CN104187837A - 一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉及其制备方法 - Google Patents

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CN104187837A CN201410336257.4A CN201410336257A CN104187837A CN 104187837 A CN104187837 A CN 104187837A CN 201410336257 A CN201410336257 A CN 201410336257A CN 104187837 A CN104187837 A CN 104187837A
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Abstract

本申请涉及一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉及其制备方法，与蛋黄蛋白质匹配的特定的生物活性物质为β-胡萝卜素、共轭亚油酸甘油酯，解决了单独补充β-胡萝卜素、亚油酸时风味不佳，且它们在加工成粉末状时由于其性质不稳定而发生颜色和生物活性的劣变问题。制备方法结合超声辅助酶解技术及将脱脂后的蛋黄蛋白与水混合进行二次喷雾干燥，并将蛋黄蛋白质粉与生物活性物质进行创造性的保温处理，不但解决了现有的蛋黄蛋白质粉溶解性差、冲调后稳定性差的问题，还使蛋黄蛋白粉颗粒表面形成多空隙结构，有利于生物活性物质的吸附。

Description

一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉及其制备方法
技术领域
本发明提供了一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉制备方法，涉及降血脂提高免疫力的功能性蛋白质粉，及一种蛋黄蛋白质的改性加工技术，属于食品加工技术领域。
背景技术
现代社会人们生活节奏越来越快，工作压力、饮食结构的改变、饮食不均衡等各种因素使得人们的健康水平令人堪忧。一些慢性病如心血管病、癌症等更加多发，人体脂肪和胆固醇的升高及氧化损伤是导致其发生的原因之一。目前的食品在补充蛋白质的同时无法保证抗氧化物质的含量也无法避免脂肪和胆固醇升高而增加的心血管疾病的风险。因此预防此类现象与补充营养一样重要，已成为研究的热点。
蛋白质作为人体不可缺少的营养成分约占人体组织的20％，其对增强体质、提高免疫力、保持精力旺盛都发挥着重要作用。因此保证优质蛋白质的补给是关系到身体健康的重要问题，只有不断的摄取优质的蛋白质，才能维持细胞的正常功能及其新陈代谢。随着科学的发展，营养学家们对蛋白质粉不断改进，逐渐制造出适用人群范围更为广泛的新型营养食品。但目前市面上的蛋白质粉的主要原料大多为大豆分离蛋白质粉或乳清蛋白粉，其功效主要是补充蛋白，以改善体质、缓解疲劳、增强体能等，功效相对单一，特别是没有具有抗氧化降低血脂功效的蛋白质粉。禽蛋是以其高营养易吸收等特点而深受人们喜爱的动物性食品，方便易得。蛋类主要供给蛋白质，其必需氨基酸的含量较畜肉更为理想，组成比例适合于人体需要，生物价可达94％以上。近几年禽蛋制品企业只是进行了蛋白片、蛋黄粉、全蛋粉等普通型初级蛋制品的生产，经济效益低下。应用生物技术，特别是酶技术对蛋制品进行深加工，提高蛋制品的附加值，是解决蛋品行业市场低迷、缺乏竞争力的一个好途径。目前，国内外对蛋黄粉溶解性研究并不多，北京二商健力食品科技有限公司申请的CN 102960773 A、发明名称为“一种速溶蛋黄粉及其制备方法”还有申请的CN 102960775 A、发明名称为“一种速溶蛋黄粉及其制备方法”的发明专利申请，他们分别通过利用脂肪酶和磷脂酶水解蛋黄液来提高其溶解性。但蛋黄蛋白质粉由于脱脂处理会出现蛋白溶解程度低，溶液体系稳定性差，颗粒不均匀，易粘结等冲调性的问题。如何提高蛋黄蛋白质粉溶解性必也将成为蛋制品领域研究热点。
