CN103977422A - 胍类降糖药-多糖共轭物及其制备方法和用途 - Google Patents
胍类降糖药-多糖共轭物及其制备方法和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103977422A CN103977422A CN201410259274.2A CN201410259274A CN103977422A CN 103977422 A CN103977422 A CN 103977422A CN 201410259274 A CN201410259274 A CN 201410259274A CN 103977422 A CN103977422 A CN 103977422A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- antidiabetic drug
- conjugate
- gene
- guanidine class
- polysaccharide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/13—Amines
- A61K31/155—Amidines (), e.g. guanidine (H2N—C(=NH)—NH2), isourea (N=C(OH)—NH2), isothiourea (—N=C(SH)—NH2)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种胍类降糖药-多糖共轭物及其制备方法和用途;该共轭物是胍类药物上的伯胺与氧化多糖上的醛基通过西弗碱键相连。与原胍类降糖药相比,该共轭物一方面可以作为降糖的高分子前药,且药理作用增强,不良反应少,安全性更高;另一方面该共轭物可以联合治疗基因用于糖尿病,尤其是肥胖症糖尿病的治疗,在细胞水平和模型动物上疗效好于原药和治疗基因。这些结果证明胍类降糖药-多糖共轭物由于具有优良的生物相容性和高效的基因传递效率,因此在糖尿病的药物联合基因治疗方面将具有巨大的潜力;且本发明合成和制备方法简单,工艺成熟,产率高。
Description
技术领域
本发明涉及一种胍类降糖药-多糖共轭物,具体涉及一种具备良好生理活性和生物可降解性的胍类降糖药-多糖共轭物作为高分子前药用作基因载体,本发明还涉及该共轭物的制备方法及该共轭物载基因用于糖尿病的治疗,属于药物与基因技术领域。
背景技术
据《美国医学会杂志》(JAMA)最新研究表明,中国已成为糖尿病人口大国,成人糖尿病患者数量估计超过1亿,其中II型糖尿病占90%以上。随着生活水平提高,人们饮食结构和生活方式发生了变化,导致肥胖症患者也逐年增加,有研究表明,80%以上的II型糖尿病患者同时伴有肥胖。肥胖症发病率的上升是诱发II型糖尿病的发病率迅速上升的最重要因素之一。肥胖者常伴有内分泌代谢紊乱、高胰岛素血症及脂肪、肌肉、肝细胞的胰岛素受体数目减少或其亲和力降低,对胰岛素不敏感,导致胰岛素抵抗(IR),从而葡萄糖利用障碍,发生糖尿病,此多为非胰岛素依赖性糖尿病(NIDM),即II型糖尿病。该病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病,其典型症状是“三多一少”,即多饮、多食、多尿、消瘦。非典型症状:乏力、口干、视力下降、皮肤瘙痒、手脚麻木,疼,走路如踩棉花样等。
