CN104107217B - 预防或治疗宿醉的组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及含有月桂(Laurus nobilis)叶提取物作为活性成分的组合物，特别是，涉及含有月桂叶提取物的预防或治疗宿醉的组合物，包含月桂叶提取物的预防或缓解宿醉的食品组合物，和制备所述组合物的方法。由于本发明的组合物含有月桂叶提取物，其具有十分优异的降低乙醇和乙醛血液浓度的效果。并通过行为学测试证实了其宿醉预防和治疗作用，因此，该组合物可广泛应用于食品、药物或功能性健康食品，它们可有效用于预防和治疗宿醉。

Description

预防或治疗宿醉的组合物
技术领域
本发明涉及包含月桂(Laurus nobilis)叶提取物作为活性成分的组合物，特别是，涉及含有月桂叶提取物的预防或治疗宿醉(hangover)的组合物，含有月桂叶提取物的预防或治疗宿醉的食品组合物，和制备所述组合物的方法。
背景技术
在人类历史上，酒精占据重要的位置至少有8000年。然而，由于19世纪引入了改善的卫生和水纯化系统，其作为食品的价值降低，酒精饮料的用途向其当前的作用转变，即，具有高浓度酒精的酒精饮料作为一种社交中可接受的娱乐形式。在2005年，每个韩国人平均消耗97瓶烧酒(soju)(8.11升酒精)，而且该消耗量每年都增长，而与国家的发达程度无关。
与其它镇静-催眠药物相似，少量的酒精缓解焦虑并使人产生舒适的感觉。然而，酒精是世界上最被滥用的物质，其是造成巨大医疗和社会成本的主要原因。在韩国，饮酒所致的社会经济损失已经超过约20万亿韩元，超过国民生产总值(GDP)的3%。
现代人经受各种压力，而压力的程度逐渐增加。为释放这种压力，人们进行各种不同的活动，例如锻炼、睡眠、吸烟、旅行等。为缓解压力而饮酒(酒精消耗)是最常见的方法。
具体地说，由于社会变得复杂而有组织，频繁饮酒的习惯盛行，大量饮酒和酗酒持续增多。此类饮酒影响许多人第二天的职业表现，而长期饮酒的习惯随之还造成了健康问题。
宿醉指的是在饮酒后不舒适的身体和精神症状，其客观症状包括头痛、恶心、呕吐、嗜睡、运动能力降低、血液学(性质)改变和激素变化。宿醉的原因尚不清楚，但已知与乙醇代谢的代谢产物(相关)。
进入身体的乙醇被胃或小肠吸收，经血管转运至肝脏。肝细胞具有乙醇脱氢酶(ADH)将乙醇氧化产生乙醛。乙醛在肝细胞中经乙醛脱氢酶(ALDH)代谢产生乙酸，转运至全身的肌肉或脂肪组织，最终分解成二氧化碳和水。此外，乙醛脱氢酶分成II型和I型，其中II型即便在低浓度乙醛下也能启动氧化，而I型仅仅在高浓度乙醛下起作用。由于东方人总体上缺乏II型乙醛脱氢酶，东方人氧化乙醛慢于西方人。未氧化的乙醛和/或乙醇干扰正常代谢，从而造成各种宿醉症状。
由于韩国饮酒文化的社会背景，对于缓解宿醉产品的需求不断增加。现已进行了许多研究来缓解宿醉，实际上，在市场上已经新投入了许多市售可得的不同产品。
然而，大多数产品不令人满意，因为缺乏对实际最终产品效果的客观验证。事实上，需要宿醉缓解饮品的消费者对于这些产品信心往往很低。因此，本领域急需开发表现出宿醉缓解效力的产品，以便在消费者饮下该产品时取得消费者的信心，降低过量饮酒所致社会影响并帮助人们获得健康的生活。
发明内容
技术问题
在此背景下，本发明人经过许多努力以提供有效缓解宿醉的饮品。结果，发明人发现含有月桂叶提取物的组合物能快速降低乙醇和乙醛的血液浓度，发明人还通过动物行为学研究证实其具有减轻宿醉后果的宿醉缓解作用，从而完成了本发明。
技术方案
本发明的目的是提供预防或治疗宿醉的组合物，该组合物含有月桂叶提取物作为活性成分。
本发明的另一目的是提供预防或缓解宿醉的食品组合物，该组合物含有月桂叶提取物作为活性成分。
本发明还有另一目的是提供制备月桂叶提取物和本发明组合物的方法。
有益效果
本发明的组合物含有月桂叶提取物，其表现出极其优异的降低乙醇和乙醛血液浓度的效果，行为学研究也证实了此类宿醉预防和治疗作用。因此，该组合物可广泛应用于能有效用于预防和治疗宿醉的食品、药物或功能性健康食品中。
附图说明
图1显示了对对照组(非-月桂叶提取物治疗组；EtOH-处理组)和实验组(月桂叶提取物治疗组)作治疗后，乙醇处理动物的(A)血液乙醇浓度和(B)血液乙醛浓度(平均值±SEM,n=8/*p<0.05和**p<0.001对EtOH-处理组)；
图2显示了总运动活性，其中，在对对照组(非-月桂叶提取物治疗组；EtOH-处理组)和实验组(月桂叶提取物治疗组)作治疗后，将乙醇处理的动物置于行为观察箱中，并评估(A)运动总距离和(B)运动总持续时间(平均值±SEM,n=8/###p<0.001对正常组/*p<0.05,**p<0.01和***p<0.001对EtOH-处理组)，正常组表示非-EtOH-处理的正常大鼠组；
图3显示了利用转棒(Rota-rod)测定的运动活性，其中，在对对照组(非-月桂叶提取物治疗组；EtOH-处理组)和实验组(月桂叶提取物治疗组)作治疗后，将乙醇处理的动物置于仪器上，利用RPM-可调踩轮装置(treadwheel device)检测(A)等待时间(latencytime)和(B)掉落频率(falling frequency)，共计5分钟(平均值±SEM,n=8/###p<0.001对正常组/*p<0.05,**p<0.01和***p<0.001对EtOH-处理组)；