研究发现，β-胡萝卜素防治癌症有确切疗效。机体内氧自由基泛滥不但会损害正常细胞，且常引起畸变而形成癌症，β-胡萝卜素恰恰是氧自由基最强的“克星”。科研证实，癌症病人血中β-胡萝卜素远远低于正常人。食用富含β-胡萝卜素的食物可以防止身体接触一种称为自由基的破坏分子。通过一个氧化的过程，自由基会对细胞造成伤害。长此以往，将有可能导致人体患上各种各样的慢性疾病。一些研究表明从日常饮食中摄入足量的β-胡萝卜素可能减少患上慢性疾病如心脏病和癌症的危险。亚油酸是一种天然存在于生物体内的天然活性物质，安全、无毒，具有提高免疫力、降低胆固醇、抗动脉粥样硬化、提高骨骼密度、减重等功效，可用于制备预防富贵病的保健食品。中国发明专利(CN1686532A)公开了一种含有共轭亚油酸的减肥人群用营养素。然而β-胡萝卜素、亚油酸均不稳定，在加工成粉末状过程中颜色及生物活性会发生劣变，而且具有一定的涩味和气味，口感较差不利于食用，因而亟需一种同时具有抗氧化及降低胆固醇功效且方便人们冲调食用的的蛋白质产品，但目前国内外尚未有关于含有共轭亚油酸甘油酯的蛋黄蛋白质粉的相关报道。
发明内容
本发明所解决的主要技术问题在于提供一种解决单独补充β-胡萝卜素、亚油酸时风味不佳，且它们在加工成粉末状时由于其性质不稳定而发生颜色和生物活性的劣变问题的方法。
本发明特别提供了一种制备速溶蛋黄蛋白质粉的方法，该方法制备的蛋白质粉在水中溶解度高，并能形成均一稳定的溶液，此种蛋黄蛋白质粉可作为终端快速消费者直接冲调食用，更可应用于饮料或保健食品的生产，大大扩展了蛋粉的可应用范围。目前还没有使用蛋黄蛋白质对活性物质进行吸附而获得高端蛋白质的先例。
本发明的技术方案：
一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉的制备方法，其特征在于按照以下步骤制备：
(1)蛋黄预处理：取市售新鲜鸡蛋小心破壳，将蛋清蛋黄进行分离，蛋黄液用搅拌器搅拌均匀，搅拌速度为200r/min，然后过滤，得到均匀、无杂质的蛋黄液，在50℃、30min条件下巴氏杀菌，备用；
(2)酶水解：将步骤(1)得到的蛋黄液添加复合蛋白酶进行两阶段酶解，第一阶段：在温度45-50℃、pH8.0-9.0的条件下酶解30-60min；第二阶段：在温度52-53℃、pH6.0-6.5的条件下酶解30-60min，得酶解液；所述的复合蛋白酶为Alcalase、中性蛋白酶，Alcalase、中性蛋白酶的添加量按照重量比计蛋黄液∶Alcalase蛋白酶∶中性蛋白酶＝100∶0.3-0.6∶0.4-0.8，得到酶解液；酶解两阶段分别伴随超声波辅助处理，第一阶段频率设置为50KHz，时间为15min；第二阶段降低频率为25KHz，时间为20min；
(3)对上述步骤(2)中得到的酶解液进行喷雾干燥，进风温度160-180℃，出风温度50-80℃；
(4)将上述步骤(3)中得到的蛋黄粉进行乙醇脱脂处理，蛋黄粉与乙醇的混合比例为1∶3-1∶10，然后经过搅拌、过滤、离心分离后得到滤渣沉淀；
(5)向上述步骤(4)中得到的沉淀物中加入一定量的水，按照重量比沉淀物∶水＝100∶40-60；
(6)将上述步骤(5)中得到的混合物进行二次喷雾干燥，进风温度150-180℃，出风温度70-90℃；
(7)将上述步骤(6)中得到的蛋黄蛋白质粉与生物活性物质混合，比例为蛋黄蛋白质粉∶生物活性物质＝100∶5-10，并置于超声波震荡反应器中进行保温处理，功率800-1000w，保温温度25-28℃，时间6-8h；然后再将温度升至50-60℃，继续保温10-12h；
(8)将上述步骤(7)中得到的混合物，置于真空捏合机中进行搅拌处理，压力为100-140mmHg，温度为40-60℃；
(9)将上述步骤(8)中得到的混合蛋白质粉过筛，包装。
进一步，优选步骤(2)中蛋白酶的添加量按照重量比蛋黄液∶Alcalase蛋白酶∶中性蛋白酶＝100∶0.5∶0.4。
进一步，优选步骤(3)中喷雾干燥采进口温度为170℃，出口温度为60℃。
进一步，优选步骤(4)中为得到蛋黄蛋白质，将蛋黄粉与乙醇混合，蛋黄粉与乙醇的混合比例为1∶7。
进一步，优选步骤(5)中脱脂蛋黄与水的混合，按照重量比脱脂蛋黄∶水＝100∶50。
进一步，优选步骤(6)中二次喷雾干燥，采进口温度为170℃，出口温度为80℃。
进一步，优选步骤(7)中所述的蛋黄蛋白质粉与生物活性物质混合比例为100∶9，其中生物活性物质为β-胡萝卜素、共轭亚油酸甘油酯，且二者的比例为1∶2。超声波震荡反应器中进行保温处理，功率900w，保温温度26℃，时间7h；然后将温度升至55℃，继续保温11h。
进一步，优选步骤(8)中所述的真空捏合搅拌处理，真空捏合机的压力为120mmHg，温度为50℃。
蛋黄蛋白质粉溶解性分析方法：
取1g蛋黄蛋白质粉定容至100mL，取一定体积的蛋黄蛋白质粉溶液于50mL离心管中，将样品在3000r/min的离心机中离心20min，上清液稀释100倍，置于1cm比色皿中，以蒸馏水作空白对照，测定最大吸收峰下的吸光度A1，与离心前最大吸收峰下的吸光度A2的比值即为稳定性系数，公式如下：
R ( % ) = A 1 A 2 × 100
式中：R-稳定性系数
A1-离心后最大吸收峰下的吸光值
A2-离心前最大吸收峰下的吸光值
(2)蛋黄蛋白质粉溶解度测定
称取样品5g(准确至0.01g)于50mL烧杯中，用38mL 25℃～30℃的水分数次将蛋黄蛋白质粉溶解于50mL离心管中，加塞。将离心管置于30℃水中保温5min，取出，振摇3min。置离心机中，以适当的转速离心10min，使不溶物沉淀。倾去上清液，并用棉栓擦净管壁。再加入25℃～30℃的水38mL，加塞，上下振荡，使沉淀悬浮。再置离心机中离心10min，倾去上清液，用棉栓仔细擦净管壁。用少量水将沉淀冲洗入已知质量的称量皿中，先在沸水浴上将皿中水分蒸干，再移入100℃烘箱中干燥至恒重(最后两次质量差不超过2mg)。公式如下：
X = 100 - ( m 2 - m 1 ) × 100 ( 1 - B ) × m
式中：X-样品的溶解度，单位为克每百克(g/100g)
m-样品的质量，单位为克(g)
m1-称量皿质量，单位为克(g)
m2-称量皿和不溶物干燥后质量，单位为克(g)
B-样品水分，单位为克每百克(g/100g)
蛋黄蛋白质粉流动性分析
采用注入法测定休止角，进而考察蛋白质粉的流动性。称取蛋黄蛋白质粉25g，将漏斗固定于坐标纸上方一定高度，从漏斗加入蛋白质粉直到形成的堆积圆锥顶部与漏斗底部刚好接触，测定圆锥半径r(cm)，以漏斗底高度h(cm)与圆锥半径r(cm)的比值作为正切值计算休止角Tanθ(°)，公式如下所示：
tan θ = h r
式中：Tanθ为衡量流动性的休止角
过氧化值(POV)测定
称取2.00g-3.00g的试样，置于250mL碘瓶中，加30mL三氯甲烷-冰乙酸混合液，使试样完全溶解。加入1.00mL饱和碘化钾溶液，紧密塞好瓶盖，并轻轻震摇0.5min，然后在暗处放置3min。取出加100mL水，摇匀，立即用硫代硫酸钠标准滴定溶液(0.0020mol/L)滴定至淡黄的时，加1mL淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失为终点，取相同量三氯甲烷-冰乙酸溶液、碘化钾溶液、水，按同一方法，做试剂空白试验。公式如下：
X 1 = ( V 1 - V 2 ) × c × 0.1269 m × 100
式中：
X1-试样的过氧化值，单位为克每百克(g/100g)；
V1-试样消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液体积，单位为毫升(mL)；
V2-试剂空白消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液体积，单位为毫升(mL)；
c-硫代硫酸钠标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升(mol/L)；
m-试样质量，单位为克(g)；
0.1269-与1.00mL硫代硫酸钠标准滴定溶液[c(Na2S2O3)＝1.000mol/L]相当的碘的质量，单位为克(g)。
色差测定
用TES-135物色分析仪测定蛋粉的L、a、b值。其中，L表示透明度，a(正值)表示红色程度，b(正值)表示黄色程度。L值越大，表示颜色越浅，褐变越轻；a，b值越大，分别表示蛋粉内部褐变程度和表面发黄程度越大。
本发明的有益效果：
(1)本发明工艺简单、易于操作，无需添加额外的设备，β-胡萝卜素和共轭亚油酸甘油酯如果单独加工成粉末状作为补充剂，由于其性质的不稳定，会在加工过程中发生颜色和生物活性的劣变，而本发明有效地解决了该问题，共轭亚油酸甘油酯是一种食品乳化剂，而β-胡萝卜素恰恰是一种脂溶性维生素它可以促进β-胡萝卜素在蛋黄蛋白粉溶解中溶解性；β-胡萝卜素还是一种抗氧化剂，可以有效的防止共轭亚油酸甘油酯的氧化，二者起到相辅相成发挥意想不到的协同作用。
共轭亚油酸甘油酯中含有健康的油脂类物质，在食品中可起乳化剂的作用，不但可以帮助蛋黄蛋白质粉的小颗粒更好的分散，使蛋白质粉更容易冲调，起到稳定蛋白质粉冲调后饮品状态的作用，而且由于β-胡萝卜素是一种脂溶性维生素，可以促进其在水溶液中的溶解，β-胡萝卜素是一种抗氧化剂，清除机体内氧自由基。
(2)选择蛋剔除蛋黄中胆固醇含既可以避免摄入过多的胆固醇，又可以利用意外发现的蛋黄中酶解保温处理后的蛋白质吸附性强的特性，蛋黄中蛋白质主要以脂蛋白的形式存在，其中低密度脂蛋白(LDL)是蛋黄中存在最多的蛋白质，它易被酶解而释放出卵磷脂，LDL被认为是蛋黄体现良好乳化性最重要的因素。且在实验中意外地发现，LDL对活性物质的吸附效果较好，能够使蛋白质粉与其充分接触结合紧密。
(3)在发明人前期工作的基础上，创造性地将Alcalase与中性蛋白酶以5∶4的比例复配后用于蛋黄蛋白的水解，此比例协同作用好。两种酶同时使用时，采用鸡蛋蛋黄粉专用的两阶段酶解方式，开创蛋黄粉加工的历史先河。第一酶解阶段，Alcalase蛋白酶起主要作用，Alcalase水解肽链内部的肽键；在第二酶解阶段，中性蛋白酶起主要作用，中性蛋白酶对三维蛋白质结构的外端肽链的末端进行水解。两种酶复合使用能够大大提高酶解效果，改善蛋黄蛋白粉的溶解性。
两种酶单独使用时由于酶的专一性只能起各自的作用，使用时酶效率低，极性基团暴漏不充分，溶解度和冲调性指标低。
(4)将酶解与超声波以特定参数协同作用。超声波作为一种物理强化手段，可在瞬间产生高温和几千个大气压的高压，并伴有强大的冲击波或射流，物理场作用可以使蛋白质的结构发生改变，从而改变蛋白质加工性能、降解性能等。蛋白质在酶解过程中，高频超声波处理对蛋白的“破碎”能力更强，使酶的结合位点增多，从而使得Alcalase蛋白酶更易与蛋白质结合，可以有效提高酶解效率。此外，高能量的超声波使部分蛋白质分子聚集，因而疏水性下降，从而进一步改善蛋黄蛋白质的溶解性；而低频超声波下经中性蛋白酶水解的蛋白粒径减小，胶团结构疏松，分散性增强。总体上，超声波作为一种能量形式，具有加热作用和空化作用，对酶反应可产生促进或抑制双重作用。在该温度条件下，与空化作用相比，加热作用占主导，超声场下的反应体系吸收超声波能量，从而加速了酶促水解反应，表现为促进作用，促进了酶催化反应。
