CN104277073B - 一种富马酸替诺福韦二吡呋酯化合物 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种富马酸替诺福韦二吡呋酯化合物。富马酸替诺福韦二吡呋酯是一种新型的核苷酸类逆转录酶抑制剂，其抗病毒作用强、耐药性低，能通过干扰人体内乙肝病毒DNA聚合酶的功能，抑制乙肝病毒的复制，从而降低人血清及肝组织内的病毒载量。此药除了可治疗乙肝外，还可与其他抗逆转录病毒药物相配合，治疗艾滋病病毒的感染。本发明还提供了富马酸替诺福韦二吡呋酯化合物在治疗乙型肝炎药物中的应用。

Description

一种富马酸替诺福韦二吡呋酯化合物

技术领域

本发明属于医药研究领域，具体涉及富马酸替诺福韦二吡呋酯化合物及其临床应用。

背景技术

富马酸替诺福韦二吡呋酯(TDF)是替诺福韦的前药，是一个新型的无环核苷类似物，在体外有抗HIV-1和HIV-2的活性。其在体外还有抗野生型和LMV耐药型HBV的活性。体内研究也显示其对HBV及HIV有良好的抗病毒作用。TDF不仅有较强的抗病毒活性和良好的安全性，而且有较好的耐药性。

富马酸替诺福韦二吡呋酯的毒性很低，大鼠口服给药的NOAEL(无明显有害效应剂量)为1500mg/kg。生殖毒性研究中，大鼠给予10倍人用剂量，结果对生育能力、交配行为和早期胚胎发育均无影响，仅雌性大鼠出现发情周期的改变。长期口服致癌研究，雌性小鼠在高剂量(相当于人用剂量的16倍)时肝脏腺瘤增加；大鼠在高剂量(相当于人用剂量的5倍)时，没有发现致癌性结果。富马酸替诺福韦二吡呋酯在Ames试验和小鼠体内微核试验，结果为阴性。

富马酸替诺福韦二吡呋酯片能有效抑制病毒复制，且耐药发生率低，其在HIV感染及慢性乙型肝炎的治疗中有广阔前景，在临床应用中获益大于风险，故申请富马酸替诺福韦二吡呋酯片的生物等效性研究。

富马酸替诺福韦二吡呋酯片是一种新型的核苷酸类逆转录酶抑制剂，其抗病毒作用强、耐药性低，能通过干扰人体内乙肝病毒DNA聚合酶的功能，抑制乙肝病毒的复制，从而降低人血清及肝组织内的病毒载量。此药除了可治疗乙肝外，还可与其他抗逆转录病毒药物相配合，治疗艾滋病病毒的感染。作为一种核苷酸，替诺福韦在细胞中的保留时间要长于其他抗逆转录病毒药，并且可以与其他抗逆转录病毒药联合应用。TDF不仅有较强的抗病毒活性和良好的安全性，而且有较好的耐药性。

妊娠期间不应使用富马酸替诺福韦二吡呋酯，除非十分需要。替诺福韦在大鼠乳汁中有分泌，如果母亲正在接受富马酸替诺福韦二吡呋酯治疗，应当禁止母乳喂养。在年龄小于18岁的患者中的安全性和疗效尚未建立。临床研究没有入选足够数量的年龄65岁或65岁以上的受试者，无法判定他们的反应是否和年轻受试者不同。一般而言，老年患者选择剂量应当谨慎。

在高于富马酸替诺福韦二吡呋酯300mg治疗剂量下的临床经验很有限。在研究901中，有8名患者中接受了持续28天的口服富马酸替诺福韦二吡呋酯600mg治疗。没有报告严重的不良事件。更高剂量可能产生的影响尚不清楚。

富马酸替诺福韦二吡呋酯片能有效抑制病毒复制，且耐药发生率低，其在HIV感染及慢性乙型肝炎的治疗中有广阔前景，在临床应用中获益大于风险。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种富马酸替诺福韦二吡呋酯化合物，其结构式如下：

上述化合物，在2θ为9.1012°、12.2135°、14.8758°、21.1015°、21.7533°、24.2143°、25.3455°、26.5050°、29.1013°和30.4523°处有X射线衍射峰。