图4显示了利用丝线测定的运动活性，其中，在对对照组(非-月桂叶提取物治疗组；EtOH-处理组)和实验组(月桂叶提取物治疗组)作治疗后，将乙醇处理的动物置于仪器上，检测(A)等待时间和(B)掉落频率，共计2分钟(平均值±SEM,n=8/###p<0.001对正常组/*p<0.05,**p<0.01和***p<0.001对EtOH-处理组)；
图5显示了冷水游泳能力(cold swimming ability)，其中，在对对照组(非-月桂叶提取物治疗组；EtOH-处理组)和实验组(月桂叶提取物治疗组)作治疗后，将乙醇处理的动物置于冷水池中游泳，检测放弃游动之前的等待时间(平均值±SEM,n=10/*p<0.05对EtOH-处理组)；
图6显示了在对对照组(非-组合物治疗组；EtOH-处理组)和实验组(组合物治疗组)作治疗后，乙醇处理的动物的血液乙醇浓度(平均值±SEM,n=10/#p<0.05,###p<0.001对正常组/*p<0.05和**p<0.001对EtOH-处理组)；
图7显示了总运动活性，其中，在对对照组(非-组合物治疗组；EtOH-处理组)和实验组(组合物治疗组)作治疗后，将乙醇处理的动物置于行为观察箱中，并评估(A)运动总距离和(B)运动总持续时间(平均值±SEM,n=10/#p<0.05,###p<0.001对正常组/*p<0.05和**p<0.01对EtOH-处理组)；
图8显示了利用转棒测定的运动活性，其中，在对对照组(非-组合物治疗组；EtOH-处理组)和实验组(组合物治疗组)作治疗后，将乙醇处理的动物置于仪器上，利用RPM-可调踩轮装置检测(A)首次等待时间(first latency time)，(B)掉落频率，和(C)平均等待时间，共计5分钟(平均值±SEM,n=10/##p<0.01,###p<0.001对正常组/*p<0.05,**p<0.01对EtOH-处理组)；
图9显示了利用丝线测定的运动活性，其中，在对对照组(非-组合物治疗组；EtOH-处理组)和实验组(组合物治疗组)作治疗后，将乙醇处理的动物置于仪器上，检测(A)首次等待时间，(B)掉落频率，和(C)平均等待时间，共计2分钟(平均值±SEM,n=10/##p<0.01,###p<0.001对正常组/*p<0.05,**p<0.01和***p<0.001对EtOH-处理组)；
图10显示了冷水游泳能力，其中，在对对照组(非-组合物治疗组；EtOH-处理组)和实验组(组合物治疗组)作治疗后，将乙醇处理的动物置于冷水池中游泳，检测放弃游动之前的等待时间(平均值±SEM,n=10/#p<0.05,###p<0.001对正常组/*p<0.05,**p<0.01和***p<0.001对EtOH-处理组)；
图11显示了在对对照组(非-组合物治疗组；EtOH-处理组)、实验组(实验组合物治疗组)和对比组(对比组合物治疗组)作治疗后，乙醇处理的动物的(A)血液乙醇浓度和(B)血液乙醛浓度(平均值±SEM,n=10.*p<0.05)；
图12显示了总运动活性，其中，在对对照组(非-组合物治疗组；EtOH-处理组)、低剂量(50%)和高剂量(100%)实验组(实验组合物治疗组)和对比组(对比组合物治疗组)作治疗后，将乙醇处理的动物置于行为观察箱中，并评估(A)运动总距离和(B)运动总持续时间(平均值±SEM,n=10/#p<0.05,##p<0.01和###p<0.001对正常组/*p<0.05和**p<0.01对EtOH-处理组)；
图13显示了利用转棒测定的运动活性，其中，在对对照组(非-组合物治疗组；EtOH-处理组)、低剂量(50%)和高剂量(100%)实验组(实验组合物治疗组)和对比组(对比组合物治疗组)作治疗后，将乙醇处理的动物置于仪器上，利用RPM-可调踩轮装置检测(A)首次等待时间，(B)掉落频率，和(C)平均等待时间(平均值±SEM,n=10/##p<0.01和###p<0.001对正常组/*p<0.05,**p<0.01和***p<0.001对EtOH-处理组)；
图14显示了利用丝线测定的运动活性，其中，在对对照组(非-组合物治疗组；EtOH-处理组)、低剂量(50%)和高剂量(100%)实验组(实验组合物治疗组)和对比组(对比组合物治疗组)作治疗后，将乙醇处理的动物置于仪器上，检测(A)首次等待时间，(B)掉落频率，和(C)平均等待时间(平均值±SEM,n=10/##p<0.01和###p<0.001对正常组/*p<0.05,**p<0.01和***p<0.001对EtOH-处理组)；和
图15显示了冷水游泳能力，其中，在对对照组(非-组合物治疗组；EtOH-处理组)、低剂量(50%)和高剂量(100%)实验组(实验组合物治疗组)和对比组(对比组合物治疗组)作治疗后，将乙醇处理的动物置于冷水池中游泳，检测放弃游动之前的等待时间(平均值±SEM,n=10/###p<0.001对正常组/*p<0.05,**p<0.01和***p<0.001对EtOH-处理组)。
具体实施方式
为实现上述目的，本发明一方面提供预防或治疗宿醉的组合物，所述组合物含有月桂叶提取物作为活性成分。
