CN103998041B

CN103998041B - 药物组合物

Info

Publication number: CN103998041B
Application number: CN201180066851.0A
Authority: CN
Inventors: D.J.德马里尼; N.T.勒; F.亨里奎兹; L.王
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Nova Laboratories Sdn Bhd; Novartis AG
Priority date: 2010-12-20
Filing date: 2011-12-20
Publication date: 2016-08-17
Anticipated expiration: 2031-12-20
Also published as: US9399021B2; HRP20201409T1; US9155706B2; US20130266649A1; PT2654736T; JP2017137299A; LT4159204T; DK4159205T3; SG191054A1; EP4159204B1; PL4159204T3; AU2011349422B2; KR20130130028A; PL4159205T3; TW201249441A; EP2654736A4; MA34883B1; RS65496B1; PL2654736T3; DK2654736T3

Abstract

本发明涉及包含N‑{3‑[3‑环丙基‑5‑(2‑氟‑4‑碘‑苯基氨基)‑6,8‑二甲基‑2,4,7‑三氧代‑3,4,6,7‑四氢‑2H‑吡啶并[4,3‑d]嘧啶‑1‑基]苯基}乙酰胺二甲基亚砜溶剂合物的药物组合物、在治疗中使用该组合物的方法以及制备该组合物的方法。

Description

药物组合物

发明领域

本发明涉及固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)，其包含下式(I)所示的N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺二甲基亚砜溶剂合物，下文中称为化合物A：

发明背景

N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺(非溶剂化的化合物(下文称为化合物B))与其可药用盐和溶剂合物一起在以下文件中公开并要求保护：国际申请日为2005年06月10日的国际申请PCT/JP2005/011082，即国际公开日为2005年12月22日的国际公开WO2005/121142，其全部公开内容在此引入作为参考；其作为MEK活性的抑制剂是有用的，特别是在癌症的治疗中。化合物B是该文件中实施例4-1中的化合物。化合物B可根据国际申请PCT/JP2005/011082的描述制备。化合物B可根据2006年01月19日公布的美国专利公开US2006/0014768的描述制备，其全部公开内容在此引入作为参考。化合物B是该文件中实施例4-1中的化合物。

合适地，化合物B为二甲基亚砜溶剂合物的形式，或本文定义的化合物A。合适地，化合物B为与以下溶剂形成的溶剂合物形式：水、乙酸、乙醇、硝基甲烷、氯苯、1-戊醇、异丙醇、乙二醇和3-甲基-1-丁醇。溶剂合物和盐的形式可由本领域技术人员制备，例如，根据国际申请PCT/JP2005/011082或美国专利公开2006/0014768中所述。美国专利公开US2006/0014768的实施例4-149中制备了化合物A。

固体口服药物剂型是分散药用活性化合物的普遍且有用的药物形式。已知许多种这样的形式，包括片剂、胶囊、丸剂、锭剂和粉剂。

然而，制备商业规模的可接受的固体口服药物剂型并不简单。当体内给药时，每种药用化合物在治疗药物浓度单独地起效。而且，药用活性化合物(特别是抗肿瘤化合物)常伴随不希望的副作用，如毒性(例如，遗传毒性、致畸性)和不希望的身体或心理表现。除了用赋形剂的化学性质平衡药物独特的化学性质外，药物还必须服用特定的剂量，该剂量足以提供所需的治疗药物浓度但不至于引起不希望的不良反应性质，或在该具体药物的治疗窗内。此外，制剂和生产方法必须提供使用前维持其完整性的完整的固体剂型。固体剂型也必须具有可接受的溶出度和崩解度性质，以在使用中提供所需的性质。具有低溶解度的药用活性化合物和/或溶剂化形式在制备高质量的固体剂型时存在特别的挑战。这些挑战包括体内给药时暴露不足或不一致，以及去溶剂化，其释放非溶剂化的具有不良药效学性质的化合物。

以商业规模提供具有理想的药效学性质的化合物A的固体口服药物剂型是所需的。

发明概述

本发明涉及固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)，其包含治疗有效量的化合物A。本发明也涉及制备包含化合物A的固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)的方法。

本发明的另一方面涉及包含化合物A的固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)，其使用基本上无水的赋形剂(合适地为稀释剂组分)配制，其如本说明书和权利要求中所用，包括非无水赋形剂的无水形式。这样的固体口服药物剂型具有改良的性质。这些改良的性质有助于确保安全有效的治疗。

本发明的另一方面涉及包含治疗有效量的化合物A的药物片剂，其中该片剂通过压片干混合物(合适地通过直接压片或通过干法制粒)制备。这样的片剂具有改良的性质。这样的改良性质有助于确保安全有效的治疗。本发明还涉及制备直接压片和干法制粒包含化合物A的药物片剂的方法。

本发明的另一方面涉及包含化合物A的薄膜衣口服药物片剂，合适地该薄膜衣为含水薄膜衣组合物，其包含成膜聚合物和水作为载体，合适地包含色素或着色剂，合适地为含有氧化铁的色素或着色剂。这样的片剂具有改良的性质。这样的改良性质有助于确保安全有效的治疗。

本发明的另一方面涉及固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)，其包含的化合物A，其量选自：0.5、1和2mg，以化合物B的重量计。这样的固体口服药物剂型具有改良的性质。这样的改良性质有助于确保安全有效的治疗。

本发明的另一方面涉及固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)，其包含化合物A，其中化合物A为微粉化形式。这样的固体口服药物剂型具有改良的性质。这样的改良性质有助于安全有效的治疗。

本发明的另一方面涉及固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)，其包含化合物A，其中至少50％化合物A颗粒的粒径等于或小于30μm，合适地至少50％化合物A颗粒的粒径等于或小于10μm，合适地至少50％化合物A颗粒的粒径等于或小于5μm。这样的固体口服药物剂型具有改良的性质。这样的改良性质有助于确保安全有效的治疗。

本发明的另一方面涉及固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)，其包含化合物A，其中非溶剂化的化合物(或本文中所用的化合物B)的量不超过约20％，合适地非溶剂化的化合物的量不超过约15％，合适地非溶剂化的化合物的量不超过10％，合适地非溶剂化的化合物的量不超过5％，合适地非溶剂化的化合物的量不超过2％。这样的固体口服药物剂型具有改良的性质。这样的改良性质有助于安全有效的治疗。

本发明的另一方面涉及一种在哺乳动物(包括人)中治疗癌症的方法，该方法包括向有需要的患者给药本发明的固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)，其包含的化合物A的量选自：0.5、1和2mg，以化合物B的重量计。

本发明的另一方面涉及一种在人体中抑制MEK的方法，该方法包括向有需要的患者给药本发明的固体口服药物剂型，合适的片剂、合适地胶囊，其包含的化合物A的量选自：0.5、1和2mg，以化合物B的重量计。

本发明还包括共同给药本发明的固体口服药物剂型和其它活性成分的方法，合适地其它活性成分为抗肿瘤药物。

附图说明

图1图1描述了化合物A在大鼠模型中的临床前研究的暴露(AUC)数据。

图2图2描述了包含化合物A的1mg片剂暴露于4种不同保存条件下的稳定性数据。

发明详述

当尝试将化合物A配制成在其治疗窗内的合适的固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)时，特别在商业规模，化合物A给制剂人员带来特别的问题。这些问题包括但不限于：在制剂过程中暴露于湿气时化合物回复到不溶的去溶剂化形式的倾向，该化合物从固体剂型中缓慢溶出以及化合物A具有光不稳定性。

这些问题的明显实现会对化合物A的体内给药带来不利影响。

需要在商业规模以片剂形式提供化合物A，因为片剂可提供更加准确的剂量，服用便利，保存过程中的耐久性和稳定性增加，生产时间较短，以及贮存、包装以及运输经济有效。不幸的是，化合物A的光不稳定性是片剂形式的潜在问题。

在一个实施方案中，本发明涉及包含化合物A的固体口服药物剂型，合适地该固体剂型为片剂，合适地该固体剂型是胶囊，合适地该固体剂型以商业规模生产。

已发现化合物A具有光不稳定性。潜在的不可接受的光降解水平特别重要，因为光催化的降解产物可能有潜在的毒性。

已发现含水有色薄膜衣包衣的化合物A片剂(合适地含有氧化铁的有色薄膜衣，例如黄色或粉红色)表现出改良的光稳定性。这种改良的稳定性导致曝光形成的光催化的降解产物的含量降低。这种改良的稳定性有助于确保安全有效的治疗。

在一个实施方案中，本发明涉及被含水有色薄膜衣包衣的包含化合物A的片剂。合适地这些片剂形式以商业规模生产。这些片剂形式有助于提供安全有效的治疗。

已发现当以高剂量给药时，化合物A能引起毒性作用。已发现当化合物A给药剂量选自约0.5mg、1mg和2mg时，基于化合物B的量，其足以提供所需的治疗药物浓度且不至于引起不可接受的不良反应性质，或在化合物A 的治疗窗内。

在一个实施方案中，本发明涉及包含化合物A的片剂，其中化合物A的量选自：约0.5mg、1mg和2mg，基于化合物B的量。这些片剂的强度有助于提供安全有效的治疗。

已发现化合物A在处理和制剂过程中会发生去溶剂化，形成非溶剂化的化合物B。化合物B比化合物A更不溶，这消极地影响了它从药物组合物中释放时的药效学。已发现药物组合物(合适地为片剂、胶囊，其中去溶剂化的化合物B的含量与化合物A相比不超过20％，合适地不超过15％，合适地不超过10％，合适地不超过5％，合适地不超过2％)提供了可接受的释放/药效学性质。

在一个实施方案中，本发明涉及包含化合物B的片剂，其中化合物B的含量为化合物A的量的不超过约20％，合适地约15％，合适地约10％，合适地约5％，合适地约2％。这样的片剂有助于提供安全有效的治疗。

已发现体内给药时化合物A表现出不良的暴露和吸收。已发现药物制剂(合适地为片剂、胶囊，其中化合物A是微粉化的，合适地至少50％化合物A的颗粒等于或小于30μm，合适地至少50％化合物A的颗粒等于或小于10μm，合适地至少50％的化合物A颗粒等于或小于5μm)提供了可接受的暴露/吸收性质。

在一个实施方案中，本发明涉及包含微粉形式的化合物A的片剂，合适地至少50％的化合物A颗粒等于或小于30μm，合适地至少50％的化合物A颗粒等于或小于10μm，合适地至少50％的化合物A颗粒等于或小于5μm。这样的片剂有助于提供安全有效的治疗。

