CN1038818A - 口服药物牛滕多糖的生产方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种从中药牛膝中提取牛膝多糖的方法，包括将生药牛膝洗涤、干燥、用水浸泡、透析、离心和浓缩干燥。用本方法生产的牛膝多糖数均分子量小于30000，无毒副作用，可用于医治肿瘤、肝炎等疾病，还具有免疫功能，可作为抗衰老保健药物。用本发明方法生产牛膝多糖，不仅产率高，而且工艺简便，适宜工业生产。

Description

本发明涉及从中草药中药物技术的领域，具体地说是一种从中药牛膝中提取牛膝多糖的方法。

中药牛膝是一种传统的中药，具有“补肝肾，强筋骨，止腰膝酸麻”和“活血化瘀、补肾填精、治疗风湿”的功效。虽然曾报导了牛膝中的无机组份（J.Pharm.Soc.Japan，48，1098，1928），含有齐墩果酸（J.Indian        Chem.Soc，35，529，1958）、三萜皂甙（Arch.pharm.，289，162，1956）、脱皮甾酮（Ecdysterone）和因闹考甾酮（Experientia，27，504，1971;医学中央杂志（日），259，68，1970）。但关于牛膝多糖还罕见报导，田庚元等首次报导了从中药牛膝中提取牛膝多糖（Achyranthes        polysauharide）的方法（CN        88105524.7），将生药牛膝的浸泡液用有机溶剂进行二级分级沉淀制得粗牛膝多糖产物，再经精制获精制品，适用于注射用药，具有显著增强免疫功能、保护肝脏、抑制肿瘤生长和具有显著增强机体免疫的功能。但是最大限度地从牛膝中提取具有免疫活性的牛膝多糖的简便生产方法仍是重要的课题。

本发明目的是提供一种方法简便、产率高和适用于工业化的牛膝多糖的生产方法。同时，由于口服用药剂量通常比注射的剂量要大得多，所以提高产率，简化方法以适应口服药物牛膝多糖的生产需要。

本发明的方法是将生药牛膝洗涤、干燥、用水浸泡，最好维持一定的pH值以提高浸出率，浸泡液可采用透析、离心分离法进行提取，浓缩干燥后即得口服牛膝多糖。

本发明的方法进一步描述是将生药牛膝洗涤，干燥，为提高浸出率，最好再经切片或粉碎，然后用二倍或二倍重量以上的水浸泡，所述的水最好是无离子水，如蒸馏水、离子交换水等。水用量过低将影响产率，而水用量过高将造成原料、时间、或能源的浪费，所以推荐重量比是牛膝∶水＝1∶2-10。浸泡液最好用碱或碱的水溶液调节pH至6.0-8.0，以提高浸出率，所述的碱最好是一价金属离子的氢氧化物、氧化物、碳酸盐和醋酸盐，以及氢氧化铵。浸泡时间等于或大于10小时，而以10-72小时为宜，更短的浸泡时间将影响浸出率，当然可以采用更长的浸泡时间，这对浸出率无影响。浸泡后过滤，滤去残渣，滤液用对流水进行透析，透析时间等于或大于16小时，推荐透析时间为16-72小时。透析时间太短，则小分子物质残留量多，影响产品的质量，但透析时间太长，则会导致产率降低。透析后离心除去不溶物，上清液干燥或先浓缩再干燥获牛膝多糖。

本发明方法中所述的透析最好采用透析膜、透析袋及超滤膜等。透析膜等的孔径最好控制在分子量1000以下。

本发明方法中所述的干燥、浓缩，最好在等于或小于60℃时进行，以便保持产物的生物活性。推荐采用低温真空浓缩或冷冻干燥。

用本发明方法获得的口服牛膝多糖，其外观为微黄色疏松固体，具有水溶性好，数均分子量小于3000，比旋度为负值，由葡萄糖和甘露糖所组成，其克分子比为1.0∶0.5～0.7。

