CN104215712A - 一种液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法 - Google Patents

一种液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104215712A
CN104215712A CN201410470787.8A CN201410470787A CN104215712A CN 104215712 A CN104215712 A CN 104215712A CN 201410470787 A CN201410470787 A CN 201410470787A CN 104215712 A CN104215712 A CN 104215712A
Authority
CN
China
Prior art keywords
carbendazim
probenazole
remain
hydrochloric acid
liquid chromatographic
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201410470787.8A
Other languages
English (en)
Inventor
戚平
陈桂云
周骏
肖剑
林子豪
刘佳
易云婷
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
GUANGZHOU FOOD INSTITUTE FOR DRUG CONTROL
Original Assignee
GUANGZHOU FOOD INSTITUTE FOR DRUG CONTROL
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by GUANGZHOU FOOD INSTITUTE FOR DRUG CONTROL filed Critical GUANGZHOU FOOD INSTITUTE FOR DRUG CONTROL
Priority to CN201410470787.8A priority Critical patent/CN104215712A/zh
Publication of CN104215712A publication Critical patent/CN104215712A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)

Abstract

高效液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留量的方法，属于食品安全检测技术领域。将果蔬汁用盐酸溶液提取，再用固相萃取柱净化，氮吹至干后用盐酸溶液定容，用液相色谱检测。本发明方法可以同时检测多菌灵和噻菌灵。用本发明方法分析果蔬汁中的多菌灵和噻菌灵残留量，样品处理简单，毒性小，回收率和灵敏度高。