本文中所用的术语“改良的性质”及其相关术语是指与未利用本发明的方面的制剂相比，化合物A从利用了本发明的方面的制剂(合适地固体口服药物剂型，合适地胶囊，合适地片剂)中的体内释放的药动学性质具有若干优点，合适地该制剂以商业规模生产。改良的性质实例包括：口服生物利用度增加、理化稳定性改善、光稳定性改善、药动学性质一致、药动学性质改善和溶出率一致。

除非另外定义，否则本文所用的术语“药物”或“活性成分”及其相关术语是指化合物A或N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺二甲基亚砜。

本文所用的术语“化合物B”及其相关术语是指N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，其为游离的或未成盐的和非溶剂化的化合物。化合物B也指在一定量的化合物A中游离的或未成盐的和非溶剂化的化合物。

本文所用的术语“商业规模”及其相关术语是指制备一批规模大于约20kg的直接压片混合物，合适地大于50kg，合适地大于75kg或批量大小适于制备至少约50,000单位固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)，合适地至少75,000单位固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)，合适地至少100,000单位固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)。

术语“有效量”及其相关术语是指例如由研究者或临床医生寻求的能引起组织、系统、动物或人的生物学或医学反应的药物或活性成分的量。此外术语“治疗有效量”是指与未接受该剂量的相应受试者相比，可改进治疗、治愈、预防，或改善疾病、紊乱或不良反应，或降低疾病、紊乱进展率的任何剂量。该术语还包括在其范围内对增强正常生理功能有效的剂量。

除非另外定义，否则本文所用的术语“制剂”及其相关术语指的是本发明的包含化合物A的固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)。

本文所用的术语“共同给药”是指包含化合物A的固体口服药物剂型和另外一种或多种已知对治疗(包括化疗和放疗)癌症有用的活性药物，同时给药或任何方式的单独连续给药。本文所用的术语“一种或多种其它活性药物”包括任何已知的或在给予需要治疗癌症的患者时证明有利性质的化合物或治疗药物。本文所用的“一种或多种其它活性药物”可与其它一种或多种抗肿瘤药物互换使用。优选地，如果不是同时给药，化合物应在与彼此相近的时间给药。此外，化合物是否以同一剂型给药无关紧要，例如，一种化合物可能注射给药，另一种化合物可能口服给药。合适地，“共同给药”基本上由包含化合物A的固体口服药物剂型和第二种含其它活性药物的药物剂型组成。合适地，“共同给药”基本上由包含化合物A的固体口服药物剂型、第二种包含其它活性药物的药物剂型和第三种含另外一种其它活性药物的药物剂型组成。

典型地，在治疗本发明中的癌症时，可以共同给药对于待治疗的敏感的肿瘤具有活性的任何抗肿瘤药物。该药物的实例参考V.T.Devita和S.Hellman(主编)的CancerPrinciples and Practice of Oncology，第6版(2001年2月15日)，Lippincott Williams&Wilkins Publishers。本领域一般技术人员将能够根据药物的具体特征和所涉及癌症辨别药物的何种组合将是有用的。可用于本发明的典型抗肿瘤药物包括，但不限于，抗微管剂，例如二萜类化合物和长春花生物碱；铂配位络合物；烷基化剂，例如氮芥、氧氮磷杂环己二烯(oxazaphosphorine)、烷基磺酸盐、亚硝基脲和三氮烯；抗生素例如蒽环类(anthracyclin)、放线菌素和博莱霉素；拓扑异构酶II抑制剂，例如表鬼臼毒素；抗代谢剂，例如嘌呤和嘧啶类似物和抗叶酸化合物；拓扑异构酶I抑制剂，例如喜树碱；激素和激素类似物；信号转导途径抑制剂；非-受体酪氨酸激酶血管生成抑制剂；免疫治疗剂；促细胞凋亡剂；细胞周期信号转导抑制剂；蛋白酶抑制剂；以及癌症代谢的抑制剂。

用于与本发明的药物剂型组合或共同给药的另一种或多种活性药物(抗瘤药物)的实例是化疗药物。

抗微管或抗有丝分裂剂是时相特异性药物(phase specific agent)，其在细胞周期中的M期或有丝分裂期对肿瘤细胞的微管具有活性。抗微管剂的实例包括但不限于二萜类化合物和长春花生物碱。

天然来源的二萜类化合物是时相特异性的抗癌剂，其在细胞周期中的G₂/M期起作用。认为二萜类化合物通过与该蛋白结合，使微管的β-微管蛋白亚单位稳定。然后使蛋白的分解受到抑制，有丝分裂停止，接着发生细胞死亡。二萜类化合物的实例包括但不限于紫杉醇及其类似物多西紫杉醇。

紫杉醇，5β,20-环氧-1,2α,4,7β,10β,13α-六羟基紫杉-11-烯-9-酮4,10-二乙酸酯2-苯甲酸酯13-(2R,3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸酯，其是从太平洋紫杉树(Taxusbrevifolia)中分离出来的天然二萜产物，且在商业上可得到可注射的溶液其为萜类紫杉烷家族的成员。其在1971年由Wani等人首次分离出来(J.Am.Chem，Soc.,93:2325,1971)，并通过化学和X-射线结晶学方法表征其结构。其活性的机理之一是关于紫杉醇能结合微管蛋白，进而抑制癌细胞生长。Schiff等,Proc.Natl,Acad,Sci.USA,77:1561-1565(1980)；Schiff等,Nature,277:665-667(1979)；Kumar,J.Biol,Chem,256:10435-10441(1981)。有关一些紫杉醇衍生物的合成和抗癌活性的综述，参见D.G.I.Kingston等,Studies in Oranic Chemistry vol.26,标题为“New trends in Natural ProductsChemistry 1986”,Attaur-Rahman,P.W.Le Quesne,Eds.(Elsevier,Amsterdam,1986)pp219-235。

在美国，已经批准紫杉醇的临床使用，用于治疗难治的卵巢癌(Markman 等,YaleJournal of Biology and Medicine,64:583,1991；McGuire等,Ann.Intem,Med.,111:273,1989)和用于治疗乳腺癌(Holmes等,J.Nat.Cancer Inst.,83:1797,1991)。其为治疗皮肤癌(Einzig等,Proc.Am.Soc.Clin.Oncol.,20:46)和头颈癌(Forastire等,Sem.Oncol.,20:56,1990)的可能的候选药物。该化合物还具有治疗多囊性肾病(Woo等,Nature,368:750,1994)、肺癌和疟疾的潜力。采用紫杉醇治疗患者，导致骨髓抑制(多重细胞谱系(multiplecell lineages),Ignoff,R.J.等,Cancer Chemotherapy Pocket Guide,1998)，这与高于阈浓度(50nM)的给药的持续时间有关(Kearns,C.M.等,Seminars in Oncology,3(6)p.16-23,1995)。

多西紫杉醇，5β-20-环氧-1,2α,4,7β,10β,13α-六羟基紫杉-11-烯-9-酮13-(2R,3S)-N-羧基-3-苯基异丝氨酸，N-叔丁基酯，4-乙酸酯2-苯甲酸酯，三水合物，在商业上可得到可注射的溶液。多西紫杉醇可用于治疗乳腺癌。多西紫杉醇是适量(q.v.)紫杉醇的半合成衍生物，其利用天然前体即从欧洲浆果紫杉树的针叶中提取的10-去乙酰基浆果赤霉素III制备。多西紫杉醇的剂量限制性毒性是嗜中性白细胞减少症。

长春花生物碱是来源于长春花属植物的时相特异性的抗肿瘤药物。长春花生物碱通过特异性地结合微管蛋白而在细胞周期的M期(有丝分裂)起作用。因此，被结合的微管蛋白分子不能聚合成微管。认为有丝分裂在中期被停止，随后细胞死亡。长春花生物碱的实例包括但不限于长春碱，长春新碱和长春瑞滨。

长春碱，长春碱硫酸盐，以注射液市售。尽管已经表明其有可能作为各种实体瘤的二线治疗，但是其最初表明用于治疗睾丸癌和各种淋巴瘤，包括霍奇金病以及淋巴细胞和组织细胞的淋巴瘤。骨髓抑制是长春碱的剂量限制性副作用。

长春新碱，长春碱22-氧代-硫酸盐，以注射溶液市售。长春新碱显示用于治疗急性白血病，还发现用于治疗多数霍奇金和非霍奇金恶性淋巴瘤。脱发和神经作用是长春新碱最常见的副作用，并产生较小程度的骨髓抑制和胃肠粘膜炎作用。

长春瑞滨，3',4'-二脱氢-4'-脱氧-C'-去甲长春碱(norvincaleukoblastine)[R-(R*,R*)-2,3-二苹果酸(1:2)(盐)]，以长春瑞滨酒石酸盐注射溶液市售，是半合成的长春花生物碱。长春瑞滨可作为单独的药物或与其它化学治疗剂(如顺铂)组合，用于治疗各种实体瘤，特别是非小细胞肺癌、晚期乳腺癌和激素难治的前列腺癌。骨髓抑制是长春瑞滨最常见的剂量限制性副作用。

铂配位络合物是非时相特异性的抗癌剂，其与DNA相互作用。铂络合物进入肿瘤细胞，进行水合作用，并与DNA形成内部和相互间的交叉连接，导致对肿瘤不利的生物学作用。铂配位络合物的实例包括但不限于顺铂和卡铂。

顺铂，顺式-二氨二氯合铂，以注射溶液市售。顺铂最初用于治疗转移性睾丸癌和卵巢癌以及晚期的膀胱癌。顺铂的主要剂量限制性副作用是肾毒性和耳毒性，所述肾毒性可通过水合和利尿来控制。

卡铂，二氨[1,1-环丁烷-二羧酸根(2-)-O,O']合铂，以注射溶液市售。卡铂最初用于晚期卵巢癌的一线和二线治疗。骨髓抑制是卡铂的剂量限制性毒性。

烷基化剂是非时相特异性的抗癌药物和强亲电试剂。通常，烷基化剂借助于烷基化作用，通过DNA分子的亲核部分如磷酸基(phosphate)、氨基、巯基、羟基、羧基和咪唑基，与DNA形成共价键。这种烷基化作用破坏核酸功能，导致细胞死亡。烷基化剂的实例包括但不限于氮芥(如环磷酰胺、美法仑和苯丁酸氮芥)、磺酸烷基酯(如白消安、亚硝基脲如卡莫司汀)，以及三氮烯(如达卡巴嗪)。

环磷酰胺，2-[双(2-氯乙基)氨基]四氢-2H-1,3,2-氧氮磷杂环己二烯2-氧化物一水合物，以注射溶液或片剂市售。环磷酰胺可作为单独的药物或与其它化学治疗剂组合，用于治疗恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤和白血病。脱发、恶心、呕吐和白细胞减少症是环磷酰胺最常见的剂量限制性副作用。

