CN115677873A - 一种银耳多糖及其制备延缓衰老组合物的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种银耳多糖及其制备延缓衰老组合物的用途,银耳粉加入到盐酸溶液中处理;再加入水中,并加入复合酶酶解,将酶解后的银耳粉,加入去离子水提取2次,过滤收集上清液下离心、浓缩,浓缩液加入95%乙醇冷藏,冷冻干燥研磨得到粗多糖粉末;向粗多糖溶液加入乙醇‑硫酸铵混合溶液,将双水相体系两相分离并萃取,得到浸提液;然后超滤分级;冷冻干燥,得到银耳纯多糖。本发明提供的制备方法,提高了了银耳多糖提取效率,产品的纯度高,避免了对多糖活性的损害。提供的抗衰老组合物,银耳多糖具有增强免疫力、增强免疫系统的调节能力等功效,从而起到抗衰老美容的作用。
Description
技术领域
本发明涉及到一种银耳多糖及其制备延缓衰老组合物的用途,属于多糖技术领域。
背景技术
银耳,是药食两用的传统中药材,味甘、淡,性平、无毒,具有提高免疫调节能力,辅助抑制肿瘤,延缓衰老,调节血糖、血脂,保护胃黏膜,抗辐射等功能。银耳多糖为银耳主要的功效成分,不同的原料来源、加工工艺制备的银耳多糖在分子量、单糖组成、糖苷键的连接方式等方面存在差异,其表现出来的生物活性不同。
银耳多糖的提取方法,目前主要有酸水解法、过氧化氢氧化降解、酶解、机械力物理降解等方法,制备低分子量银耳多糖或其低聚糖。然而,现有技术只在提取过程中进行低分子量银耳多糖的制备,虽然生产成本较低,但产品分子量分布不均一,产品活性被破坏、提取率低等问题。
发明内容
针对上述现有技术中存在的技术问题,本发明提供一种银耳多糖及其制备延缓衰老组合物的用途,提高产品的品质和原料的提取率。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的:
一种银耳多糖的制备方法,包括以下步骤:
S1:银耳的预处理
银耳在40-50℃烘干,粉碎至60目得到银耳粉;
银耳粉加入到浓度0.5-1.2 mol/L盐酸溶液中,用量比按照质量份数为,10-30份银耳粉,20-60份盐酸溶液;搅拌均匀,处理4-8h,将处理后的银耳粉抽滤,水洗,直到水洗液的pH为中性;
再加入60-120份的水中,并加入复合酶在45-55℃条件下酶解1.5-2.5h,然后酶灭活;
S2:多糖浸提
将酶解后的银耳粉,每次再加入100-150份去离子水,在50-60℃条件下提取2次,每次1-3h,合并两次的提取液,过滤收集上清液;
在6000-8000r/min条件下离心10-15min,获得的上清液,在50-60℃条件下浓缩,浓缩至提取液总体积的1.5-2.5%;
浓缩液加入质量份数75-155份的体积浓度95%乙醇,搅拌均匀,4℃条件下冷藏8-12h,取出后在4500-5000r/min条件下离心,收集沉淀并冷冻干燥2天,研磨得到粗多糖粉末;
S3:多糖提纯
用55-65℃水溶解,得到浓度为1-5mg/mL的粗多糖溶液;
向粗多糖溶液加入乙醇-硫酸铵混合溶液,置于漩涡混合器内充分混合,然后静置至,直到上下相体积不再发生变化,将双水相体系两相分离并萃取,萃取结束后将两相分离,保留下相物质,得到浸提液;
S4:超滤分级
浸提液用截留分子量为100 KDa超滤膜超滤,收集透过液;超滤压力0.6-1.5 Mpa,当多糖溶液体积超滤浓缩至浸提液体积的1/4,向浓缩液中补3/4浸提液体积的蒸馏水,继续超滤至浓缩液体积恢复为补水前体积,同样方法重复补水,直至总补水体积为浸提液体积的25倍;
收集的透过液再进行截留分子量为10 KDa超滤膜超滤,收集浓缩液;超滤压力0.8-1.2 Mpa,当透过液体积浓缩至浸提液体积的1/8-1/4时,停止超滤;
冷冻干燥,得到银耳纯多糖。
所述的乙醇-硫酸铵混合溶液中乙醇和硫酸铵的质量比20-30:15-25。
所述复合酶为蛋白酶、纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为0.5:1.1:1.8。
所述复合酶的用量为银耳粉质量的0.05-0.15%。
本发明还包括所述方法制备得到的银耳多糖。
