CN104407142A - 一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒 - Google Patents
一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104407142A CN104407142A CN201410698135.XA CN201410698135A CN104407142A CN 104407142 A CN104407142 A CN 104407142A CN 201410698135 A CN201410698135 A CN 201410698135A CN 104407142 A CN104407142 A CN 104407142A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hcv
- cag
- sample
- solution
- substrate solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/576—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis
- G01N33/5767—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis non-A, non-B hepatitis
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Virology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒。它主要包括酶标板、抗HCV-cAg酶结合物、HCV-cAg标准品梯度溶液、阳性血清对照指示样本、阴性血清对照指示样本、HCV-cAg样品稀释液、底物液A、底物液B、终止液、20×浓缩洗涤液。本发明制得的试剂盒灵敏度高、精密度好、特异性强。
Description
技术领域
本发明涉及病毒抗原检测试剂盒,尤其涉及一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-core Ag)酶联免疫检测试剂盒。
背景技术
丙型病毒性肝炎,简称为丙型肝炎、丙肝,是一种由丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus, HCV)感染引起的病毒性肝炎,丙型肝炎呈全球性流行,可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化,部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌(HCC)。一些数据显示,未来20年内与HCV感染相关的死亡率(肝衰竭及肝细胞癌导致的死亡)将继续增加,对患者的健康和生命危害极大目前,慢性丙肝除了干扰素有确切的疗效外,尚没有其它有效的治疗方法,而且疫苗的研制在短期内难有突破性的进展,因此,早发现、早诊断、早治疗对于丙肝患者有十分重要的意义。
丙型病毒性肝炎的诊断根据病程可分为急性和慢性丙型肝炎。根据临床症状可分为轻、中、重度丙型肝炎。肝硬化和肝癌是HCV感染的最严重后果。与其它病毒( HBV、HIV) 的重叠、合并感染统称为混合感染。肝脏移植后HCV感染可以复发。丙型病毒性肝炎毒血症6个月以上为慢性感染,自然转阴率低慢性率高75%~80%。感染l0~20年,至少20%患者发展为肝硬化。l0年生存率仅为25%~ 80%。肝癌发生率3年后为 l%~3%。
在生化学检测中,丙氨酸氨基转移酶(ALT ) 和天门冬氨酸氨基转移酶( AST )可反映肝细胞损害程度,但 ALT和AST与炎性分布和病情的严重程度不一定成正比。ALT下降表示抗病毒治疗有效,凝血酶原时间为作为慢性丙型肝炎患者病情进展的监测指标。但是这种方法只能作为判定丙肝的一项辅助性的依据,特异性不强,无法准确的检测出肝炎。
HCV核心抗原的检测是一种新型的检测方法,研究始于上世纪九十年代中期,应用最广泛的是酶免疫方法。美国 0rtho公司首先推出了双抗体夹心法定性和定量检测血清样品中总的或游离的HCV核心抗原ELISA试剂盒,于2004年已经在欧洲上市。近年来在我国陆续出现,但是HCV核心抗原的酶联免疫法灵敏度不高, 因此其推广使用也受到局限。所以发明一种既操作简便又灵敏度高的试剂盒具有非常重要的临床意义。
发明内容
针对现有的丙型肝炎抗原酶联免疫检测试剂盒灵敏度不高,特异性不够强等问题的,本发明提供了一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒。
本发明采用以下技术方案:
一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒,它主要包括酶标板、抗HCV-cAg酶结合物、HCV-cAg标准品梯度溶液、阳性血清对照指示样本、阴性血清对照指示样本、HCV-cAg样品稀释液、底物液A、底物液B、终止液、20×浓缩洗涤液,其特征在于:所述HCV-cAg样品稀释液的配方及制法是:
将羊血清100ml、氯化钠10g、硫柳汞10g、亚铁氰化钾42.24g、聚氧乙烯月桂醚10g、 庆大霉素10g加入到0.1M pH=7.4的Tris-HCl缓冲液中至1L,物质充分溶解后过滤除菌,2-8℃保存。
0.1M pH 7.4的Tris-HCL的缓冲液的配置方法为:使将12.11gTris溶于1L去离子水中,使用盐酸将溶液的pH值调整到7.4即得。
所述20×浓缩洗涤液的配方及制法是:将2.96g NaH2PO4 ·2H2O、29g Na2HPO4 ·12H2O、10g氯化钠、10g十二烷基硫酸三乙醇胺加入到去离子水中至1L,充分溶解后,过滤除菌,2-8℃保存。
所述阴、阳性血清对照指示样本均来源于人员基质血清,对所捐献者的血清进行灭活处理。
所述底物液A是通过下述方法制备的:将12.11gTris、1g铁氰化钾、5g焦磷酸钠和1mL30%双氧水依次溶于1L蒸馏水中,混合均匀;
所述底物液B是通过下述方法制备的:将5 g TMB溶解到10 mL二甲基亚砜中,再将其混合液加入蒸馏水中至1L,最后依次加入2.96g NaH2PO4 ·2H2O和29g Na2HPO4·12H2O溶解完成制备。
所述酶标板为各孔包被有4μg/ml的包被抗体Mab1和Mab2的聚苯乙烯96圆孔酶标板;
抗体在96孔酶标板上的包被方式:将提纯好的 Mab1和Mab2用pH5.0酒石酸缓冲液分别稀释至 4μg/mL和4μg/mL浓度,每孔加100μL于检测板孔内,在2-8℃环境下放置12小时,弃去包被液,用洗涤液清洗5-8次,然后轻轻用手拍干上面的液体。然后加入牛血清白蛋白封闭液100μL/孔,2-8℃封闭10-12小时,随后将封闭液弃去,室温干燥3-5小时,等到酶标板干燥后,使用真空封口包装,并将封装好的板存于2-8℃冰箱中,保存备用。
所述抗HCV-cAg酶结合物为辣根过氧化酶标记的羊抗人的Mab3和Mab4抗体;
所述的包被抗体Mab1、Mab2、Mab3、Mab4都是采用单克隆技术提取的高纯度抗体。
所述HCV-cAg标准品梯度溶液分为5个浓度,分别为40ng/m L、20ng/m L、10ng/m L、5ng/m L、80pg/mL。
所述终止液为2ml浓盐酸和2ml浓硫酸。
本发明的试剂盒的使用方法如下:
(1) 平衡:样品及检测试剂盒内的试剂,于18-25℃平衡30分钟;
(2) 配液:将试剂盒中配套的20×浓缩洗涤液用去离子水稀释20倍,量取300mL,制成工作所需浓度洗涤液,为下面洗板做好准备;
(3) 样品预处理:预处理板上每孔按1: 2的比例加入样本稀释液和样品,45-60℃振荡孵育60分钟,待用;
(4) 加样:取96孔酶标板,预设置空白、阴性、阳性对照各3孔, 空白对照每孔加入100μl样品稀释液,其余孔每孔中先加入50μl样品稀释液,然后阴、阳性对照孔每孔加入50μl相应对照血清,剩余孔样品检测孔,将经上述预处理的各待测样品按设定每孔中加入50μl,这样每个孔中都有100 μl的液体,加样完毕后用不干胶封片封盖反应板,37℃振荡孵育60分钟;
(5) 洗板:倒去板孔中的液体,并用吸水纸吸干上面的液体;用工作浓度洗涤液洗板5-6次,最后拍干;
(6) 加抗HCV-cAg酶结合物:每孔中加入75IU抗HCV-cAg酶结合物,用不干胶封片封盖反应板,37℃孵育30分钟;
(7) 洗板:同步骤(5);
(8) 显色:每孔中先后加入底物液A、底物液B各50μl,避光显色至少2分钟;
(9) 测定:显色反应后,将酶标板置酶免疫上测出各孔的吸光度变化;
(10) 以阴性对照吸光度变化(RLU)的平均值+2270为临界值(CUTOFF);待检样品的 RLU值>临界值(CUTOFF)为阳性,待测样品RLU值<临界值(CUTOFF)为阴性为判定标准进行判定。
与现有技术相比,本发明具有以下突出优点:
1、本发明在样本稀释液中选取了亚铁氰化钾替换原有的铁氰化钾,能够保护体系中其他成分,延缓被氧化的速度,提高了试剂的稳定性;
2、在整个反应体系中,本发明在样本稀释液体中加入了聚氧乙烯月桂醚,它能够使体系具有更好的溶解分散性、稳定性,有利于提高检测试剂盒的分析灵敏度;
3、本发明在20×浓缩洗涤液中选取表面活性剂十二烷基硫酸三乙醇胺代替常用的曲拉通-100和吐温系列,使洗涤液具有更优异的洗涤和发泡性,更好的除去酶标板上的干扰性杂质,有利于增强试剂盒的特异性及分析灵敏度。
具体实施方式
实施例1
试剂盒的组成及制备方法
一种丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒包括:
96孔抗HCV-cAg单克隆抗体包被板1块、抗HCV-cAg酶结合物、标准品5瓶、阴、阳性对照各一份、HCV-cAg样品稀释液、底物液A、底物液B、终止液、洗涤液(20×浓缩液)各1瓶,说明书一份, 不干胶纸片4张。