美法仑，4-[双(2-氯乙基)氨基]-L-苯基丙氨酸，以注射溶液或片剂市售。美法仑可用于多发性骨髓瘤和不可切除的卵巢上皮癌的姑息疗法。骨髓抑制是美法仑最常见的剂量限制性副作用。

苯丁酸氮芥，4-[双(2-氯乙基)氨基]苯丁酸，以片剂市售。苯丁酸氮芥可用于慢性淋巴细胞性白血病，恶性淋巴瘤(如淋巴肉瘤、巨滤泡性淋巴瘤和霍奇金病)的姑息疗法。骨髓抑制是苯丁酸氮芥最常见的剂量限制性副作用。

白消安，1,4-丁二醇二甲磺酸酯，以片剂市售。白消安用于慢性髓细胞性白血病的姑息疗法。骨髓抑制是白消安最常见的剂量限制性副作用。

卡莫司汀，1,3-[双(2-氯乙基)-1-亚硝基脲，以单瓶装的冻干产物市售。卡莫司汀可作为单独的药物或与其它药物组合，用于脑瘤、多发性骨髓瘤、霍奇金病和非霍奇金淋巴瘤的姑息疗法。延迟的骨髓抑制是卡莫司汀最常见的剂量限制性副作用。

达卡巴嗪，5-(3,3-二甲基-1-三氮烯基)-咪唑-4-甲酰胺，以单瓶装的产物市售。达卡巴嗪可用于转移性恶性黑素瘤的治疗，并且可与其它药物组合，用于霍奇金病的二线治疗。恶心、呕吐和厌食是达卡巴嗪最常见的剂量限制性副作用。

抗生素类抗癌剂是非时相特异性的药物，其结合或嵌入DNA中。通常，这种作用导致稳定的DNA复合物或链断裂，破坏核酸的正常功能，导致细胞死亡。抗生素类抗肿瘤药物的实例包括但不限于放线菌素(如放线菌素D)；蒽环类(anthrocyclins)(如柔红霉素和多柔比星)；以及博来霉素。

放线菌素D(Dactinomycin，也称为Actinomycin D)，以注射液形式市售。放线菌素D可用于威尔曼瘤和横纹肌肉瘤的治疗。恶心、呕吐和厌食是放线菌素D最常见的剂量限制性副作用。

柔红霉素，(8S-顺-)-8-乙酰基-10-[(3-氨基-2,3,6-三脱氧-α-L-来苏-己吡喃糖基(hexopyranosyl))氧基]-7,8,9,10-四氢-6,8,11-三羟基-1-甲氧基-5,12-并四苯二酮(naphthacenedione)盐酸盐，以脂质体可注射形式或可注射形式市售。柔红霉素可在急性非淋巴细胞性白血病和晚期HIV相关的卡波西肉瘤的治疗中用于诱导缓解。骨髓抑制是柔红霉素最常见的剂量限制性副作用。

多柔比星，(8S,10S)-10-[(3-氨基-2,3,6-三脱氧-α-L-来苏-己吡喃糖基)氧基]-8-乙醇酰基-7,8,9,10-四氢-6,8,11-三羟基-1-甲氧基-5,12-并四苯二酮盐酸盐，以或注射溶液市售。多柔比星主要用于急性成淋巴细胞性白血病和急性成髓细胞性白血病的治疗，但也是治疗某些实体瘤和淋巴瘤的有用组分。骨髓抑制是多柔比星最常见的剂量限制性副作用。

博来霉素，是从轮丝链霉菌(streptomyces verticilus)菌株中分离出来的细胞毒素糖肽类抗生素的混合物，以市售。博来霉素可作为单独的药物或与其它药物组合，用于鳞状细胞癌、淋巴瘤和睾丸癌的姑息疗法。肺部和皮肤毒性是博来霉素最常见的剂量限制性副作用。

拓扑异构酶II抑制剂包括但不限于表鬼臼脂毒素。

表鬼臼脂毒素是来源于曼德拉草(mandrake)植物的时相特异性的抗肿瘤药物。表鬼臼脂毒素通常通过与拓扑异构酶II和DNA形成三元复合物，导致DNA链断裂来影响处于细胞周期的S和G₂期的细胞。链断裂积聚，接着细胞死亡。表鬼臼脂毒素的实例包括但不限于依托泊苷和替尼泊苷。

依托泊苷，4'-去甲基-表鬼臼脂毒素9[4,6-0-(R)-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷]，以注射溶液或胶囊市售，并且常称之为VP-16。依托泊苷可作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗睾丸癌和非小细胞肺癌。骨髓抑制是依托泊苷最常见的副作用。白细胞减少症的发生率(incidence)倾向于比血小板减少症的发生率更严重。

替尼泊苷，4'-去甲基-表鬼臼脂毒素9[4,6-0-(R)-噻吩亚甲基-β-D-吡喃葡萄糖苷]，以注射溶液市售，并且通常称之为VM-26。替尼泊苷可作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗儿童急性白血病。骨髓抑制是替尼泊苷最常见的剂量限制性副作用。替尼泊苷可引起白细胞减少症和血小板减少症。

抗代谢肿瘤药物是时相特异性的抗肿瘤药物，其作用于细胞周期的S期(DNA合成)，通过抑制DNA的合成，或者通过抑制嘌呤或嘧啶碱基的合成进而限制DNA的合成。因此，S期不能继续下去，接着细胞死亡。抗代谢类抗肿瘤药物的实例包括但不限于氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、阿糖胞苷、巯基嘌呤、硫鸟嘌呤，以及吉西他滨。

5-氟尿嘧啶，5-氟-2,4-(1H,3H)嘧啶二酮，以氟尿嘧啶市售。5-氟尿嘧啶的给药导致胸苷酸合成的抑制，并且还掺入到RNA和DNA中。结果通常是细胞死亡。5-氟尿嘧啶可作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗乳腺癌、结肠癌、直肠癌、胃癌和胰腺癌。骨髓抑制和粘膜炎是5-氟尿嘧啶的剂量限制性副作用。其它的氟嘧啶类似物包括5-氟脱氧尿嘧啶核苷(氟尿苷)和5-氟脱氧尿嘧啶核苷一磷酸。

阿糖胞苷，4-氨基-1-β-D-阿拉伯呋喃糖基-2(1H)-嘧啶酮，以市售，并且通常称之为Ara-C。认为阿糖胞苷在S-期具有细胞时相特异性，其通过将阿糖胞苷末端掺入到生长的DNA链中而抑制DNA链的延长。阿糖胞苷作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗急性白血病。其它的胞苷类似物包括5-氮杂胞苷和2',2'-二氟脱氧胞苷(吉西他滨)。阿糖胞苷引起白细胞减少症、血小板减少症和粘膜炎。

巯基嘌呤，1,7-二氢-6H-嘌呤-6-硫酮一水合物，以嘌呤市售。巯基嘌呤在S-期通过至今尚未清楚的机理抑制DNA的合成具有细胞时相特异性。巯基嘌呤可作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗急性白血病。预期骨髓抑制和胃肠粘膜炎是高剂量巯基嘌呤的副作用。可使用的巯基嘌呤类似物是硫唑嘌呤。

硫鸟嘌呤，2-氨基-1,7-二氢-6H-嘌呤-6-硫酮，以市售。硫鸟嘌呤在S-期通过至今尚未清楚的机理抑制DNA的合成具有细胞时相特异性。硫鸟嘌呤可作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗急性白血病。骨髓抑制，包括白细胞减少症、血小板减少症和贫血是给药硫鸟嘌呤最常见的剂量限制性副作用。然而，还发生胃肠副作用，而且该副作用可能是剂量限制性的。其它的嘌呤类似物包括喷司他丁、赤式羟基壬基腺嘌呤(erythrohydroxynonyladenine)、磷酸氟达拉滨和克拉屈滨。

吉西他滨，2'-脱氧-2',2'-二氟胞苷一盐酸盐(β-异构体)，以市售。吉西他滨通过阻断细胞通过G1/S边界的发展在S-期具有细胞时相特异性。吉西他滨可与顺铂组合，用于治疗局部的晚期非小细胞肺癌，也可以单独地用于治疗局部的晚期胰腺癌。骨髓抑制(包括白细胞减少症、血小板减少症和贫血)是给药吉西他滨最常见的剂量限制性副作用。

甲氨蝶呤，N-[4[[(2,4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]甲基氨基]苯甲酰基]-L-谷氨酸，以甲氨蝶呤钠市售。甲氨蝶呤在S-期具有细胞时相特异性作用，其通过抑制合成嘌呤核苷酸和胸苷酸所需的脱氢叶酸还原酶来抑制DNA的合成、修复和/或复制。甲氨蝶呤可作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗绒毛膜癌、脑膜白血病、非霍奇金淋巴瘤，以及乳腺癌、头癌、颈癌、卵巢癌和膀胱癌。预期骨髓抑制(白细胞减少症、血小板减少症和贫血)和粘膜炎是给药甲氨蝶呤的副作用。

喜树碱，包括喜树碱和喜树碱衍生物，其可作为拓扑异构酶I抑制剂来使用或开发。认为喜树碱细胞毒素活性与其拓扑异构酶I抑制活性相关。喜树碱的实例包括但不限于伊立替康、托泊替康，以及下述7-(4-甲基哌嗪基-亚甲基)-10,11-亚乙二氧基-20-喜树碱的各种旋光体。

盐酸伊立替康，(4S)-4,11-二乙基-4-羟基-9-[(4-哌啶子基哌啶子基)羰基氧基]-1H-吡喃并[3',4',6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-3,14(4H,12H)-二酮盐酸盐，以注射溶液市售。

伊立替康是喜树碱的衍生物，其与其活性代谢物SN-38一起结合在拓扑异构酶I-DNA复合物上。认为由于双链不可修复的(irreparable)断裂，导致出现细胞毒性，所述断裂是由拓扑异构酶I:DNA:伊立替康或SN-38三元复合物与复制酶之间的相互作用引起的。伊立替康可用于治疗结肠或直肠的转移癌。盐酸伊立替康的剂量限制性副作用是骨髓抑制，包括嗜中性白细胞减少症，以及包括腹泻的GI效应。