近年来,对糖尿病病理生理学的认识水平和在此基础上的治疗水平有了很大的提高。II型糖尿病早期患者可通过改善生活方式(如健康饮食、适量运动、安全减肥、戒烟及避免二手烟暴露等)得以控制。但大多数患者需要口服降糖药物来帮助控制体内血糖,有些甚至仍需要胰岛素注射。然而,绝大多数II型糖尿病及糖尿病相关并发症(如导致失明和肾功能衰竭等)的发病原因还不清楚,尚无根治手段。近年来,随着基因重组技术及转基因技术的迅速发展,尤其是糖尿病相关基因的克隆的研究,糖尿病基因治疗有了较大的发展。
目前应用于基因治疗的载体主要有病毒载体和非病毒载体两种。病毒载体转染效率高,但存在免疫原性高、毒性大、目的基因容量小、靶向特异性差、制备较复杂及费用较高等缺点,因此人们愈来愈重视用于递送基因的非病毒载体研究。
发明内容
目的:为了克服现有技术中存在的不足,本发明提供一种胍类降糖药-多糖共轭物,该共轭物是由氧化多糖的醛基与胍类降糖药的伯胺反应通过西弗碱键生成,该共轭物荷较高的正电,可以进一步通过静电相互作用与基因结合形成复合物;从而提供一种新型有效递送基因用于II型糖尿病治疗的非病毒载体;该递送系统是一种对人体无毒副作用,尤其对肥胖症糖尿病有更好疗效的降糖药与基因共递送系统。
技术方案:为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案为:
一种胍类降糖药-多糖共轭物,所述胍类降糖药-多糖共轭物为多糖氧化产生的醛基与胍类降糖药上的伯胺反应通过西弗碱键连接。
其中,胍类降糖药选自二甲双胍、丁双胍和苯乙双胍;
多糖选自壳聚糖、壳寡糖、葡聚糖、透明质酸、肝素、软骨素、琼脂糖、海藻酸中的一种或几种。
作为优选方案,所述胍类降糖药-多糖共轭物为二甲双胍-壳聚糖。
本发明还提供上述胍类降糖药-多糖共轭物的制备方法,包括以下步骤:
1)氧化多糖的合成:将多糖溶于水或弱酸缓冲液中,然后加入一定量的氧化剂,在4-90℃下搅拌适宜时间,过滤后加入过量还原剂继续搅拌一段时间,之后用水充分透析,冻干得粉末固体的氧化多糖;
2)称取适量氧化多糖固体溶于一定溶剂后,加入胍类降糖药,搅拌适宜时间,透析冻干即得到共轭物。
所述弱酸缓冲液选自NaAc-HAc、NaH2PO4-Na2HPO4、KH2PO4-K2HPO4;;和/或,所述氧化剂选自高碘酸钠、高碘酸钾;和/或,所述还原剂选自乙二醇、亚硫酸氢钠。所述的制备方法中,其中多糖单体与氧化剂的摩尔比介于0.01-100。其中反应温度介于4-90℃。其中氧化时间介于0.1-72h。其中反应溶剂选自水,或不同pH的(pH1-pH14)溶液中,该溶液包括醋酸、磷酸、氢氧化钠等溶液。
所述的胍类降糖药-多糖共轭物胍类降糖药-多糖共轭物作为非病毒基因载体的应用。
所述的胍类降糖药-多糖共轭物在用于治疗Ⅱ型糖尿病药物中的应用。
所述的胍类降糖药-多糖共轭物,用作治疗型聚合物前药,通过静脉注射,腹腔注射,粘膜给药或肺部吸入给药。
胍类降糖药-多糖共轭物/基因复合物的制备方法,步骤如下:将上述胍类降糖药-多糖共轭物用水配置成0.001%-10%的共轭物溶液,得到聚合物前药溶液;将治疗有效量的基因配置成0.001%-10%的基因溶液,与共轭物溶液混合,经涡旋处理,胍类降糖药-多糖共轭物与基因通过静电相互作用进行复合得到10-1000nm复合物溶液。
所述基因选自固醇调控元件结合蛋白基因(shSREBP-1a、shSREBP-1c或shSREBP-2)、瘦素基因(leptin cDNA)、胰岛素基因(insulin gene)、胰高糖素样肽-1基因(GLP-1gene)、钙响应性激酶基因(shCaMKII)。
具体方案如下:
