CN104126416B - 一种黑牛肝菌优良性状驯化方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及食用菌菌种驯化领域，特别涉及黑牛肝菌优良性状驯化方法，包括以下步骤：(a)、选择性状优良的黑牛肝菌子实体作为驯化菌株；(b)、将菌肉组织接种于营养瘠薄型基质，置于26-30℃，暗光培养，至菌丝长满；(c)、挑取前端菌丝体，转接于营养瘠薄型基质，至菌丝长满；(d)、重复步骤(c)2-3次，将得到的菌丝栽培出菇，得到成熟子实体；(e)、重复步骤(b)-(d)2-4次，得到的子实体即为黑牛肝菌的菌种。该黑牛肝菌优良性状驯化方法，增强黑牛肝菌分解利用木质素、纤维素的能力，提高抗杂能力，从而提高出菇率、出菇整齐度和成熟率，提高了黑牛肝菌栽培的生物学效率，得到的黑牛肝菌性状优良。

Description

一种黑牛肝菌优良性状驯化方法

技术领域

本发明涉及食用菌菌种驯化领域，具体而言，涉及一种黑牛肝菌优良性状驯化方法。

背景技术

黑牛肝菌(Phlebopusportentosu)，也名暗褐网柄牛肝菌，主要分布于斯里兰卡、越南、印度尼西亚、泰国、巴西、墨西哥、澳大利亚、新西兰及我国云南、广西和海南等地，是热带地区珍贵的、最受消费者喜爱的食用菌，也是目前牛肝菌科(Boletaceae)脉柄牛肝菌属(Phlebopus)中唯一一种可以用腐生栽培方法培养的牛肝菌。黑牛肝菌品质鲜嫩、味道鲜美、营养价值丰富、高蛋白、低脂肪，富含17种人体必需氨基酸及丰富的磷、钾、钙、镁、铁、锌等人体必须的矿质元素，是较好的健康食品并具有很好的药用价值，深受消费者喜爱。目前已可用栽培腐生菌的方式进行人工栽培，以及接种凤凰木、咖啡、柚子、芒果寄主树等寄主树进行仿生栽培。

牛肝菌科菌类是一种外生菌根菌，其子实体的形成、出菇及生活史的完成必须与其共生树种形成共生菌根关系后才能完成。虽然黑牛肝菌(Phlebopusportentosu)的营养方式独特，与牛肝菌科其他属种有所不同，那就是可以脱离共生树种营腐生生活，但黑牛肝菌的腐生能力不强，原因主要是黑牛肝菌不能分解利用木质素、纤维素或其分解利用木质素、纤维素的能力较弱，因此，从野生子实体收集获得的菌株，可以出菇的菌株仅占3％-5％，而在出菇的菌株中，具备一定的抗杂菌力，使覆土后不污染，菌袋出菇率及出菇菌袋成熟率达75％，成熟子实体平均单菇重达80g的菌株仅占1％-3％，因此，从野生黑牛肝菌菌株中筛选到1个具备商业栽培性状的菌株特别困难，这制约了黑牛肝菌的扩大栽培、规模栽培以及产业化。因此，进行黑牛肝菌人工驯化获得优良菌株，提高黑牛肝菌的出菇率、出菇整齐度、抗杂菌能力及生物学效率迫在眉捷，也是实现黑牛肝菌产业化栽培的首要保障。

发明内容

本发明的目的在于提供一种黑牛肝菌优良性状驯化方法，以解决上述的问题。

在本发明的实施例中提供了一种黑牛肝菌优良性状驯化方法，包括以下步骤：(a)、选择性状优良的黑牛肝菌子实体作为驯化菌株；

(b)、将所述驯化菌株的菌肉组织接种于营养瘠薄型基质，置于26-30℃，暗光培养，至菌丝长满营养瘠薄型基质；

(c)、挑取长满营养瘠薄型基质的前端菌丝体，转接于营养瘠薄型基质，至菌丝长满营养瘠薄型基质；

(d)、重复步骤(c)2-3次，将得到的菌丝栽培出菇，得到成熟子实体；

(e)、重复步骤(b)-(d)2-4次，得到的子实体即为黑牛肝菌的菌种；

其中，所述营养瘠薄型基质包括下列组分，按重量份计：锯木屑500-1000份，木片1000-2000份，土壤100-300份，谷粒100-300份，水含量为55-65％，pH调至4.5-6.0。