本发明的组合物可优选还包含梨果仙人掌(Opuntia ficus indica)提取物，从而成为含有月桂叶提取物和梨果仙人掌提取物的组合物；更优选地，还含有缫丝花(Rosaroxburghii)提取物，从而成为含有月桂叶提取物、梨果仙人掌提取物和缫丝花提取物的组合物。更优选地，所述组合物可以是含有月桂叶提取物、梨果仙人掌提取物、缫丝花提取物、黄杞(Engelhardtia chrysolepis HANCE)提取物和莲(Nelumbo nucifera)种子提取物的组合物。
为了找到表现出缓解宿醉效力的物质，本发明人研究了各种物质降低乙醇和乙醛血液浓度的作用。结果，本发明人发现在含有缫丝花提取物的常规混合物中添加梨果仙人掌提取物和月桂叶提取物得到的组合物能显著降低乙醇和乙醛的血液浓度。该混合物已知具有降低作为宿醉原因的乙醇或乙醛血液浓度的作用，可用作食品或药物以供预防、缓解或治疗宿醉。
本文所用的术语“月桂”是属于樟科(Lauraceae)和毛莨目(Ranunculales)的常绿灌木，已知月桂叶具有利尿、消化和抗癌功能。一般在烹调时利用新鲜或干燥的月桂叶调味。同时，还知晓从月桂叶获得的油可用于制备抗菌剂和杀虫剂以供农用，而从月桂果实获得的油对瘀伤或扭伤有效。但月桂叶对宿醉缓解有效还未见报道，本发明人首次证实此类用途。在本发明的一个实施方式中，利用月桂的叶子制备月桂叶提取物。
本文所用的术语“梨果仙人掌”是是济州岛野生梨果仙人掌的果实，其富含膳食纤维和矿物质，例如钙和铁。梨果仙人掌已用于治疗发热、支气管哮喘、消化不良、胃痉挛、便秘、胃灼热、血液循环不畅等，其具有高含量的维生素C。在最近几年，已知梨果仙人掌含有高水平的多酚，从而能抑制高血压、癌症、衰老等。
本文所用的术语“缫丝花”也称为甜栗玫瑰(sweet chestnut rose)，其是属于蔷薇科(Rosaceae)的植物，广泛分布于东亚、中国和喜马拉雅山等地，其果实和种子可食用。其含有丰富的维生素等物质，具有高SOD(过氧化物歧化酶)活性，从而具有抗氧化功能。
本文所用的术语“黄杞”是属于胡桃科(Juglandaceae)的植物，通常称为“台湾黄杞(Taiwan engelhardtia)”。黄杞是东方医学中常用的药物，其表现出显著的中枢神经系统刺激作用和利尿作用。黄杞还抑制肾炎，延缓蛋白尿和胆固醇血症的进展。其降血压的作用也已为人所知。
本文所用的术语“莲”是有许多常用名的植物，包括印度莲花(Indian lotus)、圣莲花(sacred lotus)、印度豆(bean of India)、或简单称为莲花，其为睡莲科(Nelumbonaceae)的两种水生植物之一。除去种皮后，干燥的莲子用作药物。已知莲子是无毒的，具有营养和滋补作用，对于失眠、慢性腹泻和纳差有效。
本文所用的术语“提取物”可以利用水、1-6个碳原子的醇，优选具有1-4个碳原子的醇或其混合物作为溶剂提取各植物的粉末来制备，优选地，可以通过冷浸法提取、热水提取、超声波提取、回流冷提取、超高压提取或加热提取在25℃-120℃提取1小时到8小时。然而，只要该方法提取的物质对宿醉表现出预防或治疗效果，对其类型无需特别限制。对经历提取过程的产物依次进行过滤、减压浓缩和干燥过程，从而将其制备成本发明的提取物。然而，并不限于此，本发明的提取物包括所有液体提取物、稀释或浓缩的液体提取物、干燥液体提取物制备的干燥提取物、或其粗纯化提取物或纯化的提取物。此外，所述提取物可以从天然植物、其杂交种或其变体的各种器官中提取。
在本发明中，月桂叶、梨果仙人掌、缫丝花、黄杞、北枳椇(Hovenia dulcis)果实和莲子(莲花)的提取物可以是用水、乙醇、甲醇或其混合溶剂提取各种草药或其混合物，然后喷雾干燥(但不限于此)提取物得到的粉末提取物。
当月桂叶提取物、梨果仙人掌提取物和缫丝花提取物的重量比为0.25到1:0.5到2:0.5到2时，对缓解宿醉有效的预防或治疗宿醉的组合物对宿醉具有更佳的预防和治疗效果。
本文所用的术语“宿醉”表示饮用酒精之后产生的不舒适的身体和精神症状，其客观症状包括头痛、恶心、呕吐、嗜睡、运动能力降低、血液学(性质)改变和激素变化。宿醉的原因尚不清楚，但通常认为与乙醇代谢的代谢产物乙醛高度相关。即，已知身体中残留的乙醛浓度高时，通常会发生宿醉。
本文所用的术语“预防”是指通过给予包括本发明的组合物在内的预防或治疗宿醉的药物组合物，来限制或延迟宿醉发生的所有行为。本文所用的术语“治疗”或“缓解”是指通过给予包括本发明的组合物在内的预防或治疗宿醉的药物组合物或预防或缓解宿醉的食品组合物，以使宿醉症状好转或有利改善的所有行为。
本发明的预防或治疗宿醉的组合物可以是选自下组的任一制剂：片剂、丸剂、粉末剂、颗粒剂、胶囊剂、混悬液、内用液体、乳液、糖浆、无菌水溶液、非水性溶剂、冻干制品、和栓剂，可将所述组合物制备成各种口服或胃肠外制剂。就制剂而言，可以利用典型的稀释剂或赋形剂，例如填充剂、膨胀剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂或表面活性剂。口服给药的固体制剂的例子包括片剂、丸剂、粉末剂、颗粒剂和胶囊剂，通过混合一种或多种化合物与至少一种赋形剂，例如淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖、明胶等来制备这些固体制剂。除了简单的赋形剂外，还可使用润滑剂，例如硬脂酸镁、滑石粉等。对于口服给药的液体制剂，可以利用混悬液、内用液体、乳液、糖浆等，除了常用作简单稀释剂的水和液体石蜡外，还可包含各种其它赋形剂，例如润湿剂、甜味剂、调味剂、防腐剂等。对于胃肠外给药的制剂，可利用无菌水溶液、非水性溶剂、混悬液、乳液、冻干制品、栓剂等。对于非水性溶剂或混悬液，可利用丙二醇、聚乙二醇、植物油，例如橄榄油，可注射酯，例如油酸乙酯等。对于栓剂的基料，可利用Witepsol、Macrogol、吐温61、可可脂、月桂酯(laurin butter)、甘油明胶等。
可给予药学上有效量的本发明组合物。
本文所用的短语“药学上有效量”是指足以在适用于任何医学治疗的合理效益-风险比下治疗疾病的用量。有效的剂量水平可以根据各种因素来决定，包括对象的类型、严重程度、年龄和性别、疾病的类型、药物活性、药物敏感性、给药时间、给药途径、排出率、治疗时期和共同给予的药物，以及医学领域熟知的其它因素。可单独施用本发明组合物，或与其它治疗剂共同施用本发明的组合物。本发明组合物与常规治疗剂的共同施用可以同时进行或序贯进行。单剂或多剂均可施用。考虑了所有因素后，利用足以获得最大疗效而无副作用的尽可能低量的组合物是非常重要的，本领域技术人员不难确定该量。然而，就优选的效果而言，本发明组合物的给药量可以是经由胃肠外或口服途径每天0.001到100μg/kg，优选每天0.01到100μg/kg。可以在一次给药中或每天分成数次施用该剂量。本发明的范围不限于任何方面的具体剂量。可将组合物通过各种途径施用于各种哺乳动物，例如小鼠、家畜或人。本发明考虑了所有给药方式而不受限制，只要它们是本领域的典型方法，例如可以通过口服、直肠或静脉内、肌内、皮下、硬膜外或通过脑室内注射给药。
除了上述主要组分，本发明的预防或治疗宿醉的组合物还可包含黄杞提取物、莲子提取物、北枳椇果实提取物或它们的混合物作为辅助组分以便进一步提高宿醉缓解作用。优选地，还可包含维生素，例如维生素B、维生素C、维生素E或β-胡萝卜素，矿物质，例如Ca、Mg或Zn，磷脂，例如卵磷脂，氨基酸，例如丙氨酸或牛磺酸，苹果酸、柠檬酸、白砂糖、高果糖玉米糖浆、寡糖、赤灵芝(Ganoderma Lucidum)或它们的混合物。
在另一方面，本发明提供预防或制备宿醉的方法，包括步骤：将所述组合物施用于具有宿醉症状或有宿醉症状风险的对象。
对组合物和宿醉的描述与上述相同。
具体地说，本发明的治疗方法包括将药学上有效量的组合物施用于具有宿醉症状或有宿醉症状风险的对象。所述对象表示所有哺乳动物，包括狗、牛、马、家兔、小鼠、大鼠、鸡或人，但本发明的哺乳动物不限于这些例子。可通过胃肠外、皮下、腹膜内、肺内和鼻内途径给予组合物。对于局部治疗，可通过合适的方法，若有必要，其包括病灶内注射给药。本发明组合物的优选给药剂量可根据对象的情况和体重、疾病的严重程度、药物类型、给药途径和时段而有所不同，本领域技术人员不难决定。
还有在另一方面，本发明提供预防或缓解宿醉的食品组合物，所述食品组合物含有月桂叶提取物作为活性成分。
本发明的组合物优选还含有梨果仙人掌提取物，从而成为含有月桂叶提取物和梨果仙人掌提取物的组合物；更优选地，还含有缫丝花提取物，从而成为含有月桂叶提取物、梨果仙人掌提取物和缫丝花提取物的组合物。最优选地，所述组合物可以是含有月桂叶提取物、梨果仙人掌提取物、缫丝花提取物、黄杞提取物和莲子(莲花)提取物的组合物。
对月桂叶、梨果仙人掌、缫丝花提取物和宿醉的描述与上述相同。
具体地说，出于预防或缓解宿醉的目的，可以将本发明的提取物加入食品组合物。
当本发明的月桂叶提取物用作食品添加剂时，该提取物或其部分可以原样加入，或与其它食品或组分联用，并按照典型的方法适当使用。可以根据使用目的适当决定活性成分的混合量。
此外，食品的种类没有特别限制。可加入月桂叶提取物的食品的例子可以包括肉类、香肠、面包、巧克力、糖果、零食、饼干、披萨、速食面、其它面条、口香糖、果冻和包括冰激淋在内的乳制品、各种汤、饮料、茶、饮品、酒精饮料和复方维生素。实际上，可以包括广义上的所有食品种类，还包括用作动物饲料的食品。
除了上述的，本发明的食品组合物可以包含各种营养物质、维生素、电解质、调味剂、着色剂、果酸及其盐、海藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、酒精、碳酸饮料所用的碳酸化剂，等等。此外，所述食品组合物可包括用于产生天然果汁的果肉、果汁饮品和植物饮品。此外，可按照已知的制备方法将所述食品制备成诸如片剂、颗粒剂、粉末剂、液体溶液、丸剂等制剂。只要包含本发明的月桂叶提取物作为活性成分，其它成分不用特别限制，可以包含通常使用的各种调味剂或天然碳水化合物作为附加成分。
在还有另一方面，本发明提供制备月桂叶提取物和含有月桂叶提取物组合物的方法。
对月桂和月桂叶提取物的描述与上述相同。
具体地说，所述制备方法包括以下步骤：(a)在25℃-120℃，用1到100-倍(v/w)的水、1-6个碳原子的醇或它们的混合溶剂提取干燥月桂叶样品，1小时到8小时；和(b)过滤步骤(a)中产生的提取物并将其减压浓缩来制备月桂叶提取浓缩物。
步骤(a)是利用提取溶剂从月桂叶作提取的步骤，即，用水、1-6个碳原子的醇，优选具有1-4个碳原子的醇或它们的混合溶剂提取月桂叶粉末的步骤。该提取优选通过冷浸法提取、热水提取、超声波提取、回流冷提取、超高压提取或加热提取，在25℃-120℃下进行1小时到8小时。然而，只要采用的方法制备的提取物显示出预防或缓解宿醉的效果，对其类型无需特别限制。
步骤(b)是通过过滤步骤(a)中产生的提取物并将其减压浓缩来制备月桂叶提取浓缩物的步骤。
可通过包括上述步骤的制备方法制备月桂叶提取物和包含该提取物的组合物。
优选地，所述方法还可包括将梨果仙人掌浓缩提取物混合入步骤(b)的月桂叶浓缩提取物的步骤，更优选地，将缫丝花浓缩提取物混合入步骤(b)的月桂叶浓缩提取物和梨果仙人掌浓缩提取物的混合物的步骤。
本发明的方式
下文将参考实施例更详细地描述本发明的构成的效果。然而，这些实施例仅是为了说明目的，本发明并不限于这些实施例。
实施例1：制备月桂叶提取物、梨果仙人掌提取物和缫丝花提取物
1-1.制备月桂叶提取物
粉碎200g月桂叶，向其中加入2L95℃的热水，然后在搅拌下进行提取。液体提取物经滤纸过滤，然后获得上清液，减压浓缩得到液体浓缩物。通过喷雾干燥方法获得粉末状的月桂叶提取物。
1-2.制备梨果仙人掌提取物
粉碎200g梨果仙人掌果实，向其中加入2L80℃的80%乙醇，然后搅拌6小时进行提取。液体提取物经滤纸过滤，然后获得上清液，50℃下进行减压浓缩得到50%固体含量的液体浓缩物。
1-3.制备缫丝花提取物
将2L95℃的热水加入200g缫丝花果实，然后搅拌2小时进行提取。液体提取物经滤纸过滤，然后静止12小时。获得上清液，减压浓缩得到50%固体含量的液体浓缩物。然后，通过喷雾干燥方法获得粉末状的缫丝花提取物。
实施例2.制备预防或治疗宿醉的组合物
制备包含实施例1中所得月桂叶提取物的实验组合物。详细地说，将50mg月桂叶提取物、100mg梨果仙人掌提取物、100mg缫丝花提取物、30mg黄杞提取物、20mg莲子(莲花)提取物、130mg北枳椇果实提取浓缩物、340mg牛磺酸、34mg丙氨酸、9mg烟酰胺、34mg BCAA、84mg维生素C、0.83mg维生素B1盐酸盐、420mg白砂糖和2,000mg高果糖玉米糖浆加入10mL蒸馏水以制备实验组合物。
此外，制备了对比组合物，其包含除月桂叶提取物和梨果仙人掌提取物外的其它组分，其重量比与实验组合物的相同。
利用以上制备的实验组合物和对比组合物进行宿醉相关的动物测试(实验实施例3)。
实施例3.制备预防或缓解宿醉的饮品
基于实施例2，制备预防或缓解宿醉的饮品。将大鼠的给药剂量转换为人用的(成人，60kg/天)以制备饮品。具体地说，基于1L(1000g)含纯水的混合物，加入3g(0.3重量%)月桂叶提取物、6g(0.6重量%)梨果仙人掌提取物、6g(0.6重量%)缫丝花提取物、1.8g(0.18重量%)黄杞提取物、1.2g(0.12重量%)莲子(莲花)提取物、7.8g(0.78重量%)北枳椇果实提取浓缩物、20g(2重量%)牛磺酸、1g(0.1重量%)丙氨酸、0.53g(0.053重量%)烟酰胺、2g(0.2重量%)BCAA、5g(0.5重量%)维生素C、0.05g(0.005重量%)维生素B1盐酸盐、25g(2.5重量%)白砂糖、120g(12重量%)高果糖玉米糖浆、1.6g(0.16重量%)DL-苹果酸、3g(0.3重量%)柠檬酸、0.4g(0.04重量%)柠檬酸钠和17g(0.17重量%)调味剂(混合水果调味剂、蜂蜜调味剂)，向其中加入适合饮用的纯水到1L。搅拌该混合物直至所有组分完全溶解，通过高温短时(HTST)方法灭菌以除去残留的细菌，注入容器。注入容器后，将产品在80℃或更高的温度下进行后处理灭菌，然后将容器冷却、贴标签并包装以制备用于缓解宿醉的饮品。
实验实施例1.不同剂量的月桂叶提取物的宿醉预防或治疗效果研究
为研究单一月桂叶提取物的宿醉预防或治疗效果，在不同剂量下进行了实验(25mg/kg、50mg/kg和100mg/kg)。
1-1.检测乙醇和乙醛的血液浓度
将7-周龄的SD大鼠稳定饲养1周，将不同剂量，25、50和100mg/kg的月桂叶提取物给予实验组，然后检测一定时间范围内的乙醇和乙醛的血液浓度。详细地说，将禁食大鼠分成对照组(非-月桂叶提取物-治疗组;EtOH-处理组)和实验组(月桂叶提取物-治疗组)。将25、50或100mg月桂叶提取物溶解在1ml(蒸馏水)中，并转换成单位体重剂量(B.W)，然后口服给予实验组的大鼠。给药后30分钟，按4g/kg体重的用量口服给予对照组和实验组25%乙醇，。从此基线开始1、2、4和8小时后，从心脏收集1.5ml血液。通过Headspace-GC/MS(PerkinElmer,clarus600T)分析所收集血液中的乙醇和乙醛浓度。
如图1所示，与对照组(非-月桂叶提取物治疗组)相比，在给予25、50或100mg月桂叶提取物的所有实验组中均观察到乙醇和乙醛血液浓度有显著降低，表明月桂叶提取物具有降低乙醇和乙醛血液浓度的作用。
1-2.行为评估
除了血液学测试，还对酒精所致的宿醉症状进行了行为学评估，包括运动协调性不佳、运动功能降低、运动紊乱、镇静作用、肌肉松弛和体温控制失调。
1-2-1.检测整体运动活性
利用行为学观察系统和程序集，例如EthoVision system(Noldus IT b.v.,荷兰)检查预定时间中的运动距离、运动持续时间、运动角度、运动路径等，同时将大鼠置于开放的行为观察箱中并允许自由地到处移动，用作评估所有行为的基础数据。采用该实验评估运动功能的丧失、镇静作用、兴奋性、冲动行为等。
实验前一天，使大鼠对行为观察装置进行一次或多次的10分钟适应，然后将25、50或100mg月桂叶提取物溶解于1ml蒸馏水，并转换成单位体重剂量(B.W)，然后口服给予实验组的大鼠，如实验实施例1-1所示。给药后30分钟，按4g/kg体重的用量口服给予对照组和实验组25%乙醇。从此基线开始1、2、4和8小时后，将大鼠置于实验盒的中间并稳定2分钟，然后进行行为观察和分析，5分钟。评估总运动距离和总运动持续时间。
如图2所示，从给予乙醇后1小时开始整体运动活性显著降低。发现与对照组(非-月桂叶提取物-治疗组)相比，实验组(月桂叶提取物-治疗组)的总运动距离(运动的距离；cm)和总运动持续时间(运动持续时间；秒)得以显著地恢复。与对照组相比，随着时间过去，实验组的行为变得与未给予月桂叶提取物和乙醇的正常组的那些行为接近。
1-2-2.利用转棒检测运动活性
将实验动物置于RPM-可调踩轮装置上，检测掉落的等待时间、掉落频率和平均等待时间，用于评估镇静作用、运动功能丧失、运动集中性(motorconcentration)和维持运动的能力。
稳定饲养动物一周，在实验前两天训练动物两次，每次5分钟，实验前一天训练动物1次。将25、50或100mg月桂叶提取物溶解于1ml蒸馏水，并转换成单位体重剂量(B.W)，然后口服给予实验组的大鼠，如实验实施例1-1所示。给药后30分钟，按4g/kg体重的用量口服给予对照组和实验组25%乙醇。从此基线开始1、2、4和8小时后，将大鼠置于设备中，然后检测(A)掉落的平均等待时间和(B)掉落频率，5分钟。[平均等待时间=300(s)/掉落频率+1]
如图3所示，给予乙醇时，等待时间缩短，掉落频率增加。与对照组相比，实验组显示了因给予乙醇而降低的运动活性的增加，乙醇给予后2小时观察到运动活性有显著差异。
1-2-3.利用丝线检测运动活性
此测试评估动物坚持在丝线上的能力，这是用于评估运动功能丧失、维持运动能力、运动集中性、镇静作用、肌肉松弛等的模型。该数据支持以上两个实验的结果。该实验用于评估运动功能丧失、镇静作用、运动集中性等。
稳定饲养动物一周，实验前两天在设备中训练动物两次(共3分钟；第一次一分钟，第二次两分钟)。将25、50或100mg月桂叶提取物溶解于1ml蒸馏水，并转换成单位体重剂量(B.W)，然后口服给予实验组的大鼠，如实验实施例1-1所示。给药后30分钟，按4g/kg体重的用量口服给予对照组和实验组25%乙醇。从此基线开始1、2、4和8小时后，将大鼠置于设备中，然后检测(A)平均等待时间和(B)掉落频率，2分钟。[平均等待时间=120(s)/掉落频率+1]
如图4所示，给予乙醇时，等待时间缩短，掉落频率增加。与对照组相比，实验组均显示了因给予乙醇而降低的运动活性的增加，乙醇给予后4小时观察到运动活性有显著差异。
1-2-4.冷水游泳测试
此测试评估动物忍受冷水的能力，这是用于评估对应激的耐受性、维持运动的能力、体温调控能力等的模型。
宿醉后，由于控制体温的能力降低，维持在冷水(8±2℃)游泳的能力降低。将25、50或100mg月桂叶提取物溶解于1ml蒸馏水，并转换成单位体重剂量(B.W)，然后口服给予实验组的大鼠，如实验实施例1-1所示。给药后30分钟，按4g/kg体重的用量口服给予对照组和实验组25%乙醇。从此基线开始1、2、4和8小时后，让大鼠在冷水中游泳，检测放弃游动的等待时间(最多10分钟)。
如图5所示，给予乙醇时，控制体温的能力和运动活性降低，因此，冷水游泳能力显著降低。与对照组相比，实验组显示了冷水游泳能力以剂量依赖性方式得以显著恢复。
实验实施例2.最佳配比的含月桂叶提取物组合物的宿醉预防或治疗效果研究
进行该实验以研究月桂叶提取物、梨果仙人掌提取物和缫丝花提取物的混合组合物的最佳配比。以下依据实验实施例1的结果决定月桂叶提取物的剂量，然后进行实验。利用100mg月桂叶提取物、100mg梨果仙人掌提取物和100mg缫丝花提取物制备组合物A；利用100mg月桂叶提取物、100mg梨果仙人掌提取物和50mg缫丝花提取物制备组合物B；利用50mg月桂叶提取物、100mg梨果仙人掌提取物和100mg缫丝花提取物制备组合物C；利用100mg月桂叶提取物、200mg梨果仙人掌提取物和100mg缫丝花提取物制备组合物D。它们总结于表1。
表1.混合提取物组合物的配比
2-1.检测乙醇的血液浓度
7-周龄的SD大鼠稳定饲养1周，然后将稳定的大鼠分成对照组(非-组合物-治疗组；EtOH-处理组)和实验组(组合物-治疗组)。将组合物A-D给予实验组的大鼠，然后检测一定时间范围内的对照组和实验组大鼠的乙醇血液浓度。详细地说，将大鼠分成A、B、C、D组，将组合物A、B、C、D溶解在1ml蒸馏水中，并转换成单位体重剂量(B.W)，然后口服给予实验组的大鼠，如实验实施例1-1所示。给药后30分钟，口服给予大鼠乙醇。从此基线开始1、2、4和8小时后，收集血液。分析乙醇浓度。
如图6所示，与对照组相比，给予乙醇后30分钟开始在所有实验组中均观察到乙醇血液浓度变低，乙醇给予后1小时观察到显著差异。
2-2.行为评估
除了血液学测试，还对酒精所致的宿醉症状进行了行为学评估，例如运动协调性不佳、运动功能降低、运动紊乱、镇静作用、肌肉松弛和体外控制失调。
2-2-1.检测整体运动活性
与实验实施例1-2-1的方式相同，实验前一天，使大鼠对行为观察装置进行一次或多次的10分钟适应。将大鼠分成实验组A、B、C和D，将组合物A、B、C、D溶解在1ml蒸馏水中，并转换成单位体重剂量(B.W)，然后以实验实施例2-1相同的方式口服给予大鼠，。给药后30分钟，口服给予大鼠乙醇。从此基线开始1、2、4和8小时后，将大鼠置于实验盒的中间并稳定2分钟，然后进行行为观察5分钟并作分析。评估总运动距离和总运动持续时间。
如图7所示，从给予乙醇后30分钟开始整体运动活性显著降低。发现与对照组相比，所有实验组的总运动距离和总运动持续时间显著增加。
2-2-2.利用转棒检测运动活性
与实验实施例1-2-2的方式相同，动物稳定饲养一周，在实验前两天训练动物两次，每次5分钟，实验前一天训练动物1次。将大鼠分成实验组A、B、C和D，将组合物A、B、C、D溶解在1ml蒸馏水中，并转换成单位体重剂量(B.W)，然后以实验实施例2-1相同的方式口服给予大鼠。给药后30分钟，口服给予大鼠乙醇。从此基线开始30分钟、1、2、4和8小时后，将大鼠置于设备中，然后检测(A)掉落的平均等待时间、(B)掉落频率和(C)平均等待时间，5分钟。[平均等待时间=300(s)/掉落频率+1]
如图8所示，给予乙醇时，等待时间快速缩短，掉落频率快速增加。与对照组相比，所有实验组均显示了因给予乙醇而降低的运动活性的增加，乙醇给予后1小时观察到运动活性有显著差异。
2-2-3.利用丝线检测运动活性
与实验实施例1-2-3的方式相同，动物稳定饲养一周，实验前两天在设备中训练动物两次(共3分钟；第一次一分钟，第二次两分钟)。将大鼠分成实验组A、B、C和D，将组合物A、B、C、D溶解在1ml蒸馏水中，并转换成单位体重剂量(B.W)，然后以实验实施例2-1相同的方式口服给予大鼠。给药后30分钟，口服给予大鼠乙醇。从此基线开始30分钟、1、2、4和8小时后，将大鼠置于设备中，然后检测(A)掉落的平均等待时间、(B)掉落频率和(C)平均等待时间，2分钟。
如图9所示，给予乙醇时，等待时间缩短，掉落频率增加。与对照组相比，所有实验组显示运动活性显著恢复。此外，给予组合物C的实验组C显示因给予乙醇而降低的运动活性的恢复效果最优异。
2-2-4.冷水游泳测试
将大鼠分成实验组A、B、C和D，将组合物A、B、C、D溶解在1ml蒸馏水中，并转换成单位体重剂量(B.W)，然后以实验实施例1-2-4相同的方式口服给予大鼠，。给药后30分钟，口服给予大鼠乙醇。从此基线开始30分钟、1、2、4和8小时后，将大鼠置于冷水中游泳，检测放弃游动的等待时间(最多10分钟)。
如图10所示，给予乙醇时，调控体温的能力和运动活性降低，因此，冷水游泳能力显著降低。与对照组相比，所有实验组均显示了冷水游泳能力的显著恢复。
对增加乙醇代谢以降低血液乙醇浓度以及改善因给予乙醇导致运动活性和体温调控能力降低的总体检测结果显示，实验组C(月桂叶提取物:梨果仙人掌提取物:缫丝花提取物=50mg/kg:100mg/kg:100mg/kg)证实具有最有效的月桂叶提取物、梨果仙人掌提取物和缫丝花提取物配比，从而表现出最佳的宿醉缓解效果。
实验实施例3.预防和治疗宿醉的组合物的宿醉预防或治疗效果研究
基于月桂叶提取物、梨果仙人掌提取物和缫丝花提取物(实验实施例2)的最佳配比，制备含有其它物质的组合物(实施例2;实验组合物和对比组合物)并进行了实验。此外，还证实了基于给药剂量的相应组合物对行为的作用效果。
3-1.检测乙醇和乙醛的血液浓度
7-周龄的SD大鼠稳定饲养1周，然后将稳定的大鼠分成实验组、对比组和对照组。为方便起见，将实施例2制备的实验组合物和对比组合物溶解在10ml蒸馏水中，并转换成单位体重剂量(B.W)，然后进行10-倍(高剂量(100%)给药)和5-倍(低剂量(50%)给药)。按照单位体重的剂量对实验组和对比组的大鼠进行给药，然后检测一定时间范围内的乙醇和乙醛的血液浓度。详细地说，采用与实验实施例1-1相同的方式进行实验。
如图11所示，在口服给予乙醇后4小时，与对照组(非-实验组合物-治疗组)相比，实验组(实验组合物-治疗组)和对比组(对比组合物-治疗组)中，乙醇的血液浓度显著降低；在口服给予乙醇后8小时，对比组和对照组显示相似的乙醇血液浓度，但本发明的实验组小鼠的乙醇血液浓度明显要低(图11(A))。此外，与对照组和对比组相比，从口服给予乙醇后1小时开始，实验组中作为宿醉直接原因的乙醛血液浓度显著降低(图11(B))。此外，比较乙醇和乙醛血液浓度的曲线下面积(AUC)显示，实验组中的乙醇和乙醛血液浓度在统计学上显著低于对照组。
3-2.行为学评估
除了血液学测试，还对酒精所致宿醉症状进行了行为学评估，包括运动协调性不佳、运动功能降低、运动紊乱、镇静作用、肌肉松弛和体温控制失调。具体地说，通过改变本发明组合物的给药剂量比较低剂量(50%)-和高剂量(100%)-给药组，检验了本发明组合物是否具有剂量依赖性作用。
3-2-1.检测整体运动活性
与实验实施例1-2-1的方式相同，实验前一天，使大鼠对行为观察装置进行一次或多次的10分钟适应。然后将实施例2制备的实验组合物和对比组合物分别给予低剂量(50%)和高剂量(100%)实验组及对比组的大鼠。将大鼠分成实验组A、B、C和D，口服给予组合物A、B、C、D。给药后30分钟，口服给予大鼠乙醇。从此基线开始30分钟、1、2、4和8小时后，将大鼠置于实验盒的中间并稳定2分钟，然后进行行为观察5分钟并作分析。评估总运动距离和总运动持续时间。
如图12所示，从给予乙醇后30分钟开始，整体运动活性显著降低。发现与对照组相比，实验组的总运动距离和总运动持续时间增加；与对照组相比，从给予乙醇后2小时开始，在高剂量(100%)实验组中观察到总运动活性具有显著差异。
3-2-2.利用转棒检测运动活性
与实验实施例1-2-2的方式相同，动物稳定饲养一周，在实验前两天训练动物两次，每次5分钟，实验前一天训练动物1次。然后将实施例2制备的实验组合物和对比组合物分别给予低剂量(50%)和高剂量(100%)实验组及对比组的大鼠。将大鼠分成实验组A、B、C和D，将组合物A、B、C、D口服给予大鼠。给药后30分钟，口服给予大鼠乙醇。从此基线开始30分钟、1、2、4和8小时后，将大鼠置于设备中，然后检测(A)掉落的首次等待时间、(B)掉落频率和(C)平均等待时间，5分钟。[平均等待时间=300(s)/掉落频率+1]
如图8所示，给予乙醇时，等待时间缩短，掉落频率增加。与对照组相比，实验组显示了因给予乙醇而降低的运动活性的增加。具体地说，与对照组相比，高剂量(100%)实验组显示恢复运动活性的作用最高。
3-2-3.利用丝线检测运动活性
与实验实施例1-2-3的方式相同，动物稳定饲养一周，实验前两天在设备中训练动物两次(共3分钟；第一次一分钟，第二次两分钟)。然后将实施例2制备的实验组合物和对比组合物分别给予低剂量(50%)和高剂量(100%)实验组及对比组的大鼠。将大鼠分成实验组A、B、C和D，将组合物A、B、C、D口服给予大鼠。给药后30分钟，口服给予大鼠乙醇。从此基线开始30分钟、1、2、4和8小时后，将大鼠置于设备中，然后检测(A)掉落的首次等待时间、(B)掉落频率和(C)平均等待时间，2分钟。
如图14所示，给予乙醇时，等待时间缩短，掉落频率增加。与对照组相比，实验组显示因给予乙醇而降低的运动活性增加；与对照组相比，运动活性有显著差异。此外，高剂量(100%)实验组显示了因给予乙醇而降低的运动活性的恢复效果最优异。
3-2-4.冷水游泳测试
与实验实施例1-2-4的方式相同，将实施例2制备的实验组合物和对比组合物分别给予低剂量(50%)和高剂量(100%)实验组及对比组的大鼠。将大鼠分成实验组A、B、C和D，将组合物A、B、C、D口服给予大鼠。给药后30分钟，口服给予大鼠乙醇。从此基线开始30分钟、1、2、4和8小时后，将大鼠置于冷水中游泳，检测放弃游动的等待时间(最多10分钟)。
如图15所示，给予乙醇时，调控体温的能力和运动活性降低，因此，冷水游泳能力显著降低。与对照组相比，实验组的改善远为优异。具体地说，与对照组相比，从给予乙醇后4小时开始，高剂量(100%)实验组显示冷水游泳能力的恢复效果最高。
综上所述，本发明的含有月桂叶提取物的组合物表现出显著的降低乙醇和乙醛血液浓度的优异作用。此外，除了分析乙醇和乙醛的血液浓度，还进行了四类行为学测试以证实本发明组合物具有缓解和预防宿醉的作用，该作用有利于相应组合物的剂量。
虽然已经详细描述的本发明的具体诸部分，但本领域技术人员应知道，提供的这些具体描述是优选的实施方式，本发明的范围不限于此。因此，本发明的范围应仅由随附的权利要求及其等同形式所限定。

Claims (6)

1.一种预防或治疗宿醉的组合物，所述组合物含有月桂(Laurus nobilis)叶提取物、梨果仙人掌(Opuntia ficus indica)提取物和缫丝花(Rosa roxburghii)提取物作为主要活性成分，其中，
所述月桂叶提取物、梨果仙人掌提取物和缫丝花提取物的重量比是0.25到1:0.5到2:0.5到2。
2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还含有黄杞(Engelhardtiachrysolepis HANCE)提取物、莲(Nelumbo nucifera)种子提取物、北枳椇(Hoveniadulcis)果实提取物或它们的混合物。
3.如权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，所述组合物是选自下组的制剂：溶液、混悬液、粉末剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、或丸剂。
4.一种预防或缓解宿醉的食品组合物，所述组合物含有月桂(Laurus nobilis)叶提取物、梨果仙人掌提取物和缫丝花提取物作为主要活性成分，其中，
所述月桂叶提取物、梨果仙人掌提取物和缫丝花提取物的重量比是0.25到1:0.5到2:0.5到2。
5.如权利要求4所述的食品组合物，其特征在于，所述组合物是茶、果冻或饮品的形式。
6.一种制备权利要求1所述组合物的方法，所述方法包括以下步骤：
(a)在25℃-120℃，用1到100-倍(v/w)的水、1-6个碳原子的醇或它们的混合溶剂提取干燥月桂叶样品，1小时到8小时；
(b)过滤步骤(a)中产生的提取物并将其减压浓缩来制备月桂叶浓缩提取物；
(c)将梨果仙人掌浓缩提取物混合入步骤(b)的月桂叶浓缩提取物；和
(d)将缫丝花浓缩提取物混合入步骤(b)的月桂叶浓缩提取物和梨果仙人掌浓缩提取物的混合物中。
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