多糖按照上述的氧化方法进行反应,进一步在氧化多糖上引入胍类降糖药,使其荷更多的正电,在水溶液中可以通过静电相互作用与基因形成复合物。因此该胍类降糖药-多糖共轭物即是一种优良的聚合物前药,又是一种良好的传递基因的载体材料。该共轭物可用于静脉注射,腹腔注射,粘膜给药或肺部给药。该共轭物与基因形成的复合物,粒径在10-1000nm,均匀度好,再分散性好,载药量和载基因量高。
胍类降糖药-多糖共轭物的合成、表征及其与基因形成复合物的制备方法、表征及其细胞药效考察详细说明如下:
一、胍类降糖药-多糖共轭物的合成
1.氧化多糖的合成
取一定量的多糖和氧化剂分别溶解于25mL弱酸缓冲液中,在4℃通N2条件下溶解,然后将氧化剂溶液慢慢滴加到多糖溶液中,在4℃下继续搅拌48h后,加入过量的还原剂终止反应,将所得产物用透析袋分别在含0.2M NaCl的弱酸缓冲液和去离子水中透析;最后将产品冻干,保存在-20℃下备用。
2.胍类降糖药-多糖共轭物的合成
将胍类降糖药加到一定质量浓度的多糖溶液中,4℃下搅拌反应48h后,用截留分子量3500的透析袋在去离子水中透析,冻干,将终产物保存在-20℃下备用。
本发明与传统治疗糖尿病的基因载体相比具有以下特点:
本发明制备胍类降糖药-多糖共轭物,作为非病毒载体,合成方法简单,反应步骤少,产率高,环境污染少。
二、胍类降糖药-多糖共轭物的表征及毒性考察
1.胍类降糖药-多糖共轭物的表征方法
本发明制备胍类降糖药-多糖共轭物,可通过氢核磁鉴定结构及凝胶渗透色谱测定分子量进行表征。
2.胍类降糖药-多糖共轭物的毒性考察
胍类降糖药-多糖共轭物的细胞毒性具体测定方法是:采用不同的细胞系评价胍类降糖药-多糖共轭物的细胞毒性。将细胞按1×104个细胞/孔的量接种在96孔平底板中,在37℃下,5%CO2培养箱,于DMEM培养基中培养18h后,加入用不同浓度的共轭物继续培养一定时间后,再加入20μLMTS,培养4h后,用酶标仪在490nm检测吸光值。
三、胍类降糖药-多糖共轭物与基因的复合物的制备方法
所有的胍类降糖药-多糖共轭物/基因复合物均是新鲜制备,具体方法是,将含基因溶液加到等体积下的共轭物溶液中,轻轻地涡旋1min,室温下保持30min。其中,基因选自固醇调控元件结合蛋白基因(shSREBP-1a、shSREBP-1c或shSREBP-2),瘦素基因(leptin cDNA),胰岛素基因(insulingene),胰高糖素样肽-1基因(GLP-1gene),钙响应性激酶基因(shCaMKII);
四、胍类降糖药-多糖共轭物与基因的复合物的表征方法
1.胍类降糖药-多糖共轭物/基因粒径和电位表征。
将胍类降糖药-多糖共轭物10mg溶解于10ml水中,超声溶解,0.45μm滤膜过滤,作为储备液。分别将1mL含80μg的基因水溶液加入到等体积胍类降糖药-多糖共轭物水溶液中(其由储备液稀释制备,溶液中胍类降糖药-多糖共轭物与基因按不同的质量比配置),轻轻涡旋1min,室温下保持30min,用动态光散射分别测定其粒径和电位。
2.胍类降糖药-多糖共轭物对基因压缩和保护能力通过电泳表征。
共轭物/DNA的以不同的质量比,加入上样缓冲液,最后的体积为12μL。为了评价聚合物对DNA的保护能力,DNaseI作为降解酶。复合物被加到1%琼脂糖凝胶中,用TAE缓冲液作为电解质,50V下跑40min。
3、胍类降糖药-多糖共轭物/基因复合物的形貌通过透射电镜观察。
取1滴胍类降糖药-多糖共轭物/DNA复合物滴到铜网上,干燥10min,在电镜下观察其形态。
5、胍类降糖药-多糖共轭物/基因复合物转染效率考察
