CN104138350A - 一种黄芩素温敏凝胶及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种黄芩素温敏凝胶及其制备方法和应用。所述的黄芩素温敏凝胶是由0.1～10wt%黄芩素包合物、10～32wt%温敏凝胶基质、0～20wt%温度调节剂、0～2wt%粘度调节剂、0～0.5wt%防腐剂及余量水组成；其中的pH值为3.8～5.0；其中的黄芩素含量为0.03～0.2wt%；所述的黄芩素包合物是由环糊精或/和环糊精衍生物包合黄芩素而得。本发明提供的黄芩素温敏凝胶在体外为液体状态，具有剂量容易控制、使用方便等优点，在进入阴道腔后能迅速形成凝胶，可延长滞留时间，增强治疗效果，且能够到达阴道深处及刺激性小，是一种有效的治疗女性阴道炎、宫颈炎的阴道用新药。

Description

一种黄芩素温敏凝胶及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种温敏凝胶及其制备方法和应用，具体说，是涉及一种黄芩素温敏凝胶及其制备方法和应用，属于医药技术领域。

背景技术

阴道炎、宫颈炎是妇科最常见疾病，是阴道或子宫颈受病原体及其它致病因素的侵袭而引起的炎症。临床上以慢性宫颈炎最为常见，主要表现为宫颈糜烂。宫颈糜烂被确认为宫颈癌的高危因素之一，宫颈糜烂患者汇总宫颈癌发病率是正常宫颈者的4-7倍，重度糜烂患者的发病率是轻度糜烂患者的10.1倍。因此，治疗阴道炎、宫颈炎、宫颈糜烂，最终达到根除宫颈癌，对全世界妇女健康而言具有重大意义。

目前常用于女性阴道炎、宫颈炎症治疗的阴道用制剂主要包括：洗剂、栓剂、泡腾片、凝胶剂、乳膏剂、膜剂等。洗剂为液体制剂，尽管可冲洗阴道内的感染物，但由于作用时间过短，局部抗炎、杀菌作用较差；栓剂有良好的局部滞留特征，但其治疗有效部位限于阴道口3-5cm，而阴道长8-12cm；凝胶剂由于以固体凝胶形式给药，药物与病患部位接触分散不均匀，且目前凝胶剂的凝胶强度小，生物粘附力差，局部作用时间不够，极大影响了疗效；泡腾片虽可解决凝胶剂的分散不均匀问题，但局部作用时间过短，且产生大量排出物污染衣物。

温敏凝胶为一种新型的阴道给药剂型，在温度低于某个胶凝温度时（通常30℃），制剂形态为液体，接触体温2-3min后转变为固态，可成功解决普通凝胶剂在病患部位分散不均匀的问题，同时也可避免栓剂无法抵达阴道深部的问题，用药方便、卫生，也不会污染衣物，且患者的顺应性较高。

黄芩素（Baicalein）又名黄芩苷元、黄芩黄素，为中药黄芩中的主要有效成分之一，在生药中约占5.41%，其化学结构式如下所示：

现有研究已表明黄芩素具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗纤维化及心脑血管、神经元保护等药理作用。但因其溶解度较低、稳定性差、存在肝肠循环、口服吸收差、生物利用度较低等缺点，限制了其在临床上的应用。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明的目的是提供一种黄芩素温敏凝胶及其制备方法和应用，以有效解决黄芩素以阴道给药形式用于治疗女性阴道炎、宫颈炎等疾病的临床应用难题。

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

一种黄芩素温敏凝胶，其组成处方如下：

余量为水；其中的pH值为3.8～5.0；其中的黄芩素含量为0.03～0.2 wt%；所述的黄芩素包合物是由环糊精或/和环糊精衍生物包合黄芩素而得。

作为一种优选方案，所述的黄芩素包合物是由环糊精或/和环糊精衍生物与黄芩素按摩尔比1:1～50:1进行包合而得，所述的环糊精为α-环糊精(α-CD)，所述的环糊精衍生物为二甲基-β-环糊精（DM-β-CD）、羟乙基-β-环糊精(HE-β-CD)、磺丁基醚-β-环糊精（SBE-β-CD）、6-羧甲基-β-环糊精（6-CM-β-CD）、羟丙基-γ-环糊精（HP-γ-CD）中的至少一种；所述的温敏凝胶基质为泊洛沙姆407；所述的温度调节剂为泊洛沙姆188；所述的粘度调节剂为羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、海藻酸钠中的至少一种；所述的防腐剂为三氯叔丁醇、苯扎溴铵、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯中的至少一种。

作为进一步优选方案，所述的黄芩素温敏凝胶的组成处方如下：

余量为水；其中的pH值为3.8～4.5；其中的黄芩素含量为0.05～0.1 wt%；

所述的黄芩素包合物是由二甲基-β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精中的至少一种与黄芩素按摩尔比1:1～50:1进行包合而得；所述的粘度调节剂为羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、海藻酸钠中的至少一种；所述的防腐剂为三氯叔丁醇、苯扎溴铵、尼泊金乙酯中的至少一种。

作为更进一步优选方案，所述的黄芩素温敏凝胶的组成处方如下：

余量为水；其中的pH值为4.0～4.2。

一种制备所述的黄芩素温敏凝胶的方法，包括如下步骤：

a)将处方量的黄芩素包合物、温度调节剂、粘度调节剂及防腐剂溶于水中，搅拌使分散均匀；

b)边搅拌边缓缓加入处方量的温敏凝胶基质，加毕，继续搅拌使温敏凝胶基质颗粒被水润湿；

c)将步骤b)获得的混合物体系在2～8℃静置，直至得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，然后用pH调节剂调节溶液体系的pH，即得所述的黄芩素温敏凝胶。

上述的黄芩素包合物优选为由环糊精或/和环糊精衍生物与黄芩素按摩尔比1:1～50:1进行包合而得，所述的环糊精优选为α-环糊精(α-CD)，所述的环糊精衍生物优选为二甲基-β-环糊精（DM-β-CD）、羟乙基-β-环糊精(HE-β-CD)、磺丁基醚-β-环糊精（SBE-β-CD）、6-羧甲基-β-环糊精（6-CM-β-CD）、羟丙基-γ-环糊精（HP-γ-CD）中的至少一种；所述的温敏凝胶基质优选为泊洛沙姆407；所述的温度调节剂优选为泊洛沙姆188；所述的粘度调节剂优选为羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、海藻酸钠中的至少一种；所述的防腐剂优选为三氯叔丁醇、苯扎溴铵、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯中的至少一种。

上述的黄芩素包合物进一步优选为由二甲基-β-环糊精（DM-β-CD）、羟乙基-β-环糊精(HE-β-CD)、羟丙基-γ-环糊精（HP-γ-CD）中的至少一种与黄芩素按摩尔比1:1～50:1进行包合而得。

所述的pH调节剂优选为乳酸。

本发明中所述的黄芩素包合物的制备可采用溶剂法、超声法或研磨法，具体操作可参见中国专利申请CN201210186737.8中所述。

因本发明实验表明：通过阴道给予本发明所述的黄芩素温敏凝胶，能显著改善宫颈组织形态学损伤，减轻宫颈水肿，减少炎细胞浸润，对苯酚所致的宫颈炎模型有明显治疗效果，且在治疗剂量下无明显的不良反应；因此，本发明所述的黄芩素温敏凝胶可用作治疗女性阴道炎、宫颈炎的药物。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明通过采用经环糊精或/和环糊精衍生物包合的黄芩素作为有效活性成分，首次制得了黄芩素温敏凝胶，该温敏凝胶在体外为液体状态，具有剂量容易控制、使用方便等优点，在进入阴道腔后能迅速形成凝胶，可延长滞留时间，增强治疗效果，且能够到达阴道深处及刺激性小，是一种有效的治疗女性阴道炎、宫颈炎的阴道用新药，具有广阔的药用前景和开发价值。