1.包被抗HCV-cAg单克隆抗体Mab1和Mab2成为反应板,酶标板选乳白色不透明聚苯乙烯96孔酶标板。
抗体在96孔酶标板上的包被方式:将提纯好的 Mab1和Mab2用pH5.0酒石酸缓冲液分别稀释至 4μg/mL和4μg/mL浓度,每孔加100μL于检测板孔内,在2-8℃环境下放置12小时,弃去包被液,用洗涤液清洗5-8次,然后轻轻用手拍干上面的液体。然后加入牛血清白蛋白封闭液100μL/孔,2-8℃封闭10-12小时,随后将封闭液弃去,室温干燥3-5小时,等到酶标板干燥后,使用真空封口包装,并将封装好的板存于2-8℃冰箱中,保存备用。
2.标准品的制备:将重组全长HCV核心抗原用蛋白稳定剂稀释成5个梯度浓度,分别是:40ng/m L、20ng/m L、10ng/m L、5ng/m L、80pg/m L。
3.抗HCV-cAg酶结合物是辣根过氧化酶标记的羊抗人的Mab3和Mab4抗体;
4.HCV-cAg样品稀释液的配方及制法是:
将羊血清100ml、氯化钠10g、硫柳汞10g、亚铁氰化钾42.24g、聚氧乙烯月桂醚10g、 庆大霉素10g加入到0.1M pH=7.4的Tris-HCl缓冲液中至1L,物质充分溶解后过滤除菌,2-8℃保存。
0.1M pH 7.4的Tris-HCL的缓冲液的配置方法为:使将12.11gTris溶于1L去离子水中,使用盐酸将溶液的pH值调整到7.4即得。
5.20×浓缩洗涤液的配方及制法是:将2.96g NaH2PO4 ·2H2O 、29g Na2HPO4 ·12H2O、10g氯化钠、10g十二烷基硫酸三乙醇胺加入到去离子水中至1L,充分溶解后,过滤除菌,2-8℃保存。
6.反应底物液的制备方法如下:
底物液A:12.11gTri、1g铁氰化钾、5g焦磷酸钠、1mL30%双氧水,将上述各组分依次溶于1L蒸馏水中制备完成。
底物液B:2.96g NaH2PO4·2H2O、 29g Na2HPO4·12H2O、5 g TMB、10 mL二甲基亚砜,先将TMB溶解到二甲基亚砜后,再将其混合液加入蒸馏水中至1L,最后其他组分依次加入溶解完成制备。
7.终止液为2ml浓盐酸和2ml浓硫酸。
实施例2
试剂盒的应用及检测操作程序
(1) 平衡:样品及检测试剂盒内的试剂,于18-25℃平衡30分钟;
(2) 配液:将试剂盒中配套的浓縮洗涤液用去离子水稀释20倍,量取300mL,制成工作所需浓度洗涤液,为下面洗板做好准备;
(3) 样本稀释液:预处理板上每孔按1: 2的比例加入样本稀释液和样品,45-60℃振荡孵育60分钟,待用;
(4) 加样:取96孔酶标板,预设置空白、阴性、阳性对照各3孔,空白对照每孔加入100μl 样品稀释液,其余孔每孔中先加入50μl样品稀释液,然后阴、阳性对照孔每孔加入50μl相应对照血清,剩余孔样品检测孔,将经上述预处理的各待测样品按设定每孔中加入50μl,这样每个孔中都有100 μl的液体,加样完毕后用不干胶封片封盖反应板,37℃振荡孵育60分钟;
(5) 洗板:倒去板孔中的液体,并用吸水纸吸干上面的液体;用工作浓度洗涤液洗板5-6次,最后拍干;
(6) 加抗HCV-cAg酶结合物:每孔中加入75IU抗HCV-cAg酶结合物,用不干胶封片封盖反应板,37℃孵育30分钟;
(7) 洗板:同步骤(5);
(8) 显色:每孔中先后加入显色底物液A、显色底物液B各50μl,避光显色至少2分钟;
(9) 测定:显色反应后,将酶标板置酶免疫上测出各孔的吸光度变化;
(10) 以阴性对照吸光度变化(RLU)的平均值+2270为临界值(CUTOFF);待检样品的 RLU值>临界值(CUTOFF)为阳性,待测样品RLU值<临界值(CUTOFF)为阴性为判定标准进行判定。
实施例3
本试剂盒的精密度、特异性、灵敏度的检测
1)精密度试验:使用PCR和EIA确定的阴阳性血清各20分,用20份阴性血清检定,无一例阳性;用20份阳性血清检定,无一例阴性,符合产品标准。
2)特异性试验:交叉反应验证试验结果表明,抗HAV、HBsAg、抗TP、抗TOX、HSV、CMV、EBV、阳性样本及原发性肝癌患者样本不影响检测结果。
对27例RF阳性样本,25例HAMA阳性样本,18例ANA阳性样本(上述样本抗HCV和HCV均为阴性)分别采用本发明进行HCV-cAg检测,三类样本假阳性数为RF假阳性为0、HAMA假阳性为1、ANA假阳性为1,特异性分别为100%、96%、94.44%。
3)灵敏度试验:不同组对以HCV抗原浓度梯度检测不同量抗原时试剂反应灵敏度。1组为ORTHO HCV 抗原测定试剂产品测试结果;2组为本发明试剂盒测定结果;3组为实验对照组HCV-cAg检测试剂盒,其组成中除HCV-cAg样品稀释液中以0.1M铁氰化钾替代本发明中的0.1M亚铁氰化钾并不含聚氧乙烯月桂醚,以及20×浓缩洗涤液的配方中以曲拉通-100或吐温系列代替十二烷基硫酸三乙醇胺外,其他同本发明中的组成。结果见下表1。
表1 53个样本应用不同试剂的检测阳性数结果比较
1:1 | 1:10 | 1:20 | 1:40 | 1:80 | 1:160 | 1:320 | |