(5)创造性的进行保温处理.未经保温处理的产品，其中的蛋白质粉与生物生物活性物质结合不紧密，在后续的贮藏过程中，易出现脱落现象，从而使生物活性物质的颜色及活性劣变。而本发明的有益之处还在于将二次喷雾干燥后得到的蛋黄蛋白质粉与生物活性物质进行超声波辅助保温处理，与未经该处理过程相比，可以使蛋白的非极性基团与生物活性物质的结合更加紧密且均匀，本发明创造性地采用分阶段保温的方法，首先将温度控制在25-28℃，在此温度下共轭亚油酸甘油酯与蛋黄蛋白质粉的结合作用较强，经搅拌后再将温度升至50-60℃，使β-胡萝卜素与蛋黄蛋白质粉充分结合。此外，经保温处理后该蛋黄蛋白质粉的颜色及抗氧化性均有所改善。
本发明的另一有益之处在于利用真空捏合机进行减压干燥蛋黄蛋白质粉与生物活性物质，与传统的混合制粒方法相对比，本方法的突出优点在于所添加的β-胡萝卜素和共轭亚油酸甘油酯能有效的吸附到蛋白质颗粒表面的孔隙中，这也使得混合物的流动性及粘度大大得到改善。(确认表格中数值的升降或趋势是否存在矛盾，本申请的效果可以稍微更好些，觉得可以，可不改变数值)
表一：单一酶与复合酶对蛋黄蛋白质粉溶解性影响
每组实验都进行了三组平行试验，每个数值都是三组数据的平均值
*复合酶表示Alcalase蛋白酶与中性蛋白酶用量比为5∶4，总用量为0.9％
表二：：超声辅助酶解处理对比
每组实验都进行了三组平行试验，每个数值都是三组数据的平均值
*复合酶表示Alcalase蛋白酶与中性蛋白酶用量比为5∶4，总用量为0.9％
**超声波辅助处理首先频率为50KHz，时间为15min；然后降频至25KHz，时间为20min
表三：真空捏合机与传统挤压制粒对蛋黄蛋白质粉流动性的影响
表四：共轭亚油酸甘油酯贮藏过程中过氧化值比较
表五：β-胡萝卜素贮藏过程中颜色变化比较
表六：β-胡萝卜素贮藏过程中过氧化值比较
具体实施方式
实施例1
(1)蛋黄预处理：取市售新鲜鸡蛋小心破壳，将蛋清蛋黄进行分离，蛋黄液用搅拌器搅拌均匀，搅拌速度为200r/min，然后过滤，得到均匀、无杂质的蛋黄液，在50℃、30min条件下巴氏杀菌，备用；
(2)酶水解：将步骤(1)得到的蛋黄液添加复合蛋白酶进行两阶段酶解，第一阶段：在温度45℃、pH8.0的条件下酶解30min；第二阶段：在温度52℃、pH6.0的条件下酶解30min，得酶解液；所述的复合蛋白酶为Alcalase、中性蛋白酶，Alcalase、中性蛋白酶的添加量按照重量比计蛋黄液∶Alcalase蛋白酶∶中性蛋白酶＝100∶0.3∶0.4，得到酶解液；酶解两阶段分别伴随超声波辅助处理，第一段频率设置为50KHz，时间为15min；第二段降低频率为25KHz，时间为20min；
(3)对上述步骤(2)中得到的酶解液进行喷雾干燥，进风温度160℃，出风温度50℃；
(4)将上述步骤(3)中得到的蛋黄粉进行乙醇脱脂处理，蛋黄粉与乙醇的混合比例为1∶3，然后经过搅拌、过滤、离心分离后得到滤渣沉淀；
(5)向上述步骤(4)中得到的沉淀物中加入一定量的水，按照重量比沉淀物∶水＝100∶40；
(6)将上述步骤(5)中得到的混合物进行二次喷雾干燥，进风温度150℃，出风温度70℃；
(7)将上述步骤(6)中得到的蛋黄蛋白质粉与生物活性物质混合，比例为蛋黄蛋白质粉∶生物活性物质＝100∶5，并置于超声波震荡反应器中进行保温处理，功率800w，保温温度25℃，时间6h；然后再将温度升至50℃，继续保温10h；
(8)将上述步骤(7)中得到的混合物，置于真空捏合机中进行搅拌处理，压力为100mmHg，温度为40℃；
(9)将上述步骤(8)中得到的混合蛋白质粉过筛，包装。
实施例2
(1)蛋黄预处理：取市售新鲜鸡蛋小心破壳，将蛋清蛋黄进行分离，蛋黄液用搅拌器搅拌均匀，搅拌速度为200r/min，然后过滤，得到均匀、无杂质的蛋黄液，在50℃、30min条件下巴氏杀菌，备用；
(2)酶水解：将步骤(1)得到的蛋黄液添加复合蛋白酶进行两阶段酶解，第一阶段：在温度48℃、pH8.5的条件下酶解45min；第二阶段：在温度52.5℃、pH6.3的条件下酶解45min，得酶解液；所述的复合蛋白酶为Alcalase、中性蛋白酶，Alcalase、中性蛋白酶的添加量按照重量比计蛋黄液∶Alcalase蛋白酶∶中性蛋白酶＝100∶0.5∶0.6，得到酶解液；酶解两阶段分别伴随超声波辅助处理，第一阶段频率设置为50KHz，时间为15min；第二阶段降低频率为25KHz，时间为20min；