盐酸托泊替康，(S)-10-[(二甲基氨基)甲基]-4-乙基-4,9-二羟基-1H-吡喃并[3',4',6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-3,14-(4H,12H)-二酮一盐酸盐，以注射溶液市售。托泊替康是喜树碱的衍生物，其与拓扑异构酶I-DNA复合物结合，并阻止单链断裂的再连接，所述单链断裂是拓扑异构酶I响应DNA分子的扭转张力(torsional strain)所引起的。托泊替康用于卵巢转移癌和小细胞肺癌的二线治疗。盐酸托泊替康的剂量限制性副作用是骨髓抑制，主要是嗜中性白细胞减少症。

同样感兴趣的是以下式A的喜树碱衍生物，包括外消旋混合物(R,S)形式以及R和S对映异构体：

已知为化学名“7-(4-甲基哌嗪基-亚甲基)-10,11-亚乙二氧基-20(R,S)-喜树碱(外消旋混合物)或“7-(4-甲基哌嗪基-亚甲基)-10,11-亚乙二氧基-20(R)-喜树碱(R对映异构体)或“7-(4-甲基哌嗪基-亚甲基)-10,11-亚乙二氧基-20(S)-喜树碱(S对映异构体)。该化合物以及相关化合物(包括制备方法)公开在美国专利6,063,923；5,342,947；5,559,235；5,491,237和于1997年11月24日提交的审查中的美国专利申请08/977,217中。

激素和激素类似物为治疗癌症有用的化合物，其中激素和癌症的生长和/ 或停止生之间存在关系。用于治疗癌症的激素和激素类似物的实例包括，但不限于，肾上腺皮质类固醇类(例如泼尼松和泼尼松龙)，其用于治疗儿童的恶性淋巴瘤和急性白血病；氨鲁米特和其它芳香酶抑制剂(例如阿那曲唑、来曲唑、vorazole和依西美坦)，其用于治疗肾上腺皮质癌和包含雌激素受体的激素依赖性乳腺癌；孕酮(例如醋酸甲地孕酮)，其用于治疗激素依赖性乳腺癌和子宫内膜癌；雌激素、雄激素以及抗雄激素(例如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、醋酸环丙孕酮)和5α-还原酶(例如非那雄胺和度他雄胺)，其用于治疗前列腺癌和良性前列腺肥大；抗雌激素(例如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬、iodoxyfene，以及美国专利5,681,835、5,877,219和6,207,716中公开的选择性雌激素受体调节剂(SERMS))，其用于治疗激素依赖性乳腺癌和其它易发性癌症；以及促性腺素-释放激素(GnRH)及其类似物，其刺激黄体生成激素(LH)和/或促卵泡激素(FSH)的释放，用于治疗前列腺癌，例如，LHRH激动剂和拮抗剂，例如醋酸戈舍瑞林和luprolide。

信号转导途径抑制剂为阻断或抑制引起细胞内变化的化学过程的那些抑制剂。本文所用的该变化为细胞增殖或分化。用于本发明的信号转导抑制剂包括受体酪氨酸激酶、非-受体酪氨酸激酶、SH2/SH3区域阻断剂、丝氨酸/苏氨酸激酶、磷脂酰肌醇-3激酶、肌醇信号，以及Ras癌基因的抑制剂。

多种蛋白酪氨酸激酶催化细胞生长的调节中涉及的多种蛋白中的特定酪胺酰残基的磷酸化。该蛋白酪氨酸激酶可以大致分类为受体或非-受体激酶。

受体酪氨酸激酶为跨膜蛋白，其具有胞外配体结合区域、跨膜区域，以及酪氨酸激酶区域。受体酪氨酸激酶涉及细胞生长的调节，并通常称为生长因子受体。许多这些激酶的不合适的或不受控制的活化，即异常激酶生长因子受体活化(例如过表达或突变)，已经显示出导致不受控制的细胞生长。因此，该激酶的异常活性已经与恶性组织生长联系起来。因此，该激酶的抑制剂可以提供癌症治疗方法。生长因子受体包括，例如，表皮生长因子受体(EGFr)、血小板衍生生长因子受体(PDGFr)、erbB2、erbB4、血管内皮生长因子受体(VEGFr)、具有免疫球蛋白-样和表皮生长因子同源性区域的酪氨酸激酶(TIE-2)、胰岛素生长因子-I(IGFI)受体、巨噬细胞集落刺激因子(cfms)、BTK、ckit、cmet、成纤维细胞生长因子(FGF)受体、Trk受体(TrkA、TrkB和TrkC)、ephrin(eph)受体，以及RET原癌基因。生长受体的多种抑制剂处于研发之中，包括配体拮抗剂、抗体、酪氨酸激酶抑制剂和反义寡核苷酸。生长因子受体和抑制生长因子受体功能的药剂公开在，例如，Kath,John C.,Exp.Opin.Ther.Patents(2000)10(6):803-818；Shawver等，DDT Vol 2,No.2February1997；以及Lofts,F.J.等,“Growth factor receptors as targets”,New MolecularTargets for Cancer Chemotherapy,ed.Workman,Paul and Kerr,David,CRC press1994,London中。

酪氨酸激酶(其不是生长因子受体激酶)被称为非-受体酪氨酸激酶。用于本发明的非-受体酪氨酸激酶，其为抗癌症药物的靶点或潜在靶点，包括cSrc、Lck、Fyn、Yes、Jak、cAbl、FAK(黏着斑激酶)、Brutons酪氨酸激酶，以及Bcr-Abl。该非-受体激酶和抑制非-受体酪氨酸激酶功能的药剂公开在Sinh,S.和Corey,S.J.,(1999)Journal of Hematotherapyand Stem Cell Research 8(5)：465-80；以及Bolen,J.B.,Brugge,J.S.,(1997)Annualreview of Immunology.15：371-404中。

SH2/SH3区域阻断剂为断裂多种酶或适体(adaptor)蛋白中的SH2或SH3区域结合的药剂，包括PI3-K p85亚单位、Src家族激酶、适体分子(Shc、Crk、Nck、Grb2)和Ras-GAP。SH2/SH3区域作为抗癌症药物的靶点公开在Smithgall,T.E.(1995),Journal ofPharmacological and Toxicological Methods.34(3)125-32中。

丝氨酸/苏氨酸激酶的抑制剂包括MAP激酶级联阻断剂，其包括Raf激酶(rafk)、促分裂原或胞外调节的激酶(MEK)，以及胞外调节的激酶(ERK)的阻断剂；并且蛋白激酶C家族成员阻断剂包括PKC(alpha、beta、gamma、epsilon、mu、lambda、iota、zeta)、IkB激酶家族(IKKa、IKKb)、PKB家族激酶、AKT激酶家族成员，PDK1以及TGFβ受体激酶的阻断剂。该丝氨酸/苏氨酸激酶及其抑制剂公开在Yamamoto,T.,Taya,S.,Kaibuchi,K.,(1999),Journalof Biochemistry.126(5)799-803；Brodt,P,Samani,A.,和Navab,R.(2000),BiochemicalPharmacology,60.1101-1107；Massague,J.,Weis-Garcia,F。(1996)Cancer Surveys.27:41-64；Philip,P.A.,和Harris,A.L.(1995),Cancer Treatment and Research.78：3-27,Lackey,K.等，Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters,(10),2000,223-226；美国专利号6,268,391；Pearce,L.R等，Nature Reviews Molecular Cell Biology(2010)11,9-22以及Martinez-Iacaci,L.等,Int.J.Cancer(2000),88(1),44-52中。

合适地，药学活性的本发明化合物与B-Raf抑制剂组合使用。合适地， N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺，或其药学上可接受的盐，其在国际专利申请号PCT/US2009/042682中公开和要求保护，其国际申请日期为2009年5月4日，将其全部公开内容引入作为参考。N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺可以按照国际专利申请号PCT/US2009/042682所述进行制备。

合适地，药学活性的本发明化合物与Akt抑制剂组合使用。合适地，N-{(1S)-2-氨基-1-[(3,4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰氨或其药学上可接受的盐，其在国际专利申请号PCT/US2008/053269中公开和要求保护，其国际申请日期为2008年2月7日；国际公布号为WO 2008/098104且国际公布日期为2008年8月14日，将其全部公开内容引入作为参考。N-{(1S)-2-氨基-1-[(3,4-二氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-呋喃甲酰氨为实施例224的化合物，其可按照国际专利申请号PCT/US2008/053269所述进行制备。

合适地，药学活性的本发明化合物与Akt抑制剂组合使用。合适地，N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰氨或其药学上可接受的盐，其在国际专利申请号PCT/US2008/053269中公开和要求保护，其国际申请日期为2008年2月7日；国际公布号为WO 2008/098104且国际公布日期为2008年8月14日，将其全部公开内容引入作为参考。N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰氨为实施例96的化合物，且可按照国际专利申请号PCT/US2008/053269中所述进行制备。合适地，N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰氨呈盐酸盐的形式。所述盐形式可以由本领域技术人员根据国际专利申请号PCT/US2010/022323所述进行制备，其国际申请日期为2010年1月28日。

包括PI3-激酶、ATM、DNA-PK，以及Ku的阻断剂的磷脂酰肌醇-3激酶家族成员的抑制剂也用于本发明。该激酶公开在Abraham,R.T.(1996),Current Opinion inImmunology.8(3)412-8；Canman,C.E.,Lim,D.S.(1998),Oncogene 17(25)3301-3308；Jackson,S.P.(1997),International Journal of Biochemistry and Cell Biology.29(7):935-8；以及Zhong,H.等,Cancer res,(2000)60(6),1541-1545中。

本发明还关注肌醇信号抑制剂，例如磷脂酶C阻断剂以及肌醇类似物。该信号抑制剂公开在Powis,G.,和Kozikowski A.,(1994)New Molecular Targets for CancerChemotherapy ed.,Paul Workman and David Kerr,CRC press 1994,London中。

信号转导途径抑制剂的其它类型为Ras癌基因的抑制剂。该抑制剂包括法呢基转移酶、牻牛儿基-牻牛儿基转移酶、CAAX蛋白酶、反义寡核苷酸、核糖酶和免疫疗法的抑制剂。该抑制剂已经显示出在含有野生型突变ras的细胞中阻断ras激活，因此作为抗增殖药剂。Ras癌基因的抑制在Scharovsky,O.G.,Rozados,V.R.,Gervasoni,S.I.Matar,P.(2000),Journal of Biomedical Science.7(4)292-8；Ashby,M.N.(1998),CurrentOpinion in Lipidology.9(2)99-102；以及BioChim.Biophys.Acta,(19899)1423(3):19-30中讨论。