1组 | 53 | 52 | 49 | 39 | 20 | 5 | 0 |
2组 | 53 | 51 | 49 | 38 | 21 | 4 | 0 |
3组 | 50 | 30 | 18 | 11 | 2 | 0 | 0 |
从以上检测结果可以看出,对照组HCV-cAg检测试剂盒检出阳性HCV 抗原远远不如ORTHO检测率高,而本发明制得的试剂盒检测结果与ORTHO检测试剂检测灵敏度无差异,具有较高的灵敏度。
Claims (5)
1.一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒,它主要包括酶标板、抗HCV-cAg酶结合物、HCV-cAg标准品梯度溶液、阳性血清对照指示样本、阴性血清对照指示样本、HCV-cAg样品稀释液、底物液A、底物液B、终止液、20×浓缩洗涤液,其特征在于:所述HCV-cAg样品稀释液的配方及制法是:
将羊血清100ml、氯化钠10g、硫柳汞10g、亚铁氰化钾42.24g、聚氧乙烯月桂醚10g、庆大霉素10g加入到0.1M pH=7.4的Tris-HCl缓冲液中至1L,物质充分溶解后过滤除菌,2-8℃保存;
所述20×浓缩洗涤液的配方及制法是:将2.96g NaH2PO4 ·2H2O、29g Na2HPO4 ·12H2O、10g氯化钠、10g十二烷基硫酸三乙醇胺加入到去离子水中至1L,充分溶解后,过滤除菌,2-8℃保存。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:
所述底物液A是通过下述方法制备的:将12.11gTris、1g铁氰化钾、5g焦磷酸钠和1mL30%双氧水依次溶于1L蒸馏水中,使用HCL调整PH到7.4,混合均匀;
所述底物液B是通过下述方法制备的:将5 g TMB溶解到10 mL二甲基亚砜中,再将其混合液加入蒸馏水中至1L,最后依次加入2.96g NaH2PO4 ·2H2O和29g Na2HPO4·12H2O溶解完成制备。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述酶标板为各孔包被有4μg/ml的包被抗体Mab1和Mab2的聚苯乙烯96圆孔酶标板;所述抗HCV-cAg酶结合物为辣根过氧化酶标记的羊抗人的Mab3和Mab4抗体。
4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述HCV-cAg标准品梯度溶液分为5个浓度,分别为40ng/m L、20ng/m L、10ng/m L、5ng/m L、80pg/mL。
5.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述终止液为2ml浓盐酸和2ml浓硫酸。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410698135.XA CN104407142B (zh) | 2014-11-28 | 2014-11-28 | 一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410698135.XA CN104407142B (zh) | 2014-11-28 | 2014-11-28 | 一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN104407142A true CN104407142A (zh) | 2015-03-11 |
CN104407142B CN104407142B (zh) | 2016-04-06 |
Family
ID=52644788
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201410698135.XA Active CN104407142B (zh) | 2014-11-28 | 2014-11-28 | 一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN104407142B (zh) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1366067A (zh) * | 2001-01-15 | 2002-08-28 | 上海博华基因芯片技术有限公司 | 一种乙型、丙型肝炎双检基因芯片试剂盒及其制备和使用方法 |
CN1877330A (zh) * | 2005-06-10 | 2006-12-13 | 湖南景达基因有限公司 | 丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫诊断试剂盒及其制备方法 |
CN101419238A (zh) * | 2008-12-04 | 2009-04-29 | 山东莱博生物科技有限公司 | 丙型肝炎病毒核心抗原化学发光酶联免疫检测试剂盒 |
CN101694495A (zh) * | 2009-10-21 | 2010-04-14 | 北京市卫生局肝炎研究所 | 有丙肝ns3单克隆抗体的超顺磁性复合微球及制备方法 |
-
2014
- 2014-11-28 CN CN201410698135.XA patent/CN104407142B/zh active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1366067A (zh) * | 2001-01-15 | 2002-08-28 | 上海博华基因芯片技术有限公司 | 一种乙型、丙型肝炎双检基因芯片试剂盒及其制备和使用方法 |
CN1877330A (zh) * | 2005-06-10 | 2006-12-13 | 湖南景达基因有限公司 | 丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫诊断试剂盒及其制备方法 |
CN101419238A (zh) * | 2008-12-04 | 2009-04-29 | 山东莱博生物科技有限公司 | 丙型肝炎病毒核心抗原化学发光酶联免疫检测试剂盒 |
CN101694495A (zh) * | 2009-10-21 | 2010-04-14 | 北京市卫生局肝炎研究所 | 有丙肝ns3单克隆抗体的超顺磁性复合微球及制备方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN104407142B (zh) | 2016-04-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101419238B (zh) | 丙型肝炎病毒核心抗原化学发光酶联免疫检测试剂盒 | |
CN101196518B (zh) | 丙型肝炎病毒抗体化学发光法诊断试剂盒及其制备方法 | |
CN105004862B (zh) | 一种高通量联合检测丙肝病毒抗原抗体的试剂 | |
CN104090105A (zh) | 一种检测hev抗体的方法及试剂盒和该试剂盒的制备方法 | |
CN105388282B (zh) | 一种elisa试剂盒抗原间接包被酶标板的包被方法 | |
CN104407143B (zh) | 一种丙型肝炎病毒抗原-抗体联合检测试剂盒 | |
CN103063661A (zh) | 一种tmb显色液及其制备方法 | |
CN104237520A (zh) | 一种丙型肝炎病毒抗原抗体联合检测试剂盒及其制备方法 | |
CN109142727A (zh) | 一种o型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒及其应用 | |
CN103033624A (zh) | 一种人髓过氧化物酶化学发光免疫检测试剂盒 | |
CN102081100A (zh) | 一种肝癌多标志物微阵列试剂盒、其制备方法及其应用 | |
CN102236021A (zh) | 人类免疫缺陷病毒抗体时间分辨免疫荧光分析法及试剂盒 | |
CN101750493A (zh) | 多个传染病项目同时检测的酶促化学发光免疫分析定性诊断试剂盒 | |
Yuan et al. | Differential diagnosis of pandemic (H1N1) 2009 infection by detection of haemagglutinin with an enzyme-linked immunoassay | |
CN104407142B (zh) | 一种高效的丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫检测试剂盒 | |
CN103063841B (zh) | 一种流行性出血热病毒IgM抗体酶联免疫检测试剂盒及其制备和使用方法 | |
CN103712982A (zh) | 一种高灵敏度的tmb显色液及其制备方法 | |
CN102565399B (zh) | 一种检测氢化可的松的方法及其专用酶联免疫试剂盒 | |
CN102798718A (zh) | 乙肝病毒前s1抗原检测试剂盒及其制备方法 | |
CN102818892B (zh) | 一种前列腺特异性抗原检测试剂盒及其制备方法 | |
CN106771218B (zh) | 一种检测HIV-1 p24抗原的试剂盒及其应用 | |
CN104833804A (zh) | 一种幽门螺杆菌IgG抗体ELISA半定量检测试剂盒及其应用 | |
CN105510580B (zh) | 一种检测发热伴血小板减少综合征病毒核衣壳蛋白特异性抗体的多肽‑酶联免疫吸附试剂盒 | |
CN104991057A (zh) | 一种水貂阿留申病毒抗体elisa快速检测试剂盒及其制备方法 | |
CN102445540B (zh) | 一种聚苯乙烯微球定量检测人血清中HCV-cAg浓度的试剂盒 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |