CN104133010A - 高效液相色谱法分离分析阿西马朵林中间体及光学异构体 - Google Patents

Abstract

高效液相色谱法分离分析阿西马朵林中间体及光学异构体。本发明属分析化学领域，本发明公开了一种用液相色谱法分离分析阿西马朵林中间体2-（（S）-3-羟基吡咯烷-1-基）-2-氧代-（S）-1-苯基氨基甲酸乙酯及其光学异构体的方法，该方法采用以纤维素-3,5-二氯苯基氨基甲酸酯键合硅胶为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇溶液为流动相，可以定量测定阿西马朵林中间体及其光学异构体的含量。本发明方法专属性强，准确度高，操作简便。

Description

高效液相色谱法分离分析阿西马朵林中间体及光学异构体

技术领域

本发明公开了一种HPLC方法，具体涉及一种阿西马朵林中间体及其光学异构体的分离分析方法。 

背景技术

阿西马朵林是K-阿片受体激动剂，可升高肠易激综合征（IBS）患者的敏感阈值，几乎不通过血脑屏障，耐受性良好。阿西马朵林可以减轻结肠压迫性膨胀、过敏性肠综合征、发热以及其他内脏损伤引起的疼痛，并在镇痛剂量范围内产生利尿作用。阿西马朵林中间体的化学名为2-（（S）-3-羟基吡咯烷-1-基）-2-氧代-（S）-1-苯基氨基甲酸乙酯，英文化学名为ethyl(S)-2-((S)-3-hydroxypyrrolidin-1-yl)- 2-oxo-1phenylethyl-carbamate，分子式为C₁₅H₂₀N₂O₄。其化学结构式为： 

                                                    

该化合物的主要空间异构体结构式分别为：

         

创建一种分离分析阿西马朵林中间体及其光学异构体的方法对合成阿西马朵林原料药及对阿西马朵林原料药中光学杂质的质量控制均具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析分离阿西马朵林中间体及其光学异构体的高效液相方法，从而保证阿西马朵林中间体纯度测定的准确性，实现其终产品原料药的质量控制。 

本方法所述的用高效液相色谱法分析阿西马朵林中间体的纯度以及分离其光学异构体的方法，是采用以纤维素-3,5-二氯苯基氨基甲酸酯键合硅胶为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇溶液为流动相。 

本发明采用的手性色谱柱为CHIRALPAK  IA或CHIRALPAK  IC。 

本发明采用的低级醇溶液选自甲醇、无水乙醇、丙醇、异丙醇，最优选为无水乙醇、异丙醇。 

本发明中流动相正己烷与低级醇体系的体积比为70:30~100:0，优选比例为70:30~90:10。 

本发明所述的分析分离方法，可按照以下方法实现： 

(1) 取阿西马朵林中间体及其光学异构体适量，用无水乙醇溶解样品，配制成含阿西马朵林中间体及其光学异构体0.05～1mg /mL，优选0.5mg/mL的样品溶液；

(2) 设置流动相流速为0.3～1.0mL/min ，优选0.5mL/min；检测波长为200～320nm，优选 210nm，柱温为室温；

(3) 取(1)的样品溶液10～50μL ，优选10μL注入液相色谱仪，完成阿西马朵林中间体及其光学异构体的分离与分析。

本发明使用的仪器及最优色谱条件为： 

高效液相色谱仪：岛津：LC-20AB控制器，SPD-20A检测器

色谱柱： IC　(CHIRALPAK 250mm*4.6mm)

流动相：正己烷-异丙醇=80:20

流速：0.5 mL/min

检测波长：210 nm

柱温：室温

进样体积：10μL。

本发明采用IC (CHIRALPAK 250mm*4.6mm)，能够有效分离阿西马朵林中间体及其光学异构体，准确测定阿西马朵林中间体的纯度；本发明解决了阿西马朵林中间体及其光学异构体的分离分析问题，从而确保了阿西马朵林中间体原料药的质量可控（结果见附图1～7）。 

