CN104222675A - 一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂的制备方法及应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种评鲽类鱼用发酵型中草药免疫增强剂，具有预防、保健、治疗和调节免疫等多种功效，是替代抗生素药物的理想、绿色、环保、安全、新型饲料添加剂。该发酵中草药饲料添加剂由猴头菇、菌陈蒿、党参、金银花、茯苓、夏枯草、甘草、黄芪、白术、连翘、防风、山楂、百部等复方中草药通过“中草药超声波辅助浸提+多菌种好氧发酵和厌氧发酵相结合二步发酵”工艺制得，具有中草药和益生菌的双重优点，可以高效调理评鲽类鱼肠道健康，标本兼治，固本培元，保持肠道微生态平衡和最佳免疫状态，提高营养物质的消化吸收率，提高评鲽类鱼机体免疫力，提高养殖收益，降低养殖风险，替代抗生素使用，对评鲽类鱼无不良影响，使用安全，不存在药物残留和耐药性等问题，有着广阔的市场前景。

Description

一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂的制备方法及应用

技术领域

本发明涉及一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂的制备方法，属于饲料添加剂领域。

背景技术

水产品在人们日常饮食中越来越占据重要的份额，为了满足不断增长的水产品的需求，解决因水产养殖规模不断扩大和生长周期缩减而导致的生理机能紊乱、疾病频发成为水产养殖的重点问题，也是水产饲料产业发展的关键。在此背景下，抗生素类饲料添加剂受到热捧，被广泛应用于饲料业中，在一定程度上促进了水产养殖业的发展，但是抗生素带来的高残留、高污染和抗药性等问题愈发的严重。当前社会，食品安全事故频发，人们在满足温饱的同时也更加注重饮食健康，绿色健康的水产品备受关注。中草药饲料添加剂符合绿色水产养殖业发展要求，消除了人们对其饲喂出水产产品的安全顾虑，值得大力推广应用。但当前中药饲料添加剂的研究水平较低，制作工艺简单粗糙，产品科技含量较低，质量不够稳定，诸如此类问题严重制约着中药饲料添加的推广应用。微生物发酵中药是对传统中药加工技术的改革和创新，具有诸多特点和优势。将此技术引入中药饲料添加剂的研究，可使其科技含量大幅提升，效果更加显著，质量更加稳定，效益更加明显，可以显著提高机体免疫力，增强水产动物抵抗疾病的水平，对于解决当前水产养殖业中水产动物的多种问题有着重要的应用价值。利用微生物发酵技术来加工中草药，可使其主要功能活性物质的含量显著提高，这对于注重养殖成本的水产养殖业显得尤为重要。

鲆鲽类(flatfish) 是我国尤其是北方海水养殖鱼类的主要种类，由于其双眼在身体同一侧，又称比目鱼类.养殖方式主要有工厂化养殖、网箱养殖和池塘养殖等。目前已开展养殖的有牙鲆(Paralichthys olivaceus) 、大 菱 鲆 ( Scophthalmus maximus)、大西洋牙鲆(Paralichthys dentatus)、石鲽(Kareius bicoloratus)、大西洋庸鲽(Hippoglossus hiossusppogl)和半滑舌鳎 (Gynoglossus semilaevis Gunther)等品种，其中以牙鲆和大菱鲆的养殖规模最大，南北方均有养殖。随着鲆鲽类养殖规模的不断扩大，取得了巨大的经济效益。但是疾病的不断爆发严重制约了鲆鲽类养殖业的发展，病毒性病原中大菱鲆虹彩病毒引起的危害较大，细菌性病原主要有鳗弧菌、哈维氏 弧 菌 、创 伤 弧 菌 、灿烂弧菌和溶藻弧菌等弧菌、迟钝爱德华氏菌、假 单 胞 菌和肠球菌，寄生虫病原有鞭毛虫、盾纤毛虫、车轮虫和隐核虫等。由于当前病害防治水平的限制，鲆鲽类疾病的防治仍以化学药物为主，频繁用药造成病原菌产生耐药或变异致使病害难以控制，继而产生水产品的药物残留问题，严重影响水产品的品质。因此，进行主动防病、无公害防病成为当今养殖业能够可持续发展的方向和趋势。

