CN104027478A - 金花茶叶活性部位，其制备方法及其用途 - Google Patents

金花茶叶活性部位，其制备方法及其用途 Download PDF

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Abstract

公开了金花茶叶活性部位，其制备方法及其用途。制备方法包括：A.浸润：取金花茶叶粗粉，用5倍(V/W)30％或以上浓度的醇溶液浸泡过夜；B.提取：用与步骤A中相同浓度的醇溶液对A步骤中的金花茶叶粗粉加热回流提取2次或2次以上，醇溶液用量为金花茶叶粗粉的10～40倍(V/W)，每次提取时间为1～4小时，过滤，合并提取液，回收溶剂，得浓缩膏；C.萃取：将所述浓缩膏用水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，取乙酸乙酯萃取后的萃取液，回收溶剂；D.干燥：将C步骤获得的乙酸乙酯萃取物冷冻干燥，即得。

Description

金花茶叶活性部位,其制备方法及其用途
技术领域
本发明涉及中药活性部位，其制备方法及其用途。
背景技术
a-糖苷酶在食物的吸收过程中起着重要作用，食物必须与这种酶结合才能被消化吸收而使血糖升高。a-糖苷酶抑制剂是目前广泛应用的一类新型口服降糖药，临床常用的有阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇，其作用部位在小肠上段，通过可逆性地抑制肠系膜刷状缘的a-糖苷酶，延缓a-糖苷酶将多糖(如淀粉、寡糖等)分解为葡萄糖，从而减慢葡萄糖的吸收速度，降低餐后血糖。阿卡波糖主要抑制a-淀粉酶，作用于大分子多糖的消化过程；伏格列波糖和米格列醇选择性地抑制双糖水解酶(麦芽糖酶、蔗糖酶)，使双糖分解为单糖的过程受阻。由于这种抑制作用是可逆的(a-糖苷酶抑制剂与a-糖苷酶结合数小时后又自行解离)，所以碳水化合物向葡萄糖的转化仅仅是推迟，而不是完全阻断。a-糖苷酶抑制剂对空腹血糖无直接作用，但可通过延缓肠道内糖的消化和吸收，降低餐后高血糖，减轻葡萄糖的毒性作用，改善胰岛素抵抗，进而使患者的空腹血糖也得到一定程度的改善。
临床上仍然亟需新的a-糖苷酶抑制剂，作为治疗糖尿病的药物。
广西是金花茶(Camellia nitidissima chi)植物的现代地理分布中心，被誉为金花茶的故乡。金花茶来源于山茶科(Theaceae)山茶属植物，是茶花家族中唯一花瓣是金黄色的珍稀物种，被列为国家一级重点保护植物，在国际上享有“植物界大熊猫”和“茶族皇后”之美誉。目前金花茶已成功大面积栽培，以金花茶叶为原料开发的功能保健品，已远销全国各地。但尚未有关于其降血糖和抑制a-糖苷酶活性的研究报道。
发明内容
本发明人经过广泛研究，发现在用含水乙醇提取金花茶叶后再用乙酸乙酯萃取而获得的乙酸乙酯部位对a-糖苷酶具有良好的抑制作用，因而提出本发明。
本申请的一实施方案提供了金花茶叶活性部位的制备方法，其包括如下步骤：
A.浸润：取金花茶叶粗粉，用5倍(V/W)30％或以上浓度的醇溶液浸泡过夜；
B.提取：用与步骤A中相同浓度的醇溶液对A步骤中的金花茶叶粗粉加热回流提取2次或2次以上，醇溶液用量为金花茶叶粗粉的10～40倍(V/W)，每次提取时间为1～4小时，过滤，合并提取液，回收溶剂，得浓缩膏；
C.萃取：将所述浓缩膏用水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，取乙酸乙酯萃取后的萃取液，回收溶剂；
D.干燥：将C步骤获得的乙酸乙酯萃取物冷冻干燥，即得。
本申请的另一实施方案提供了采用上述制备方法制备的金花茶叶活性部位。
本申请的另一实施方案提供了药物组合物，其包含本申请的金花茶叶活性部位。
本申请的另一实施方案提供了保健品，其包含本申请的金花茶叶活性部位。
本申请的另一实施方案提供了化妆品，其包含本申请的金花茶叶活性部位。
本申请的另一实施方案提供了上述金花茶叶活性部位在制备用于治疗糖尿病的药物中的用途。该药物可以制备成滴丸、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、合剂或贴膏。
本申请的另一实施方案提供了上述金花茶叶活性部位在制备保健品中的用途。
本申请的另一实施方案提供了上述金花茶叶活性部位在制备化妆品中的用途。
具体实施方式
本申请的一实施方案提供了金花茶叶活性部位的制备方法，其包括如下步骤：
A.浸润：取金花茶叶粗粉，用5倍(V/W)30％或以上浓度的醇溶液浸泡过夜；
B.提取：用与步骤A中相同浓度的醇溶液对A步骤中的金花茶叶粗粉加热回流提取2次或2次以上，醇溶液用量为金花茶叶粗粉的10～40倍(V/W)， 每次提取时间为1～4小时，过滤，合并提取液，回收溶剂，得浓缩膏；
C.萃取：将所述浓缩膏用水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，取乙酸乙酯萃取后的萃取液，回收溶剂；
D.干燥：将C步骤获得的乙酸乙酯萃取物冷冻干燥，即得。
在某些实施方案中，所述醇选自甲醇、乙醇、丙醇或其混合物。在更优选的实施方案中，所述醇为乙醇。
在某些实施方案中，可用慢速渗漉或超声波提取替代回流提取。
本申请的另一实施方案提供了采用上述制备方法制备的金花茶叶活性部位。
本申请的另一实施方案提供了药物组合物，其包含本申请的金花茶叶活性部位。
本申请的另一实施方案提供了保健品，其包含本申请的金花茶叶活性部位。
本申请的另一实施方案提供了化妆品，其包含本申请的金花茶叶活性部位。
本申请的另一实施方案提供了上述金花茶叶活性部位在制备用于治疗糖尿病的药物中的用途。该药物可以制备成滴丸、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、合剂或贴膏。
本申请的另一实施方案提供了上述金花茶叶活性部位在制备用于抑制a-糖苷酶的药物中的用途。该药物可以制备成滴丸、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、合剂或贴膏。
本申请的另一实施方案提供了上述金花茶叶活性部位在制备保健品中的用途。
本申请的另一实施方案提供了上述金花茶叶活性部位在制备化妆品中的用途。
实施例
实施例1金花茶叶活性部位的制备
金花茶叶粗粉1000g，5倍70％乙醇浸泡过夜，加热回流提取3次，第一次3h，第二、三次分别为2.5h，合并提取液，回收溶剂，得浓缩膏，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取后，取乙酸乙酯萃取液，回收溶剂，将所得乙酸乙酯部位冷冻干燥，即得。
实施例2药理活性试验
1)试剂
a-葡萄糖苷酶(a-glucosidase，EC3.2.1.20)，4-硝基苯-a-D-吡喃葡萄糖苷(4-Ntrophenyl-a-D-glucopyranoside，PNPG，026K1516)，阿卡波糖(Acarbose，Lot16869，阳性对照)和DMSO均购自Sigma公司，牛血清白蛋白(5组分)(BSA)购自Solarbio有限公司。
2)试验方法
按稍改良的方法[1]在96孔板上进行，用全波长酶标仪(UVmax Thermo Scientific Multiskan Go)于405nm波长下测定吸光度A值。
3)数据分析
按照抑制率％＝[1-(样品A试验组-样品A空白组)/(对照A试验组-对照A空白组)]×100％计算抑制率，并用OriginPro7.5SR1软件计算半数抑制率浓度(IC50)值。实验数据用平均值±标准偏差(n＝4)表示。
试验结果如表1所示。
表1金花茶叶乙酸乙酯部位和阿卡波糖抑制a-糖苷酶的IC50值
aIC50：抑制一半时抑制剂的浓度，通过浓度-抑制曲线内推而得。所有的值表达为平均值±标准偏差(n＝4)。
从上表可知，本申请的乙酸乙酯活性部位取得了比阳性对照阿卡波糖更好的抑制a-糖苷酶的活性。
参考文献
[1]Li Ting，Zhang Xiaodong，Song Yuwen，et al.A microplate based screening method for alpha-glucosidase inhibitors(a-糖苷酶抑制剂的基于微孔板的筛选方法)[J].Chinese Journal of Clinical Pharmacology and Therapeutics，2005，10(10)：112R-1134。

Claims (11)

1.金花茶叶活性部位的制备方法，其包括如下步骤：
A.浸润：取金花茶叶粗粉，用5倍(V/W)30％或以上浓度的醇溶液浸泡过夜；
B.提取：用与步骤A中相同浓度的醇溶液对A步骤中的金花茶叶粗粉加热回流提取2次或2次以上，醇溶液用量为金花茶叶粗粉的10～40倍(V/W)，每次提取时间为1～4小时，过滤，合并提取液，回收溶剂，得浓缩膏；
C.萃取：将所述浓缩膏用水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，取乙酸乙酯萃取后的萃取液，回收溶剂；
D.干燥：将C步骤获得的乙酸乙酯萃取物冷冻干燥，即得。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述醇选自甲醇、乙醇、丙醇或其混合物。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，在步骤B中，用慢速渗漉或超声波提取替代回流提取。
4.金花茶叶活性部位，其按照权利要求1-3中任一权利要求所述的方法制备。
5.药物组合物，其包含权利要求4所述的金花茶叶活性部位。
6.保健品，其包含权利要求4所述的金花茶叶活性部位。
7.化妆品，其包含权利要求4所述的金花茶叶活性部位。
8.权利要求4所述的金花茶叶活性部位在制备用于治疗糖尿病的药物中的用途。
9.权利要求8所述的用途，其中所述药物被制备成滴丸、片剂、胶囊剂、颗粒剂或合剂。
10.权利要求4所述的金花茶叶活性部位在制备保健品中的用途。
11.权利要求4所述的金花茶叶活性部位在制备化妆品中的用途。
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