如上所述，拮抗受体激酶配体结合的抗体也用作信号转导抑制剂。该类信号转导途径抑制剂包括使用人化的抗体至受体酪氨酸激酶的胞外配体结合区域。例如ImcloneC225EGFR特异性抗体(见Green,M.C.等,Monoclonal Antibody Therapy for SolidTumors,Cancer Treat.Rev.,(2000),26(4),269-286)；erbB2抗体(见Tyrosine Kinase Signalling in Breast cancer:erbB Family Receptor TyrosineKniases,Breast cancer Res.,2000,2(3),176-183)；以及2CB VEGFR2特异性抗体(见Brekken,R.A.et al,Selective Inhibition of VEGFR2Activity by a monoclonalAnti-VEGF antibody blocks tumor growth in mice,Cancer Res.(2000)60,5117-5124)。

非-受体激酶血管生成抑制剂也有用于本发明。血管生成相关的VEGFR和TIE2的抑制剂在上文信号转导抑制剂中讨论(两种受体均为受体酪氨酸激酶)。血管生成通常与erbB2/EGFR信号转导联系起来，因为erbB2和EGFR的抑制剂已经显示出抑制血管生成，主要地VEGF表达。因此，非-受体酪氨酸激酶抑制剂也可以与本发明的化合物组合使用。例如，抗-VEGF抗体，其不识别VEGFR(受体酪氨酸激酶)，但是结合配体；将抑制血管生成的整联蛋白的(alpha_v beta₃)的小分子抑制剂；内皮他丁(endostatin)和血管他丁(angiostatin)(非-RTK)也得以证明用于与公开的化合物组合。(见Bruns CJ等(2000),Cancer Res.,60：2926-2935；Schreiber AB,Winkler ME,和Derynck R.(1986),Science,232：1250-1253；Yen L等，(2000),Oncogene 19：3460-3469)。

用于免疫治疗方案的药剂也可用于与式(I)化合物组合。存在许多产生免疫响应的免疫策略。这些策略通常在肿瘤疫苗的范围内。免疫方法的有效性可以经过使用小分子抑制剂结合抑制信号途径得以大大增强。对抗erbB2/EGFR的免疫/肿瘤疫苗方法的讨论可见于Reilly RT等.(2000),Cancer Res.60：3569-3576；以及Chen Y,Hu D,Eling DJ,Robbins J,和Kipps TJ.(1998),Cancer Res.58：1965-1971。

用于促细胞凋亡方案的药剂(例如，bcl-2反义寡核苷酸)也可用于本发明的组合中。蛋白的Bcl-2家族的成员阻断凋亡。上调的bcl-2因此已经与化学抗性联系起来。研究显示表皮生长因子(EGF)刺激bcl-2家族(即，mcl-1)的抗凋亡成员。因此，设计的下调bcl-2在肿瘤中的表达的策略已经证明临床有益，而且现已进入II/III期临床试验，即Genta的G3139bcl-2反义寡核苷酸。使用对bcl-2的该反义寡核苷酸策略的促细胞凋亡策略在WaterJS等.(2000),J.Clin.Oncol.18：1812-1823；以及Kitada S等.(1994),AntisenseRes.Dev.4：71-79中讨论。

细胞周期信号转导抑制剂抑制参与细胞周期控制的分子。蛋白激酶的家族称为细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)，而且它们与称为细胞周期蛋白的蛋白家族的相互作用控制真核细胞周期的进展。不同细胞周期蛋白/CDK复合物的协调活化和失活对于细胞周期的正常进展至关重要。细胞周期信号转导的多种抑制剂处于研发之中。例如，细胞周期蛋白依赖激酶，包括CDK2、CDK4和CDK6以及它们的抑制剂的实例公开在，例如，Rosania等,Exp.Opin.Ther.Patents(2000)10(2):215-230中。此外，p21WAF1/CIP1已经公开为细胞周期蛋白依赖性激酶(Cdk)的有效和通用的抑制剂(Ball等，Progress in cell cycle Res.,3：125(1997))。已知诱导p21WAF1/CIP1表达的化合物和抑制细胞增殖并抑制肿瘤活性有关系(Richon等，Proc.Nat Acad.Sci.U.S.A.97(18)：10014-10019(2000))，且包括作为细胞周期信号转导抑制剂。组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)抑制剂和转录激活p21WAF1/CIP1有关(Vigushin等，Anticancer Drugs,13(1)：1-13(Jan 2002))，其为用于本文的合适的细胞周期信号转导抑制剂。

所述HDAC抑制剂的实例包括：

1.Vorinostat，包括其药学上可接受的盐。Marks等，Nature Biotechnology25,84to 90(2007)；Stenger,Community Oncology 4,384-386(2007)。

Vorinostat具有以下化学结构和名称：

2.Romidepsin，包括其药学上可接受的盐。Vinodhkumar等，Biomedicine&Pharmacotherapy 62(2008)85-93。

Romidepsin具有以下化学结构和名称：

(1S,4S,7Z,10S,16E,21R)-7-亚乙基-4,21-二(丙-2-基)-2-氧杂-12,13-二硫杂

-5,8,20,23-四氮杂双环[8.7.6]二十三碳-16-烯-3,6,9,19,22-五酮

3.Panobinostat，包括其药学上可接受的盐。Drugs of the Future 32(4)：315-322(2007)。

Panobinostat具有以下化学结构和名称：

(2E)-N-羟基-3-[4-({[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}甲基)苯基]丙烯酰胺

4.丙戊酸，包括其药学上可接受的盐。Gottlicher等，EMBO J。20(24)：6969-6978(2001)。

丙戊酸具有以下化学结构和名称：

5.Mocetinostat(MGCD0103)，包括其药学上可接受的盐。Balasubramanian等，Cancer Letters 280：211-221(2009)。

Mocetinostat具有以下化学结构和名称：

N-(2-氨基苯基)-4-[[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]甲基]苯甲酰胺

所述HDAC抑制剂的其它实例包括在Bertrand European Journal of MedicinalChemistry 45,(2010)2095-2116中，尤其其中所述的表3的化合物，如下所示。

蛋白酶体抑制剂为阻断蛋白酶体作用的药物，蛋白酶体是裂解蛋白(例如p53蛋白)的细胞复合体(cellular complexes)。几种蛋白酶体抑制剂已经上市或处于治疗癌症的研究中。用于本文的合适的蛋白酶体抑制剂包括：

1.硼替佐米包括其药学上可接受的盐。Adams J,Kauffman M(2004),Cancer Invest22(2)：304-11。

硼替佐米具有以下化学结构和名称：

[(1R)-3-甲基-1-({(2S)-3-苯基-2-[(吡嗪-2-基羰基)氨基]丙酰基}氨基)丁基]硼酸

2.双硫仑，包括其药学上可接受的盐。Bouma等，(1998)。J.Antimicrob.Chemother.42(6)：817-20。

双硫仑具有以下化学结构和名称：

1,1',1″,1″'-[二硫烷二基双(硫羰基次氨基)]四乙烷

3.表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)，包括其药学上可接受的盐。Williamson等，(December 2006),The Journal of Allergy and Clinical Immunology118(6)：1369-74。

表没食子儿茶素没食子酸酯具有以下化学结构和名称：

[(2R,3R)-5,7-二羟基-2-(3,4,5-三羟基苯基)色满-3-基]3,4,5-三羟基苯甲酸酯

4.Salinosporamide A，包括其药学上可接受的盐。Feling等,(2003),Angew。Chem.Int.Ed.Engl.42(3)：355-7。

Salinosporamide A具有以下化学结构和名称：

(4R,5S)-4-(2-氯乙基)-1-((1S)-环己-2-烯基(羟基)甲基)-5-甲基-6-氧杂-2-氮杂双环3.2.0庚烷-3,7-二酮

癌症代谢的抑制剂：许多肿瘤细胞显示与正常组织显著不同的代谢。例如，糖酵解(即将葡萄糖转化为丙酮酸的代谢过程)的速率增加，并且生成的丙酮酸被还原为乳酸，而非进一步在线粒体中经三羧酸(TCA)循环被氧化。甚至在有氧条件下也常常观察到该效应，并且称为Warburg效应。

乳酸脱氢酶A(LDH-A)(乳酸脱氢酶的一种同种型)表达于肌肉细胞中，在肿瘤细胞代谢中起关键作用，其通过进行丙酮酸至乳酸的还原，然后其运输至细胞外。已经显示所述酶在许多肿瘤类型中被上调。在Warburg效应中描述的葡萄糖代谢的改变对癌症细胞的生长和增殖至关重要，而且使用RNA-i敲除的LDH-A已经显示出在异种移植模型中导致细胞增殖和肿瘤生长的降低。

D.A.Tennant等,Nature Reviews,2010,267。

P.Leder等,Cancer Cell,2006,9,425。

癌症代谢抑制剂，包括LDH-A抑制剂，适用于与本发明的化合物组合。

本文所用的术语“干混合物”及其相关术语指的是包含化合物A和/或稀释剂和/或粘合剂和/或润滑剂和/或崩解剂的配制的颗粒，从而该颗粒适用于制备固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)，且该颗粒可通过干法混合或干法制粒制得。可以将干混合物作为药物直接给予有需要的患者。然而，如上所述，可以预期干混合物最适用于制备固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)。

除非另外定义，否则本文所用的术语“固体口服药物剂型”和“固体剂型”及其相关术语指的是适合体内给药的包含化合物A的最终药物制剂，如：片剂、胶囊、丸剂、锭剂、囊剂和粉剂(包括这些制剂的包衣形式)，合适地为片剂、合适地为胶囊。

当指明本文所用的赋形剂基本上无水时，应认为该赋形剂可包含少量水，例如约5％重量或更少，合适地约2.5％重量或更少，合适地约1％重量或更少。在本发明的这一方面中，认为赋形剂成分中非常少量的水不会对固体剂型(合适地为片剂、胶囊)的性能产生不良影响。

合适地，本发明的固体口服药物剂型包含化合物A、稀释剂(也称为填充剂或填料)和合适地粘合剂和/或润滑剂和/或崩解剂。本领域技术人员将能识别一种给出的材料可能在片剂制剂中提供一种或多种功能，尽管通常为了主要功能而包含该材料。本文和权利要求中提供的稀释剂、粘合剂、润滑剂和崩解剂的百分比均以片剂的重量计。