采用特定细胞系评价胍类降糖药-多糖共轭物/基因复合物的体外转染效率。将细胞按10×104个细胞/孔的量接种在24孔平底板中,在37℃下,5%CO2培养箱下,于DMEM培养基中培养18-24h后,吸取培养基,用无血清的含共轭物/pGL3复合物培养基孵育4h后,换用新鲜的含血清培养基,于37℃下培养一定时间。荧光素酶活性测定方法按照生产厂家的说明进行测定。用BCA蛋白测试试剂盒提取蛋白后,其浓度用酶标仪测定,再将每个样品荧光素酶活性进行标准化,考察转染效率。
6、胍类降糖药-多糖共轭物/基因复合物细胞药效考察
采用特定细胞系评价胍类降糖药-多糖共轭物/功能基因复合物的细胞药效。将细胞按30×104个细胞/孔的量接种在6孔平底板中,在37℃下,5%CO2培养箱下,于DMEM培养基中培养18-24h后,吸取培养基,将该细胞按30×104个细胞/孔的量接种在6孔平底板中,孵育18-24h后,吸取培养基,用含胍类降糖药-多糖共轭物/基因复合物的无血清培养基培养一定时间后,换用新鲜的含血清培养基,于37℃下继续孵育一定时间。蛋白和RNA的提取分别按照试剂盒的说明进行操作。用western blot检测细胞中的蛋白含量;逆转录RNA后,用q-PCR检测细胞中的mRNA含量。
有益效果:本发明提供的胍类降糖药-多糖共轭物,为基于生物相容性多糖载体材料,具有很低的细胞毒性;
本发明为基因与降糖药共递送系统,具有显著的转染效率;
本发明中药物的适应症:糖尿病,尤其适用于肥胖症的II型糖尿病;
本发明提供的胍类降糖药-多糖共轭物,既可作为单一治疗型高分子前药,又可作为基因递送的优良载体,与降糖药达到协同治疗的目的;
本发明制备的胍类降糖药-多糖共轭物能有效地与基因形成复合物,可用于静脉注射、腹腔注射、粘膜给药或肺部给药,具有安全性高,粒径控制在10-1000nm,在基因治疗领域具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为本发明实施例中的二甲双胍-壳聚糖的氢核磁表征;
图2为本发明实施例中的二甲双胍-壳聚糖的细胞毒性考察;
图3为二甲双胍-壳聚糖/DNA复合物的电位表征;
图4为二甲双胍-壳聚糖/DNA复合物的形态表征;
图5为二甲双胍-壳聚糖/基因复合物的细胞转染考察
图6为二甲双胍-壳聚糖/基因复合物的细胞药效考察。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作更进一步的说明。
实施例1
二甲双胍-壳聚糖的合成:
将0.209g壳聚糖和0.575g高碘酸钾分别溶解于25mL pH4.5的醋酸缓冲液中(分别含0.05mol/L的壳聚糖单体和0.1mol/L的高碘酸钠),在40℃下继续搅拌1h后,加入与高碘酸钾等摩尔的乙二醇终止反应,将所得产物用截留分子量3500的透析袋在分别在含0.2M NaCl的pH4.5醋酸缓冲液和去离子水中透析,冻干。称取一定量的氧化壳聚糖,溶解于1M的氢氧化钠溶液中,再加入一定量的二甲双胍(摩尔量为氧化壳聚糖单体摩尔量的2倍),4℃下搅拌反应48h后,用截留分子量3500的透析袋在去离子水中透析,冻干,将终产物保存在-20℃下备用。
实施例2
二甲双胍-壳聚糖的结构鉴定和分子量表征
如图1所示,二甲双胍-壳聚糖共轭物通过氢核磁鉴定结构。与壳聚糖2位碳上质子信号峰(用虚线标示)相比,壳聚糖-二甲双胍结构中壳聚糖2位碳上质子信号峰基本消失(δH=3.2ppm),说明该结构中壳聚糖上的C-C键成功的被高碘酸钾氧化断裂,通过壳聚糖-二甲双胍1H NMR图谱,分别显示了二甲双胍(δH=3.0ppm;-N(CH3)2)及壳聚糖(δH=2.0ppm;-COCH3)的特征信号峰,进一步表明壳聚糖-二甲双胍的形成.
