CN104263702A

CN104263702A - 一种鸡传染性支气管炎病毒820株及其应用

Info

Publication number: CN104263702A
Application number: CN201410569487.5A
Authority: CN
Inventors: 黄庆华; 许传田; 胡北侠; 杨少华; 张秀美; 张琳
Original assignee: Institute Animal Science and Veterinary Medicine of Shandong AAS
Current assignee: Institute Animal Science and Veterinary Medicine of Shandong AAS
Priority date: 2014-10-23
Filing date: 2014-10-23
Publication date: 2015-01-07
Anticipated expiration: 2034-10-23
Also published as: CN104263702B

Abstract

本发明涉及兽医生物制品中鸡传染性支气管炎强毒株模型领域，特别涉及一种鸡传染性支气管炎820株，其保藏编号为CGMCC No.9571。所述的鸡传染性支气管炎820株在鸡传染性支气管炎疫苗效力检验中的应用。鸡传染性支气管炎病毒820株接种鸡群的发病率和死亡率均较强，其攻毒效果接近于临床发病和致死水平，具备了模拟临床病毒致病的水平，能够有效的评价疫苗的保护水平，从而降低本病造成的经济损失，在疫苗评价领域有着广阔的应用前景。

Description

一种鸡传染性支气管炎病毒820株及其应用

技术领域

本发明涉及鸡传染性支气管炎病毒技术领域，特别涉及一种鸡传染性支气管炎病毒820株，还涉及所述鸡传染性支气管炎病毒820株的应用。

背景技术

鸡传染性支气管炎( infectious bronchitis，IB)，是由传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus. IBV)引起的鸡的一种急性、高度传染性的病毒性呼吸道疾病，以气管啰音、咳嗽和打喷噴为特征。该病在肉鸡主要引起鸡的增重和饲料报酬降低,IBV损伤呼吸道后,还会引起继发性的细菌感染，引起的雏鸡死亡率可高达30%以上。有些IB毒株可以引起严重的肾病病变。IBV也能在输卵管复制,成年鸡感染后产蛋量会下降10%、50%或更多，同时畸形蛋数量增多,蛋壳色泽发生改变，感染鸡群的产蛋率一般不能再恢复到正常水平，而雏鸡感染IB后有时还会导致输卵管不能正常发育。该病目前己经成为对养鸡业危害最严重的疾病之一。

鸡传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus，IBV）属于冠状病毒科冠状病毒属中的y-冠状病毒，由该病毒感染引起的疾病称为鸡传染性支气管炎(chicken infectioubronchitis， IB)，疫苗免疫预防是目前控制该病的最为有效的手段之一。IBV的重要特点之一就是血清型众多，不同血清型之间交叉保护性较低甚至完全不能保护。不同血清IBV具有典型的地域性流行特征，而且由于病毒基因组的突变和毒株间的重组使得新的血清型不断出现，导致免疫预防日益复杂化。因此发掘一株能够用于动物攻毒试验，并可以对疫苗进行免疫效力评价的标准IBV强毒株，是现阶段筛选疫苗好坏的关键。但是，从自然界中筛选出的毒株，其毒力与复制效率存在很大的差异，因此寻找到一株毒力强，且毒性稳定的毒株实属不易。

发明内容

为了解决以上现有国内筛选出的鸡传染性支气管炎病毒毒性不强、不适用于攻毒试验的问题，本发明提供了一株致病性强且能引起典型症状的鸡传染性支气管炎病毒820（infectious bronchitis virus）株。

本发明还提供了所述鸡传染性支气管炎病毒820株的应用。

本发明是通过以下措施实现的：

一种鸡传染性支气管炎病毒820株，其保藏编号为CGMCC No.9571。

所述的鸡传染性支气管炎病毒820株，优选其病毒滴度（EID₅₀）为10^-6.79/0.2mL。

所述的鸡传染性支气管炎病毒820株在鸡传染性支气管炎疫苗效力检验中的应用。在动物致病试验以及在动物实验中作为评价疫苗的保护效力。

所述的应用，优选采用所述的鸡传染性支气管炎病毒820株培养物进行攻毒。

所述的应用，优选功毒剂量为10^4.5-6.0 EID₅₀。

本发明的有益效果：鸡传染性支气管炎病毒820株对鸡有较强的致病性，接种鸡群的发病率和死亡率均较强，其攻毒效果接近于临床发病和致死水平，具备了模拟临床病毒致病的水平，能够有效的评价疫苗的保护水平，从而降低本病造成的经济损失，有着广阔的应用前景。

菌株保藏信息

保藏时间：2014年8月20日，

保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，

保藏编号：CGMCC No. 9571，

保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，

分类命名：鸡传染性支气管炎病毒。

具体实施方式

为了更好的理解本发明，下面结合具体实施例来进一步说明。

实施例

鸡传染性支气管炎病毒820株是2012年从山东某鸡场分离的病料中分得的野毒株，经过SPF鸡胚增值获得,动物致病试验中发病率为80%以上，属于强毒株。IBV呈圆形至多边形不定，病毒有囊膜，直径为120 nm.表面有棒状纤突，长约20 nm，通过投影技术可以观察到自发崩解病毒颗粒所释放出的核衣壳蛋白(RNP，核芯)，多数情况下能够观察到的RNP是直径为1-2nm的索状物，但偶尔也能见到直径为10-15 nm的卷曲结构，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.9571。

1.1动物致病试验

为了更好的筛选到用于疫苗免疫效力评价的合适攻毒株，我们从近几年分离的病料中筛选了3株（337毒株，369毒株，820毒株）发病率、死淘率高，具有典型传支症状的病料进行复制，病料处理后，接种10d SPF鸡胚，培养72h后收获尿囊液（24h内死亡的弃掉）。

对三株分离株与国家标准毒株M41进行动物致病试验评价，M41作为阳性对照组。试验鸡分为5组：A1、A2、A3、A4、A5，每组20只鸡，分别进行攻毒，攻毒剂量为10^4.5EID₅₀，攻毒方式为滴鼻点眼。试验分组与死亡率详见表1。

表1 试验分组与死亡率

组别	试验鸡数量，只	攻毒量	攻毒	发病率	死亡率%
						A1	20	100ul	337毒株	症状不明显	0%
A2	20	100ul	369毒株	70%	10%
						A3	20	100ul	820毒株	100%	30%
A4	20	100ul	M41标准毒株	90%	20%
						A5	20	100ul	生理盐水	0%	0

试验鸡攻毒后A1组（337毒株）：试验鸡偶见甩头症状，但不是很明显，试验鸡基本无异常。A2组（369毒株）：试验鸡表现甩头，打喷嚏，啰音等传支典型临床症状，发病率为70%，于攻毒后8d，13d各死亡一只。A3组（820毒株）：试验鸡于攻毒后2d即出现甩头，打喷嚏症状，随后试验鸡呆立闭眼，精神差，出现张口呼吸等传支典型临床症状，发病率为100%,于攻毒后2d-8d，死亡6只，之后无死亡，攻毒后11d发病鸡病情开始好转，逐渐恢复。

A4组（M41标准毒株）：试验鸡于攻毒后3d也开始表现同A3组相同的临床症状，发病率为90%,死亡4只，发病鸡于攻毒后11d开始好转，逐渐恢复。A5组（阴性对照）：试验鸡表现正常，无异常现象出现。

通过对各组试验鸡发病率与死亡率的统计，参照国家对标准强毒株的要求，即发病率大于80%，我们筛选出最佳攻毒毒株820毒株，与M41一同作为标准强毒株，以丰富不同基因型强毒株类型。并且我们已经利用820株对传支疫苗进行了免疫效率评价，结果也是成立的，如下。

1.2疫苗评价试验

把试验鸡分为四组：C1、C2、C3，每组30只鸡，分别免疫451株、生理盐水、生理盐水，免疫剂量为10^4.5(EID50)。用异源强毒820毒株攻毒，功毒剂量10^6.0(EID50)。保护率结果见表2。

表2 异源强毒株攻毒保护力试验结果

组别	试验鸡数量，只	免疫	攻毒毒株	保护率%
					C1	30	451株	820	100
C2	30	生理盐水	820	50
					C3	30	生理盐水	\	100

从表中可以看到820株作为攻毒使用，有很好的评价疫苗作用。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受实施例的限制，其它任何未背离本发明的精神实质与原理下所做的改变、修饰、组合、替代、简化均应为等效替换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种鸡传染性支气管炎病毒820株，其特征在于其保藏编号为CGMCC No.9571。

2.根据权利要求1所述的鸡传染性支气管炎病毒820株，其特征在于其病毒滴度EID₅₀为10^-6.79/0.2mL。

3.一种权利要求1或2中所述的鸡传染性支气管炎病毒820株在鸡传染性支气管炎疫苗效力检验中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于采用权利要求1或2中所述的鸡传染性支气管炎病毒820株培养物进行功毒。

5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于功毒剂量为10^4.5-6.0 EID50。