(3)对上述步骤(2)中得到的酶解液进行喷雾干燥，进风温度170℃，出风温度65℃；
(4)将上述步骤(3)中得到的蛋黄粉进行乙醇脱脂处理，蛋黄粉与乙醇的混合比例为1∶7，然后经过搅拌、过滤、离心分离后得到滤渣沉淀；
(5)向上述步骤(4)中得到的沉淀物中加入一定量的水，按照重量比沉淀物∶水＝100∶50；
(6)将上述步骤(5)中得到的混合物进行二次喷雾干燥，进风温度150-180℃，出风温度80℃；
(7)将上述步骤(6)中得到的蛋黄蛋白质粉与生物活性物质混合，比例为蛋黄蛋白质粉∶生物活性物质＝100∶7，并置于超声波震荡反应器中进行保温处理，功率900W，保温温度26℃，时间7h；然后再将温度升至55℃，继续保温11h；
(8)将上述步骤(7)中得到的混合物，置于真空捏合机中进行搅拌处理，压力为120mmHg，温度为50℃；
(9)将上述步骤(8)中得到的混合蛋白质粉过筛，包装。
实施例3
(1)蛋黄预处理：取市售新鲜鸡蛋小心破壳，将蛋清蛋黄进行分离，蛋黄液用搅拌器搅拌均匀，搅拌速度为200r/min，然后过滤，得到均匀、无杂质的蛋黄液，在50℃、30min条件下巴氏杀菌，备用；
(2)酶水解：将步骤(1)得到的蛋黄液添加复合蛋白酶进行两阶段酶解，第一阶段：在温度50℃、pH9.0的条件下酶解60min；第二阶段：在温度53℃、pH6.5的条件下酶解60min，得酶解液；所述的复合蛋白酶为Alcalase、中性蛋白酶，Alcalase、中性蛋白酶的添加量按照重量比计蛋黄液∶Alcalase蛋白酶∶中性蛋白酶＝100∶0.6∶0.8，得到酶解液；酶解两阶段分别伴随超声波辅助处理，第一阶段频率设置为50KHz，时间为15min；第二阶段降低频率为25KHz，时间为20min；
(3)对上述步骤(2)中得到的酶解液进行喷雾干燥，进风温度180℃，出风温度80℃；
(4)将上述步骤(3)中得到的蛋黄粉进行乙醇脱脂处理，蛋黄粉与乙醇的混合比例为1∶10，然后经过搅拌、过滤、离心分离后得到滤渣沉淀；
(5)向上述步骤(4)中得到的沉淀物中加入一定量的水，按照重量比脱脂蛋黄∶水＝100∶60；
(6)将上述步骤(5)中得到的混合物进行二次喷雾干燥，进风温度180℃，出风温度90℃；
(7)将上述步骤(6)中得到的蛋黄蛋白质粉与生物活性物质混合，比例为蛋黄蛋白质粉∶生物活性物质＝100∶10，并置于超声波震荡反应器中进行保温处理，功率1000W，保温温度28℃，时间8h；然后再将温度升至60℃，继续保温12h；
(8)将上述步骤(7)中得到的混合物，置于真空捏合机中进行搅拌处理，压力为140mmHg，温度为60℃；
(9)将上述步骤(8)中得到的混合蛋白质粉过筛，包装。

Claims (10)

1.一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉的制备方法，其特征在于按照以下步骤制备：
(1)蛋黄预处理：取市售新鲜鸡蛋小心破壳，将蛋清蛋黄进行分离，蛋黄液用搅拌器搅拌均匀，搅拌速度为200r/min，然后过滤，得到均匀、无杂质的蛋黄液，在50℃、30min条件下巴氏杀菌，备用；
(2)酶水解：将步骤(1)得到的蛋黄液添加复合蛋白酶进行两阶段酶解，第一阶段：在温度45-50℃、pH8.0-9.0的条件下酶解30-60min；第二阶段：在温度52-53℃、pH6.0-6.5的条件下酶解30-60min，得酶解液；所述的复合蛋白酶为Alcalase、中性蛋白酶，Alcalase、中性蛋白酶的添加量按照重量比计蛋黄液∶Alcalase蛋白酶∶中性蛋白酶＝100∶0.3-0.6∶0.4-0.8，得到酶解液；酶解两阶段分别伴随超声波辅助处理，第一阶段频率设置为50KHz，时间为15min；第二阶段降低频率为25KHz，时间为20min；