壳聚糖-二甲双胍分子量通过凝胶渗透色谱检测:柱温为25℃,流速0.5mL/min,流动相为0.5M乙酸铵溶液。壳聚糖原料分子量为100kDa,氧化后其重均分子量为19.01kDa,接枝二甲双胍后,形成的壳聚糖-二甲双胍重均分子量为28.82kDa。
实施例3
二甲双胍-壳聚糖的细胞毒性考察
采用L02和HepG2细胞系评价根据实施例1合成的二甲双胍-壳聚糖的细胞毒性。L02和HepG2细胞分别为人正常肝细胞和人肝癌细胞。将这两种细胞以1×104个细胞/孔的量接种在96孔平底板中,在37℃,5%CO2培养箱中,用DMEM培养基孵育18h后,用不同浓度的聚合物处理24h后,用20μL MTS溶液处理4h后,用酶标仪检测其在490nm下的吸光值。如图2所示,在浓度0-100μg/ml范围内,二甲双胍-壳聚糖对L02和HepG2均无细胞毒性。
实施例4
二甲双胍-壳聚糖与基因复合物的制备
将实施例1二甲双胍-壳聚糖10mg溶解于10ml水中,超声溶解,0.45μm滤膜过滤,作为储备液。分别将1mL含80μg的基因水溶液加入到等体积二甲双胍-壳聚糖共轭物水溶液中(其由储备液稀释制备,溶液中二甲双胍-壳聚糖共轭物与基因的质量比分别为1:1,1:5,1:10,1:20,1:30),轻轻涡旋1min,室温下保持30min,用动态光散射测定复合物的大小和表面电荷。如图3所示,二甲双胍-壳聚糖基因复合物的粒径随质量比的增大而减小,电荷随质量比的增大而增大,最后二甲双胍-壳聚糖基因复合物的粒径和电荷均趋于稳定,约100nm和20mV。
实施例5
二甲双胍-壳聚糖共轭物对DNA压缩和保护能力通过电泳表征
将二甲双胍-壳聚糖与DNA按不同质量比(0.5-30)复合,然后将该复合物于50V条件下在1%琼脂糖凝胶上跑40min,结果表明二甲双胍-壳聚糖共轭物在质量比5:1条件下对DNA就有结合能力。为了评价该共轭物对DNA的保护能力,将质量比为5:1的二甲双胍-壳聚糖/DNA复合物与DNaseI酶复合30min后,用EDTA将酶失活,然后用SDS解离二甲双胍-壳聚糖/DNA,于于50V条件下在1%琼脂糖凝胶上跑40min,通过电泳考察二甲双胍-壳聚糖共轭物对DNA的结合能力50V下跑40min,结果表明二甲双胍-壳聚糖共轭物对DNA有很好的保护能力。
实施例6
二甲双胍-壳聚糖/基因复合物的表征
如图4所示,通过透射电镜观察按实施例4合成的二甲双胍-壳聚糖共轭物/DNA复合物的形貌。取1滴二甲双胍-壳聚糖共轭物/DNA复合物滴到铜网上,干燥10min,在电镜下观察,二甲双胍-壳聚糖/基因复合物呈类球形。
实施例7
二甲双胍-壳聚糖/基因复合物的细胞转染考察
采用L02和HepG2细胞系评价根据实施例1合成的二甲双胍-壳聚糖的体外转染效率。L02和HepG2细胞分别为人正常肝细胞和人肝癌细胞,在37℃下,5%CO2培养箱(Thermo Scientific)下,于DMEM培养基中培养。将两种细胞按10×104个细胞/孔的量接种在24孔平底板中,孵育18h后,吸取培养基,用含共轭物/pGL3复合物无血清培养基继续孵育4h,之后换用含血清的培养基,于37℃下培养24h后测定荧光素酶活性。其测定方法按照生产厂家的说明进行。如图5所示,用BCA蛋白测试试剂盒提取蛋白后,其浓度用酶标仪测定。最后将每个样品荧光素酶活性进行标准化,考察转染效率。结果表明甲双胍-壳聚糖/DNA复合物相对于壳聚糖/DNA复合物,在L02和HepG2细胞中均有很高的基因转染效率。
实施例8
二甲双胍-壳聚糖/基因复合物的细胞药效考察
采用L02细胞系评价根据实施例1合成的二甲双胍-壳聚糖载功能基因的细胞药效。L02为人正常肝细胞,在37℃下,5%CO2培养箱(ThermoScientific)下,于DMEM培养基中培养。将该细胞按30×104个细胞/孔的量接种在6孔平底板中,孵育18h后,吸取培养基,用含共轭物/shSREBP-1c复合物的无血清培养基继续培养24h。之后换用新鲜的含血清培养基,于37℃下培养24h。蛋白和RNA的提取分别按照试剂盒的说明进行提取。用western blot检测细胞中的AMPK、pAMPK及SREBP-1c的蛋白含量;用q-PCR检测细胞中的SREBP-1c的mRNA含量。如图6所示,结果表明,二甲双胍-壳聚糖/shSREBP-1c复合物能使L02细胞中的AMPK磷酸化,即提高pAMPK蛋白含量,同时该复合物下调SREBP-1c的蛋白含量,其相应的SREBP-1c的mRNA含量也降低。
