CN104026007A - 一种土沉香的种胚苗茎段离体快速繁殖方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种土沉香的种胚苗茎段离体快速繁殖方法，包括如下步骤：将土沉香种子置于9010型旋风式微型高速样品粉碎机粉碎1min，重复3次，镜检；将镜检合格的土沉香种子用双氧水原液液泡30-60min后，用无菌水冲洗，用无菌滤纸吸干水份，无菌条件下分离种胚并进行培养，获得无菌种胚苗；切取种胚苗茎段，诱导腋芽成苗，再以该成苗的茎段继续增殖，10～12代扩大繁殖茎段苗数量。本发明通过旋风粉碎法进行破壁，降低成本的同时，可以规模化运作，通过双氧水杀菌，促进了种子的发芽，同时利用MS、IBA2.0mg/L、NAA0.2mg/L溶液，增强了生根的几率，而椰壳基质的添加，提高了成活率。

Description

一种土沉香的种胚苗茎段离体快速繁殖方法
技术领域
本发明涉及一种土沉香的种胚苗茎段离体快速繁殖方法。
背景技术
土沉香又名牙香树、蜜香树，为瑞香科常绿乔木，渐危种。一般生于海拔400米以下，在海南可达1000米。多生于山地雨林或半常绿季雨林中，是中国特有而珍贵的药用植物。近年(2013年)由于常被采取供药用，损伤林木极为严重，仅有零星散生的残存植株，为中国国家II级重点保护野生植物，因此研制一种土沉香快速繁殖方法迫在眉急。
发明内容
本发明的目的在于提供一种土沉香的种胚苗茎段离体快速繁殖方法，通过旋风粉碎法进行破壁，降低成本的同时，可以规模化运作，通过双氧水杀菌，促进了种子的发芽，同时利用MS、IBA2.0mg/L、NAA0.2mg/L溶液，增强了生根的几率，而椰壳基质的添加，提高了成活率。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：
一种土沉香的种胚苗茎段离体快速繁殖方法，包括如下步骤：
S1、将土沉香种子置于9010型旋风式微型高速样品粉碎机粉碎1min，重复3次，镜检；
S2、将镜检合格的土沉香种子用双氧水原液液泡30-60min后，用无菌水冲洗，用无菌滤纸吸干水份，无菌条件下分离种胚并进行培养，获得无菌种胚苗；
S3、切取种胚苗茎段，诱导腋芽成苗，再以该成苗的茎段继续增殖，10～12代扩大繁殖茎段苗数量；
S4、利用MS、IBA2.0mg/L、NAA0.2mg/L溶液调节土沉香茎段苗的生理与诱导生根，以获得生根苗；
S5、生根苗先后经温室炼苗、室外移栽，得到成活的土沉香苗。
S2步骤中所述种胚培养是将种胚接种于1/2MS+NAA5.0mg/L培养基，培养2天后移至1/2MS+体积百分比10～15％椰子水的培养基上培养，其中培养条件为：白天光照8～15h，光强2000～25001ux，温度25±1℃。
S3步骤中所述诱导腋芽成苗是将长成的种胚苗茎段按照2个节剪成一段，添加有椰壳基质的1/2MS+NAA5.0mg/L培养基的培养基上培养，培养条件为：光照3000Lux、光照时间12～14h、温度25±1℃。
S5步骤中所述温室炼苗是将生根苗置于自然光下锻炼，光照由遮光90％逐步增强，15天时增强至遮光60％，此时往培养基上加入自来水，24h后取出生根苗移栽。
本发明在土沉香组织培养技术的研究过程中，通过以少量土沉香种子为材料，无菌条件下分离种胚培养，获得无菌种胚苗；然后切取土沉香种胚苗茎段，诱导腋芽成苗，多次继代扩大繁殖种苗数量；通过调节土沉香的生理状态，促进土沉香茎段基部形成层的产生，促进细胞分化，诱导生根，突破了土沉香组织培养瓶颈技术；通过栽培附生植物，提高了土沉香苗的移栽成活率，从而完成土沉香组织培养的全部生产技术路线。
具体实施方式
为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种土沉香的种胚苗茎段离体快速繁殖方法，包括如下步骤：
S1、将土沉香种子置于9010型旋风式微型高速样品粉碎机粉碎1min，重复3次，镜检；
S2、将镜检合格的土沉香种子用双氧水原液液泡30min后，用无菌水冲洗，用无菌滤纸吸干水份，无菌条件下分离种胚，将种胚接种于1/2MS+NAA5.0mg/L培养基，培养2天后移至1/2MS+体积百分比12％椰子水的培养基上培养，其中培养条件为：白天光照10h，光强20001ux，温度25℃，获得无菌种胚苗；
S3、将长成的种胚苗茎段按照2个节剪成一段，添加有椰壳基质的1/2MS+NAA5.0mg/L培养基的培养基上培养，培养条件为：光照3000Lux、光照时间13h、温度25℃，再以该成苗的茎段继续增殖，10～12代扩大繁殖茎段苗数量；
S4、利用MS、IBA2.0mg/L、NAA0.2mg/L溶液调节土沉香茎段苗的生理与诱导生根，以获得生根苗；
S5、生根苗将生根苗置于自然光下锻炼，光照由遮光90％逐步增强，15天时增强至遮光60％，此时往培养基上加入自来水，24h后取出生根苗移栽置室外，得到成活的土沉香苗。
实施例2
一种土沉香的种胚苗茎段离体快速繁殖方法，包括如下步骤：
S1、将土沉香种子置于9010型旋风式微型高速样品粉碎机粉碎1min，重复3次，镜检；
S2、将镜检合格的土沉香种子用双氧水原液液泡45min后，用无菌水冲洗，用无菌滤纸吸干水份，无菌条件下分离种胚，将种胚接种于1/2MS+NAA5.0mg/L培养基，培养2天后移至1/2MS+体积百分比10％椰子水的培养基上培养，其中培养条件为：白天光照10h，光强20001ux，温度24℃，获得无菌种胚苗；
S3、将长成的种胚苗茎段按照2个节剪成一段，添加有椰壳基质的1/2MS+NAA5.0mg/L培养基的培养基上培养，培养条件为：光照3000Lux、光照时间13h、温度24℃，再以该成苗的茎段继续增殖，10代扩大繁殖茎段苗数量；
S4、利用MS、IBA2.0mg/L、NAA0.2mg/L溶液调节土沉香茎段苗的生理与诱导生根，以获得生根苗；
S5、生根苗将生根苗置于自然光下锻炼，光照由遮光90％逐步增强，15天时增强至遮光60％，此时往培养基上加入自来水，24h后取出生根苗移栽置室外，得到成活的土沉香苗。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (4)

1.一种土沉香的种胚苗茎段离体快速繁殖方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、将土沉香种子置于9010型旋风式微型高速样品粉碎机粉碎1min，重复3次，镜检；
S2、将镜检合格的土沉香种子用双氧水原液液泡30-60min后，用无菌水冲洗，用无菌滤纸吸干水份，无菌条件下分离种胚并进行培养，获得无菌种胚苗；
S3、切取种胚苗茎段，诱导腋芽成苗，再以该成苗的茎段继续增殖，10～12代扩大繁殖茎段苗数量；
S4、利用MS、IBA2.0mg/L、NAA0.2mg/L溶液调节土沉香茎段苗的生理与诱导生根，以获得生根苗；
S5、生根苗先后经温室炼苗、室外移栽，得到成活的土沉香苗。
2.根据权利要求1所述的一种土沉香的种胚苗茎段离体快速繁殖方法，其特征在于，S2步骤中所述种胚培养是将种胚接种于1/2MS+NAA5.0mg/L培养基，培养2天后移至1/2MS+体积百分比10～15％椰子水的培养基上培养，其中培养条件为：白天光照8～15h，光强2000～25001ux，温度25±1℃。
3.根据权利要求1所述的一种土沉香的种胚苗茎段离体快速繁殖方法，其特征在于，S3步骤中所述诱导腋芽成苗是将长成的种胚苗茎段按照2个节剪成一段，添加有椰壳基质的1/2MS+NAA5.0mg/L培养基的培养基上培养，培养条件为：光照3000Lux、光照时间12～14h、温度25±1℃。
4.根据权利要求1所述的一种土沉香的种胚苗茎段离体快速繁殖方法，其特征在于，S5步骤中所述温室炼苗是将生根苗置于自然光下锻炼，光照由遮光90％逐步增强，15天时增强至遮光60％，此时往培养基上加入自来水，24h后取出生根苗移栽。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104663455A (zh) * 2015-03-12 2015-06-03 朱炳贵 一种土沉香组织培养再生体系的建立方法
CN104938336A (zh) * 2015-06-11 2015-09-30 仲恺农业工程学院 一种促进土沉香离体芽生芽的快速增殖方法
CN105010142A (zh) * 2015-07-14 2015-11-04 中国林业科学研究院热带林业研究所 越南奇楠沉香组织培养的方法
CN106613851A (zh) * 2016-12-28 2017-05-10 广东国方医药科技有限公司 一种离体沉香木结香方法
CN111937748A (zh) * 2020-08-24 2020-11-17 延边大学 一种提高人参不定根皂苷Rg1和Re含量的培养方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102870683A (zh) * 2012-10-30 2013-01-16 广东省林业科学研究院 马来沉香的微体扩繁方法
CN103348920A (zh) * 2013-07-25 2013-10-16 中国科学院华南植物园 一种奇楠沉香优质种苗快速繁殖方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102870683A (zh) * 2012-10-30 2013-01-16 广东省林业科学研究院 马来沉香的微体扩繁方法
CN103348920A (zh) * 2013-07-25 2013-10-16 中国科学院华南植物园 一种奇楠沉香优质种苗快速繁殖方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
兰芹英等: ""土沉香成熟胚的组织培养及植株再生"", 《广西农业生物科学》 *
张翘等: ""不同培养体系对白木香成熟胚丛芽诱导的影响研究"", 《时珍国医国药》 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104663455A (zh) * 2015-03-12 2015-06-03 朱炳贵 一种土沉香组织培养再生体系的建立方法
CN104938336A (zh) * 2015-06-11 2015-09-30 仲恺农业工程学院 一种促进土沉香离体芽生芽的快速增殖方法
CN105010142A (zh) * 2015-07-14 2015-11-04 中国林业科学研究院热带林业研究所 越南奇楠沉香组织培养的方法
CN106613851A (zh) * 2016-12-28 2017-05-10 广东国方医药科技有限公司 一种离体沉香木结香方法
CN111937748A (zh) * 2020-08-24 2020-11-17 延边大学 一种提高人参不定根皂苷Rg1和Re含量的培养方法
CN111937748B (zh) * 2020-08-24 2022-01-11 延边大学 一种提高人参不定根皂苷Rg1和Re含量的培养方法

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