲劳是指由于工作时间过长、劳动强度过大、心理压力过重导致精疲力竭的亚健康状态。它最大的隐患是引起身体潜藏的疾病急速恶化,比如导致高血压等基础疾病恶化引发脑血管病或者心血管病等急性循环器官障碍,甚至出现致命的症状。这种长期慢性疲劳后诱发的猝死也就是“过劳死”。一个人经常加班、熬夜、休息不好,时间长了就会导致焦虑、失眠、记忆力减退、精神抑郁,甚至引发抑郁症和精神分裂症。如果这种疲劳持续6个月或更长时间,身体就可能会出现低烧、咽喉肿痛、注意力下降、记忆力减退等症状。而且,非常严重的长期性疲劳很可能就是其他病症的先兆。
文冠果,古代又名文官果,文官花,现名文冠果,属无患子科落叶灌木或乔木。学名:Xamlhocerassorbihola.Bge.是我国北方特有的木本油料作物,主要分布于内蒙古、山西、陕西,在甘肃、宁夏、山东、河北、沈阳也均有分布。原产于中国,现在也被世界各国引进。文冠果适应性极强,抗寒、抗旱、耐贫瘠能力强文冠果油是半干性油,色泽黄,气味芳香可口,酸价低、碘价高,是一种透明质高、杂质少、宜长期储存的上好食用油,在国际市场上享有很高的声誉。据了解,加工文冠果油的文冠果种子含油率为30%-36%,种仁含油率为55%-66%,最高可达70%。油中不饱和脂肪酸含量高达94%,其中亚油酸36.9%、油酸7.16%。不饱和脂肪酸具有调节血脂、清理血栓、免疫调节、维护视网膜提高视力、补脑健脑、改善关节炎症状减轻疼痛等作用。文冠果具有防治心血管疾病和炎症的发生,预防和改善动脉硬化、减少心脏病的发生、提高免疫力、防治糖尿病等作用。
未见临床报道文冠果油具有抗疲劳,抗氧化的功能。
发明内容
本发明的目的是提供一种文冠果油的新用途,即文冠果油在制备抗氧化调和油中的应用。
本发明新用途中所使用的文冠果油可以通过各种不同的方式制备得到,比如:溶剂萃取、水酶法提取、超声波辅助萃取、微波辅助萃取、冷榨法提取、超临界二氧化碳萃取等,优选为超临界二氧化碳萃取。
上述超临界二氧化碳萃取文冠果油的方法优选的萃取条件为:压力30-40Mpa、温度为30-50℃、萃取时间为90-150分钟;
进一步优选为:压力30Mpa、温度为50℃、萃取时间为120分钟。
本发明新用途中,制备调和油的主要油料为文冠果油,辅油料为花生油、大豆油、橄榄油、菜籽油或者玉米油中的一种或多种;辅油料优选为玉米油;文冠果油与玉米油二者的比例优选为1∶1-1∶10;进一步优选为1∶8。
疲劳会对人体有一定的影响,特别是体内一些氧化应激的因子如丙二醛(MDA)、过氧化物歧化酶(SOD)、乳酸(LD)、谷胱甘肽还原酶(GR)、肝糖、尿素氮(BUN)等指标会发生一些改变,对这些指标的改善成为抗氧化,因此,本发明新用途,优选为文冠果油在制备抗疲劳调和油中的应用。
为了证实文冠果油抗疲劳抗氧化的功能,发明人进行了如下实验:
1、实验材料
1.1供试品
名称:文冠果油样品;
提供单位:北京农学院;
性状:黄色油状液体;
溶解性:不溶于水;
保存条件:阴凉、遮光、密封
配制方法:高剂量直接应用原油,中、低剂量组用色拉油稀释配制,用时搅拌器混匀。密封,4℃冰箱贮藏。用于灌胃给药,用时充分摇匀,每次给药剩余药液废弃。
1.2阳性对照药
香菇多糖片:浙江普洛康裕天然药物有限公司。批号:101002,规格:0.1g/片,36片/板,1板/袋。临床给药方式为口服,一次2~5片,每日2次。临床应用于益气健脾,补虚扶正。产品批准文号:国药准字Z20026215,保质期:24个月。配制方法:用研钵研成粉末,蒸馏水配制,用时搅拌器混匀。密封,4℃冰箱贮藏。用于灌胃给药,用时充分摇匀,每次给药剩余药液废弃。
1.3试剂
丙二醛试剂盒(MDA):南京建成生物工程研究所产品,批号:20110802;过氧化物歧化酶试剂盒(SOD):南京建成生物工程研究所产品,批号:20110729;乳酸试剂盒(LD):南京建成生物工程研究所产品,批号:20110721;谷胱甘肽还原酶试剂盒(GR):南京建成生物工程研究所产品,批号:20110729;肝糖试剂盒:南京建成生物工程研究所产品,批号:20110803;尿素氮测定试剂盒(BUN):上海荣盛生物药业有限公司产品,批号:20101001;以上试剂4℃冰箱贮藏,用于测定血清及肝脏样品。