发明内容

本发明的目的在于根据现有技术中存在的上述不足，考虑中草药具有的抗菌、抗病毒、提高机体免疫力和改善动物生长性能的左右，可减少抗生素大量使用造成的养殖业污染，且原料来源广，价格低廉，是一种绿色、环保、高效的饲料添加剂，研制开发一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂。

本发明上述目的是通过以下技术方案予以实现的：

一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂，其特征在于复方中草药由以下质量比的中草药组成：猴头菇12～18份、菌陈蒿8～12份、党参8～12份、金银花6～10份、茯苓3～5份、夏枯草6～10份、甘草6～8份、黄芪3～5份、白术6～10份、连翘6～10份、防风6～10份、山楂5～7份、百部3～5份。

本发明提供一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂，所选发酵剂为由地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母、嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌组成的复合发酵剂，其中地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌的接种量为2～4%、产朊假丝酵母接种量为5～8%。

本发明提供一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂的制备方法，具体包括以下的步骤：

（1）复方中草药的制备：按照上述配方准确称量中草药，将其粉碎至40～60目，混合均匀，制得复方中草药；

（2）超声波辅助浸提：向复方中草药粉剂中加入质量比5～10倍的水，在超声波辅助作用下，100℃条件下回流浸提20～30min，超声功率400w，频率25kHz；

（3）发酵液制备：向浸提后的中草药浸提液中加入浸提液质量比3.0～5.0%葡萄糖、2.0～3.0%酵母膏、0.3～0.5%磷酸二氢钾、0.02%MgSO₄.7H₂O、0.01%CaCl₂,pH调至7.0～7.2；

（4）好氧发酵：选用液体发酵罐，装液量为60～70%（体积比），接种地衣芽孢杆菌和产朊假丝酵母，接种量分别为2～4%、5～8%（体积比），控制发酵温度28～37℃，转速150～300rpm，通气量10～20L/min；在此发酵条件下发酵12～24h；

（5）厌氧发酵：好氧发酵结束后，接种嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌，接种量均为2～4%（体积比），发酵温度28～37℃，控温厌氧发酵12～24h；

（6）发酵后处理：发酵完成后将发酵液体用1.2～2倍体积比的麸皮吸附，在40～60℃鼓风干燥机中干燥，水分控制在8～10%；

（7）粉碎：将干燥后的产品用粉碎机60目过筛粉碎，即得鲆鲽类鱼用发酵型中草药免疫增强剂。

本发明提供一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂，具有预防、保健、治疗和调节免疫等多种功效，是替代抗生素药物的理想、绿色、环保、安全、新型饲料添加剂。该发明发酵中草药饲料添加剂一是可以高效调理鲆鲽类鱼肠道健康，标本兼治，固本培元，保持肠道微生态平衡和最佳免疫状态，提高营养物质的消化吸收率，提高动物机体免疫力；二是可抑制和阻止病原大肠菌、梭状芽孢杆菌、沙门氏菌等有害菌的发生，增加肠道益生菌，维持健康的肠道菌群；三是增强免疫作用，通过刺激肠道内免疫系细胞，增加局部抗体的形成，增加巨噬细胞活性；四是发酵中草药饲料添加剂进入肠内抵制有害菌，降低恶臭及有害成分形成，使排出的粪便消除恶臭，在保护养殖环境的同时提高鲆鲽类鱼肉质品质。

本发明提供一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂，所述鲆鲽类鱼用发酵型中草药免疫增强剂产品在水产饲料全价料中使用的质量比例为0.1～0.5%：或所述的饲料添加剂在预混料、浓缩料以全价料中所需的比例添加使用。