稀释剂提供体积，例如，为将片剂制成可加工处理的实际大小。稀释剂也可能有助于加工处理，例如，通过提供改善的物理性质如流动性、可压缩性和片剂硬度。由于在典型的药物制剂中相对高的稀释剂百分比以及稀释剂与活性化合物直接接触量，稀释剂与活性化合物间的相互作用是制剂人员特别关注的问题。适于本发明中使用的稀释剂的实例包括以下稀释剂或其无水形式：水溶性填充剂和水不溶性填充剂，如磷酸钙(例如，磷酸氢二钙或磷酸三钙、水合的或无水的)、硫酸钙、碳酸钙、碳酸镁、高岭土，基本无水的乳糖，合适地喷雾干燥的或无水的乳糖(本文所用的全部乳糖)、纤维素(例如，微晶纤维素、粉状纤维素)、预胶凝淀粉、淀粉、乳糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、麦芽糖糊精(maltodextrin)、糖粉、可压缩糖、蔗糖、右旋糖和肌醇。基本无水的稀释剂适用于本发明的片剂。在本发明的一个实施方案中，该稀释剂由甘露糖醇和微晶纤维素中的一种或两种组成。

本发明的固体口服药物剂型典型地包含约25％至约89％的一种或多种稀释剂。

本发明的一个方面包括固体口服药物剂型，其中该固体剂型使用一种或多种基本上无水的稀释剂配制。

本发明的一个方面包括药物片剂，其中该片剂使用一种或多种基本上无水的稀释剂配制。

本发明的一个方面包括药物胶囊，其中该胶囊使用一种或多种基本上无水的稀释剂配制。

粘合剂赋予粉状材料粘合性质。适用于本发明的粘合剂的实例包括以下粘合剂或其无水形式：羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素(HPC)、羟乙基纤维素(HEC)和乙基纤维素(EC)、聚乙烯吡咯烷酮。基本无水的粘合剂适用于本发明的片剂。在本发明的一个实施方案中，粘合剂为羟丙基甲基纤维素(HPMC)或羟丙甲纤维素。

本发明的固体口服药物剂型典型地包含至多约2-8％的粘合剂，例如约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％和约8％重量/重量。该制剂合适地包含至多约5％的粘合剂。

本发明的一个方面包括固体口服药物剂型，其中该固体剂型使用一种或多种基本无水的粘合剂配制。

本发明的一个方面包括药物片剂，其中该片剂使用一种或多种基本无水的粘合剂配制。

本发明的一个方面包括药物胶囊，其中该胶囊使用一种或多种基本无水的粘合剂配制。

润滑剂通常用来促进加工，例如防止制剂材料粘附到生产设备，减少颗粒间的摩擦，改善制剂的流动速率，和/或有助于制剂从生产设备中排出。适用于本发明的润滑剂的实例包括以下润滑剂或其无水形式：滑石粉、硬脂酸盐(例如，硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、棕榈酰硬脂酸酯(palmitostearate))、硬脂酸、氢化植物油、山萮酸甘油酯(glycerylbehanate)，聚乙二醇、环氧乙烷聚合物(例如，CARBOWAX)、液状石蜡、月桂基硫酸钠、月桂基硫酸镁、油酸钠、硬脂酰富马酸钠、DL-亮氨酸，和硅衍生物(例如，胶体二氧化硅、胶体硅、热解硅胶、硅铝酸钠)。基本无水的润滑剂适用于本发明的片剂。在本发明的一个实施方案中，润滑剂为硬脂酸镁。

本发明的固体口服药物剂型典型地包含至多约2％的润滑剂。该制剂合适地包含至多约1％，合适地至多约0.75％的润滑剂。

本发明的一个方面包括固体口服药物剂型，其中该固体剂型使用一种或多种基本上无水的润滑剂配制。

本发明的一个方面包括药物片剂，其中该片剂使用一种或多种基本上无水的润滑剂配制。

本发明的一个方面包括药物胶囊，其中该胶囊使用一种或多种基本上无水的润滑剂配制。

崩解剂被用来促进给药后制剂的破碎或崩解。适用于本发明的崩解剂的实例包括以下崩解剂或其无水形式：淀粉、纤维素、胶、交联聚合物，和发泡剂，如玉米淀粉、土豆淀粉、预胶凝淀粉、改性玉米淀粉、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、淀粉乙醇酸钠、硅酸镁铝HV、甲基纤维素、微晶纤维素、纤维素、胶体二氧化硅、改性纤维素胶(例如，Ac-Di-So1R)、琼脂、膨润土、蒙脱土(montmorillonite clay)、天然海绵、阳离子交换树脂、离子交换树脂(例如，波拉克林钾)、海藻酸和海藻酸盐、瓜尔胶、柑橘浆(citrus pulp)、羧甲基纤维素及其盐，如月桂基硫酸钠、硅酸镁铝、水合硅酸铝、碳酸氢钠与酸化剂(如酒石酸或柠檬酸)的混合物。基本上无水的崩解剂适用于本发明的片剂。在本发明的一个实施方案中，崩解剂由交联羧甲基纤维素钠、月桂基硫酸钠和胶体二氧化硅的一种或多种组成。

本发明的固体口服剂型典型地包含2％至约5％量的崩解剂，合适地约2％、约3％、约4％和约5％重量/重量。该剂型合适地包含约3％的崩解剂。

本发明的一个方面包括固体口服药物剂型，其中该固体剂型使用一种或多种基本无水的崩解剂配制。

本发明的一方面包括药物片剂，其中该片剂使用一种或多种基本无水的崩解剂配制。

本发明的一个方面包括药物胶囊，其中该胶囊使用一种或多种基本无水的崩解剂配制。

在体内给药时，每种药用化合物在治疗药物浓度单独地起效。而且，药用活性化合物常伴有不希望的副作用，如：毒性(例如，遗传毒性、致畸性)和不希望的身体或心理表现。除了用赋形剂的化学性质平衡药物独特的化学性质外，药物还必须服用特定的剂量，该剂量足以提供所需的治疗药物浓度但不至于引起不希望的不良反应性质，或在该具体药物的治疗窗内。本发明的一个实施方案涉及以足以提供所需的疗效和可接受的副作用性质的剂量给药化合物A。

剂量强度

很多使用N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺的研究在动物模型中进行，以尝试为人体研究建立剂量选择范围。该动物模型包括以下模型。

动物中的药代动力学和代谢作用

在一系列的体外研究和在Balb/c小鼠、Sprague Dawley大鼠(除非另外指明)、比格犬和短尾猴中使用未标记的和[¹⁴C]标记的化合物的体内口服(管饲法)和IV研究中研究了N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺及其溶剂合物，包括二甲基亚砜溶剂合物(当在动物模型或人体临床试验中使用时，统称为“化合物”)的药代动力学、吸收、分布、代谢和消除。这些研究的说明与后续获得的人体临床结果均包含在下表1中。多种制剂用于体内研究。溶液或混悬液用于口服给药。此外，一些药代动力学和毒性研究(包括在大鼠和狗的13周毒性研究)使用了微粉化的化合物。

表1使用“化合物”的药代动力学与产物代谢研究的说明

A＝化合物(母体形式)；B＝化合物(二甲基亚砜溶剂合物)；H＝化合物(乙酸溶剂合物)；[¹⁴C]＝[¹⁴C]-标记的化合物(DMSO溶剂合物)；BCRP＝乳腺癌耐药蛋白；BDC＝插入胆管；CYP＝细胞色素P450；HEK＝人胚肾；IV＝静脉内；M＝雄性；F＝雌性；NA＝不适用；MDCKII-MDR1＝II型Madin-Darby犬肾-多重耐药1；OATP＝有机阴离子转运多肽；Pgp＝P-糖蛋白；PXR＝孕甾烷X受体；QWBA＝定量的全身放射自显影术；SOL＝溶液制剂。

注：口服剂量通过管饲法给药(除非另外指明，使用混悬液制剂)

重复剂量药代动力学和毒理学

在大鼠和狗中的13周比较全身暴露(AUC0-t和Cmax)的研究如表2所示。在此研究前进行了剂量范围研究：在大鼠中剂量至多1mg/kg/天，持续14天；在狗中剂量至多0.5mg/kg/天(或10mg/m²/天)，持续10天。

表2大鼠、狗和人口服给药化合物后平均全身暴露的比较评价

NA＝不适用；NC＝未计算。

注：除标注外，数据均为平均值(n＝3)。粗体值为所标明的最大耐受剂量(MTD)或未观测到不良反应的浓度(NOAEL)。

a.比值基于每天2mg剂量给药15天的平均人体暴露。

b.数据从两只大鼠获得。

c.数据从5只狗获得。

d.数据从4只狗获得。

e.对于给药1.5mg/m²/天的狗，最后给药时间是第7天。

f.该狗前11至12天接受0.6mg/m²/天剂量，接着大约7天休药期，然后在研究剩余天中接受0.45mg/m²/天。

体内毒理学研究通过口服管饲法在Sprague Dawley大鼠和比格犬中进行(表3)。研究通过使用化合物的DMSO溶剂合物在1.5％羟丙基甲基纤维素、5％甘露糖醇和0.2％月桂基硫酸钠的混悬液中进行。对于所有的毒理学研究，剂量基于体表面积(mg/m²)表示。通常，为了将mg/m²剂量转化成mg/kg剂量，大鼠的剂量需除以8，狗的剂量需除以20。

表3化合物的毒理学研究

B＝化合物(二甲基亚砜溶剂合物)；H＝化合物(乙酸溶剂合物)；M＝雄性；F＝雌性；NA＝不适用。

a.13周重复剂量毒性研究，后续4周的恢复期。

鉴于动物模型观测到的结果，进行了单次剂量和多次剂量人体临床试验的剂量范围研究。

人体中的药代动力学、产物代谢和药效学

初步的PK数据在单次和重复剂量口服给药化合物片剂后的实体瘤患者中得到。第一次人体内研究(FTIH)的剂量升高部分，包括使用3种主要给药方案之一给药化合物：

●每天一次给药指定剂量21天，然后7天不给药；

●在第一天和第二天或仅在第一天，给药负荷剂量(LD)，然后连续的每天一次给药指定剂量；或

●无负荷剂量，连续每天一次给药。

单次剂量药代动力学

在进行中的FTIH研究中，化合物的单次剂量(第一天)药代动力学在口服给药化合物片剂后在禁食条件下评价，且初步结果如表4所述。在24小时期间内，化合物的血浆浓度并未在全部受试者中测量，尤其是给予低剂量0.125至0.5mg的受试者。通常，AUC(0-24)和Cmax值在至多6mg时与剂量成比例，在8mg时低于剂量比例，并在10mg时高于剂量比例。大多数受试者在单次剂量给药后至多24小时采样，且半衰期和AUC(0-inf)无法计算。中位Tmax的范围从1.0至3.0小时。所有给药方案中，暴露的平均差异性(CV％)范围，对Cmax为13至68％，对AUC(0-24)为12至56％。

表4单次剂量给药化合物后(第一天)的初步药代动力学参数

缩写：BQL＝低于分析定量限；NA＝不适用

注：如果患者数<＝2，则所列药动学参数为个体值，如果患者数>2，则所列药动学参数为均值(CV％)和范围，报告的Tmax为中值(范围)；由于终末期尚未确定，T_1/2未显示。

a.低剂量组中的受试者样品有限(≤3可定量的样品)且AUC未报告；一个受试者所有样品均低于分析定量限

b.第一天给予负荷剂量

多剂量药代动力学

在FTIH研究中，化合物的重复剂量(第15天)药代动力学在口服给药化合物片剂后在禁食条件下评价，且初步结果如表5所示。在推荐剂量2mg QD，化合物以平均蓄积率为6.6的重复每天给药得以蓄积。第15天的平均AUC(0-tau)和Cmax值一般与剂量成比例增加(即，剂量增加2倍导致暴露增加2倍)。由于消除期长，大约5天的有效半衰期(T1/2，eff)基于蓄积率计算。所有给药方案中，暴露的受试者间差异性(CV％)范围，对Cmax为27至50％，对AUC(0-24)为20至41％。

表5重复剂量给药化合物后(第15天)的初步药代动力学参数

缩写：AR＝蓄积率；NA＝不适用；T1/2,eff＝有效半衰期

注：如果患者数<＝2，则所列药动学参数为个体值；如果患者数>2，则所列药动学参数为平均值(CV％)和(最小值至最大值)；Tmax以中值(范围)报道。

a.包括同时以负荷和连续给药方案的受试者。

b.由于停药，受试者1210从分析中略去。

在第一周期的第15天和部分2与部分3中的其它周期的第一天给药前采取额外的血样，以评价化合物的稳态谷浓度。重复给药达10周期的平均谷浓度范围，对每天2.0mg给药为10.0至18.9ng/mL，对每天2.5mg给药为7.8至17.3ng/mL。重复给药2.5mg化合物后，第15天的平均(CV％)谷浓度为16.8ng/mL(54％)，范围为0.68至49.0ng/mL。

在总结了所有可用的数据后，基于耐受性、肿瘤组织活检中的药效学标记物的暴露-应答关系和临床活性，选择了每天一次2mg剂量给药。也选择了0.5mg剂量以适应较低强度给药，例如当与其他抗肿瘤化合物联用或由于毒性需要减少剂量时。

药物产品的光稳定性

在化合物A的制剂研发过程中，发现当直接暴露于ICH Q1B光照条件时，在RRT＝0.81和RRT＝0.87(HPLC分析)两处观测到的两种降解产物的含量超过0.5％的不合格杂质的ICH限度。

包衣对光暴露的作用

将0.5、1和2mg未包衣的片剂暴露于ICH光稳定条件下并测试，以提供基线杂质信息用于比较。表6的数据显示对于包衣前的片剂芯，其在RRT＝0.81和RRT＝0.87两处的杂质大于0.5％。

所研究的包衣的组成在表7中给出。在所研究的5种包衣制剂中，白色为1mg强度提供最少的保护，其所观测到的杂质含量与未包衣的片剂类似。测试了粉红色和黄色的两种不同制剂，其均能提供足够的光保护。

来自1mg的数据显示粉红色和黄色的两种制剂都能提供足够的光保护。当着色剂的含量从4％下降到2％重量/重量时，这种保护并没有改变。在粉红色或黄色的保护下，所有的包衣片剂均显示出良好的光稳定性，即使在直接光暴露下(在培养皿中的片剂)。

表6培养皿中核心(未包衣)片剂的光暴露

表7包衣的组成

表8培养皿中包衣片剂的光暴露

ND＝未检测到

杂质特征

尽管在光稳定性研究中观测到3种杂质，但是RRT＝0.81和RRT＝0.87两处的杂质具有显著的含量，而RRT＝0.89处的杂质含量在ICH鉴定阈以下。RRT＝0.81和RRT＝0.87的结构已被确认并提供在表9中。此处它们分别被称为杂质I和杂质II。

表9杂质的结构

鉴于表6、7和8中所示的结果，片剂包衣的颜色在保护化合物A避免光降解中起着重要的作用。有色包衣可通过物理方式阻断有害波长或者通过提供化学保护(消除氧化自由基)以防止光照诱导形成杂质。

由于粉红色和黄色色料都包含氧化铁而白色不含；因此具有包含氧化铁的色料的膜包衣预期可预防包含化合物A的片剂生成光诱导杂质。

作为包含着色剂(非白色)的膜包衣的替代，未包衣片剂、蜡包衣片剂、白色包衣片剂等可放置在避光的泡罩包装或避光瓶中以保持药物避光。

粒径

临床前DMPK研究证实了药物微粉化的益处和使用具体崩解剂以改善暴露的益处。使用混悬在0.5％甲基纤维素中的未微粉化的药物(下表10中的“未微粉化的”)的临床前暴露数据的差异性被认为是不可接受的(研究内和研究间)。为了测试暴露差异性是否由剂量均匀度和悬浮固体表面积的差异性引起的，进行了一项实验以确定未微粉化的和微粉化的药物以及含有和不含具体崩解剂制成的混悬液的物理稳定性。该实验的结果表明为了确保该混悬液剂量足够的再现性，必须使用微粉化的药物。合适地，微粉化的药物与一种或多种具体崩解剂一起使用。从未微粉化的药物和不含具体崩解剂制得的混悬液显示出快速沉降和粒径增加。

一种混悬液制剂由微粉化的药物(下表10中的“微粉化的”)混悬在由5％甘露糖醇、1.5％羟丙甲纤维素和0.2％月桂基硫酸钠组成的载体中制得。制备了两种浓度：26.9mcg/mL和134.4mcg/mL，并且同一天给药。在第三天，134.4mcg/mL的混悬液连同新鲜配制的相似浓度的混悬液再次给药。表10总结了暴露数据(AUC)，图1表现临床前研究的结果。

表10临床前大鼠研究中的暴露

NB＝新一批的混悬液

1.混悬在0.5％的甲基纤维素中的未微粉化的药物

2.混悬在1.5％羟丙甲纤维素、0.2％月桂基硫酸钠、5％甘露糖醇中的微粉化的药物

图1：临床前研究中化合物A的暴露数据。

表10和图1中的数据表明使用由微粉化的药物制得的微粉化混悬液，显著改善了平均暴露和再现性。合适地，该微粉化的药物与一种或多种具体崩解剂配制，合适地该崩解剂选自月桂基硫酸钠、胶体二氧化硅和交联羧甲基纤维素钠的一种或多种。

本文所用的术语“微粉化的”是指本领域的标准用法，即例如将药物颗粒通过研磨、击打和/或碾碎以显著减小化学合成过程中天然产生的颗粒的粒径。对本文使用合适地，至少50％的目标颗粒等于或小于30μm，合适地至少50％的颗粒等于或小于10μm，合适地至少50％的颗粒等于或小于5μm。

本发明药物颗粒合适的粒径分布如下：

X10：NLT 0.46μm

X50：1.0-4.2μm

X90：NMT 10.6μm

在本发明的一个实施方案中，发现湿法制粒或使用大量水的压片技术不适于制备化合物A的片剂，特别是在商业规模，因为在制剂过程中一旦与水接触，化合物A即可可转变成显著更不溶的化合物B。进行了试验以确定药物剂型中可接受的去溶剂化的化合物B的含量以及合适的制剂技术。

去溶剂化

用HPLC测定DMSO含量

使用一种梯度洗脱HPLC方法确定包含化合物A的片剂中DMSO的含量。典型的色谱条件总结在表11中。

表11：测定典型的DMSO含量的HPLC仪器/色谱条件

一般根据实施例2制得的包含化合物A的1mg片剂暴露于四种不同保存条件(在含有干燥剂的HDPE瓶中的30片)的稳定性数据示于表12和图2中。

表12

图2：包含化合物A的1mg片剂的稳定性数据

外推的结果显示DMSO含量的下限对应于约20％去溶剂化。初始DMSO含量对应于约0％去溶剂化。合适地，初始DMSO含量少于约2％去溶剂化，合适地，少于约4％去溶剂化，合适地，少于约8％去溶剂化。合适地，在片剂的保存期间，DMSO的含量不会少于等价于约5％去溶剂化，合适地约10％去溶剂化，合适地约15％去溶剂化，合适地约20％去溶剂化。因此，发现干法直接压片和干法制粒是合适的制剂技术。

本发明的固体口服药物剂型(合适地为片剂、胶囊)的典型大小至多达1克，合适地约140mg至约175mg。这些固体剂型包含选自以下剂量的化合物A：0.5mg、1mg和2mg，以化合物B的重量计。本发明的片剂可能有许多种形状，包括：圆形、改良的圆形(modifiedround)、菱形、改良的胶囊形(modified capsule)、改良的椭圆形(modified oval)、椭圆形和六角形以及可任选地具有斜面。

片剂

赋形剂的具体类型和含量以及所用压片技术的选择取决于化合物A和赋形剂的其它性质，例如，可压性、流动性、粒径、相容性和密度。片剂可根据本领域已知的方法制备，该方法包括干法直接压片和干法制粒；所用赋形剂的类型会根据采用的确切方法而变化。已发现干法直接压片特别适于在适于商业生产的规模提供高强度、低破损的包含相对低含量的化合物A的片剂(例如，少于约1.5％，合适地少于1％)。本发明的合适的干法直接压片片剂包括将包含化合物A和一种或多种填充剂、粘合剂和崩解剂的干混合物与另外的填充剂、粘合剂、崩解剂和/或润滑剂混合形成可被压缩形成片剂的压片混合物。

本发明包括包含化合物A的片剂形式的药物组合物(合适地在商业规模制得)，其中片剂通过使用一种或多种基本无水的稀释剂经干法直接压片方法制得。本发明还包括包含薄膜衣的药物组合物，其中该薄膜衣包含色素。

本发明还包括包含化合物A的药物组合物(合适地在商业规模)，其中该片剂通过使用一种或多种基本无水的稀释剂经干法直接压片方法制得，且化合物A颗粒是微粉化的。

化合物A的微粉化通过增加颗粒的比表面积和提供低强度固体剂型足够的含量均匀度来增加生物暴露。

此外，使用本文公开的表面活性剂通过增加微粉化化合物A的可湿性来进一步增加生物暴露。

在本发明的一个实施方案中，本发明的片剂包含：

(i)约0.3％至1.5％的化合物A；

(ii)约25％至约89％的稀释剂；

(iii)至多约8％的粘合剂，合适地至多约5％；

(iv)至多约2％的润滑剂，合适地至多约0.75％；

(v)2％至约8％的崩解剂，合适地3％。

在上述实施方案中，稀释剂合适地为甘露糖醇和微晶纤维素的组合，粘合剂合适地为HPMC，润滑剂合适地为硬脂酸镁，和崩解剂合适地为月桂基硫酸钠、胶体二氧化硅和交联羧甲基纤维素钠的组合。