所述的银耳多糖在制备抗衰老组合物中的应用。
具体的,一种抗衰老组合物,包括所述的银耳多糖,还包括抗氧化活性肽、活性因子;所述的银耳多糖、抗氧化活性肽、活性因子按照质量份数为3-5:2-4:1-3;所述活性因子为丹参和银杏提取物。
进一步的,本发明提供一种银耳多糖的抗衰老面膜,由以下原料按照质量制成:20-40份的有效溶液和60-80份的面膜基液;
所述的有效溶液包括权利要求6所述的抗衰老组合物,还包括黄原胶和水,以质量份计,所述的抗衰老组合物的质量分数为4-8份,黄原胶的质量分数为0.5-3份,水80-92份,在40-80℃条件下混合5-8min;
所述的面膜基液,包括油相和水相,以质量份计,所述的油相为12-24份,所述的水相为48-56份;分别加热融化后混合乳化,加热融化温度为50-80℃,乳化时间为5-10min。
以质量份计,所述的油相包括甘油聚丙烯酸酯3-5份、甘油5-10份、聚二甲基硅氧烷2-5份、甘油聚醚-26 1-3份、乙基己基甘油0.30-0.50份;
以质量份计,所述水相包括甜菜碱4-7份、丙二醇4-7份、辛酸3-6份、海藻糖2-4份、1,2-己二醇0.01-0.02份、尿囊素2-4份、聚丙烯酸1-3份、三乙醇胺0.10-0.30份、透明质酸钠0.5-2份、燕麦肽0.5-1份、羟苯甲酯钠1-3份。
进一步的,本发明提供一种银耳多糖的抗衰老口服液,以质量份计,包括权利要求6所述的抗衰老组合物5-13份,还包括浓缩蔬菜汁或果汁8-12份、木糖醇5-8份、柠檬酸0.04-0.1份、山梨酸钾0.2-0.4份、桃胶0.10-0.15份、水50-58份。
本发明提供的一种银耳多糖及其制备延缓衰老组合物的用途,具有以下技术效果:
1、本发明提供的制备方法,通过乙醇、无机盐组成双水相提取体系,除去银耳多糖中的蛋白质,提高了了银耳多糖提取效率。
2、本发明提供的制备方法,分离纯化银耳多糖,工艺安全,并且产品的纯度高,纯度可以达到90-95%。
3、本发明提供的制备方法,避免了对多糖活性的损害,能够对多糖的活性进行最大化的保持。
4、本发明提供的抗衰老组合物,银耳多糖具有增强免疫力、增强免疫系统的调节能力等功效,作为护肤品的添加剂,具备吸湿保湿性,还能增加真皮和表皮水分渗透,保护皮肤,并且具有抗氧化性,提高角质层更新速度、改善皮肤紧密度、抵御紫外线,降低表面活性剂对皮肤的损伤等作用。作为食品添加剂,能够有清除自由基、延缓衰老、调节血糖血脂水平,从而起到抗衰老美容的作用。
具体实施方式
结合实施例说明本发明的具体技术方案。
实施例1
一种银耳多糖的制备方法,包括以下步骤:
S1:银耳的预处理
银耳在45℃烘干,粉碎至60目得到银耳粉;
银耳粉加入到浓度0.5mol/L盐酸溶液中,用量比按照质量份数为,12份银耳粉,55份盐酸溶液;搅拌均匀,处理8h,将处理后的银耳粉抽滤,水洗,直到水洗液的pH为中性;
再加入114份的水中,并加入复合酶在55℃条件下酶解1.5h,所述复合酶为蛋白酶、纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为0.5:1.1:1.8;所述复合酶的用量为银耳粉质量的0.05-0.15%;然后酶灭活;
S2:多糖浸提
将酶解后的银耳粉,每次再加入147份去离子水,在55℃条件下提取2次,每次2.5h,合并两次的提取液,过滤收集上清液;
在6000-8000r/min条件下离心15min,获得的上清液,在50℃条件下浓缩,浓缩至提取液总体积的1.5%;
浓缩液加入质量份数155份的体积浓度95%乙醇,搅拌均匀,4℃条件下冷藏10h,取出后在4500r/min条件下离心,收集沉淀并冷冻干燥2天,研磨得到粗多糖粉末;
S3:多糖提纯
用55℃水溶解,得到浓度为4.3mg/mL的粗多糖溶液;
向粗多糖溶液加入乙醇-硫酸铵混合溶液,所述的乙醇-硫酸铵混合溶液中乙醇和硫酸铵的质量比22:17;置于漩涡混合器内充分混合,然后静置至,直到上下相体积不再发生变化,将双水相体系两相分离并萃取,萃取结束后将两相分离,保留下相物质,得到浸提液;
S4:超滤分级