上述化合物，具有与附图2类似的差热分析图谱。

上述化合物，可以用于制备片剂、胶囊、颗粒剂、注射液和冻干粉针制剂。

本发明的另一目的是在于提供一种药物组合物，其包含上述化合物以及药学上可接受的辅料。

本发明的另一目的在于提供上述化合物在制备乙型肝炎药物中的应用。

本发明的另一目的在于提供上述药物组合物在制备乙型肝炎药物中的应用。

上述的化合物可以与药学上可接受的辅料或载体，如口服制剂常用辅料，注射剂常用辅料等一起，制备成口服制剂如片剂、胶囊、颗粒剂，注射剂如注射液、冻干粉针等制剂形式。

附图说明

图1是本发明实施例1的富马酸替诺福韦二吡呋酯晶型的粉末X射线衍射图；

图2是本发明实施例1的富马酸替诺福韦二吡呋酯晶型的DSC图；

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步说明，使本领域专业技术人员可以更好地理解本发明，但该实施例并不以任何形式限制本发明的范围。

实施例1-富马酸替诺福韦二吡呋酯的制备

取富马酸替诺福韦二吡呋酯粗品，加入约10倍量(重量体积比)的乙醚和四氢呋喃混合溶剂(乙醚与四氢呋喃的比例为3:4)，于35-45℃加热搅拌至完全溶解，过滤，在搅拌状态下向滤液中滴加4倍量体积的正丁醇，滴加完毕后室温搅拌析晶3小时，过滤，用约0.5倍量的无水乙醚洗涤滤饼，以无水氯化钙作干燥剂，在真空度≥-0.08Mpa的条件下真空干燥4小时后，得富马酸替诺福韦二吡呋酯化合物。

粉末X射线衍射：使用Cu-K辐射，该化合物的X-ray射线粉末衍射(XRPD)图谱见附图1。

差示扫描量热分析(DTA)：该化合物的差示扫描量热分析(DTA)图谱见附图2。

实施例2-本发明片剂的制备

处方：

制法：

①将富马酸替诺福韦二吡呋酯过200目筛备用，将乳糖、羟丙甲基纤维素分别过100目筛，备用；

②将处方量乳糖、羟丙甲基纤维素以等量递加法混合均匀，备用；

③将预胶化淀粉溶于纯化水中，并加入富马酸替诺福韦二吡呋酯混匀，备用；

④将乳糖和羟丙甲基纤维素的混合物加入到高效湿法制粒机中，搅拌混合，并加入预胶化淀粉和富马酸替诺福韦二吡呋酯的混合物，16目制粒分散，继续在50～60℃烘3-5小时，取出干颗粒，16目整粒，加入硬脂酸镁，压片。

实施例3-本发明片剂的制备

处方：

制法：

①将富马酸替诺福韦二吡呋酯过200目筛备用，将乳糖、羟丙甲基纤维素分别过100目筛，备用；

②将处方量乳糖、羟丙甲基纤维素以等量递加法混合均匀，备用；

③将预胶化淀粉溶于纯化水中，并加入富马酸替诺福韦二吡呋酯混匀，备用；

④将乳糖和羟丙甲基纤维素的混合物加入到高效湿法制粒机中，搅拌混合，并加入预胶化淀粉和富马酸替诺福韦二吡呋酯的混合物，16目制粒分散，继续在50～60℃烘3-5小时，取出干颗粒，16目整粒，加入硬脂酸镁，压片。

实施例4-本发明片剂的制备

处方：

制法：

①将富马酸替诺福韦二吡呋酯过200目筛备用，将乳糖、羟丙甲基纤维素分别过100目筛，备用；

②将处方量乳糖、羟丙甲基纤维素以等量递加法混合均匀，备用；

③将预胶化淀粉溶于纯化水中，并加入富马酸替诺福韦二吡呋酯混匀，备用；

④将乳糖和羟丙甲基纤维素的混合物加入到高效湿法制粒机中，搅拌混合，并加入预胶化淀粉和富马酸替诺福韦二吡呋酯的混合物，16目制粒分散，继续在50～60℃烘3-5小时，取出干颗粒，16目整粒，加入硬脂酸镁，压片。

实施例5-本发明片剂的制备

处方：

制法：

①将富马酸替诺福韦二吡呋酯过200目筛备用，将乳糖、羟丙甲基纤维素分别过100目筛，备用；

②将处方量乳糖、羟丙甲基纤维素以等量递加法混合均匀，备用；

③将预胶化淀粉溶于纯化水中，并加入富马酸替诺福韦二吡呋酯混匀，备用；

④将乳糖和羟丙甲基纤维素的混合物加入到高效湿法制粒机中，搅拌混合，并加入预胶化淀粉和富马酸替诺福韦二吡呋酯的混合物，16目制粒分散，继续在50～60℃烘3-5小时，取出干颗粒，16目整粒，加入硬脂酸镁，压片。

实验例1

原料药是制剂生产的关键，在工艺研究前需要充分了解原料药的性质，以评估其对制剂工艺的影响，其相关理化性质总结见表1。

表1原料药基本性质

根据上述原料药的性质，本品原料药的关键理化特性对制剂生产及制剂性能影响分析见表3.2.P.2-4。

表2关键理化特性对制剂生产及制剂性能影响分析

见下表3。

表3.处方变量初始风险评估说明

本品确定处方后从小试规模到车间放大规模进行了多批样品制备，制备过程正常，产品符合要求，处方合理可行，处方筛选过程汇总见下表4。

表4处方开发过程汇总

1、本品在进行处方筛选前，对制备工艺进行了初步分析。考虑到本品主药占片重的44％，且片重较大(约700mg)，粉末直压可能面临可压性差、脆碎度不合格等问题，同时原研品专利“含核苷酸类似物的组合物及其合成方法”中表明原研制剂亦是采用了湿法制粒工艺，故本品选择了相同的制备工艺。

2、本品为胃溶型普通薄膜包衣片，因此包衣成分对崩解和溶出度影响不明显，因此在处方研究中主要以素片为考察对象。

稀释剂的种类和比例主要影响片剂的成型，参考原研产品的片重(约700mg)，根据原研品处方(原研品稀释剂为乳糖和微晶纤维素)及辅料使用手册，本品也拟采用乳糖和微晶纤维素作为稀释剂，其余辅料也与原研品一致，按表5所示进行稀释剂考察，使用湿法制粒工艺制备。取制备好的片剂测定其在水中的溶出曲线。溶出度测定结果见表5。

表5富马酸替诺福韦二吡呋酯片稀释剂处方考察结果

试验结果分析：从上述试验数据及现象来看，所有处方在15min均能达到85％的溶出，但各处方溶出现象差异较大。从崩解现象来看，实施例2-5与原研品最为接近，虽然完全溶散时间明显较原研品长，但可通过后续的崩解剂考察加以解决，故优选微晶纤维素与乳糖比例1:2作为稀释剂，稀释剂在处方中比例为51％。本品稀释剂种类与原研品相同。

实验例2

在表达乙型肝炎病毒的转基因小鼠中对实施例1进行了研究。灌胃给予动物32mg/kg- 剂量的实施例1或灭菌生理盐水,每日1次，连续给药10天，结果发现：本发明的替诺福韦可显著降低小鼠肝中的HBV中DNA含量，使雌性小鼠每微克细胞DNA中的HBV的DNA从原来的5.9pg/μg降低到小于0.82pg/μg，而雄性小鼠从原来的8.3pg/μg降低到小于1.1pg/μg。在10天的研究中，动物均能良好耐受本发明的化合物，未见濒死或死亡情况发生。

实验例3

使用鸭乙型肝炎模型对实施例1进行了抗乙肝病毒作用研究。给予动物的实施例1为0.01或0.1mg/kg灌胃,每日1次,连续给药21d。结果发现:实施例1的抗病毒活性呈剂量依赖性,即使是0.01mgmg/kg的最低剂量,其抗病毒活性也高于25mg/kg的阳性对照药拉米夫定。实验组0.01和0.1mg/kg以及拉米夫定组25mg mg/kg血清病毒DNA水平分别平均降低。在降低鸭肝内的HBV的DNA水平方面，本发明也比拉米夫定更有效。与阴性对照组相比，本发明的实验组1mg「kg-1中的共价闭合环状病毒DNA(cccDNA)水平也有降低。

Claims (3)

1.一种富马酸替诺福韦二吡呋酯晶型，其特征在于，所述晶型具有如图1所示的X-射线衍射图谱所代表的特征，以及具有如图2所示的差热分析图谱所代表的特征。

2.一种药物组合物，其特征在于含有权利要求1所述的富马酸替诺福韦二吡呋酯晶型及药学上可接受的辅料。

3.权利要求1所述的富马酸替诺福韦二吡呋酯晶型或权利要求2所述药物组合物在制备乙型肝炎药物中的应用。