生理盐水:山东康宁药业有限公司,批号:E10110809,生产日期:2010/11/08,有效期至:2012/05/07,常温密封贮藏,作为配制试剂盒所需溶液的溶剂直接应用。
1.4实验仪器
UV-1601PC型可见紫外分光光度计:日本Shimadzu公司产品;
雷杜Chemray360全自动生化分析仪:深圳雷杜生命科学股份有限公司产品;
HD型单列恒温水浴锅,辽阳市恒温仪器厂制造;
常规解剖器材;
微量加样器、塑料吸头、量筒
1.5实验动物
种系:ICR小鼠,SPF级;
性别、数量:雄性,90只
体重、周龄范围:起始体重17.9±1.0g,6w,给药时体重22.9±1.2g,6~7w。
来源:购于北京维通利华实验动物技术有限公司
等级:SPF级
动物生产许可证号:SCXK(京)2006-0009
发证单位:北京市科学技术委员会
饲养环境条件:屏障环境系统:应用于SPF级小鼠饲养;使用许可证号:SYXK(京)2008-0024;温湿度:温度20~25℃,相对湿度40~70%;换气次数:10~20次/小时;照明时间:每日12h/12h交替照明;清扫及消毒:试验期间每日消毒地面、台面和墙面,消毒剂为新洁而灭、来苏尔、乙醇交替使用。
饲料:鼠维持颗粒饲料,符合GB14924.3-2001标准,购于北京科澳协力饲料有限公司,生产许可证号:SCXK(京)2009-0012,经高温高压蒸汽灭菌后使用,自由摄取。
饮用水种类:普通环境系统使用自来水,屏障环境系统SPF级动物饮用前高压蒸汽灭菌水。供水方法:均由动物饮水瓶自由摄取。
2、试验方法
2.1动物分组及识别
标记方法为苦味酸染色法,结合组别编号、性别、笼具编号与个体编号,对全部动物进行编号,动物编号顺序为“组别号+性别(雄)+笼号+个体编号”。具体组别编号、性别、笼具编号和个体编号见表1。
试验笼子的标记方法:分组后,用不同颜色笼卡进行组别区分,并注明专题名称、动物品系、等级组别、数量、笼号、性别、动物号、负责者、试验者、试验日期等信息。
表1小鼠负重游泳实验的分组标记
2.2给药途径
依据临床拟给药途径,均采取灌胃给药方式。
2.3剂量设计
受试物:文冠果油,以原油含量计,设定低2.5ml/kg.bw/d、中5.0ml/kg.bw/d、高10ml/kg.bw/d三个剂量组。
香菇多糖:临床给药方式为口服,确定小鼠口服剂量约为300mg/kg.bw/d。
2.4操作步骤
用上述合格ICR小鼠90只,体重18~22g,雄性,按体重随机分为5组,每组12只:空白对照组、阳性对照组(香菇多糖片300mg/kg)、文冠果油高、中、低剂量组(以原油含量计为2.5、5.0、10ml/kg.bw/d)。各给药组分别灌胃给予相应药物,对照组给等量色拉油10ml/kg.bw/d,每天灌胃给药一次,连续28d。
连续给药28d后,于末次给药1h后进行试验,在小鼠尾部负重5%的铅皮,投入水温为27±0.5℃,水深40cm的游泳箱中游泳,以头部沉入水中不能游出水面为体力耗竭(头部沉入水底10s为止),观察记录从投入水中至体力耗竭的时间为游泳时间。以上小鼠游泳后取出,眼球采血,血凝固后2000rpm/min离心15min,取血清冻存,并取肝脏,每只取三份并秤重(按照糖原含量、MDA、SOD三个试剂盒说明书不同要求秤肝脏重量),放在事前准备好的管内冻存。
测定指标:用血清测BUN、LD、GR;用肝脏测肝糖原含量、MDA、SOD。其中血清BUN用全自动生化分析仪检测,其他指标用试剂盒测定,按说明书测吸光度OD值后,再按照说明书来计算各指标。
2.5数据统计处理方法