本发明提供一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂，其优势在于：一是在发酵中草药饲料添加剂制备过程中采用了“中草药超声波辅助浸提+多菌种好氧发酵和厌氧发酵相结合二步发酵”的生产工艺，与现有的中草药饲料添加剂产品相比作用效果更显著；二是发酵中草药饲料添加剂具有中草药和益生菌的双重优点，可以高效调理鲆鲽类鱼肠道健康，标本兼治，固本培元，保持肠道微生态平衡和最佳免疫状态，提高营养物质的消化吸收率，提高动物机体免疫力，提高养殖收益，降低养殖风险；三是该产品可替代抗生素使用，对鲆鲽类鱼无不良影响，使用安全，不存在药物残留和耐药性等问题，有着广阔的市场前景。

具体实施方式

实施例1：

一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂，具体制备步骤如下：

（1）称量：按照如下配方准确称量中草药：猴头菇12份、菌陈蒿12份、党参8份、金银花10份、茯苓3份、夏枯草10份、甘草6份、黄芪5份、白术6份、连翘10份、防风6份、山楂7份、百部3份；

（2）复方中草药的制备：将称量后的中草药粉碎至40～60目，混合均匀，制得复方中草药；

（3）超声波辅助浸提：向复方中草药粉剂中加入质量比5倍的水，在超声波辅助作用下，100℃条件下回流浸提20～30min，超声功率400w，频率25kHz；

（4）发酵液制备：向浸提后的中草药浸提液中加入浸提液质量比3.0%葡萄糖、3.0%酵母膏、0.3%磷酸二氢钾、0.02%MgSO₄.7H₂O、0.01%CaCl₂,pH调至7.0～7.2；

（5）好氧发酵：选用液体发酵罐，装液量为60～70%（体积比），接种地衣芽孢杆菌和产朊假丝酵母，接种量分别为2%、8%（体积比），控制发酵温度28～37℃，转速150～300rpm，通气量10～20L/min；在此发酵条件下发酵12h；

（6）厌氧发酵：好氧发酵结束后，接种嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌，接种量分别为2%、4%（体积比），发酵温度28～37℃，控温厌氧发酵24h；

（7）发酵后处理：发酵完成后将发酵液体用1.2倍体积比的麸皮吸附，在40～60℃鼓风干燥机中干燥，水分控制在8～10%；

（8）粉碎：将干燥后的产品用粉碎机60目过筛粉碎，即得鲆鲽类鱼用发酵型中草药免疫增强剂。

实施例2：

一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂，具体制备步骤如下：

（1）称量：按照如下配方准确称量中草药：猴头菇18份、菌陈蒿8份、党参12份、金银花6份、茯苓5份、夏枯草6份、甘草8份、黄芪3份、白术10份、连翘6份、防风10份、山楂5份、百部5份；

（2）复方中草药的制备：将称量后的中草药粉碎至40～60目，混合均匀，制得复方中草药；

（3）超声波辅助浸提：向复方中草药粉剂中加入质量比10倍的水，在超声波辅助作用下，100℃条件下回流浸提20～30min，超声功率400w，频率25kHz；

（4）发酵液制备：向浸提后的中草药浸提液中加入浸提液质量比5.0%葡萄糖、2.0%酵母膏、0.5%磷酸二氢钾、0.02%MgSO₄.7H₂O、0.01%CaCl₂,pH调至7.0～7.2；

（5）好氧发酵：选用液体发酵罐，装液量为60～70%（体积比），接种地衣芽孢杆菌和产朊假丝酵母，接种量分别为4%、5%（体积比），控制发酵温度28～37℃，转速150～300rpm，通气量10～20L/min；在此发酵条件下发酵24h；

（6）厌氧发酵：好氧发酵结束后，接种嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌，接种量分别为4%、2%（体积比），发酵温度28～37℃，控温厌氧发酵12h；

（7）发酵后处理：发酵完成后将发酵液体用2倍体积比的麸皮吸附，在40～60℃鼓风干燥机中干燥，水分控制在8～10%；

（8）粉碎：将干燥后的产品用粉碎机60目过筛粉碎，即得鲆鲽类鱼用发酵型中草药免疫增强剂。

实施例3：

一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂，具体制备步骤如下：

（1）称量：按照如下配方准确称量中草药：猴头菇15份、菌陈蒿10份、党参10份、金银花8份、茯苓4份、夏枯草8份、甘草7份、黄芪4份、白术8份、连翘8份、防风8份、山楂6份、百部4份；

（2）复方中草药的制备：将称量后的中草药粉碎至40～60目，混合均匀，制得复方中草药；

（3）超声波辅助浸提：向复方中草药粉剂中加入质量比7.5倍的水，在超声波辅助作用下，100℃条件下回流浸提20～30min，超声功率400w，频率25kHz；

（4）发酵液制备：向浸提后的中草药浸提液中加入浸提液质量比4.0%葡萄糖、2.5%酵母膏、0.4%磷酸二氢钾、0.02%MgSO₄.7H₂O、0.01%CaCl₂,pH调至7.0～7.2；

（5）好氧发酵：选用液体发酵罐，装液量为60～70%（体积比），接种地衣芽孢杆菌和产朊假丝酵母，接种量分别为3%、6.5%（体积比），控制发酵温度28～37℃，转速150～300rpm，通气量10～20L/min；在此发酵条件下发酵18h；

（6）厌氧发酵：好氧发酵结束后，接种嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌，接种量均为3%（体积比），发酵温度28～37℃，控温厌氧发酵18h；

（7）发酵后处理：发酵完成后将发酵液体用1.6倍体积比的麸皮吸附，在40～60℃鼓风干燥机中干燥，水分控制在8～10%；

（8）粉碎：将干燥后的产品用粉碎机60目过筛粉碎，即得鲆鲽类鱼用发酵型中草药免疫增强剂。

通过对牙鲆幼鱼非特异性免疫的影响实验验证本发明产品的免疫增强功效，试验结果如下：

以上实施例仅用于说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对被发明进行了详细的说明，但对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而对这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。

Claims (1)

1. 一种鲆鲽类鱼用中草药免疫增强剂的制备方法，其特征在于具体包括以下的步骤：

（1）复方中草药的制备：按照猴头菇12～18份、菌陈蒿8～12份、党参8～12份、金银花6～10份、茯苓3～5份、夏枯草6～10份、甘草6～8份、黄芪3～5份、白术6～10份、连翘6～10份、防风6～10份、山楂5～7份、百部3～5份比例准确称量中草药，将其粉碎至40～60目，混合均匀，制得复方中草药；

（2）超声波辅助浸提：向复方中草药粉剂中加入质量比5～10倍的水，在超声波辅助作用下，100℃条件下回流浸提20～30min，超声功率400w，频率25kHz；

（3）发酵液制备：向浸提后的中草药浸提液中加入浸提液质量比3.0～5.0%葡萄糖、2.0～3.0%酵母膏、0.3～0.5%磷酸二氢钾、0.02%MgSO₄.7H₂O、0.01%CaCl₂,pH调至7.0～7.2；

（4）好氧发酵：选用液体发酵罐，装液量为60～70%（体积比），接种地衣芽孢杆菌和产朊假丝酵母，接种量分别为2～4%、5～8%（体积比），控制发酵温度28～37℃，转速150～300rpm，通气量10～20L/min；在此发酵条件下发酵12～24h；

（5）厌氧发酵：好氧发酵结束后，接种嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌，接种量均为2～4%（体积比），发酵温度28～37℃，控温厌氧发酵12～24h；

（6）发酵后处理：发酵完成后将发酵液体用1.2～2倍体积比的麸皮吸附，在40～60℃鼓风干燥机中干燥，水分控制在8～10%；

（7）粉碎：将干燥后的产品用粉碎机60目过筛粉碎，即得鲆鲽类鱼用发酵型中草药免疫增强剂。