用本发明方法获得的口服牛膝多糖，口服LD50大于20克/公斤，给大鼠以极限剂量5克/公斤连续口服3个月，也无毒付作用。药理研究表明它具有明显的增强机体免疫功能的作用;它能升高血清溶血素和脾脏内抗体形成细胞数，提高血清免疫球蛋白IgG水平，激活网状内皮系统的吞噬功能，增加血清补体C₃的含量，促进白细胞介素-1和白细胞介素-2的生成，增强T细胞和B细胞的免疫功能，还能使肝细胞膜、对抗脂质过氧化物的生成，此外还能抑制小鼠S-180肉瘤的生长。因此可长期服用，作为治疗肿瘤和肝炎等疾病的免疫药物，也可以作为抗衰老保健药品。具有分子量小，水溶性好，人体易吸收等特点。

用本发明方法2可获得的口服牛膝多糖，而且工艺简单、产率高，得到的牛膝多糖可达到生药的8-10%，适宜工业生产。

为了对本发明的进一步理解，提供下述实施例加以说明

实施例1

将生药牛膝2公斤洗净、干燥、切成片状，然后用1000毫升蒸馏水浸泡，并用1N碳酸钠溶液不断调节浸泡液pH，保持中性，浸泡30小时后，滤去残渣，滤液用透析纸包扎后对水进行透析50小时，然后离心除去不溶物，上清液经浓缩后可直接真空干燥或冷冻干燥，即得口服用牛膝多糖约180克。元素分析结果不含氮、磷和硫。用原子吸收分光光度法测定结果也不含Hg、Pb、As、Cd等重金属离子。

本方法所得牛膝多糖在远紫外区202nm有一吸收峰，比旋度为负值、红外光谱表明在810cm^-1，870cm^-1和930cm^-1处有特征吸收，其中890cm^-1和870cm^-1为甘露糖特征吸收，930cm^-1为D-吡喃葡萄糖环的振动吸收。核磁共振¹H-NMR质子信号集中在3.0-5.0ppm处，只在5.30ppm处有一小峰，¹³C-NMR在104.2-105.2ppm处有6个峰。

实施例2

将1公斤生药牛膝粉，用3公斤离子交换水浸泡，并用氢氧化铵调节浸泡液pH至7.8，浸泡20小时后滤去残渣，滤液置于透析袋内用对流水进行透析，透析时间25小时，离心后取上清液干燥获牛膝多糖80克。

Claims (10)

1、一种从生药牛滕中生产口服药物牛滕多糖的生产方法，包括生药洗涤、干燥、浸泡、透析、离心和浓缩干燥，其特征是将干燥后的生药牛滕经切片或粉碎，用二倍或二倍以上重量的水浸泡，浸泡液用碱或碱的水溶液调节pH至6.0-8.0，浸泡时间等于或大于10小时，过滤，滤液用对流水进行透析，透析时间等于或大于16小时，透析后离心，取上清液干燥或先浓缩再干燥。

2、如权利要求1所述的生产口服药物牛膝多糖的生产方法，其特征是所述的干燥后的生药牛膝不经切片或粉碎。

3、如权利要求1和2所述的生产口服药物牛膝多糖的生产方法，其特征是生药牛膝与浸泡水的重量比是牛膝∶水＝1∶2-10。

4、如权利要求1和2所述的生产口服药物牛膝多糖的生产方法，其特征是所述的碱是一价金属离子的氢氧化物、氧化物、碳酸盐、醋酸盐及氢氧化铵。

5、如权利要求1和2所述的生产口服药物牛膝多糖的生产方法，其特征是水浸泡时间为10-72小时。

6、如权利要求1和2所述的生产口服药物牛膝多糖的生产方法，其特征是所述的浸泡用的水是无离子水。

7、如权利要求1和2所述的生产口服药物牛膝多糖的生产方法，其特征是透析时间为16-72小时。

8、如权利要求1和2所述的生产口服药物牛膝多糖的生产方法，其特征是透析时用透析膜、透析袋及超滤膜，其孔径最好控制在分子量1000以下。

9、如权利要求1和2所述的口服药物牛膝多糖的生产方法，其特征是透析后的上清液的干燥或浓缩的温度是等于或小于60℃时进行，最好采用低温真空浓缩或冷冻干燥。

10、如权利要求1、2所述的生产口服药物牛膝多糖的生产方法，其特征是不用所述的碱或碱的水溶液调节浸泡液的pH。