其他胍类降糖药-多糖共轭物,因为胍类降糖药、多糖的物理化学性质相似,因此根据列举的实施例可以看出,都是可以实现和达到的。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出:对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种胍类降糖药-多糖共轭物,其特征在于:所述胍类降糖药-多糖共轭物为多糖氧化产生的醛基与胍类降糖药上的伯胺反应通过西弗碱键连接。
2.根据权利要求1所述的胍类降糖药-多糖共轭物,其特征在于:其中,胍类降糖药选自二甲双胍、丁双胍和苯乙双胍;
多糖选自壳聚糖、壳寡糖、葡聚糖、透明质酸、肝素、软骨素、琼脂糖、海藻酸中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的胍类降糖药-多糖共轭物,其特征在于:所述胍类降糖药-多糖共轭物为二甲双胍-壳聚糖。
4.一种胍类降糖药-多糖共轭物的制备方法,包括以下步骤:
1)氧化多糖的合成:将多糖溶于水或弱酸缓冲液中,然后加入一定量的氧化剂,反应温度4-90 ℃下搅拌适宜时间,过滤后加入过量还原剂继续搅拌一段时间,之后用水充分透析,冻干得粉末固体的氧化多糖;
2)称取适量氧化多糖固体溶于一定溶剂后,加入胍类降糖药,搅拌适宜时间,透析冻干即得到共轭物。
5.根据权利要求4所述的胍类降糖药-多糖共轭物的制备方法,其特征在于:所述弱酸缓冲液选自NaAc-HAc、NaH2PO4-Na2HPO4、KH2PO4-K2HPO4;;和/或,所述氧化剂选自高碘酸钠、高碘酸钾;和/或,所述还原剂选自乙二醇、亚硫酸氢钠。
6.权利要求1-5所述的胍类降糖药-多糖共轭物胍类降糖药-多糖共轭物作为非病毒基因载体的应用。
7.权利要求1-5所述的胍类降糖药-多糖共轭物在用于治疗Ⅱ型糖尿病药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的胍类降糖药-多糖共轭物,用作治疗型聚合物前药,通过静脉注射,腹腔注射,粘膜给药或肺部吸入给药。
9.胍类降糖药-多糖共轭物/基因复合物的制备方法,步骤如下:将上述胍类降糖药-多糖共轭物用水配置成0.001%-10%的共轭物溶液,得到聚合物前药溶液;将治疗有效量的基因配置成0.001%-10%的基因溶液,与共轭物溶液混合,经涡旋处理,胍类降糖药-多糖共轭物与基因通过静电相互作用进行复合得到10-1000nm复合物溶液。
10.根据权利要求9所述的胍类降糖药-多糖共轭物/基因复合物的制备方法,其特征在于:所述基因选自固醇调控元件结合蛋白基因、瘦素基因、胰岛素基因、胰高糖素样肽-1基因、钙响应性激酶基因。
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410259274.2A CN103977422B (zh) | 2014-06-11 | 2014-06-11 | 胍类降糖药-多糖共轭物及其制备方法和用途 |
PCT/CN2014/082486 WO2015188423A1 (zh) | 2014-06-11 | 2014-07-18 | 胍类降糖药-多糖共轭物及其制备方法和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410259274.2A CN103977422B (zh) | 2014-06-11 | 2014-06-11 | 胍类降糖药-多糖共轭物及其制备方法和用途 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103977422A true CN103977422A (zh) | 2014-08-13 |
CN103977422B CN103977422B (zh) | 2016-03-02 |
Family
ID=51269741
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201410259274.2A Active CN103977422B (zh) | 2014-06-11 | 2014-06-11 | 胍类降糖药-多糖共轭物及其制备方法和用途 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103977422B (zh) |
WO (1) | WO2015188423A1 (zh) |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105056240A (zh) * | 2015-07-21 | 2015-11-18 | 中国药科大学 | pH响应性一体双能纳米载体及其制备方法和用途 |