附图说明

图1为实施例1制得的黄芩素温敏凝胶的体外累积释药曲线；

图2为实施例1制得的黄芩素温敏凝胶的累积溶蚀曲线；

图3为实施例1所制得的黄芩素温敏凝胶的溶蚀与释药的相关性曲线；

图4体现了本发明的黄芩素温敏凝胶对大鼠宫颈炎的治疗作用，其中：

A图为未经处理的空白对照组的正常的子宫颈；

B图为经苯酚感染的模型组的子宫颈，子宫颈上皮坏死、脱落，大量炎细胞浸润，腔内有大量炎性渗出物；

C图为苯酚感染后经阳性对照药消糜栓治疗7天后的子宫颈，子宫颈血管轻度扩张，少量炎细胞浸润，基本恢复正常；

D图为苯酚感染后经实施例2所制得的黄芩素温敏凝胶治疗7天后的子宫颈，子宫颈上皮完好，未见明显异常，偶见少量炎细胞浸润；

E图为苯酚感染后经实施例4所制得的黄芩素温敏凝胶治疗7天后的子宫颈，子宫颈上皮完好，未见明显异常，偶见少量炎细胞浸润。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细、完整地说明。实施例中所用的黄芩素包合物是参见中国专利申请CN201210186737.8中所述方法制备而得。

实施例1

本实施例所制备的黄芩素温敏凝胶的组成处方如下：

用乳酸调节pH为4.2；加水至100g。

具体制备方法如下：

一、包合物的制备

精密称取0.9g的羟丙基-γ-环糊精置于50mL三角锥形瓶中，加入10mL水搅拌使溶解；另精密称取0.05g的黄芩素，用50mL无水乙醇溶解；边超声边向羟丙基-γ-环糊精水溶液中逐滴加入黄芩素乙醇溶液；滴毕，于45℃超声4h，然后将溶液转移至圆底烧瓶中，旋转挥干溶剂；注入适量的蒸馏水使残渣充分溶解；经0.45μm微膜过滤后，对滤液进行冷冻干燥，即得黄芩素与羟丙基-γ-环糊精的包合物。

二、温敏凝胶的制备

将处方量的黄芩素与羟丙基-γ-环糊精的包合物、泊洛沙姆188、羟丙基甲基纤维素、苯扎溴铵溶于水中，边搅拌边缓慢加入处方量的泊洛沙姆407，持续搅拌直至泊洛沙姆颗粒均被水润湿，然后将其放置于4℃冰箱，冷藏过夜，直至得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，然后用乳酸调节pH为4.2，即得黄芩素温敏凝胶，该凝胶的胶凝温度为35.2℃。

图1为本实施例所制得的黄芩素温敏凝胶的体外累积释药曲线，由图1可见：黄芩素温敏凝胶的累积释药量随时间延长而不断增加，但超过60min后增加幅度变小，持续释放至480min时已接近完全。

图2为本实施例所制得的黄芩素温敏凝胶的累积溶蚀曲线，由图2可见：黄芩素温敏凝胶的累积溶蚀曲线和累积释放曲线相似，累积溶蚀量随时间延长而不断增加，超过60min后增加幅度变小，至480min时凝胶溶蚀已接近完全。

图3为本实施例所制得的黄芩素温敏凝胶的溶蚀与释药的相关性曲线，由图3可见：二者存在良好的线性关系，温敏凝胶的溶蚀量越大，药物的释放越完全，表明温敏凝胶中黄芩素的释药机制主要是通过溶蚀方式释药，兼有扩散行为。

实施例2

本实施例所制备的黄芩素温敏凝胶的组成处方如下：

用乳酸调节pH为4.2；加水至100g。

具体制备方法如下：

一、包合物的制备

精密称取1.8g的羟丙基-γ-环糊精，加入20mL水搅拌使溶解；另精密称取0.1g的黄芩素，用100mL无水乙醇溶解；边超声边向羟丙基-γ-环糊精水溶液中逐滴加入黄芩素乙醇溶液；滴毕，于50℃超声6h，然后将溶液转移至圆底烧瓶中，旋转挥干溶剂；注入适量的蒸馏水使残渣充分溶解；经0.45μm微膜过滤后，对滤液进行冷冻干燥，即得黄芩素与羟丙基-γ-环糊精的包合物。

二、温敏凝胶的制备

将处方量的黄芩素与羟丙基-γ-环糊精的包合物、泊洛沙姆188、羟丙基甲基纤维素、苯扎溴铵溶于水中，边搅拌边缓慢加入处方量的泊洛沙姆407，持续搅拌直至泊洛沙姆颗粒均被水润湿，然后将其放置于4℃冰箱，冷藏过夜，直至得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，然后用乳酸调节pH为4.2，即得黄芩素温敏凝胶，该凝胶的胶凝温度为35.2℃。

