CN105724245A

CN105724245A - 一种微扦插快速繁殖土沉香种苗的方法

Info

Publication number: CN105724245A
Application number: CN201410732379.5A
Authority: CN
Inventors: 张秀国
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2014-12-06
Filing date: 2014-12-06
Publication date: 2016-07-06

Abstract

本发明公开了一种微扦插快速繁殖土沉香种苗的方法，是将土沉香的种子接种到诱芽培养基培养成幼苗；将获得的幼苗切成茎段后插入微扦插培养基中进行培养长出侧芽，再将侧芽切成茎段插入新鲜的微扦插培养基培养；将获得的侧芽切成茎段后接种到生根培养基培养至茎段生根，即可获得土沉香种苗。本发明工艺简单易行，操作简单，增殖速度快，解决了利用土沉香种子繁殖种苗中种子数量少、发芽率低、繁殖速度慢的问题，实现了土沉香种苗的长期大规模快速增殖，可大量、快速、持续获得高质量的土沉香试管苗，实用性强。

Description

一种微扦插快速繁殖土沉香种苗的方法

技术领域

本发明属于农业生物技术领域，具体为一种利用试管茎段微扦插快速繁殖土沉香种苗的方法。

背景技术

土沉香又称香材，白木香，牙香树，女儿香，栈香，青桂香，崖香，芫香，沉香为瑞香科常绿乔木，渐危种。多生于山地雨林或半常绿季雨林中。是中国特有而珍贵的药用植物，近年由于常被采取供药用，损伤林木极为严重，现仅有零星散生的残存植株。为国家Ⅱ级重点保护野生植物。该植物老茎受伤后所积得的树脂，俗称沉香，为治胃病特效药。此外，还可以作香料原料，提取芳香油等。

土沉香传统的繁殖方法采用种子繁殖，该方法存在的问题：(1)种子资源少，大量采集困难；(2)种子不耐储存，寿命短，无法实现定期播种育苗；(3)种子发芽率较低，仅达到50％左右。

近年来，扦插繁殖和组培繁殖成为土沉香种苗繁殖的研究重点。扦插繁殖现存的问题是：(1)扦插繁殖成活率低，甚至全部死亡；(2)扦插条资源紧缺，批量繁殖困难。组培繁殖目前采用诱导愈伤组织、分化增殖愈伤组织和诱导不定芽生根的方式获得无菌苗，这种方式存在的问题是：(1)诱导愈伤组织时间较长；(2)愈伤组织分化为不定芽的频率较低，分化出的不定芽变异率高；(3)愈伤组织分化出的不定芽伸长速度慢，达到生根标准的时间长。这些问题严重阻碍了土沉香种苗的规模化生产，因而无法满足市场需求。为此，必须建立能大量、快速扩繁土沉香种苗的生产技术体系。

发明内容

本发明的目的是提供一种微扦插快速繁殖土沉香种苗的方法，利用试管中茎段侧芽萌发和伸长速度快的特点，实现了土沉香种苗大规模快速扩繁的目的。

本发明利用少量种子获得无菌苗，以无菌苗茎段为外植体，通过试管微扦插促进侧芽不断萌发进行快速增殖，实现土沉香种苗大规模扩繁。

本发明所采用的技术方案：一种微扦插快速繁殖土沉香种苗的方法，包括三个过程：无菌苗的获得、茎段微扦插、茎段生根。

1、无菌苗的获得

选取土沉香的蒴果经消毒后将种子剥出，将种子接种到诱芽培养基进行培养至长成幼苗，所述诱芽培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤、α-萘乙酸。

2、茎段微扦插

将步骤1所获得的幼苗切成茎段，将茎段的基部向下插入微扦插培养基中进行培养至长出侧芽，再将侧芽切成茎段，然后将其基部向下插入新鲜的微扦插培养基中进行培养。所述微扦插培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤、吲哚乙酸。

3、茎段生根

将步骤2所获得的侧芽切成茎段，并将其接种到生根培养基上，先暗培养再进行光照培养，至茎段生根即可获得土沉香种苗。所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基并附加α-萘乙酸。

本发明工艺简单易行，操作简单，增殖速度快，解决了利用土沉香种子繁殖种苗中种子数量少、发芽率低、繁殖速度慢的问题，实现了土沉香种苗的长期大规模快速增殖，可大量、快速、持续获得高质量的土沉香试管苗，实用性强，为土沉香大规模扩繁增殖提供了高效的方法，为土沉香种苗的规模化、工厂化生产奠定了基础，也为保护野生土沉香种质资源开辟了一条切实可行的途径。

具体实施方式

下面对本发明作进一步说明。

本发明所提供的微扦插快速繁殖土沉香种苗的方法，包括无菌苗的获得、茎段微扦插、茎段生根。

1)、无菌苗的获得

选取土沉香的蒴果经消毒后将种子剥出，将种子接种到诱芽培养基进行培养至长成幼苗，培养温度度为24～27℃，光照强度为15～20μmol·m^-2·s^-1，光照时间为10h·d^-1，培养20～30天；所述诱芽培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤0.5mg·L^-1、α-萘乙酸0.1mg·L^-1。

2)、茎段微扦插

将步骤1所获得的幼苗切成带1～2节的茎段，将茎段的基部向下插入微扦插培养基中进行培养至长出侧芽，再将侧芽切成带1～2节的茎段，然后将其基部向下插入新鲜的微扦插培养基中进行培养，培养温度度为26～29℃，光照强度为30～40μmol·m^-2·s^-1，光照时间为10h·d^-1；所述微扦插培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤2.0mg·L^-1、吲哚乙酸0.1mg·L^-1。

3)、茎段生根

将步骤2所获得的侧芽切成带1～2节的茎段，并将其接种到生根培养基上，先暗培养7～14天再进行光照培养20～30天，至茎段生根即可获得土沉香种苗。所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基并附加α-萘乙酸0.5mg·L^-1。

Claims

1.一种微扦插快速繁殖土沉香种苗的方法，其特点在于包括三个过程：无菌苗的获得、茎段微扦插和茎段生根；

（1）无菌苗的获得

选取土沉香的蒴果经消毒后将种子剥出，将种子接种到诱芽培养基进行培养至长成幼苗，培养温度为24～27℃，光照强度为16～20μmol·m^-2·s^-1，光照时间为10h·d^-1，培养20～30天；所述诱芽培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤0.5mg·L^-1、α-萘乙酸0.1mg·L^-1；

（2)、茎段微扦插

将步骤1所获得的幼苗切成带1～2节的茎段，将茎段的基部向下插入微扦插培养基中进行培养至长出侧芽，再将侧芽切成带1～2节的茎段，然后将其基部向下插入新鲜的微扦插培养基中进行培养，培养温度为26～29℃，光照强度为30～40μmol·m^-2·s^-1，光照时间为10h·d^-1；所述微扦插培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤2.0mg·L^-1、吲哚乙酸0.1mg·L^-1；

（3)、茎段生根

将步骤2所获得的侧芽切成带1～2节的茎段，并将其接种到生根培养基上，先暗培养7～14天再进行光照培养20～30天，至茎段生根即可获得土沉香种苗；所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基并附α-萘乙酸0.5mg·L^-1。