浸提液用截留分子量为100 KDa超滤膜超滤,收集透过液;超滤压力1.5 Mpa,当多糖溶液体积超滤浓缩至浸提液体积的1/4,向浓缩液中补3/4浸提液体积的蒸馏水,继续超滤至浓缩液体积恢复为补水前体积,同样方法重复补水,直至总补水体积为浸提液体积的25倍;
收集的透过液再进行截留分子量为10 KDa超滤膜超滤,收集浓缩液;超滤压力0.8Mpa,当透过液体积浓缩至浸提液体积的1/5倍时,停止超滤;
冷冻干燥,得到银耳纯多糖。
实施例2
一种银耳多糖的制备方法,包括以下步骤:
S1:银耳的预处理
银耳在40℃烘干,粉碎至60目得到银耳粉;
银耳粉加入到浓度0.6mol/L盐酸溶液中,用量比按照质量份数为,25份银耳粉,38份盐酸溶液;搅拌均匀,处理6h,将处理后的银耳粉抽滤,水洗,直到水洗液的pH为中性;
再加入80份的水中,并加入复合酶在45℃条件下酶解2.5h,所述复合酶为蛋白酶、纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为0.5:1.1:1.8;所述复合酶的用量为银耳粉质量的0.10%;然后酶灭活;
S2:多糖浸提
将酶解后的银耳粉,每次再加入150份去离子水,在60℃条件下提取2次,每次1h,合并两次的提取液,过滤收集上清液;
在6000r/min条件下离心15min,获得的上清液,在60℃条件下浓缩,浓缩至提取液总体积的2.5%;
浓缩液加入质量份数75份的体积浓度95%乙醇,搅拌均匀,4℃条件下冷藏8h,取出后在4500r/min条件下离心,收集沉淀并冷冻干燥2天,研磨得到粗多糖粉末;
S3:多糖提纯
用55℃水溶解,得到浓度为1mg/mL的粗多糖溶液;
向粗多糖溶液加入乙醇-硫酸铵混合溶液,所述的乙醇-硫酸铵混合溶液中乙醇和硫酸铵的质量比25:21;置于漩涡混合器内充分混合,然后静置至,直到上下相体积不再发生变化,将双水相体系两相分离并萃取,萃取结束后将两相分离,保留下相物质,得到浸提液;
S4:超滤分级
浸提液用截留分子量为100 KDa超滤膜超滤,收集透过液;超滤压力1 Mpa,当多糖溶液体积超滤浓缩至浸提液体积的1/4,向浓缩液中补3/4浸提液体积的蒸馏水,继续超滤至浓缩液体积恢复为补水前体积,同样方法重复补水,直至总补水体积为浸提液体积的25倍;
收集的透过液再进行截留分子量为10 KDa超滤膜超滤,收集浓缩液;超滤压力0.8-1.2 Mpa,当透过液体积浓缩至浸提液体积的1/6时,停止超滤;
冷冻干燥,得到银耳纯多糖。
实施例3
一种银耳多糖的制备方法,包括以下步骤:
S1:银耳的预处理
银耳在40℃烘干,粉碎至60目得到银耳粉;
银耳粉加入到浓度0.5mol/L盐酸溶液中,用量比按照质量份数为,30份银耳粉,60份盐酸溶液;搅拌均匀,处理8h,将处理后的银耳粉抽滤,水洗,直到水洗液的pH为中性;
再加入60份的水中,并加入复合酶在45℃条件下酶解2.5h,所述复合酶为蛋白酶、纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为0.5:1.1:1.8;所述复合酶的用量为银耳粉质量的0.05%;然后酶灭活;
S2:多糖浸提
将酶解后的银耳粉,每次再加入150份去离子水,在60℃条件下提取2次,每次1-3h,合并两次的提取液,过滤收集上清液;
在8000r/min条件下离心15min,获得的上清液,在60℃条件下浓缩,浓缩至提取液总体积的2.5%;
浓缩液加入质量份数75份的体积浓度95%乙醇,搅拌均匀,4℃条件下冷藏8h,取出后在4500r/min条件下离心,收集沉淀并冷冻干燥2天,研磨得到粗多糖粉末;
S3:多糖提纯
用55℃水溶解,得到浓度为5mg/mL的粗多糖溶液;
向粗多糖溶液加入乙醇-硫酸铵混合溶液,所述的乙醇-硫酸铵混合溶液中乙醇和硫酸铵的质量比20:25;置于漩涡混合器内充分混合,然后静置至,直到上下相体积不再发生变化,将双水相体系两相分离并萃取,萃取结束后将两相分离,保留下相物质,得到浸提液;
S4:超滤分级