本发明实施例提供的黑牛肝菌优良性状驯化方法，将性状优良的黑牛肝菌子实体作为驯化菌株，将驯化菌株的菌肉组织接种在营养瘠薄型基质，得到牛肝菌菌丝，使牛肝菌菌丝在富含木质素、C、N营养瘠薄型基质中反复进行菌丝腐生能力诱导、驯化，诱发黑牛肝菌对木质素、纤维素的分解利用能力，增强黑牛肝菌分解利用木质素、纤维素的能力，提高抗杂能力，从而提高出菇率、出菇整齐度和成熟率，提高了黑牛肝菌栽培的生物学效率，得到的黑牛肝菌性状优良。

其中，营养瘠薄型基质的锯木屑可以选用橡胶木，凤凰木、柚子树、芒果树等的锯木屑；木片可以选用橡胶木，凤凰木、柚子树、芒果树等，其大小为0.5-1.0cm×0.2-0.5cm×0.1-0.3cm；谷粒为常见的谷粒，如高粱粒、大米粒、小麦粒、小米粒、玉米粒等；土壤采用栽培真菌所用的一般土壤即可。

营养瘠薄型基质通过以上方法制得，将锯木屑和木片预湿，谷粒用水浸泡7-9小时，然后与木屑、木片和土壤混匀；调pH；然后分装于500ml塑料瓶中，每瓶装培养基量450ml，121℃灭菌50-70min冷却即得。

优选地，所述性状优良的黑牛肝菌子实体由以下方法制得：

(1)、采集野生黑牛肝菌子实体，切取子实体菌盖与菌柄交界处的菌肉组织接种于母种培养基，于28℃-30℃恒温培养，培养25-30d获得母种菌丝；

(2)、将所述母种菌丝接种于菌袋或菌瓶的固体培养基质中，培养菌丝长满固体培养基质，然后在菌袋或菌瓶的表面覆土，培养菌丝长满覆土层，出菇，至子实体发育成熟；

(3)、对发育成熟的子实体进行挑选，得到所述性状优良的黑牛肝菌子实体。

野生黑牛肝菌，菌体较大，肉肥厚，柄粗壮，食味香甜可口，营养丰富，是极富美味的野生食用菌之一。野生黑牛肝菌具有这些优良的性状，也是其优良性状的来源，使用野生黑牛肝菌作为驯化菌株的来源，能够很好的保留其自身的营养价值以及其他的优良性状。

切取野生黑牛肝菌的菌肉组织(长宽厚为0.5-1.0cm×0.2-0.5cm×0.15-0.25cm)将其培养(暗培养)获得子实体，是为了在扩繁的同时，进一步纯化野生黑牛肝菌，将得到的发育成熟的子实体进行挑选，以获得性状优良的黑牛肝菌子实体，保证后续驯化的有效进行。

为了保证后续驯化菌株的优良性状，进一步地，所述野生黑牛肝菌子实体单菇重200g-500g，菌柄粗壮不中空，菌肉肥厚，中等成熟菌，孔未开，无虫蛀及杂菌，新鲜。

为了得到的性状优良的黑牛肝菌子实体具有更优的性状，优选地，所述野生黑牛肝菌子实体为50-100个。将每个野生黑牛肝菌子实体分别切取菌肉组织进行培养获得菌株，继续栽培每个菌株生长子实体，从众多成熟的子实体中挑选性状优良的黑牛肝菌子实体来进行驯化。

具体地，所述性状优良的黑牛肝菌子实体符合以下标准：

(1)袋栽40d内菌丝长满固体培养基质；瓶栽30d内菌丝长满固体培养基质；

(2)覆土至菌丝长满覆土层在10d以内；

(3)覆土菌袋或菌瓶的出菇率达75％以上；

(4)菌袋或菌瓶出菇的成熟率达75％以上；

(5)发育成熟的子实体的单菇重为80g-130g；

(6)覆土至开始出菇不超过15d，收菇开始至结束4d；

(7)菌盖及菌柄颜色为黄褐色或橄榄褐色，形态完整。

为了使菌肉组织在营养瘠薄型基质上正常的生长，保证驯化的正常进行，经验证，优选地，在所述步骤(b)中，所述菌肉组织的长宽厚为0.8-1.2cm×0.4-0.7cm×0.15-0.25cm。

优选地，在所述步骤(b)中，菌肉组织接种时按压菌肉组织使菌肉组织与营养瘠薄型基质紧密接触。菌肉组织与营养瘠薄型基质紧密接触，以利于菌丝萌发、吃料及生长。

优选地，所述营养瘠薄型基质占其培养器皿体积的1/4-1/2。在保证提供营养成分的同时，留有一定的空间，以利于菌丝的生长。其中，一般选用盛装营养瘠薄型基质的培养器皿为25mm×200mm规格的试管或250ml规格的三角瓶。

优选地，所述母种培养基包括以下组分，按重量份计：

马铃薯100-200份，葡萄糖10-20份，酵母浸出汁1-2份，硝酸铵1-2份，MgSO₄1-2份，KH₂PO₄1-2份，ZnSO₄0.5-1份，MnSO₄0.01-0.05份，琼脂粉18-22份，水900-1100份，pH调至4.5-6.5。采用常用的高温高压灭菌即可，如121℃灭菌30-60min，冷却即得。在该母种培养基上生长得到的母种菌丝性能更为优良。

有选地，所述固体培养基质包括下列组分，按重量份计：

锯木屑100000-200000份，麦粒10000-20000份，蔗糖100-200份，酒石酸铵100-200份，蛋白胨200-400份，MgSO₄100-200份，KH₂PO₄100-200份，水含量为55-65％，pH调至4-6。

其制备方法为：将橡胶木或其他杂木的锯木屑预湿，麦粒用水浸泡7-9小时，过滤与木屑混匀；蔗糖，酒石酸铵、蛋白胨、MgSO₄、KH₂PO₄溶于水，喷洒入木屑中，调pH；然后分装于500ml塑料瓶中，每瓶装培养基量450ml，121℃灭菌50-70min冷却待用。

在该固体培养基质对菌丝先进行预诱导，以便于使得到子实体能更好的适应在营养瘠薄型基质中生长。

本发明实施例提供的黑牛肝菌优良性状驯化方法，将性状优良的黑牛肝菌子实体作为驯化菌株，将驯化菌株的菌肉组织接种在营养瘠薄型基质，得到牛肝菌菌丝，使牛肝菌菌丝在富含木质素、C、N营养瘠薄型基质中反复进行菌丝腐生能力诱导、驯化，诱发黑牛肝菌对木质素、纤维素的分解利用能力，增强黑牛肝菌分解利用木质素、纤维素的能力，提高抗杂能力，从而提高出菇率、出菇整齐度和成熟率，提高了黑牛肝菌栽培的生物学效率，得到的黑牛肝菌性状优良。

具体实施方式

下面通过具体的实施例子对本发明做进一步的详细描述。

实施例1

1.野生黑牛肝菌子实体收集

采集野生黑牛肝菌子实体50个，子实体要求单菇重400-500g，菌柄粗壮不中空，菌肉肥厚，中等成熟菌孔未开，无虫蛀及杂菌，新鲜；

用组织分离法切取子实体菌盖与菌柄交界处的菌肉组织接种于母种培养基中，于30℃恒温培养，25d获得母种菌丝；

其中，母种培养基包括以下组分，按重量份计：马铃薯200份，葡萄糖20份，酵母浸出汁2份，硝酸铵2份，MgSO₄2份，KH₂PO₄2份，ZnSO₄1份，MnSO₄0.05份，琼脂粉22份，水1100份，pH调至6.5。

2.对收集的野生黑牛肝菌扩繁

将上述“1”收集的野生黑牛肝菌的菌株培养得到的母种菌丝接种于菌袋或菌瓶的固体培养基质中，培养菌丝长满固体培养基质，然后在菌袋或菌瓶的表面覆土，培养菌丝长满覆土层，出菇，至子实体发育成熟；

其中，固体培养基质包括下列组分，按重量份计：

锯木屑200000份，麦粒20000份，蔗糖200份，酒石酸铵200份，蛋白胨400份，MgSO₄200份，KH₂PO₄200份，水含量为65％，pH调至6。

3.选择驯化菌株

选择上述“2”出菇及子实体发育成熟的菌株。

选择标准：

(1)袋栽40d内菌丝长满固体培养基质；瓶栽30d内菌丝长满固体培养基质；

(2)覆土至菌丝长满覆土层在10d以内；

(3)覆土菌袋或菌瓶的出菇率达75％以上；

(4)菌袋或菌瓶出菇的成熟率达75％以上；

(5)发育成熟的子实体平均单菇重为120-130g；

(6)覆土至开始出菇不超过15d，收菇开始至结束4d；

(7)菌盖及菌柄颜色为黄褐色或橄榄褐色，形态完整。

4.优良性状驯化

(b)、将上述“3”筛选到的驯化菌株的菌肉组织接种于营养瘠薄型基质，菌肉组织的长宽厚为1.2cm×0.7cm×0.25cm，接种时稍按压接种菌丝块，使菌丝块与固体基质紧密接触，菌丝萌发、吃料及生长；置于30℃，暗光培养，至菌丝长满营养瘠薄型基质；

(c)、挑取长满营养瘠薄型基质的前端菌丝体，转接于营养瘠薄型基质，30d后菌丝长满营养瘠薄型基质；

(d)、重复步骤(c)3次，将得到的菌丝栽培出菇，得到成熟子实体；

(e)、重复步骤(b)-(d)4次，即对营养瘠薄型基质驯化培养的菌丝转进行栽培出菇培养成熟子实体进行菌株复壮，最后得到的子实体即为黑牛肝菌的菌种；

其中，所述营养瘠薄型基质包括下列组分，按重量份计：橡胶树的锯木屑1000份，橡胶树的木片2000份，土壤300份，谷粒300份，水含量为65％，pH调至6.0；营养瘠薄型基质占其培养器皿体积的1/2。

实施例2

1.野生黑牛肝菌子实体收集

采集野生黑牛肝菌子实体100个，子实体要求单菇重200-250g，菌柄粗壮不中空，菌肉肥厚，中等成熟菌孔未开，无虫蛀及杂菌，新鲜；

用组织分离法切取子实体菌盖与菌柄交界处的菌肉组织接种于母种培养基中，于28℃恒温培养，30天获得母种菌丝；

其中，母种培养基包括以下组分，按重量份计：马铃薯100份，葡萄糖10份，酵母浸出汁1份，硝酸铵1份，MgSO₄1份，KH₂PO₄1份，ZnSO₄0.5份，MnSO₄0.01份，琼脂粉18份，水900份，pH调至4.5。

2.对收集的野生黑牛肝菌扩繁

将上述“1”收集的野生黑牛肝菌的菌株培养得到的母种菌丝接种于菌袋的固体培养基质中，培养菌丝长满固体培养基质，然后在菌袋的表面覆土，培养菌丝长满覆土层，出菇，至子实体发育成熟；

其中，固体培养基质包括下列组分，按重量份计：

橡胶树和芒果树的锯木屑100000份，麦粒10000份，蔗糖100份，酒石酸铵100份，蛋白胨200份，MgSO₄100份，KH₂PO₄100份，水含量为55％，pH调至4。

3.选择驯化菌株

选择上述“2”出菇及子实体发育成熟的菌株。

选择标准：

(1)袋栽40d内菌丝长满固体培养基质；

(2)覆土至菌丝长满覆土层在10d以内；

(3)覆土菌袋或菌瓶的出菇率达75％以上；

(4)菌袋或菌瓶出菇的成熟率达75％以上；

(5)发育成熟的子实体平均单菇重为80g以上；

(6)覆土至开始出菇不超过15d，收菇开始至结束4d；

(7)菌盖及菌柄颜色为黄褐色或橄榄褐色，形态完整。

4.优良性状驯化

(b)、将上述“3”筛选到的驯化菌株的菌肉组织接种于营养瘠薄型基质，菌肉组织的长宽厚为0.8cm×0.4cm×0.15cm，接种时稍按压接种菌丝块，使菌丝块与固体基质紧密接触，菌丝萌发、吃料及生长；置于26℃，暗光培养，至菌丝长满营养瘠薄型基质；

(c)、挑取长满营养瘠薄型基质的前端菌丝体，转接于营养瘠薄型基质，40d后菌丝长满营养瘠薄型基质；

(d)、重复步骤(c)2次，将得到的菌丝栽培出菇，得到成熟子实体；

(e)、重复步骤(b)-(d)2次，即对营养瘠薄型基质驯化培养的菌丝转进行栽培出菇培养成熟子实体进行菌株复壮，最后得到的子实体即为黑牛肝菌的菌种；

其中，所述营养瘠薄型基质包括下列组分，按重量份计：橡胶树和芒果树的锯木屑500份，橡胶树和芒果树的的木片1000份，土壤100份，谷粒100份，水含量为55％，pH调至4.5；营养瘠薄型基质占其培养器皿体积的1/4。

实施例3

1.野生黑牛肝菌子实体收集

采集野生黑牛肝菌子实体80个，子实体要求单菇重300-350g，菌柄粗壮不中空，菌肉肥厚，中等成熟菌孔未开，无虫蛀及杂菌，新鲜；

用组织分离法切取子实体菌盖与菌柄交界处的菌肉组织接种于母种培养基中，于29℃恒温培养，28d获得母种菌丝；

其中，母种培养基包括以下组分，按重量份计：马铃薯150份，葡萄糖15份，酵母浸出汁2份，硝酸铵1份，MgSO₄2份，KH₂PO₄1份，ZnSO₄0.8份，MnSO₄0.03份，琼脂粉20份，水1000份，pH调至6。

2.对收集的野生黑牛肝菌扩繁

将上述“1”收集的野生黑牛肝菌的菌株培养得到的母种菌丝接种于菌瓶的固体培养基质中，培养菌丝长满固体培养基质，然后在菌瓶的表面覆土，培养菌丝长满覆土层，出菇，至子实体发育成熟；

其中，固体培养基质包括下列组分，按重量份计：

锯木屑150000份，麦粒15000份，蔗糖150份，酒石酸铵150份，蛋白胨300份，MgSO₄150份，KH₂PO₄150份，水含量为60％，pH调至5。

3.选择驯化菌株

选择上述“2”出菇及子实体发育成熟的菌株。

选择标准：

(1)瓶栽30d内菌丝长满固体培养基质；

(2)覆土至菌丝长满覆土层在10d以内；

(3)覆土菌袋或菌瓶的出菇率达75％以上；

(4)菌袋或菌瓶出菇的成熟率达75％以上；

(5)发育成熟的子实体平均单菇重为100g-110g；

(6)覆土至开始出菇不超过15d，收菇开始至结束4d；

(7)菌盖及菌柄颜色为黄褐色或橄榄褐色，形态完整。

4.优良性状驯化

(b)、将上述“3”筛选到的驯化菌株的菌肉组织接种于营养瘠薄型基质，菌肉组织的长宽厚为1.0cm×0.5cm×0.2cm，接种时稍按压接种菌丝块，使菌丝块与固体基质紧密接触，菌丝萌发、吃料及生长；置于28℃，暗光培养，至菌丝长满营养瘠薄型基质；

(c)、挑取长满营养瘠薄型基质的前端菌丝体，转接于营养瘠薄型基质，35天后菌丝长满营养瘠薄型基质；

(d)、重复步骤(c)2次，将得到的菌丝栽培出菇，得到成熟子实体；

(e)、重复步骤(b)-(d)3次，即对营养瘠薄型基质驯化培养的菌丝转进行栽培出菇培养成熟子实体进行菌株复壮，最后得到的子实体即为黑牛肝菌的菌种；

其中，所述营养瘠薄型基质包括下列组分，按重量份计：橡胶树和凤凰树的锯木屑750份，橡胶树和凤凰树的木片1500份，土壤200份，谷粒200份，水含量为60％，pH调至5；营养瘠薄型基质占其培养器皿体积的1/3。

将实施例1-3获得的黑牛肝菌的菌种进行试验，同时以未经驯化的黑牛肝菌的菌株作为对照组。

在普通菇房(无净化设施)条件下栽培实施例1-3获得的黑牛肝菌的菌种和未经驯化的黑牛肝菌的菌株，未经驯化的黑牛肝菌的菌株分三组进行，通过观察和数据计算，比较驯化菌株与对照菌株在养菌期时间、养菌期污染率、出菇率、成熟率、平均子实体重、覆土至出菇时间、生物学效率(是指食用菌鲜重与所用的培养料干重之比，常用百分数表示)参数的差异，结果见表1所示。

表1驯化菌株与对照菌株栽培性状比较

从表1可以看出：1.培养30d菌丝长满基质，驯化菌株与对照菌株的养菌期均为30d，但菌丝培养性状发生了变化，对照菌株产生了厚菌皮，吐水量多，而驯化菌株无菌皮，只有少量吐水。

2.改良了菌株的栽培性状，表现在：降低了养菌期污染率(对照菌株8-10％，驯化菌株养菌期污染率1％-3％)，缩短了菌丝长覆土层时间(驯化菌株6-8d，对照菌株9d-10d)及诱导出菇时间(驯化菌株2d-4d，对照菌株5d-6d)，提高覆土菌袋(瓶)的出菇率(驯化菌株96.0％-100％，对照菌株75.0％-80.0％)，提高了出菇菌袋(菌瓶)的成熟率(驯化菌株95.0％--100％，对照菌株75.0％—80.0％)，增加平均子实重(驯化菌株100.0g—110.0g，对照菌株85.0g—90.0g),进而提高栽培的生物学效率(驯化菌株19.0％-22.0％，对照菌株16.28％-18.0)，驯化效果较为明显。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种黑牛肝菌优良性状驯化方法，其特征在于，包括以下步骤：(a)、选择性状优良的黑牛肝菌子实体作为驯化菌株；

(b)、将所述驯化菌株的菌肉组织接种于营养瘠薄型基质，置于26-30℃，暗光培养，至菌丝长满营养瘠薄型基质；

(c)、挑取长满营养瘠薄型基质的前端菌丝体，转接于营养瘠薄型基质，至菌丝长满营养瘠薄型基质；

(d)、重复步骤(c)2-3次，将得到的菌丝栽培出菇，得到成熟子实体；

(e)、重复步骤(b)-(d)2-4次，得到的子实体即为黑牛肝菌的菌种；

其中，所述营养瘠薄型基质包括下列组分，按重量份计：锯木屑500-1000份，木片1000-2000份，土壤100-300份，谷粒100-300份，水含量为55-65％，pH调至4.5-6.0。

2.根据权利要求1所述的黑牛肝菌优良性状驯化方法，其特征在于，所述性状优良的黑牛肝菌子实体由以下方法制得：

(1)、采集野生黑牛肝菌子实体，切取子实体菌盖与菌柄交界处的菌肉组织接种于母种培养基，于28℃-30℃恒温培养，培养25-30d获得母种菌丝；

(2)、将所述母种菌丝接种于菌袋或菌瓶的固体培养基质中，培养菌丝长满固体培养基质，然后在菌袋或菌瓶的表面覆土，培养菌丝长满覆土层，出菇，至子实体发育成熟；

(3)、对发育成熟的子实体进行挑选，得到所述性状优良的黑牛肝菌子实体。

3.根据权利要求2所述的黑牛肝菌优良性状驯化方法，其特征在于，所述野生黑牛肝菌子实体单菇重200g-500g，菌柄粗壮不中空，菌肉肥厚，中等成熟菌，孔未开，无虫蛀及杂菌，新鲜。

4.根据权利要求3所述的黑牛肝菌优良性状驯化方法，其特征在于，所述野生黑牛肝菌子实体为50-100个。

5.根据权利要求2所述的黑牛肝菌优良性状驯化方法，其特征在于，所述性状优良的黑牛肝菌子实体符合以下标准：

(1)袋栽40d内菌丝长满固体培养基质；瓶栽30d内菌丝长满固体培养基质；

(2)覆土至菌丝长满覆土层在10d以内；

(3)覆土菌袋或菌瓶的出菇率达75％以上；

(4)菌袋或菌瓶出菇的成熟率达75％以上；

(5)发育成熟的子实体的单菇重为80g-130g；

(6)覆土至开始出菇不超过15d，收菇开始至结束4d；

(7)菌盖及菌柄颜色为黄褐色或橄榄褐色，形态完整。

6.根据权利要求1所述的黑牛肝菌优良性状驯化方法，其特征在于，在所述步骤(b)中，所述菌肉组织的长宽厚为0.8-1.2cm×0.4-0.7cm×0.15-0.25cm。

7.根据权利要求1所述的黑牛肝菌优良性状驯化方法，其特征在于，在所述步骤(b)中，菌肉组织接种时按压菌肉组织使菌肉组织与营养瘠薄型基质紧密接触。

8.根据权利要求1所述的黑牛肝菌优良性状驯化方法，其特征在于，所述营养瘠薄型基质占其培养器皿体积的1/4-1/2。

9.根据权利要求2所述的黑牛肝菌优良性状驯化方法，其特征在于，所述母种培养基包括以下组分，按重量份计：

马铃薯100-200份，葡萄糖10-20份，酵母浸出汁1-2份，硝酸铵1-2份，MgSO₄1-2份，KH₂PO₄1-2份，ZnSO₄0.5-1份，MnSO₄0.01-0.05份，琼脂粉18-22份，水900-1100份，pH调至4.5-6.5。

10.根据权利要求2所述的黑牛肝菌优良性状驯化方法，其特征在于，所述固体培养基质包括下列组分，按重量份计：

锯木屑100000-200000份，麦粒10000-20000份，蔗糖100-200份，酒石酸铵100-200份，蛋白胨200-400份，MgSO₄100-200份，KH₂PO₄100-200份，水含量为55-65％，pH调至4-6。