Description

一种液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法
技术领域
本发明涉及检测领域，更具体地，涉及一种液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法。
背景技术
多菌灵和噻菌灵为高效低毒苯并咪唑类广谱杀菌剂，对多种作物由真菌（如半知菌、多子囊菌）引起的病害有防治效果，对人畜低毒。但在部份国家，这种除菌剂只可用于球场或康乐设施，而不能用于农产品。有相关的医学研究表明，杀真菌剂将增加动物患肝脏肿瘤的几率。2012年美国可口可乐多菌灵事件引起了人们对广谱杀菌剂更大更多的关注。
  现阶段多菌灵和噻菌灵检测方法主要有紫外分光光度法、气相色谱法、液相色谱法、液相质谱联用法（胡梅等--超高效液相色谱法-串联质谱测定蒜苔中多菌灵和噻菌灵的残留量）等。其中高效液相色谱法和高效液相质谱联用法是测定果蔬汁多菌灵和噻菌灵残留量最常用方法，其前处理过程，大多是需要用碱来调节pH后采用有机溶剂来提取目标化合物，如采用甲醇（孔祥虹等--固相萃取．高效液相色谱法测定浓缩苹果汁中的多菌灵残留量）、乙腈（黄文雯等--LC- MS/MS法测定浓缩果汁中2-氨基苯并咪唑、多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵的残留量）、乙酸乙酯(廖涛等--苹果汁中多菌灵的高效液相色谱法分析)等提取后过柱，存在的缺点主要有：提取过程繁琐；用碱液来调节，导致稀释体积变大，测定结果不准确；用有机溶剂提取，易造成环境污染，并且由于有机试剂的使用，导致检测人员作业危险性较大。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种快速、简便、灵敏度和回收率高、污染小且能够显著减少检测人员作业危险性的高效液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留量的方法。
    根据以上发明目的，本发明首先提供一种液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法，样品的预处理的方法如下所示，
    S11.提取：将待检测样品混合均匀，准确称取10～30g待检测样品于比色管中，用第一浓度盐酸定容，形成样品提取液，并采用涡旋振荡将所述样品与第一浓度盐酸混合均匀，形成待处理溶液，转移至离心管中离心；
S12净化：准确移取一定体积经离心的待处理溶液上清液过固相萃取柱，用氨水甲醇洗脱，氮吹至干，残渣用第二浓度盐酸溶液溶解定容至1mL。
    样品进行预处理之后，使用液相色谱检测，具体条件为：
    液相色谱条件：色谱柱：Agient Eclipse Plus C18：5μm， 4.6×150mm；流动相A：70%-80%磷酸盐缓冲溶液，流动相B： 20%-30%乙腈；分析时间10min，平衡时间20min；流速：1mL/min，柱温：35℃；进样体积：20μL。
    所述第一浓度盐酸溶液为0.2mol/L。
    所述的第二浓度盐酸溶液为0.1mol/L。
    所述的离心的转速为4000r/min，离心时间为2min。
    所述的固相萃取柱为聚合阳离子交换树脂萃取柱，所述的离心管为聚丙烯离心管。
    所述经离心所得的上清液过柱体积为5～40mL。
所述的流动相A为75%磷酸盐缓冲溶液，所述的流动相B为25%乙腈。
本发明的优点在于，步骤简单，不需要调节pH，且前处理的毒性低，并且能够完整的检测出果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留。
附图说明
图1 多菌灵和噻菌灵标准品混合溶液的色谱图。
图2 多菌灵和噻菌灵校正曲线。
图3 果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留量分析色谱图。
图4 添加了多菌灵和噻菌灵的果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留量分析色谱图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例进一步详细说明本发明。除非特别说明，本发明采用的试剂、设备和方法为本技术领域常规市购的试剂、设备和常规使用的方法。
    仪器与试剂
    仪器：LC1100高效液相色谱仪（安捷伦），PHS-3B pH计（上海雷磁），TDL-5-A离心机（上海飞鸽），高纯水水机（Type1 Synergy）。
    试剂：盐酸、甲醇、氨水（分析纯  广州化学试剂厂）；一级水；Bond Elut Plexa PCX 固相萃取柱（60mg，3mL  Varian）；多菌灵、噻菌灵标准品（纯度分别为99.5%、99.0%  Dr Ehrenstorfer 公司）甲醇分别配成100μg/mL的单标，并于-20℃下保存，使用前用0.1mol/L盐酸逐级稀释配制为所需要浓度的混标。
    标准品溶液制备：分别准确称取标准品：多菌灵、噻菌灵，用甲醇超声溶解，配成100μg/mL的单标储备溶液。低浓度的混合标准系列溶液用0.1mol/L盐酸稀释配制成所需混标。多菌灵和噻菌灵标准品混合溶液的色谱图见附图1。多菌灵和噻菌灵校正曲线见附图2.
实施例1
    应用液相色谱法对多菌灵和噻菌灵进行分析。