浸提液用截留分子量为100 KDa超滤膜超滤,收集透过液;超滤压力1.5 Mpa,当多糖溶液体积超滤浓缩至浸提液体积的1/4,向浓缩液中补3/4浸提液体积的蒸馏水,继续超滤至浓缩液体积恢复为补水前体积,同样方法重复补水,直至总补水体积为浸提液体积的25倍;
收集的透过液再进行截留分子量为10 KDa超滤膜超滤,收集浓缩液;超滤压力0.82 Mpa,当透过液体积浓缩至浸提液体积的1/8时,停止超滤;
冷冻干燥,得到银耳纯多糖。
实施例4
提供一种银耳多糖的抗衰老面膜,由以下原料按照质量制成:27份的有效溶液和58份的面膜基液;
所述的有效溶液包括抗衰老组合物,还包括黄原胶和水,以质量份计,所述的抗衰老组合物的质量分数为7.4份,黄原胶的质量分数为1.4份,水87份,在50℃条件下混合5min;
其中,抗衰老组合物,包括所述的银耳多糖,还包括抗氧化活性肽、活性因子;所述的银耳多糖、抗氧化活性肽、活性因子按照质量份数为3.8:3.2:2.4;所述活性因子为丹参和银杏提取物。
所述的面膜基液,包括油相和水相,以质量份计,所述的油相为18.2份,所述的水相为52.6份;分别加热融化后混合乳化,加热融化温度为60℃,乳化时间为8min。
以质量份计,所述的油相包括甘油聚丙烯酸酯4.2份、甘油6.3份、聚二甲基硅氧烷2.3份、甘油聚醚-26 2.4份、乙基己基甘油0.41份;
以质量份计,所述水相包括甜菜碱5.1份、丙二醇6.2份、辛酸4.9份、海藻糖3.1份、1,2-己二醇0.01份、尿囊素2.7份、聚丙烯酸2.6份、三乙醇胺0.10份、透明质酸钠0.2份、燕麦肽0.8份、羟苯甲酯钠2.7份。
实施例5
提供一种银耳多糖的抗衰老口服液,以质量份计,包括抗衰老组合物13份,还包括浓缩蔬菜汁或果汁8份、木糖醇5份、柠檬酸0.04份、山梨酸钾0.4份、桃胶0.10份、水58份。
其中,抗衰老组合物,包括所述的银耳多糖,还包括抗氧化活性肽、活性因子;所述的银耳多糖、抗氧化活性肽、活性因子按照质量份数为4.3:2.4:1.2;所述活性因子为丹参和银杏提取物。
相关性能检测:
1.银耳多糖的提取率,计算公式为:
银耳多糖的提取率(%)=喷雾干燥得到的银耳多糖含量(g)/干银耳的质量(g)×100%
结果见表1,本发明的提取率基本保持在20%以上。
2.高温稳定性
分别将实施例1-3获得的银耳多糖在120℃高温蒸煮40min,分别测试高温蒸煮前后的动力粘度,并计算粘度的变化率:
粘度的变化率(%)=(初始动力粘度-高温蒸煮后动力粘度)/初始动力粘度×100%
其中,粘度的变化率在1-3%,记为优;粘度的变化率在3-8%(不包括3%)记为良,粘度大于8%记为差。结果见表1。
3.面膜试用
本发明实施例4的面膜进行用户评价,选择10名试用人员,试用人员具有不同年龄、性别分布,并且有化妆品基础知识,对化妆品的各项指标逐项评分。10名试用人员对面膜各项指标的给分情况如表2。
评价指标包括:光亮度,透明度,铺展性,保湿性,黏滞感,厚重感,滑爽度,黏起感;
评价等级:非常差0-2),略差2-4,一般4-6,较好6-8,极好8-9。
由此可知10名用户评价银耳多糖抗衰老面膜较好。
4、银耳多糖口服液试用
征集年龄18-65岁的志愿者100名,品尝本发明各实施例5制备得到的银耳多糖口服液半个月,每天两支,每支30ml,并评价其口感和试用效果。持续试用半个月后统计效果,对皮肤红润细腻、毛孔变小、精神饱满三个指标进行统计打分,评分等级标准为:非常差0-20,略差20-40,一般40-60,较好60-80,非常好80-100,具体如表3所示。
说明总体上试用人员对该口服液的效果是认可的。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而未脱离本发明技术方案的精神和范围,其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (10)
1.一种银耳多糖的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1:银耳的预处理
银耳在40-50℃烘干,粉碎至60目得到银耳粉;
银耳粉加入到浓度0.5-1.2 mol/L盐酸溶液中,用量比按照质量份数为,10-30份银耳粉,20-60份盐酸溶液;搅拌均匀,处理4-8h,将处理后的银耳粉抽滤,水洗,直到水洗液的pH为中性;
再加入60-120份的水中,并加入复合酶在45-55℃条件下酶解1.5-2.5h,然后酶灭活;
S2:多糖浸提
将酶解后的银耳粉,每次再加入100-150份去离子水,在50-60℃条件下提取2次,每次1-3h,合并两次的提取液,过滤收集上清液;
在6000-8000r/min条件下离心10-15min,获得的上清液,在50-60℃条件下浓缩,浓缩至提取液总体积的1.5-2.5%;
浓缩液加入质量份数75-155份的体积浓度95%乙醇,搅拌均匀,4℃条件下冷藏8-12h,取出后在4500-5000r/min条件下离心,收集沉淀并冷冻干燥2天,研磨得到粗多糖粉末;
S3:多糖提纯
用55-65℃水溶解,得到浓度为1-5mg/mL的粗多糖溶液;
向粗多糖溶液加入乙醇-硫酸铵混合溶液,置于漩涡混合器内充分混合,然后静置至,直到上下相体积不再发生变化,将双水相体系两相分离并萃取,萃取结束后将两相分离,保留下相物质,得到浸提液;
S4:超滤分级
浸提液用截留分子量为100 KDa超滤膜超滤,收集透过液;超滤压力0.6-1.5 Mpa,当多糖溶液体积超滤浓缩至浸提液体积的1/4,向浓缩液中补3/4浸提液体积的蒸馏水,继续超滤至浓缩液体积恢复为补水前体积,同样方法重复补水,直至总补水体积为浸提液体积的25倍;
收集的透过液再进行截留分子量为10 KDa超滤膜超滤,收集浓缩液;超滤压力0.8-1.2Mpa,当透过液体积浓缩至浸提液体积的1/8-1/4时,停止超滤;
冷冻干燥,得到银耳纯多糖。
2.根据权利要求1所述的一种银耳多糖的制备方法,其特征在于:所述的乙醇-硫酸铵混合溶液中乙醇和硫酸铵的质量比20-30:15-25。
3.根据权利要求1所述的一种银耳多糖的制备方法,其特征在于:所述复合酶为蛋白酶、纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为0.5:1.1:1.8。
4.根据权利要求3所述的一种银耳多糖的制备方法,其特征在于,所述复合酶的用量为银耳粉质量的0.05-0.15%。
5.根据权利要求1-4任一项所述方法制备得到的银耳多糖。
6.权利要求5所述的银耳多糖在制备抗衰老组合物中的应用。
7.一种抗衰老组合物,其特征在于,包括权利要求4所述的银耳多糖,还包括抗氧化活性肽、活性因子;所述的银耳多糖、抗氧化活性肽、活性因子按照质量份数为3-5:2-4:1-3;所述活性因子为丹参和银杏提取物。
8.一种银耳多糖的抗衰老面膜,其特征在于:由以下原料按照质量制成:20-40份的有效溶液和60-80份的面膜基液;
所述的有效溶液包括权利要求6所述的抗衰老组合物,还包括黄原胶和水,以质量份计,所述的抗衰老组合物的质量分数为4-8份,黄原胶的质量分数为0.5-3份,水80-92份,在40-80℃条件下混合5-8min;
所述的面膜基液,包括油相和水相,以质量份计,所述的油相为12-24份,所述的水相为48-56份;分别加热融化后混合乳化,加热融化温度为50-80℃,乳化时间为5-10min。
9.根据权利要求8所述的一种银耳多糖的抗衰老面膜,其特征在于:以质量份计,所述的油相包括甘油聚丙烯酸酯3-5份、甘油5-10份、聚二甲基硅氧烷2-5份、甘油聚醚-26 1-3份、乙基己基甘油0.30-0.50份;
以质量份计,所述水相包括甜菜碱4-7份、丙二醇4-7份、辛酸3-6份、海藻糖2-4份、1,2-己二醇0.01-0.02份、尿囊素2-4份、聚丙烯酸1-3份、三乙醇胺0.10-0.30份、透明质酸钠0.5-2份、燕麦肽0.5-1份、羟苯甲酯钠1-3份。
10.一种银耳多糖的抗衰老口服液,其特征在于:以质量份计,包括权利要求6所述的抗衰老组合物5-13份,还包括浓缩蔬菜汁或果汁8-12份、木糖醇5-8份、柠檬酸0.04-0.1份、山梨酸钾0.2-0.4份、桃胶0.10-0.15份、水50-58份。
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