实施例3

本实施例所制备的黄芩素温敏凝胶的组成处方如下：

用乳酸调节pH为4.5；加水至100g。

具体制备方法如下：

一、包合物的制备

精密称取0.3g的羟乙基-β-环糊精，加入10mL水搅拌使溶解；另精密称取0.05g的黄芩素，用50mL无水乙醇溶解；边超声边向羟乙基-β-环糊精水溶液中逐滴加入黄芩素乙醇溶液；滴毕，于40℃超声4h，然后将溶液转移至圆底烧瓶中，旋转挥干溶剂；注入适量的蒸馏水使残渣充分溶解；经0.45μm微膜过滤后，对滤液进行冷冻干燥，即得黄芩素与羟乙基-β-环糊精的包合物。

二、温敏凝胶的制备

将处方量的黄芩素与羟乙基-β-环糊精的包合物、泊洛沙姆188、海藻酸钠、尼泊金乙酯溶于水中，边搅拌边缓慢加入处方量的泊洛沙姆407，持续搅拌直至泊洛沙姆颗粒均被水润湿，然后将其放置于4℃冰箱，冷藏过夜，直至得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，然后用乳酸调节pH为4.5，即得黄芩素温敏凝胶，该凝胶的胶凝温度为34.5℃。

实施例4

本实施例所制备的黄芩素温敏凝胶的组成处方如下：

用乳酸调节pH为3.8；加水至100g。

具体制备方法如下：

一、包合物的制备

精密称取0.6g的二甲基-β-环糊精，加入20mL水搅拌使溶解；另精密称取0.05g的黄芩素，用50mL无水乙醇溶解；边超声边向二甲基-β-环糊精水溶液中逐滴加入黄芩素乙醇溶液；滴毕，于45℃超声5h，然后将溶液转移至圆底烧瓶中，旋转挥干溶剂；注入适量的蒸馏水使残渣充分溶解；经0.45μm微膜过滤后，对滤液进行冷冻干燥，即得黄芩素与二甲基-β-环糊精的包合物。

二、温敏凝胶的制备

将处方量的黄芩素与二甲基-β-环糊精的包合物、泊洛沙姆188、甲基纤维素、三氯叔丁醇溶于水中，边搅拌边缓慢加入处方量的泊洛沙姆407，持续搅拌直至泊洛沙姆颗粒均被水润湿，然后将其放置于4℃冰箱，冷藏过夜，直至得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，然后用乳酸调节pH为3.8，即得黄芩素温敏凝胶，该凝胶的胶凝温度为33.8℃。

采用实施例2和实施例4所制备的黄芩素温敏凝胶对大鼠宫颈炎动物模型进行了实验，并与阳性对照药消糜栓进行了对比实验。具体实验方案如下：

试验动物分组：取体重180-220g的雌性大鼠，随机分为：空白对照组、模型对照组、阳性药对照组、黄芩素温敏凝胶组I（实施例2）、黄芩素温敏凝胶组II（实施例4）。

宫颈炎模型的建立：除空白对照组外，每只大鼠阴道内注射0.5mL苯酚胶浆，每天一次，连续3天，空白对照组注射等容积空白胶浆，3天后发现除空白胶浆组外，其它3组大鼠的外阴外翻，且红肿有脓水流出，说明构建模型成功。

动物给药：各实验组造模成功后开始给药，连续给药7天，阳性对照药组每天每只给予0.3g，温敏凝胶组每天每只给予0.5mL，空白对照组和模型组均给与等体积蒸馏水，最后一次给药后，大鼠禁食24h，每只大鼠注射1.5mL乌拉坦麻醉，取阴道至子宫分角处组织，进行病理组织学检查。

实验结果见图4所示，其中：

A图为未经处理的空白对照组的正常的子宫颈；

B图为经苯酚感染的模型组的子宫颈，子宫颈上皮坏死、脱落，大量炎细胞浸润，腔内有大量炎性渗出物；

C图为苯酚感染后经阳性对照药消糜栓治疗7天后的子宫颈，子宫颈血管轻度扩张，少量炎细胞浸润，基本恢复正常；

D图为苯酚感染后经实施例2所制得的黄芩素温敏凝胶治疗7天后的子宫颈，子宫颈上皮完好，未见明显异常，偶见少量炎细胞浸润；

E图为苯酚感染后经实施例4所制得的黄芩素温敏凝胶治疗7天后的子宫颈，子宫颈上皮完好，未见明显异常，偶见少量炎细胞浸润。

由图4可表明：本发明提供的黄芩素温敏凝胶能显著改善宫颈组织形态学损伤，减轻宫颈水肿，减少炎细胞浸润，对苯酚所致的宫颈炎模型有明显治疗效果；本发明所述的黄芩素温敏凝胶可用作治疗女性阴道炎、宫颈炎的药物。

最后有必要在此说明的是：以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用于限制本发明，本领域的技术人员根据本发明的上述内容作出的一些非本质的改进和调整均属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种黄芩素温敏凝胶，其特征在于，其组成处方如下：

余量为水；其中的pH值为3.8～5.0；其中的黄芩素含量为0.03～0.2wt%；所述的黄芩素包合物是由环糊精或/和环糊精衍生物包合黄芩素而得。

2.如权利要求1所述的黄芩素温敏凝胶，其特征在于：所述的黄芩素包合物是由环糊精或/和环糊精衍生物与黄芩素按摩尔比1:1～50:1进行包合而得，所述的环糊精为α-环糊精，所述的环糊精衍生物为二甲基-β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、磺丁基醚-β-环糊精、6-羧甲基-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精中的至少一种；所述的温敏凝胶基质为泊洛沙姆407；所述的温度调节剂为泊洛沙姆188；所述的粘度调节剂为羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、海藻酸钠中的至少一种；所述的防腐剂为三氯叔丁醇、苯扎溴铵、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯中的至少一种。

3.如权利要求2所述的黄芩素温敏凝胶，其特征在于，所述的黄芩素温敏凝胶的组成处方如下：

余量为水；其中的pH值为3.8～4.5；其中的黄芩素含量为0.05～0.1wt%；

所述的黄芩素包合物是由二甲基-β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精中的至少一种与黄芩素按摩尔比1:1～50:1进行包合而得；所述的粘度调节剂为羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、海藻酸钠中的至少一种；所述的防腐剂为三氯叔丁醇、苯扎溴铵、尼泊金乙酯中的至少一种。

4.如权利要求3所述的黄芩素温敏凝胶，其特征在于，所述的黄芩素温敏凝胶的组成处方如下：

余量为水；其中的pH值为4.0～4.2。

5.一种制备权利要求1所述的黄芩素温敏凝胶的方法，其特征在于，包括如下步骤：

a)将处方量的黄芩素包合物、温度调节剂、粘度调节剂及防腐剂溶于水中，搅拌使分散均匀；

b)边搅拌边缓缓加入处方量的温敏凝胶基质，加毕，继续搅拌使温敏凝胶基质颗粒被水润湿；

c)将步骤b)获得的混合物体系在2～8℃静置，直至得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，然后用pH调节剂调节溶液体系的pH，即得所述的黄芩素温敏凝胶。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述的黄芩素包合物是由环糊精或/和环糊精衍生物与黄芩素按摩尔比1:1～50:1进行包合而得，所述的环糊精为α-环糊精，所述的环糊精衍生物为二甲基-β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、磺丁基醚-β-环糊精、6-羧甲基-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精中的至少一种；所述的温敏凝胶基质为泊洛沙姆407；所述的温度调节剂为泊洛沙姆188；所述的粘度调节剂为羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、海藻酸钠中的至少一种；所述的防腐剂为三氯叔丁醇、苯扎溴铵、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯中的至少一种。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述的黄芩素包合物是由二甲基-β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精中的至少一种与黄芩素按摩尔比1:1～50:1进行包合而得。

8.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述的pH调节剂为乳酸。

9.权利要求1至4中任一项所述的黄芩素温敏凝胶在制备治疗阴道炎药物中的应用。

10.权利要求1至4中任一项所述的黄芩素温敏凝胶在制备治疗宫颈炎药物中的应用。