将各给药组数据计算采用孙瑞元、郑青山等主编的DAS软件,进行统计分析,与溶媒组比较的t检验,判定显著性差异。
3、试验结果
由表2可知,与空白对照组比较,文冠果油高、中、低剂量组小鼠负重游泳时间均比对照组显著延长(P<0.05、P<0.05、P<0.05),同样试验条件下,阳性对照药物香菇多糖片300mg/kg非常显著延长(P<0.01),表明文冠果油样品可提高小鼠耐疲劳能力;
由表4,5,6,7可知,与空白对照组比较,文冠果油显著升高小鼠运动后
肝脏组织中肝糖原含量(P<0.05)、显著升高肝脏组织SOD活性(P<0.05)、显著升高血清中GR活性(P<0.05),显著升高血清中BUN,显著降低血清中LD,显著降低肝脏组织MDA含量(P<0.05),同样试验条件下,阳性对照药物香菇多糖片300mg/kg也显著升高小鼠运动后肝脏组织中肝糖原含量(P<0.01)、显著升高血清中GR活性(P<0.05),显著降低血清中LD,显著降低肝脏组织MDA含量(P<0.05),表明文冠果油与香菇多糖相近,均能提高运动小鼠的抗氧化能力和抗疲劳能力,减少体内产生的损伤因子对机体的损伤。
表2文冠果油对小鼠负重游泳时间的影响
与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
表3文冠果油对小鼠运动后肝糖原含量的影响
与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
表4文冠果油对小鼠运动后血清LD含量的影响
与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
表5文冠果油对小鼠运动后血清BUN含量的影响
与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
表6文冠果油对小鼠运动后血清GR含量的影响
与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
表7文冠果油对小鼠运动后肝脏组织中MDA和SOD活性的影响
与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
4、实验结论
文冠果油能提高运动小鼠的抗氧化能力和抗疲劳能力,减少体内产生的损伤因子对机体的损伤。
该文冠果油能降低运动后动物体内乳酸及MDA的含量,延长负重游泳时间、提高运动后谷胱甘肽-还原酶、肝糖原含量,说明其有一定的抗疲劳和抗氧化作用。
目前,从植物种子中提取油脂的方法有溶剂回流提取法、冷浸法、热榨法、超临界二氧化碳流体萃取法、超声波萃取法等。但从提取效率、产物纯度、溶剂残留问题等角度综合考虑,超临界二氧化碳流体萃取技术具有操作方便、能耗低、提取效率高、产品纯度高等优点,已经应用于生物医药、食品等领域,尤其在油脂提取中得到较好的应用。
为了得到超临界二氧化碳流体萃取文冠果油的最佳工艺条件,发明人进行了如下实验:
1、试验材料及仪器
1.1实验材料
文冠果种子:由北京金桐福绿色能源科技有限公司提供。
1.2试验仪器
超临界二氧化碳萃取仪:美国AppliedSeparations公司,二氧化碳食用级99.999%:北温气体制造厂,电子精密天平。上海第二天平仪器厂;高速万能粉碎机FW100型:天津市泰斯特仪器有限公司;DH-101电热恒温鼓风干燥箱:天津市中环实验电炉有限公司。
2、试验方法
取清理去壳后的文冠果种仁,在105℃的干燥箱中烘烤2h,室温冷却后用高速万能粉碎机粉碎,然后过0.2mm筛,备用。
将一定量的文冠果种仁粉末倒入萃取釜中,调节系统的时间、温度、压力在设定的条件下,静态萃取30min后,保持二氧化碳流速3.0L/min,达到设定时间后,从出料口收集产物并计算萃取得率。
萃取得率=得油量/文冠果种仁粉末量×100%
2.1单因素实验
2.1.1单因素实验条件