在本发明的一个实施方案中，用由含水薄膜衣组合物形成的薄膜衣来包衣片剂。适用于本发明的含水薄膜衣组合物包含成膜聚合物，媒介水和任选地一种或多种薄膜包衣领域知晓的佐剂。合适地，薄膜衣包含色素。

合适地，该色素包含氧化铁。

选用成膜聚合物以形成具有合适的机械性质(例如，机械强度、弹性)从而满足性能要求，如既定使用环境(例如，在胃肠液内的溶出度性质)和/或使用(例如，溶液粘度)的要求的包衣。合适的成膜聚合物的实例包括纤维素聚合物(例如，纤维素醚，如HPMC、HPC、MC、EC、HEC、CAP，乙基纤维素硫酸钠、羧甲基纤维素等)；聚乙烯吡咯烷酮；玉米蛋白；和丙烯酸聚合物(例如，甲基丙烯酸/甲基丙烯酸酯共聚物，例如甲基丙烯酸/甲基丙烯酸甲酯共聚物等)。本发明优选纤维素聚合物，尤其纤维素醚，且更尤其HPMC和HPC。该聚合物典型地以基于水或有机溶剂的溶液或含水分散液提供。然而，该聚合物可以以干燥形式单独或与其他组分(例如，增塑剂和/或着色剂)的粉状混合物提供，其可由使用者通过与含水媒介混合制成溶液或分散液。

含水薄膜衣组合物还包含水作为另一种组分的载体，以促进其运送到片剂表面。该载体还可任选地包含一种或多种水溶性溶剂，例如醇类(例如，甲醇、异丙醇、丙醇)和酮类(例如，丙酮)。本领域技术人员可选择合适的载体组分以提供成膜聚合物和载体间的良好相互作用，从而确保良好的膜性质。一般而言，设计聚合物-载体相互作用用于生成最大的聚合物链延伸，以形成具有最大粘度和机械性质的膜。还选用组分以使成膜聚合物良好地沉积到片剂表面，从而形成粘结和粘附的膜。

含水薄膜衣组合物可任选包含一种或多种本领域知晓的佐剂，如增塑剂、着色剂、抗粘剂(detackifiers)、第二成膜聚合物，助流剂、表面活性剂(例如，有助于伸展)、麦芽糖糊精和聚葡萄糖。

增塑剂为膜提供弹性，其可减少膜破裂并改善膜对片剂的粘附。合适的增塑剂通常具有与成膜聚合物的高度相容性和足够的持久性，从而包衣性质通常是稳定的。合适的增塑剂的实例包括甘油、丙二醇、聚乙二醇(例如，分子量从200至20000，包括UnionCarbide’s PEG 400、4000、6000、8000和20000)、甘油三乙酸酯(aka triacetin)、乙酰甘油单酯、柠檬酸酯(例如，柠檬酸三乙酯、乙酰基柠檬酸三乙酯、柠檬酸三丁酯、乙酰基柠檬酸三丁酯)、酞酸酯(例如，酞酸二乙酯)，矿物油和氢化葡萄糖浆。在本发明的一个实施方案中，该增塑剂选自聚乙二醇、三醋汀、丙二醇、甘油和它们的混合物。

已发现化合物A对光诱导的降解敏感。薄膜衣(合适地有色薄膜衣)有利于改善稳定性。

含水薄膜衣组合物典型地在载体中包含约5％至约25％，合适地约5％至约20％的包衣固体。在合适的实施方案中，按重量计，该固体典型地包含约25％至约70％，合适地约60％至约70％的成膜聚合物，约5％至约10％，合适地约6％至约8％的增塑剂和约20％至约35％的色素和着色剂。在合适的实施方案中，该着色剂包含约0.5％至3％重量。

许多合适的含水薄膜衣组合物是可购得的。该含水薄膜衣组合物可以以溶液或分散液形式提供。或者，该组合物以干燥形式提供，其可在包衣所述片剂前根据供应商说明书与载体组分混合。合适地，含水薄膜衣组合物可从West Point,PA的Colorcon,Inc.购得，商品名为OPADRY和OPADRY II(非限制性实例包括Opadry Pink YS-1-14762-A或03B140009、Opadry Yellow YS-1-12525-A或03B120006)。这些组合物可以以干燥的薄膜衣组合物形式得到，可在使用前即刻用水稀释。

也合适地包衣该片剂以提供无斑点的均匀包衣。典型地包衣该片剂使得干燥片剂的重量增加约2％至约5％，合适地约2.5％至4％。

未包衣的片芯通过本领域熟知的技术使用市售获得的设备(例如，ThomasAccela-Cota,Vector Hi-Coater,Compu-Lab 36)用含水薄膜衣组合物包衣。通常，该方法通常涉及在包衣盘中滚动或翻动片剂，或者将片剂悬浮在气流垫(流化床)上，并间歇地或连续地(优选连续地)将包衣组合物的雾化液滴的细雾喷洒到片剂上，这些液滴在片剂表面湿润、扩散和凝结以形成粘结和粘附的薄膜衣。片剂典型地被温度最高达85℃，合适地约65至80℃的空气加热到约40至50℃，合适地约45至50℃。

本发明的固体口服药物剂型可以治疗有效量给药以治疗或预防疾病状态，例如，如上述引用的国际申请PCT/JP2005/011082和美国专利公开US2006/0014768中所述。

本发明的抑制人体的MEK活性方法包括给予需要该活性的患者治疗有效量的本发明的固体口服药物剂型。

本发明还提供了化合物A在制备本发明的固体口服药物剂型中的用途。

本发明还提供了化合物A在制备用于治疗癌症的本发明的固体口服药物剂型中的用途。

本发明还提供了化合物A在制备用于抑制MEK的本发明的固体口服药物剂型中的用途。

本发明还提供了用作MEK抑制剂的固体口服药物剂型，其包含了本发明的化合物A和可药用载体。

本发明还提供了用于治疗癌症的固体口服药物剂型，其包含本发明的化合物A和可药用载体。

本发明还提供了用于抑制MEK的固体口服药物剂型，其包含本发明的化合物A和可药用载体。

不再进一步详细说明，应当认为本领域技术人员，使用之前的描述，可将本发明利用到最大限度。因此，以下的实施例，仅用来例示而并非限制本发明的范围。

本文所用的所有赋形剂均为从众多本领域熟知的生产商获得的标准药用级别赋形剂。

实施例

实施例1至3：片剂制备

通过干法直接压片，制备了包含化合物A和表13中的成分的片剂。

表13

注:

1.通过化合物B(非溶剂化的)与化合物A(DMSO溶剂化的)的分子转换比0.8873并根据分析报告的纯度值计算达到标示量的化合物B(游离或非溶剂化的化合物)所需的化合物A的量。甘露糖醇的量也相应调整。

2.水在加工中被除去。

NP＝制剂中不存在

混合

如果需要的话，将微粉化的药物、月桂基硫酸钠、二氧化硅、交联羧甲基纤维素钠、微晶纤维素和羟丙甲纤维素过筛，并转移到合适的混合器中混合。如果需要的话，将硬脂酸镁过筛，并转移到混合器中再混合一定时间。

压片

将润滑的混合物在旋转压片机上压片以得到各自强度的目标重量(145mg、155mg和165mg分别对应于0.5mg、1mg和2mg)。压制片剂在加工中监测各自的重量差异、外观、硬度、厚度、脆性和崩解时限。

包衣

片芯被喷洒Pink YS-1-14762-A的含水混悬液(2mg强度)、Yellow YS-1-12525-A的含水混悬液(0.5mg强度)或White OY-S-28876的含水混悬液(1mg强度)。继续包衣直到达到目标重量增加约3％。然后干燥片剂并散装到具有塑料衬里和干燥剂的HDPE容器中，保存直至进行包装。

尽管本发明的优选实施方案由上述实施例进行例示，但应当理解本发明不限于本文公开的精确的说明，并保留在权利要求范围内进行的所有修改的权利。

Claims

1.药物片剂，其包含：

a)药物N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺二甲基亚砜溶剂合物，其量选自：0.5635mg、1.127mg和2.254mg；

其中

b)该片剂包含25％至89％重量的一种或多种赋形剂，其中该赋形剂基本无水；和

c)非溶剂化药物的含量不超过20％，

其中药物颗粒为微粉化的。

2.权利要求1的药物片剂，其中非溶剂化药物的含量不超过15％。

3.权利要求1的药物片剂，其中非溶剂化药物的含量不超过10％。

4.权利要求1的药物片剂，其中非溶剂化药物的含量不超过5％。

5.权利要求1的药物片剂，其中非溶剂化药物的含量不超过2％。

6.权利要求1的药物片剂，其中至少50％的药物颗粒的粒径等于或小于30μm。

7.权利要求1的药物片剂，其中至少50％的药物颗粒的粒径等于或小于5μm。

8.权利要求1的药物片剂，其中该片剂包含25％至89％重量的选自以下的一种或多种赋形剂：微晶纤维素、粉状纤维素、预胶凝淀粉、淀粉、乳糖、磷酸氢二钙、乳糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇和麦芽糖糊精，其中该赋形剂基本无水。

9.权利要求1的药物片剂，其中该片剂以适于制备至少50,000粒片剂的规模进行制备。

10.权利要求1的药物片剂，其中该片剂经薄膜包衣。

11.权利要求1的药物片剂，其中该片剂经薄膜包衣且该薄膜衣包含着色剂。

12.权利要求1的药物片剂，其中该片剂经薄膜包衣且该薄膜衣包含含有氧化铁的着色剂。

13.权利要求1的药物片剂，其中该赋形剂选自微晶纤维素和甘露糖醇。

14.权利要求1-13中任一项的药物片剂在制备用于治疗癌症的药物中的用途。

15.一种制备包含一定量药物的药物片剂的方法，其中该药物为N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺二甲基亚砜溶剂合物，其量选自：0.5635mg、1.127mg和2.254mg，所述方法包括以下步骤：

混合：N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺二甲基亚砜溶剂合物、一种或多种基本无水的赋形剂和其它赋形剂，以形成混合物；并将该混合物压制成片剂；

条件是：每片包含N-{3-[3-环丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺二甲基亚砜溶剂合物，其量选自：0.5635mg、1.127mg和2.254mg；

每片包含25％至89％重量的一种或多种基本无水的赋形剂；且非溶剂化药物的含量不超过20％。