    不加标样品预处理：将果蔬汁混合均匀，准确称取12.5g样品于25mL比色管中，用0.2mol/L盐酸溶液定容至25mL，涡旋混合1min后，转移到50mL聚丙烯离心管，室温下4000r/min离心2min；将Bond Elut Plexa PCX 固相萃取柱分别用3mL甲醇和3mL一级水活化，准确移取10mL离心后的上清液过柱，再分别用3mL一级水和3mL甲醇净化固相萃取柱，用6mL3%氨水甲醇洗脱；将洗脱液室温氮吹至干，残渣用0.1mol/L盐酸溶解并定容至1mL，过0.45μm滤膜，待用。
    液相色谱条件：色谱柱：Agient Eclipse Plus C18：5μm， 4.6×150mm；流动相A：70%-80%磷酸盐缓冲溶液，流动相B： 20%-30%乙腈；分析时间10min，平衡时间20min；流速：1mL/min，柱温：35℃；进样体积：20μL。
    加标样品预处理：将果蔬汁混合均匀，准确称取12.5g样品于25mL比色管中，分别加入单标溶液，用0.2mol/L盐酸溶液定容至25mL，涡旋混合1min后，转移到50mL聚丙烯离心管，室温下4000r/min离心2min；将Bond Elut Plexa PCX 固相萃取柱分别用3mL甲醇和3mL一级水活化，准确移取10mL离心后的上清液过柱，再分别用3mL一级水和3mL甲醇净化固相萃取柱，用6mL3%氨水甲醇洗脱；将洗脱液室温氮吹至干，残渣用0.1mol/L盐酸溶解并定容至1mL，过0.45μm滤膜，待用。
    液相色谱条件：色谱柱：Agient Eclipse Plus C18：5μm， 4.6×150mm；流动相A：70%-80%磷酸盐缓冲溶液，流动相B： 20%-30%乙腈；分析时间10min，平衡时间20min；流速：1mL/min，柱温：35℃；进样体积：20μL。固相萃取柱性能验证(样品中所含多菌灵和噻菌灵残留量浓度较低时，可通过提高过柱体积来浓缩目标化合物)。
分别准确移取1.00mL多菌灵和噻菌灵标准储备溶液，加入 0.1mol/L盐酸溶液配制成1μg/mL的混合标准溶液，对固相萃取柱进行活化，分别移取5、10、15、20、40mL混合标准溶液过柱净化，以外标法定量，计算回收率，见表1。
表1
    液相色谱条件：色谱柱：Agient Eclipse Plus C18：5μm， 4.6×150mm；流动相A：70%-80%磷酸盐缓冲溶液，流动相B： 20%-30%乙腈；分析时间10min，平衡时间20min；流速：1mL/min，柱温：35℃；进样体积：20μL。
实施例2
应用液相色谱法对多菌灵和噻菌灵进行分析。
    不加标样品预处理：将果蔬汁混合均匀，准确称取12.5g样品于25mL比色管中，用0.2mol/L盐酸溶液定容至25mL，涡旋混合1min后，转移到50mL聚丙烯离心管，室温下4000r/min离心2min；将Bond Elut Plexa PCX 固相萃取柱分别用3mL甲醇和3mL一级水活化，准确移取10mL离心后的上清液过柱，再分别用3mL一级水和3mL甲醇净化固相萃取柱，用6mL3%氨水甲醇洗脱；将洗脱液室温氮吹至干，残渣用0.1mol/L盐酸溶解并定容至1mL，过0.45μm滤膜，待用。
    液相色谱条件：色谱柱：Agient Eclipse Plus C18：5μm， 4.6×150mm；流动相A：75%磷酸盐缓冲溶液，流动相B： 25%乙腈；分析时间10min，平衡时间20min；流速：1mL/min，柱温：35℃；进样体积：20μL。
果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留量分析色谱图见附图3。
 加标样品预处理：将果蔬汁混合均匀，准确称取12.5g样品于25mL比色管中，分别加入单标溶液，用0.2mol/L盐酸溶液定容至25mL，涡旋混合1min后，转移到50mL聚丙烯离心管，室温下4000r/min离心2min；将Bond Elut Plexa PCX 固相萃取柱分别用3mL甲醇和3mL一级水活化，准确移取10mL离心后的上清液过柱，再分别用3mL一级水和3mL甲醇净化固相萃取柱，用6mL3%氨水甲醇洗脱；将洗脱液室温氮吹至干，残渣用0.1mol/L盐酸溶解并定容至1mL，过0.45μm滤膜，待用。
    液相色谱条件：色谱柱：Agient Eclipse Plus C18：5μm， 4.6×150mm；流动相A：75%磷酸盐缓冲溶液，流动相B：25%乙腈；分析时间10min，平衡时间20min；流速：1mL/min，柱温：35℃；进样体积：20μL。
添加了多菌灵和噻菌灵的果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留量分析色谱图见附图4。
样品及加标样品结果分析见表2.
表2
    固相萃取柱性能验证(样品中所含多菌灵和噻菌灵残留量浓度较低时，可通过提高过柱体积来浓缩目标化合物)。
分别准确移取1.00mL多菌灵和噻菌灵标准储备溶液，加入 0.1mol/L盐酸溶液配制成1μg/mL的混合标准溶液，对固相萃取柱进行活化，分别移取5、10、15、20、40mL混合标准溶液过柱净化，以外标法定量，计算回收率，见表3。
表3
    液相色谱条件：色谱柱：Agient Eclipse Plus C18：5μm， 4.6×150mm；流动相A：75%磷酸盐缓冲溶液，流动相B： 25%乙腈；分析时间10min，平衡时间20min；流速：1mL/min，柱温：35℃；进样体积：20μL。

Claims (8)

1.一种液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法，其特征在于，样品的预处理的方法如下所示，
    S11.提取：将待检测样品混合均匀，准确称取10～30g待检测样品于比色管中，用第一浓度盐酸定容，形成样品提取液，并采用涡旋振荡将所述样品与第一浓度盐酸混合均匀，形成待处理溶液，转移至离心管中离心；
S12净化：准确移取一定体积经离心的待处理溶液上清液过固相萃取柱，用氨水甲醇洗脱，氮吹至干，残渣用第二浓度盐酸溶液溶解定容至1mL。
2.根据权利要求1所述的液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法，其特征在于，样品进行预处理之后，使用液相色谱检测，具体条件为：
    液相色谱条件：色谱柱：Agient Eclipse Plus C18：5μm， 4.6×150mm；流动相A：70%-80%磷酸盐缓冲溶液，流动相B： 20%-30%乙腈；分析时间10min，平衡时间20min；流速：1mL/min，柱温：35℃；进样体积：20μL。
3.根据权利要求1所述的液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法，其特征在于，所述第一浓度盐酸溶液为0.2mol/L。
4.根据权利要求1所述的液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法，其特征在于，所述的第二浓度盐酸溶液为0.1mol/L。
5.根据权利要求1所述的液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法，其特征在于，所述的离心的转速为4000r/min，离心时间为2min。
6.根据权利要求1所述的液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法，其特征在于，所述的固相萃取柱为聚合阳离子交换树脂萃取柱，所述的离心管为聚丙烯离心管。
7.根据权利要求1所述的液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法，其特征在于，所述经离心所得的上清液过柱体积为5～40mL。
8.根据权利要求2所述的液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法，其特征在于，所述的流动相A为75%磷酸盐缓冲溶液，所述的流动相B为25%乙腈。
CN201410470787.8A 2014-09-16 2014-09-16 一种液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法 Pending CN104215712A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410470787.8A CN104215712A (zh) 2014-09-16 2014-09-16 一种液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410470787.8A CN104215712A (zh) 2014-09-16 2014-09-16 一种液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104215712A true CN104215712A (zh) 2014-12-17

Family

ID=52097426

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410470787.8A Pending CN104215712A (zh) 2014-09-16 2014-09-16 一种液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104215712A (zh)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104820031A (zh) * 2015-04-28 2015-08-05 青岛康大分析检测有限公司 一种噻菌灵及其中间物的快速检测方法
CN105223289A (zh) * 2015-09-14 2016-01-06 杭州市质量技术监督检测院 纺织产品中抗菌剂的检测方法
CN105699513A (zh) * 2016-01-21 2016-06-22 中华人民共和国赤峰出入境检验检疫局 高效液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留量的方法
CN107422017A (zh) * 2017-08-01 2017-12-01 信阳师范学院 一种高灵敏检测噻菌灵的化学修饰电极及其制备方法
CN108195976A (zh) * 2018-02-02 2018-06-22 厦门鉴科检测技术有限公司 一种测定橙汁中多菌灵的在线净化和固相萃取方法及装置
CN112007417A (zh) * 2020-08-20 2020-12-01 赣州禾绿康健生物技术有限公司 一种灵芝三萜提取物中多菌灵的脱除装置及方法
CN112461808A (zh) * 2019-09-06 2021-03-09 苏州市农产品质量安全监测中心 用于农产品中多菌灵检测的检测方法以及试剂盒

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102221589A (zh) * 2011-03-28 2011-10-19 中国水稻研究所 液相色谱高分辨质谱检测蔬菜样品中农药多残留量的方法
KR20130039215A (ko) * 2011-10-11 2013-04-19 대한민국(국립농산물품질관리원장) 아세토니트릴을 이용한 콩나물의 잔류농약 분석방법
CN103175813A (zh) * 2012-12-22 2013-06-26 桂林理工大学 荧光光谱同时快速测定蔬菜中多菌灵和噻菌灵含量的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102221589A (zh) * 2011-03-28 2011-10-19 中国水稻研究所 液相色谱高分辨质谱检测蔬菜样品中农药多残留量的方法
KR20130039215A (ko) * 2011-10-11 2013-04-19 대한민국(국립농산물품질관리원장) 아세토니트릴을 이용한 콩나물의 잔류농약 분석방법
CN103175813A (zh) * 2012-12-22 2013-06-26 桂林理工大学 荧光光谱同时快速测定蔬菜中多菌灵和噻菌灵含量的方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALFONSO DI MUCCIO 等: "Selective clean-up applicable to aqueous acetone extracts for the determination of carbendazim and thiabendazole in fruits and vegetables by high-performance liquid chromatography with UV detection", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY A》 *
KONSTANTINOS P. PROUSALIS 等: "Determination of carbendazim, thiabendazole,and o-phenylphenol residues in lemons by HPLC following sample clean-up by ion-pairing", 《ANAL BIOANAL CHEM》 *
何强 等: "固相萃取-离子交换色谱法测定浓缩苹果汁中残留的苯菌灵、多菌灵、噻菌灵", 《色谱》 *
张卉 等: "液相色谱-质谱测定蔬菜、水果中四种保鲜剂的残留量", 《食品科学》 *
连文浩 等: "超高效液相色谱-串联质谱法测定干香菇中多菌灵和噻菌灵残留量研究", 《食品科学》 *
陈练洪 等: "固相萃取-高效液相色谱法同时测定食用菌中多菌灵和噻菌灵残留量", 《理化检验（化学分册）》 *

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104820031A (zh) * 2015-04-28 2015-08-05 青岛康大分析检测有限公司 一种噻菌灵及其中间物的快速检测方法
CN104820031B (zh) * 2015-04-28 2016-09-07 青岛康大分析检测有限公司 一种噻菌灵及其中间物的快速检测方法
CN105223289A (zh) * 2015-09-14 2016-01-06 杭州市质量技术监督检测院 纺织产品中抗菌剂的检测方法
CN105699513A (zh) * 2016-01-21 2016-06-22 中华人民共和国赤峰出入境检验检疫局 高效液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留量的方法
CN105699513B (zh) * 2016-01-21 2018-01-30 中华人民共和国赤峰出入境检验检疫局 高效液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留量的方法
CN107422017A (zh) * 2017-08-01 2017-12-01 信阳师范学院 一种高灵敏检测噻菌灵的化学修饰电极及其制备方法
CN107422017B (zh) * 2017-08-01 2019-06-04 信阳师范学院 一种高灵敏检测噻菌灵的化学修饰电极及其制备方法
CN108195976A (zh) * 2018-02-02 2018-06-22 厦门鉴科检测技术有限公司 一种测定橙汁中多菌灵的在线净化和固相萃取方法及装置
CN112461808A (zh) * 2019-09-06 2021-03-09 苏州市农产品质量安全监测中心 用于农产品中多菌灵检测的检测方法以及试剂盒
CN112007417A (zh) * 2020-08-20 2020-12-01 赣州禾绿康健生物技术有限公司 一种灵芝三萜提取物中多菌灵的脱除装置及方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104215712A (zh) 一种液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留的方法
CN103512984B (zh) 一种检测不同种类“瘦肉精”残留的样品前处理方法
CN102183611B (zh) 一种检测白芍药材中农药残留的方法
CN103940925B (zh) 高效液相色谱快速检测磺胺类抗生素的方法及应用
CN103175932B (zh) 高效液相色谱测定橡胶树中四种激素的方法
CN104181246A (zh) 一种烟草中除草剂残留的合相色谱分析方法
CN103822984B (zh) 同步分离测定草坪草内源脱落酸、赤霉素和生长素的方法
CN103630647A (zh) 一种低分子肝素完全降解产物结合柱前衍生的反相色谱质谱联用检测方法
CN104280471A (zh) 一种果蔬中农药残留的快速检测方法
CN103822983A (zh) 一种高效分离和测定草坪草内源激素的方法
CN105175380A (zh) 一种制备云南松树皮原花青素的方法
CN102890130A (zh) 一种烟草中阿维菌素残留量的检测方法
CN104435746A (zh) 一种从金钗石斛中同时提取制备多糖、黄酮和生物碱
CN104237402A (zh) 一种树皮、树叶中全氟化合物提取及测定方法
CN104215709A (zh) 一种牛肉中阿维菌素类抗生素残留的测定方法
CN104535670A (zh) 一种成熟桔子中多菌灵残留的检测方法
CN104165947B (zh) 一种定量测定植物中生长素与脱落酸含量的方法
CN105920089A (zh) 一种从核桃青皮中高效分离制备植物总多酚的方法
CN102830183A (zh) 一种用于hplc测定丝瓜种子内源激素含量的样品前处理方法
CN111747914A (zh) 一种银杏根皮中分离得到的化合物及其用途
CN103235067A (zh) 一种从芒果中富集具抗氧化活性的没食子单宁的方法
CN103389356A (zh) 饲料中聚醚类抗生素的检测方法
CN105699513B (zh) 高效液相色谱检测果蔬汁中多菌灵和噻菌灵残留量的方法
CN103149289A (zh) 一种烟草中2,4-d残留量的测定方法
CN107271582A (zh) 一种红曲米中桔霉素毒素的检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20141217

RJ01 Rejection of invention patent application after publication