除单因素条件变化外,其他条件统一不变,称取10g文冠果种仁粉末倒入萃取釜中,静态萃取30min后,保持二氧化碳流速3.0L/min,出口温度为50℃。
(1)萃取时间t=90min,萃取温度T=40℃为定量,萃取压力为不定变量,P=25MPa、30MPa、35MPa、40MPa、45MPa。
(2)萃取压力P=35MPa,萃取时间t=90min为定量,萃取温度为不定变量,T=30℃、40℃、50℃、60℃。
(3)萃取压力P=35MPa,萃取温度T=40℃为定量,萃取时间为不定变量,t=60min、90min、120min、150min、180min。
2.2正交试验条件
综合各方面的考虑,根据预实验的结果,选择萃取压力(A)、温度(B)、时间(C)为考察因素,每个因素取三个水平,文冠果油萃取率为考察指标,选用L9(34)正交表进行正交设计,静态萃取30min后,保持二氧化碳流速3.0L/min,出口温度为50℃。
表8因素水平表
3结果与讨论
3.1单因素实验结果
(1)萃取时间t=90min,萃取温度T=40℃为定量,萃取压力为不定变量,可见压力为35MPa时,文冠果油的得率最高。
(2)萃取压力P=35MPa,萃取时间t=90min为定量,萃取温度为不定变量,萃取温度为40摄氏度时,文冠果油的得率最高。
(3)萃取压力P=35MPa,萃取温度T=40℃为定量,萃取时间为不定变量,萃取时间为180分钟时,文冠果油的得率最高。
4.2正交实验结果
表9L9(34)正交实验结果
根据超临界萃取得率的考察结果可知,以超临界萃取得率为指标,有极差(R)A>C>D>B,从方差分析结果可知,A(萃取压力)C(萃取时间)在实验中为显著,B(萃取温度)在所考察的因素中不显著,相对影响最小。由直观分析可看出最终最佳的工艺条件为A3B3C2,即压强30MPa,温度50℃,时间120min。
在最佳工艺条件下,对另一批样品进行萃取,平均得率是31.6%,证明该工艺稳定。超临界二氧化碳萃取文冠果油其酸价、过氧化值、不溶性杂质、水分和挥发物质含量均符合国标GB2716《食用植物油卫生标准》和GB2760《食品添加剂使用卫生标准》从外观色泽上优于冷榨、溶剂萃取等方法制备的文冠果油。
具体实施方式
下述实施例用于举例说明本发明抗疲劳调和油的制备,但其不能对本发明的范围构成任何限制,同时为了证实本发明超临界二氧化碳萃取得到的文冠果油与冷榨法得到的文冠果油制成的调和油的区别,在每个实施例中同法配制两份分别使用超临界二氧化碳萃取得到的文冠果油与冷榨法得到的文冠果油,在色泽、口感、气味等方面分别评分进行对比。
实施例1
主辅油料配比:
文冠果油10公斤、花生油2公斤;
制备方法:
将两种油混合搅拌30分钟即得;
质量评价:
文冠果油来源 | 色泽 | 口感 | 气味 |
超临界二氧化碳萃取 | 8 | 7 | 7 |
冷榨法 | 6 | 6 | 7 |
实施例2
主辅油料配比:
文冠果油10公斤、葵花籽油2公斤;
制备方法:
将两种油混合搅拌30分钟即得;
质量评价:
文冠果油来源 | 色泽 | 口感 | 气味 |
超临界二氧化碳萃取 | 8 | 7 | 6 |
冷榨法 | 7 | 7 | 6 |
实施例3
主辅油料配比:
文冠果油10公斤、大豆油2公斤;
制备方法:
将两种油混合搅拌30分钟即得;
质量评价:
文冠果油来源 | 色泽 | 口感 | 气味 |
超临界二氧化碳萃取 | 7 | 6 | 7 |
冷榨法 | 6 | 5 | 5 |
实施例4
主辅油料配比:
文冠果油10公斤、玉米油2公斤;
制备方法:
将两种油混合搅拌30分钟即得;
质量评价:
文冠果油来源 | 色泽 | 口感 | 气味 |
超临界二氧化碳萃取 | 9 | 8 | 8 |
冷榨法 | 8 | 7 | 6 |
实施例5
主辅油料配比:
文冠果油10公斤、橄榄油2公斤;
制备方法:
将两种油混合搅拌30分钟即得;
质量评价:
文冠果油来源 | 色泽 | 口感 | 气味 |
超临界二氧化碳萃取 | 8 | 7 | 8 |