附图说明

图1为实施例1时的阿西马朵林中间体及其光学异构体HPLC色谱图； 

图2为实施例1时的阿西马朵林中间体HPLC色谱图；

图3为实施例2时的阿西马朵林中间体及其光学异构体HPLC色谱图；

图4为实施例2时的阿西马朵林中间体的HPLC色谱图；

图5为实施例3时的溶剂HPLC色谱图；

图6为实施例3时的阿西马朵林中间体及其光学异构体HPLC色谱图；

图7为实施例3时的阿西马朵林中间体的HPLC色谱图。

具体实施方式

实施例1 

仪器与条件：

高效液相色谱仪：岛津：LC-20AB控制器，SPD-20A检测器

色谱柱：CHIRALCEL OD-H(250mm*4.6mm)；

流动相：正己烷-异丙醇=55:45

流速：0.5 mL/min；

检测波长：210nm；

柱温：室温；

进样体积：10μL。

实验步骤： 

取阿西马朵林中间体及其光学异构体适量，分别用无水乙醇溶解样品，配制成含阿西马朵林中间体及其光学异构体约0.5 mg/mL的样品溶液。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图1～2，图1中保留时间为9.177 min的色谱峰是阿西马朵林中间体及其光学异构体重叠之后形成的色谱峰；图2中保留时间为9.218min的色谱峰为阿西马朵林中间体的色谱峰。可见在该条件下阿西马朵林中间体与其光学异构体无法完全分离。

实施例2     

仪器与条件：

高效液相色谱仪：岛津：LC-20AB控制器，SPD-20A检测器

色谱柱： AD-H　(CHIRALPAK 250mm*4.6mm)

流动相：正己烷-无水乙醇=65:35

流速：0.5 mL/min

检测波长：210 nm

柱温：室温

进样体积：10μL。

实验步骤： 

取阿西马朵林中间体及其光学异构体适量，分别用无水乙醇溶解样品，配制成含阿西马朵林中间体及其光学异构体约0.5mg/mL的样品溶液。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图3～4，图3中保留时间为28.150min的色谱峰为阿西马朵林中间体及其光学异构体重叠后形成的色谱峰；图4中保留时间为28.797min的色谱峰为阿西马朵林中间体的色谱峰。可见在该条件下阿西马朵林中间体与其光学异构体无法完全分离。

实施例3 

仪器与条件：

高效液相色谱仪：岛津：LC-20AB控制器，SPD-20A检测器

色谱柱：IC　(CHIRALPAK 250mm*4.6mm)

流动相：正己烷-异丙醇=80:20

流速：0.5 mL/min

检测波长：210 nm

柱温：室温

进样体积：10μL。

实验步骤： 

取阿西马朵林中间体及其光学异构体适量，分别用无水乙醇溶解样品，配制成含阿西马朵林中间体及其光学异构体约0.5mg/mL的样品溶液；另取无水乙醇适量作为空白溶剂。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图5～7，图5为溶剂色谱图；图6中保留时间为51.424min的色谱峰为阿西马朵林中间体，其余峰为其光学异构体；图7中保留时间为52.491min的色谱峰为阿西马朵林中间体。可以看出在该条件下阿西马朵林中间体与其光学异构体可以完全分离。

Claims (7)

1.一种高效液相色谱法分离分析阿西马朵林中间体及其光学异构体的方法，其特征在于：采用以纤维素-3,5-二氯苯基氨基甲酸酯键合硅胶为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇溶液为流动相。

2.根据权利要求1所述的分析分离方法，手性色谱柱选自CHIRALPAK IA或CHIRALPAK IC。

3.根据权利要求1 所述的分析分离方法，所说的低级醇选自以下化合物中的一种：甲醇、无水乙醇、丙醇、异丙醇。

4.根据权利要求3 所述的低级醇的选取，优选无水乙醇、异丙醇。

5.根据权利要求1 所述的分析分离方法，流动相正己烷-低级醇的体积比为70:30~100:0。

6.根据权利要求5 所述的流动相正己烷-低级醇溶液体积比的选取，优选70:30～90:10。

7.根据权利要求1 所述的分析分离方法，其特征在于包括以下几个步骤：

（1）取阿西马朵林中间体样品及其光学异构体适量，分别用无水乙醇溶解样品，配制成每1mL含阿西马朵林中间体及其光学异构体0.05～1mg，优选为0.5mg/mL的样品溶液；

（2）设置流动相流速为0.3～1.0mL/min，优选为0.5 mL/min；检测波长为200～320nm，优选为210nm，柱温为室温；

（3）取（1）的样品溶液10～50μL，优选为10μL注入液相色谱仪，完成阿西马朵林中间体及其光学异构体的分析与分离。