(3)对上述步骤(2)中得到的酶解液进行喷雾干燥，优选进风温度160-180℃，出风温度50-80℃；
(4)将上述步骤(3)中得到的蛋黄粉进行乙醇脱脂处理，蛋黄粉与乙醇的混合比例为1∶3-1∶10，然后经过搅拌、过滤、离心分离后得到滤渣沉淀；
(5)向上述步骤(4)中得到的沉淀物中加入一定量的水，按照重量比沉淀物∶水＝100∶40-60；
(6)将上述步骤(5)中得到的混合物进行二次喷雾干燥，优选进风温度150-180℃，出风温度70-90℃；
(7)将上述步骤(6)中得到的蛋黄蛋白质粉与生物活性物质混合，比例为蛋黄蛋白质粉∶生物活性物质＝100∶5-10，并置于超声波震荡反应器中进行保温处理，功率800-1000w，保温温度25-28℃，时间6-8h；然后再将温度升至50-60℃，继续保温10-12h；
(8)将上述步骤(7)中得到的混合物，置于真空捏合机中进行搅拌处理，压力为100-140mmHg，温度为40-60℃；
(9)将上述步骤(8)中得到的混合蛋白质粉过筛，包装。
2.根据权利要求1所述的一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中蛋白酶的添加量按照蛋黄液∶Alcalase蛋白酶∶中性蛋白酶＝100∶0.5∶0.4，第一阶段酶解温度为50℃，pH为8，酶解时间为60min；第二阶段酶解温度为52℃，pH为6.2，酶解时间为50min；其中Alcalase蛋白酶的活力为600000U/g，中性蛋白酶的活力为100000U/g。
3.根据权利要求1所述的一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中所述的喷雾干燥采进口温度为170℃，出口温度为60℃。
4.根据权利要求1所述的一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉的制备方法，其特征在于，在步骤(4)中蛋黄粉与乙醇的混合比例为1∶7。
5.根据权利要求1所述的一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉得制备方法，其特征在于，在步骤(5)中脱脂蛋黄与水的混合，按照重量比脱脂蛋黄∶水＝100∶50。
6.根据权利要求1所述的一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉的制备方法，其特征在于，在步骤(6)中所述的二次喷雾干燥，采进口温度为170℃，出口温度为80℃。
7.根据权利要求5或6任一项所述的一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉的制备方法，其特征在于该方法制备得到的所述蛋黄蛋白质粉颗粒表面具有更多更细小的孔隙，更加有利于吸附生物活性物质。
8.根据权利要求1所述的一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉的制备方法，其特征在于，在步骤(7)中所述蛋黄蛋白质粉与生物活性物质混合比例为100∶9，其中生物活性物质为β-胡萝卜素、共轭亚油酸甘油酯，且二者的比例为1∶2；超声波震荡反应器中进行保温处理，功率900w，保温温度26℃，时间7h；然后将温度升至55℃，继续保温11h。
9.根据权利要求1所述的一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉的制备方法，其特征在于，在步骤(8)中所述的真空捏合搅拌处理，真空捏合机的压力为120mmHg，温度为50℃。
10.一种含有生物活性物质的速溶蛋黄蛋白质粉，其特征在于是根据权利要求1-9任一项所述的制备方法制备得到。
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