冷榨法 | 7 | 6 | 8 |
实施例6
主辅油料配比:
文冠果油10公斤、山茶油2公斤;
制备方法:
将两种油混合搅拌30分钟即得;
质量评价:
文冠果油来源 | 色泽 | 口感 | 气味 |
超临界二氧化碳萃取 | 8 | 6 | 7 |
冷榨法 | 7 | 8 | 5 |
实施例7
主辅油料配比:
文冠果油10公斤、芝麻油2公斤;
制备方法:
将两种油混合搅拌30分钟即得;
质量评价:
文冠果油来源 | 色泽 | 口感 | 气味 |
超临界二氧化碳萃取 | 8 | 8 | 8 |
冷榨法 | 7 | 8 | 7 |
实施例8
主辅油料配比:
文冠果油10公斤、玉米油10公斤;
制备方法:
将两种油混合搅拌30分钟即得;
质量评价:
文冠果油来源 | 色泽 | 口感 | 气味 |
超临界二氧化碳萃取 | 8 | 8 | 8 |
冷榨法 | 7 | 7 | 7 |
实施例9
主辅油料配比:
文冠果油10公斤、玉米油30公斤;
制备方法:
将两种油混合搅拌30分钟即得;
质量评价:
文冠果油来源 | 色泽 | 口感 | 气味 |
超临界二氧化碳萃取 | 8 | 9 | 8 |
冷榨法 | 8 | 7 | 8 |
实施例10
主辅油料配比:
文冠果油10公斤、玉米油50公斤;
制备方法:
将两种油混合搅拌30分钟即得;
质量评价:
文冠果油来源 | 色泽 | 口感 | 气味 |
超临界二氧化碳萃取 | 9 | 9 | 8 |
冷榨法 | 8 | 7 | 8 |
实施例11
主辅油料配比:
文冠果油10公斤、玉米油80公斤;
制备方法:
将两种油混合搅拌30分钟即得;
质量评价:
文冠果油来源 | 色泽 | 口感 | 气味 |
超临界二氧化碳萃取 | 10 | 10 | 10 |
冷榨法 | 9 | 9 | 9 |
实施例12
主辅油料配比:
文冠果油10公斤、玉米油100公斤;
制备方法:
将两种油混合搅拌30分钟即得;
质量评价:
文冠果油来源 | 色泽 | 口感 | 气味 |
超临界二氧化碳萃取 | 10 | 9 | 9 |
冷榨法 | 9 | 8 | 8 |
Claims (9)
1.文冠果油在制备抗疲劳调和油中的应用。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述文冠果油是由文冠果种子经二氧化碳超临界萃取制成的。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述二氧化碳超临界萃取条件为:压力30-40Mpa、温度为30-50℃、萃取时间为90-150分钟。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述二氧化碳超临界萃取条件为:压力30Mpa、温度为50℃、萃取时间为120分钟。
5.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述抗疲劳调和油的主要油料为文冠果油,辅油料为花生油、大豆油、橄榄油、菜籽油或者玉米油中的一种或多种。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述抗疲劳调和油的主要油料为文冠果油,辅油料为玉米油。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述抗疲劳调和油的主要油料为文冠果油,辅油料为玉米油,二者比例为1∶1-1∶10。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于所述抗疲劳调和油的主要油料为文冠果油,辅油料为玉米油,二者比例为1∶8。
9.文冠果油在制备抗疲劳调和油中的应用,该调和油还具有抗氧化功效。
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