CN108434191A (zh) * | 2018-05-18 | 2018-08-24 | 广东药科大学 | 一种具有减肥降糖降脂作用的组合物及其制备方法 |
CN110935031A (zh) * | 2018-09-25 | 2020-03-31 | 天津大学 | 壳寡糖双胍衍生物在制备治疗胰岛缺陷药物中的应用 |
CN111068070A (zh) * | 2018-10-19 | 2020-04-28 | 复旦大学 | 一种用于非酒精性脂肪肝病的纳米基因药物及其制备方法 |
CN113930454A (zh) * | 2021-11-26 | 2022-01-14 | 南通大学 | 壳聚糖-聚二甲双胍在作为基因转染试剂方面的应用 |
CN115177794A (zh) * | 2022-07-14 | 2022-10-14 | 中南大学湘雅三医院 | 一种氧化葡聚糖-二甲双胍高分子可注射水凝胶的制备方法及其应用 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102675651A (zh) * | 2012-04-20 | 2012-09-19 | 常州华联保健敷料有限公司 | 抗菌敷料用壳聚糖水凝胶的制备方法 |
-
2014
- 2014-06-11 CN CN201410259274.2A patent/CN103977422B/zh active Active
- 2014-07-18 WO PCT/CN2014/082486 patent/WO2015188423A1/zh active Application Filing
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102675651A (zh) * | 2012-04-20 | 2012-09-19 | 常州华联保健敷料有限公司 | 抗菌敷料用壳聚糖水凝胶的制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
KAI LIU ET AL.: "Synergistic effects of guanidine-grafted CMC on enhancing antimicrobial activity and dry strength of paper", 《CARBOHYDRATE POLYMERS》 * |
TAE-HEE KIM ET AL.: "Chemical modification of chitosan as a gene carrier in vitro and in vivo", 《PROGRESS IN POLYMER SCIENCE》 * |
姜虎林: "生物相容性高分子基因载体的研究进展", 《中国药科大学学报》 * |
Cited By (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105056240A (zh) * | 2015-07-21 | 2015-11-18 | 中国药科大学 | pH响应性一体双能纳米载体及其制备方法和用途 |
CN105056240B (zh) * | 2015-07-21 | 2017-11-28 | 中国药科大学 | pH响应性一体双能纳米载体及其制备方法和用途 |
CN108434191A (zh) * | 2018-05-18 | 2018-08-24 | 广东药科大学 | 一种具有减肥降糖降脂作用的组合物及其制备方法 |
WO2019218538A1 (zh) * | 2018-05-18 | 2019-11-21 | 广东药科大学 | 一种具有减肥降糖降脂作用的组合物及其制备方法和用途 |
CN108434191B (zh) * | 2018-05-18 | 2020-10-23 | 广东药科大学 | 一种具有减肥降脂作用的组合物及其制备方法 |
CN110935031A (zh) * | 2018-09-25 | 2020-03-31 | 天津大学 | 壳寡糖双胍衍生物在制备治疗胰岛缺陷药物中的应用 |
CN111068070A (zh) * | 2018-10-19 | 2020-04-28 | 复旦大学 | 一种用于非酒精性脂肪肝病的纳米基因药物及其制备方法 |
CN111068070B (zh) * | 2018-10-19 | 2022-11-08 | 复旦大学 | 一种用于非酒精性脂肪肝病的纳米基因药物及其制备方法 |
CN113930454A (zh) * | 2021-11-26 | 2022-01-14 | 南通大学 | 壳聚糖-聚二甲双胍在作为基因转染试剂方面的应用 |
CN115177794A (zh) * | 2022-07-14 | 2022-10-14 | 中南大学湘雅三医院 | 一种氧化葡聚糖-二甲双胍高分子可注射水凝胶的制备方法及其应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN103977422B (zh) | 2016-03-02 |
WO2015188423A1 (zh) | 2015-12-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103977422B (zh) | 胍类降糖药-多糖共轭物及其制备方法和用途 | |
CN110801431B (zh) | 一种核-壳型智能纳米递送系统的构建及应用 | |
Chen et al. | Microneedle patches loaded with nanovesicles for glucose transporter-mediated insulin delivery | |
CN102260356B (zh) | 一种用作基因载体的壳聚糖衍生物及其制备方法和用途 | |
CN111632153B (zh) | 一种化学基因药物共载的靶向纳米递药系统及其制备方法 | |
CN110183613A (zh) | 一种两亲性共聚物及其纳米胶束系统的制备与应用 | |
CN101130086A (zh) | 用聚乙烯亚胺修饰壳聚糖制备基因给药载体的方法 | |
Wang et al. | Glycopolypeptide nanocarriers based on dynamic covalent bonds for glucose dual-responsiveness and self-regulated release of insulin in diabetic rats | |
CN102140171B (zh) | 用作非病毒基因载体材料的谷胱甘肽修饰壳聚糖共聚物及其制备和应用 | |
CN108329404B (zh) | 一种ir-780碘化物-壳聚糖硬脂酸嫁接物及制备与应用 | |
Wu et al. | Glucose-sensitive nanoparticles based on poly (3-acrylamidophenylboronic acid-block-n-vinylcaprolactam) for insulin delivery | |
US11331277B2 (en) | H2O2-responsive nanoparticles and uses thereof | |
CN104491844A (zh) | 一种胰岛素缓释口服制剂的制备方法 | |
CN102309760A (zh) | 一种阳离子型两亲性壳聚糖纳米药物载体及其制备和应用 | |
CN103992483A (zh) | 一种具有糖、温度和pH三重敏感性的药物输送材料及其制备方法 | |
CN107296962A (zh) | 化药/基因共转运功能化碳纳米管的制备方法及应用 | |
CN106750416A (zh) | 一种拥有自愈合和pH响应性能的可注射水凝胶及其制备方法和应用 | |
CN105906815A (zh) | 微环境双重响应壳聚糖基因载体及其制备方法和应用 | |
CN104173282B (zh) | 基于聚磷酸酯的叶酸靶向酸敏感核交联载药胶束及其制备方法 | |
CN109876154B (zh) | 一类枸杞多糖修饰的纳米粒子制备及其抗肿瘤活性研究 | |
CN104231265A (zh) | 脂肪烃基接枝的低分子量聚乙烯亚胺、制备方法及应用 | |
CN106619568A (zh) | 一种铂纳米晶复合纳米材料的制备方法及产品 | |
CN109662956A (zh) | 一种齐墩果酸接枝的壳聚糖载药纳米颗粒的应用 | |
CN102030908A (zh) | 聚乙烯亚胺接枝瓜尔胶阳离子聚合物及其制备方法和应用 | |
CN103320471B (zh) | 一种非病毒基因载体及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |