KR101958210B1 - 두피 가려움증 개선용 복합 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 두피 가려움증 개선용 조성물에 관한 것으로서, 돈피분쇄균질물, 베타글루칸액, 히알루론산액, 실크펩타이드액 및 해양심층암반 미네랄수를 포함하는 피부보습용 복합물; 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소 및 녹차를 포함하는 천연물 복합추출물; 및 미네랄수를 유효성분으로 포함하는 두피 가려움증 개선용 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 저분자화된 혼합제제 및 천연물 복합추출물의 새로운 조합을 갖는 두피 가려움증 개선용 조성물은 피부 가려움증 개선 및 항염 효과, 두피의 피부보습효과가 뛰어날 뿐 아니라, 우수한 피부침투효과를 부여함으로써 피부 가려움증 개선 효과가 상승적이고 지속적으로 유도되는 우수한 효과가 있다.

Description

두피 가려움증 개선용 복합 조성물{Complex composition for improving itch of scalp}

본 발명은 두피 가려움증 개선 및 각질완화용 조성물에 관한 것이다.

가려움증은 긁고 싶어하는 불쾌감을 유발하는 피부상태를 일컫는 것으로, 아토피, 건선, 접촉성 피부염 혹은 민감성 피부질환에서 흔히 나타나는 증상이며 특히 민감성 피부질환은 피부 병변에 관한 어떤 임상적 또는 조직학적 증상이 없음에도 불구하고 화장품이나 비누, 샴푸와 같은 세정제 사용 후 감각적으로 불쾌한 가려움을 동반하게 된다.

또한, 가장 심한 가려움증을 유발하는 대표적인 질환이 바로 두피질환인데, 이는 과도한 비듬균 증식이나 두피 건조, 혹은 비누, 샴푸 사용 후 잔재하는 찌꺼기, 혹은 탈모와 함께 유발되는 가려움증 등으로 볼 수 있다.

대부분 두피가려움은 피부 소양 등으로 인해 급격히 피부가 건조해져서 발생하는 경우가 많기 때문에, 두피 건조를 예방하고 가려움증을 완화시키는 것이 무엇보다 필수적인데, 종래에는 스테로이드 제제 또는 이들에 항균 및 항염 기능을 강화한 물질들이 포함된 제제의 개발에 그쳐 두피가려움증의 근본적인 해결책이 되지 못하였으며, 대부분 샴푸와 같은 제제로서 계면활성제를 포함하고 있어 장기간 피부에 적용시 심각한 부작용을 발생시킬 염려가 있다는 문제가 있었다.

이에, 최근 들어 천연물을 이용한 피부 보습제 개발 등 아토피 피부염, 건선, 가려움증 등 피부 질환 개선에 효과가 있는 소재 발굴의 연구가 활발하게 이루어 지고 있고, 이와 관련된 선행기술로서 "자생 식물 및 천연 한약재 추출물을 함유한 샴푸 조성물(특허문헌 0001)", "두피 가려움증 예방 및 완화 워터프리 샴푸(특허문헌 0002)", "천연물 복합 발효 추출물을 유효성분으로 하는 피부 및 두피 상태 개선용 조성물(특허문헌 0003)", "인삼줄기 추출물을 함유하는 모발 및 두피상태 개선용 조성물(특허문헌 0004)" 및 "구상나무 추출물을 포함하는 모발과 두피상태 개선용 조성물(특허문헌 (0005)"이 있다.

그러나, 상기 선행기술들은 천연물의 부작용이 발생하여 소량으로 사용할 수 밖에 없거나 두피 가려움증 개선효과가 미미하고, 피부질환 치료의 가장 중요한 보습과 주된 난치성, 재발성 증상인 소양증 해결에 탁월한 효과를 갖는 제품은 거의 없는 실정이다.

한국 등록특허공보 제10-1478945호 한국 등록특허공보 제10-0899429호 한국 등록특허공보 제10-1373636호 한국 공개특허공보 제10-2012-0011872호 한국 공개특허공보 제10-2013-0140557호

본 발명은 상기와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 천연 한약재료 중에서 민감성, 자극성 및 반응성 두피를 안정화시키고, 두피의 가려움, 열감, 염증을 효과적으로 개선할 수 있는 천연 화합물을 개발하고자 노력하였다.

또한, 본 발명은 세포독성이 완화되고 두피 가려움증 개선효과가 있는 천연물 복합추출물, 돈피분쇄균질물을 함유하는 피부보습용 조성물 및 미네랄수를 유효성분으로 포함하여 두피 소양증의 근본적인 해결책이 될 수 있는 두피 가려움증 개선용 조성물을 제공하되, 두피의 수분보유력을 극대화시키고 지속적으로 유지할 수 있는 혼합비율을 개시함으로서 두피 가려움증 개선효과를 상승적으로 유도할 수 있는 조성물을 제공하고자 한다.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명에 의하면, 이하의 발명이 제공된다.

1) 유효성분으로서, (a) 돈피분쇄균질물, 1%(w/v)의 베타글루칸액, 1%(w/v)의 히알루론산액, 1%(w/v)의 실크펩타이드액 및 해양심층암반 미네랄수를 포함하는 피부보습용 복합물, (b) 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소 및 녹차를 포함하는 천연물 복합추출물 및 (c) 미네랄수를 함유하는, 두피가려움증 개선용 화장료 조성물.

2) 상기 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소 및 녹차의 중량비는 1: 1: 1: 2: 1: 1 인, 두피가려움증 개선용 화장료 조성물.

3) 피부보습용 복합물 1~2 중량부, 천연물 복합추출물 1~1.5 중량부 및 미네랄수 0.2~0.3 중량부를 포함하는, 두피가려움증 개선용 화장료 조성물.

4) 상기 피부보습용 복합물은 돈피분쇄균질물, 1%(w/v)의 베타글루칸액, 1%(w/v)의 히알루론산액, 1%(w/v)의 실크펩타이드액 및 해양심층암반 미네랄수를 25: 10: 10: 10: 0.33~0.66의 중량비로 혼합한 것을 전체 피부보습용 복합물 총 중량에 대하여 10 내지 12.5 중량%로 포함하는 것인, 두피 가려움증 개선용 화장료 조성물.

5) 상기 화장료 조성물은 헤어토닉, 모발 영양화장수, 헤어에센스, 헤어세럼, 두피트리트먼트, 헤어트리트먼트, 헤어컨디셔너, 헤어샴푸, 헤어로션으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는, 두피 가려움증 개선용 화장료 조성물.

6) 상기 유효성분 외에 약리학적으로 허용 가능한 부형제를 추가로 포함하는, 두피 가려움증 개선용 화장료 조성물.

7) 사람이나 사육 또는 애완동물에게 적용하기 위한, 조성물.

본 발명의 두피 가려움증 개선용 조성물에 의하면 천연 한방재료의 유효성분을 추가적으로 포함함으로써 민감성, 자극성 및 반응성 두피를 안정화시키고, 두피의 가려움, 열감, 염증을 효과적으로 개선시킴으로써 두피 가려움증 개선효과를 상승적으로 유도하는 우수한 효과가 있다.

또한, 본 발명의 혼합제제들은 안전성이 입증된 천연 물질의 사용 및 최적화된 혼합비율로의 사용으로 인해 피부에 대해 안전하면서도 피부재생 및 항염 효과가 우수하여, 외부 자극에 대한 염증을 경감시키는 효능을 발휘한다.

또한, 본 발명의 두피 가려움증 개선용 조성물은 다양한 원료의 첨가에 따라 문제되는 피부 사용감 악화의 문제를 현저하게 개선할 수 있는 효과를 나타낸다.

도 1은 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소, 녹차 단독 추출물을 개별 처리한 경우와 상기 추출물을 혼합한 천연물 복합추출물을 처리한 경우의 DPPH 라디컬 소거능을 나타낸 것이다.
도 2는 단독 추출물과 천연물 복합추출물의 세포독성 평가결과를 나타낸 것이다.
도 3은 단독 추출물과 천연물 복합추출물의 항염증 효과를 확인하기 위하여 NO 생성량을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 단독 추출물과 천연물 복합추출물의 항염증 효과를 확인하기 위하여 염증성 사이토카인인 IL-6, TNF-a 및 IL-1b의 mRNA의 발현량을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 실험동물에서 본 발명의 조성물과 비교예 조성물을 전처리한 경우와 후처리한 경우 두피 가려움증 개선효과를 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 두피 가려움증 개선 효과가 비만세포 탈과립의 억제효과인지 확인하기 위하여 실험동물에서 본 발명의 조성물과 비교예 조성물의 유리된 히스타민을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 7은 임상시험에서 본 발명의 조성물의 두피보습 개선효과를 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 8은 임상시험에서 본 발명의 조성물의 두피각질 개선효과를 측정한 결과를 나타낸 것이다.

본 발명자들은 천연물을 이용한 부작용 및 독성이 없는 두피 가려움증 개선용 조성물을 개발하기 위하여 예의 연구 노력한 결과, 선행연구에 따른 피부보습용 복합물과 천연 한약재 복합 추출물의 새로운 조합이 민감성, 자극성 및 반응성 두피를 안정화시키고, 두피의 가려움, 열감, 염증을 효과적으로 개선시키는 것을 발견하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 돈피분쇄균질물, 1%(w/v)의 베타글루칸액, 1%(w/v)의 히알루론산액, 1%(w/v)의 실크펩타이드액 및 해양심층암반 미네랄수를 포함하는 피부보습용 복합물(A); 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소 및 녹차를 포함하는 천연물 복합추출물(B); 및 미네랄수(C)를 유효성분으로 포함하는, 두피 가려움증 개선용 조성물을 제공한다. 이하에서 각 유효성분에 대하여 구체적으로 설명한다.

(A) 돈피분쇄균질물을 포함하는 피부보습용 복합물

본 발명에 따른 상기 피부보습용 복합물(A)은 본 출원인의 선행연구결과에 따른 것으로 선등록된 한국 등록특허공보 제10-1737446호의 '피부 보습용 화장료 조성물'을 통해 얻어진 조성물을 사용한다. 상기 피부보습용 복합물에 대해 간략하게 설명하면, 돈피분쇄균질물, 1%(w/v)의 베타글루칸액, 1%(w/v)의 히알루론산액, 1%(w/v)의 실크펩타이드액 및 해양심층암반 미네랄수를 25: 10: 10: 10: 0.66의 중량비로 혼합한 혼합물을 전체 피부보습용 복합물 총 중량에 대하여 10 내지 12.5 중량%로 포함하여 제조한 것을 이용한다.

상기 혼합비율에 따른 피부보습용 복합물은 돈피분쇄균질물 중 콜라겐과 엘라스틴을 추출, 펩타이드화 하지 않고도 피부침투력을 향상시킬 수 있는 효과가 있다. 또한, 상기 돈피분쇄균질물은 엘라스틴, 케라틴 등 피부 구성 결합조직 단백질을 포함하고 있어 콜라겐만을 단독으로 사용하는 경우보다 피부미용, 보습, 피부노화 방지에 더욱 효과적이며 다양한 원료의 첨가에 따라 문제되는 피부 사용감 악화의 문제를 현저하게 개선할 수 있고, 본 발명에서는 피부침투력을 극대화시켜 두피의 수분보유력을 지속적으로 유지함으로써 두피 가려움증 개선 효과를 상승적으로 유도할 수 있다.

(B) 천연물 복합추출물

본 발명에 따른 두피가려움증 개선용 조성물에 있어서, 상기 천연물 복합추출물은 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소 및 녹차 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 제조하고 농축시켜 수득되는 천연물 복합추출농축액을 유효성분으로 포함함을 특징으로 한다. 또한, 본 발명은 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소 및 녹차의 유효성분을 최대한 포함시키는 천연물 복합추출물을 제공하는 것을 특징으로 한다.

최근 두피가려움증 개선을 위한 다양한 한약재의 효능이 보고되고 있으나, 한 종류의 단일 한약재 투여에 따른 세포독성 문제는 여전히 해결되어야 할 과제로 남아 있다. 따라서 이러한 문제 해결을 위하여 최근 몇몇 한약재의 복합 처방전 개발이 큰 관심을 모으고 있으며, 이러한 접근은 각 단일 한약재의 우수성을 증대시키면서 세포독성을 현저히 감소시킬 수 있는 장점을 가지고 있다.

본 발명에서도 상기 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소 및 녹차 추출물을 후보군으로 선정하여 단일 추출물의 두피 가려움증에 대한 완화 및 개선 효과를 확인하였다. 그러나, 상술한 바와 같이 상기 추출물의 경우에도 두피 가려움증에 대한 완화 및 개선 효과를 위해 각각의 추출물을 단독으로 사용하는 경우 단일 추출물의 고농도 사용에 따른 세포독성의 문제가 있다는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 세포독성에 따른 부작용 등의 문제 때문에 상기 개별 추출물을 두피 가려움증에 대한 완화 및 개선용 조성물로 사용하는 데에는 그 사용량이 제한적이므로 실질적으로 두피 가려움증에 대한 효과를 위해 사용할 수 있는 상기 개별 추출물의 함량이 제한적일 수 밖에 없다는 문제가 있었다.

그러나 상기 추출물 중 복합처방으로서, 아토피 피부염을 유발한 동물모델을 활용하여 천연물 추출물을 혼합하여 사용하는 경우 개별 추출물을 단독으로 사용하는 경우에 비하여 세포독성을 낮추면서도 가려움증을 억제하는 활성이 높다는 것을 확인하였다(도 1 내지 4).

본 발명에 따른 복합추출물은 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소 및 녹차잎을 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올로 구성된 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 용매로 추출하거나, 초음파 또는 초임계 유체 추출법으로 추출하여 얻어진 것일 수 있으며, 바람직하게는 정제수와 에탄올의 혼합용 매로 추출하여 얻어진다. 이때 산수유, 감초, 어성초, 자소 및 녹차잎을 혼합한 후 이를 추출하는 것이 바람직하나, 각각의 생약을 개별적으로 추출한 후 혼합하여도 무방하다. 바람직하게는, 혼합추출물은 건조, 예를 들어 동결건조하여 사용될 수 있다. 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소 및 녹차잎의 중량비는 바람직하게는 0.5~2 : 0.5~2 : 0.5~2 : 0.5~2 : 0.5~2 : 0.5~2 이고, 보다 바람직하게는 1 : 1 : 1 : 2 : 1 : 1이다.

상기 범위로 포함되는 경우 단독 추출물 또는 다른 조합으로 사용할 때 보다 세포독성이 감소하고 항산화, 항염 및 두피 가려움증 개선효과가 상승적으로 유도될 수 있으므로 본 발명의 천연물 추출물은 상기 범위로 혼합하여 사용하는 것이 바람직하다.

여기서, 본 발명의 천연물 복합추출물을 형성하는 약리학적 성분을 간략하게 살펴보면, 산수유는 층층나무과에 속하는 낙엽교목으로, 한방에서는 자양, 강장, 수렴약 등으로 사용되며, 주성분으로는 모로니사이드(Morroniside), 로가닌(Loganin), 코르닌(Cornin), 우르솔닉산(Ursolic acid) 과 같은 이리도이드(iridoid) 배당체 등이 있으며, 탄닌(Tanin)류도 분리되었다.

홍경천은 고산지대에서 자라는 다년생 약용식물로, 불리한 환경인자에 대한 적응 능력을 증가시켜 생물체의 생리적 기능을 조절하여 항상성을 유지시키며, 높은 항산화 활성이 있는 것으로 보고되었다. 이는 특히 식용 및 약용으로 다양하게 쓰이는데, 그 추출물 및 주요 활성 성분을 이용하여 미백, 혈당조절, 혈중 알코올 농도 저하, 항스트레스 등의 효과가 알려져 있다.

감초는 모든 약의 독성을 조화시켜서 약효가 잘 나타나게 하며 장부의 한열과 사기를 다스리고 모든 혈맥의 소통을 잘 시키며 근육과 뼈를 튼튼히 한다. 특히 약리작용은 해독작용, 간염, 두드러기, 피부염, 습진 등에 효과가 있고, 진해?거담, 근육이완, 이뇨작용 있으며 소화성 궤양을 억제하는데 효과가 있다는 것이 알려져 있다.

어성초는 삼백초과에 속하는 다년생 초본의 전통 야생 약초의 개화기의 지상부를 의미하는 것으로 항균작용, 면역증강작용, 항염증작용, 이뇨작용, 진해작용이 보고되었다. 특히 어성초의 주요 활성성분인 쿼시트린(Quercitrin)이 다양한 생리 활성 기능을 가지고 있다고 보고되었다.

자소는 자소엽을 의미하며, 항산화, 항염, 면역조절, 진정, 항균에 효과적인 약재로 알려져 있고, 피부에 대해 강한 항염 효과와 면역증강 효과를 나타내며 주로 화장품, 세제 등에 많이 쓰인다. 탈모와 노화방지에 대한 효과도 알려져 있다. 탈모를 유발할 수 있는 효소를 억제시켜 주어 탈모를 예방해주며, EPA(에이코사펜타에논산 ; eicosapentaenoic acid)가 함유되어 있어 면역력 강화에 도움이 되며 아토피 피부염이나 알레르기 체질을 개선하는데 탁월한 효과를 발휘하는 것으로 알려져 있다.

녹차는 녹차 잎에서 추출한 카테킨(Catechins)이라는 성분이 항 안드로겐 특성을 가져 녹차를 자주 마시면 탈모 예방에 효과가 크다는 연구 결과가 나왔으며 녹차의 성분 중에는 탈모를 유발하는 DHT 호르몬을 억제하는 효과가 있다고 밝혀졌다.

(C) 미네랄수

본 발명의 상기 미네랄수는 해양심층암반 미네랄수로서 해양심층수와 달리 미네랄이 풍부한 해양심층 암반석에서 순수이온미네랄을 추출하고 고농도(2만배)로 농축하여 저장한 후 이를 용도에 맞춰 희석하여 사용할 수 있다. 해양심층암반 미네랄수는 마그네슘, 규소, 인, 황, 칼륨, 칼슘, 바나듐, 망간, 철, 코발드, 니켈, 구리, 아연, 게르마늄, 셀렌, 몰리브덴 등 미량원소가 광천수에 비해 풍부해서 부족해지기 쉬운 미네랄 중 미량 원소을 보충해 준다. 본 발명의 두피 가려움증 개선용 조성물에 있어서 상기 해양심층암반 미네랄수의 공급으로 가려움증 억제효과를 상승적으로 유도하고 피부 면역력 회복과 가려움증 억제, 자연적인 피부세정, 항균, 보습기능이 가능하게 하는 화장료 조성물을 제공할 수 있다.

본 발명의 두피가려움증 개선용 조성물은 상기에서 언급한 피부보습용 복합물(A), 천연물 복합추출물(B) 및 미네랄수(C)를 1~2: 1~1.5: 0.2~0.3의 중량비로 함유하도록 사용한다. 상기 중량비로 포함되는 경우 상기 피부보습용 복합물, 천연물 복합추출물 및 미네랄수의 상호 작용으로 세포독성이 없는 범위 내에서 두피 가려움증 개선효과를 높게, 지속적으로 유지하게 할 수 있다.

본 발명의 두피가려움증 개선용 조성물은 비타민 B5 및 페퍼민트 오일을 추가적으로 포함할 수 있다.

본 발명의 두피 가려움증 개선용 화장료 조성물은 피부보습용 복합물, 천연물 복합추출물 및 미네랄수를 전체 중량에 대하여 2~5 중량% 범위로 유지하는 것이 품질 경쟁력과 가격 경쟁력 측면에서 가장 적절하다. 이외에 모발용 화장료 베이스가 전체 중량에 대하여 95~98 중량% 범위로 함유되고, 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하는데, 예컨대 통상적인 세정성분인 합성계면활성제와 방부제, 점증제 및 점도 조절제, pH 조절제, 향료, 염료, 모발 컨디셔닝제 그리고 물을 포함한다.

한편, 모발용 화장료 베이스에 포함되는 합성계면활성제와 방부제, 점증제 및 점도 조절제, pH 조절제, 향료, 염료, 모발 컨디셔닝제는 특별히 제한을 두지 않으며, 통상적인 범위내에서 종류에 따라 적절한 성분을 첨가하여 사용된다 할 것이다.

본 발명의 화장료 조성물은 헤어토닉, 모발 영양화장수, 헤어에센스, 헤어세럼, 두피트리트 먼트, 헤어트리트먼트, 헤어컨디셔너, 헤어샴푸, 헤어로션으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형으로 제조한다. 이러한 화장료 조성물은 제형화하는데 있어 특별히 한정하지 않는다. 또한, 각각의 제형에 있어 상기한 필수성분 이외에 다른 성분들은 기타 외용제의 종류 또는 사용목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적합하게 선정하여 배합하여 제조될 수 있다.

본 발명의 조성물의 적용대상에는 특별한 제한이 없는 바, 본 발명의 조성물은 사람이나 사육 또는 애완동물에게 적용할 수 있다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예 및 실험예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 이에 의해 본 발명의 내용이 제한되는 것은 아니다.

또한, 이하에서 언급된 돈피, 실크펩타이드, 히알루론산, 베타클루칸은 (주) 쿠시드바이오팜에서 구입한 것이며, 미네랄수 원액은 (주)프레이바이오로부터 구입한 것이다. 산수유 열매와 잘 건조된 감초, 어성초, 자소, 녹차 및 홍경천은 경동시장에서 구입하였다.

실시예 1. 돈피분쇄균질물을 포함하는 피부보습용 복합물의 제조

본 발명에 따른 상기 피부보습용 복합물은 본 출원인의 선행연구결과에 따른 것으로 선등록된 한국 등록특허공보 제10-1737446호의 '피부 보습용 화장료 조성물'을 통해 얻어진 조성물을 사용하였다. 구체적으로 콜라겐, 엘라스틴, 젤라틴 등의 피부결합단백질을 포함하는 돈피분쇄균질물, 1%(w/v)의 베타글루칸액, 1%(w/v)의 히알루론산액, 1%(w/v)의 실크펩타이드액 및 해양심층암반 미네랄수를 감마선으로 조사하여 저분자화하여 사용하였고 상기 성분들을 25: 10: 10: 10: 0.66의 중량비로 혼합한 것을 전체 피부보습용 복합물 총 중량에 대하여 10 내지 12.5 중량%로 포함하되 잔부의 정제수를 첨가하여 제조한 것을 이용하였다.

실시예 2. 산수유, 감초, 어성초, 자소, 녹차잎 및 홍경천의 6가지 복합 추출물 제조

건조 분쇄한 산수유, 감초, 어성초, 자소, 녹차잎 100g을 50% 에탄올 1L를 가하여 50℃ 수조에서 24시간 1차 추출한 다음, 50% 에탄올 1L를 가하여 2차 추출을 하였다. 추출된 용액은 여과 및 진공농축하여 약 25~30% 추출물을 회수하였다. 홍경천은 동일한 방법으로 추출하되, 70% 에탄올을 사용하였으며, 추출된 용액은 여과 및 진공농축하여 약 30% 추출물을 회수하였다. 천연 한약재는 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소, 녹차잎을 1:1:1:2:1:1의 중량비가 되도록 정량하여 사용하였고, 상기 방법으로 얻어진 추출물을 혼합하여 천연물 복합 추출물을 제조하였다.

실험예 1. DPPH 라디컬 소거능 측정

DPPH 라디컬 소거능은 각 추출물 0.5ml에 0.2mM DPPH (2,2-diphenyl-2-picrylhydrazl) 용액을 0.5ml 분주하여 30분간 방치시킨 후, 517nm에서 흡광도(GENESYS 10 UV)를 측정하였다. 대조구는 시료 대신 용매를 가하여 동일한 방법으로 측정하였다. 또한, 시료 자체의 색에 대한 흡광도 값을 보정하기 위해 0.2nm DPPH 대신에 메탄올을 첨가하여 흡광도를 측정하였다.

하기 표 1과 도 1에 나타낸 바와 같이, 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소, 녹차 각각의 추출물을 처리한 경우 처리하지 않은 무처리군보다 약 60~70% 라디컬 소거능이 증가하고, 천연물 복합추출물을 처리한 경우에는 무처리군에 비해 82%로 증가됨을 확인할 수 있었다. 따라서 천연물 복합추출물이 천연 한약재를 각각 처리한 경우보다 더 우수하게 피부의 산화와 염증 발생을 억제함을 확인할 수 있었다.

	IC50 (ug/ml)
산수유추출물	55.7 ± 0.417
홍경천추출물	47.8 ± 0.026
감초추출물	53.8 ± 0.036
어성초	46.7 ± 0.038
자소	54.2 ± 0.12
녹차	47.7 ± 0.083
복합 추출물	32.8 ± 0.245
비타민 C	5.14 ± 0.097

실험예 2. 세포독성 평가

세포 독성을 분석하기 위하여 단독 추출물 및 천연물 복합추출물을 각각 100ug/ml의 농도로 배양한 MRC-1 섬유아세포와 HaCat 피부세포에 처리하였다. 24시간 후, MTT 용액을 첨가하여 측정한 결과, 천연물 복합추출물을 처리한 경우가 단독 추출물을 처리한 경우보다 섬유아세포 및 피부세포에 대한 세포독성이 현저하게 낮아 필요에 따라 사용량을 증가시킬 수 있음을 확인하였다(표 2 및 도 2).

	MRC-1	HaCat
대조군	100	100
산수유추출물	99.2 ± 0.2	99.1 ± 0.1
홍경천추출물	98.3 ± 0.1	95.1 ± 0.2
감초추출물	98.5 ± 0.2	97.5 ± 0.1
어성초	97.2 ± 0.1	98.8 ± 0.3
자소	98.6 ± 0.3	97.9 ± 0.1
녹차	97.1 ± 0.1	98.1 ± 0.2
복합 추출물	116.2 ± 0.1	113.3 ± 0.1

실험예 3. 세포주에서 항염증 효과 확인

항염증 효과를 확인하기 위해, 대식세포를 배양하여 LPS로 염증반응을 유도하였다. 단독 추출물 및 천연물 복합 추출물을 2시간 전처리 후, LPS로 24시간 동안 염증반응을 유도한 다음 배양액을 회수하여 NO 생성량을 측정하였다 (도 3). 그리고, 각 세포내 RNA를 추출하여 염증반응에 의한 사이토카인의 mRNA의 발현량을 측정하였다 (도 4). LPS에 의해 유의적으로 증가된 NO는 단독 추출물 및 천연물 복합 추출물을 전처리 했을 때 유의적으로 감소되었다. 뿐만 아니라, 이와 동일한 경향으로 LPS에 의해 증가되었던 염증성 사이토카인인 IL-6, TNF-a, 그리고 IL-1b의 mRNA의 발현량이 감소됨에 따라 단독 추출물 및 천연물 복합 추출물의 항염증 효과를 확인하였다. 한편, 각각의 단독 추출물로 처리한 경우에는 무처리군보다는 NO 생성량 감소 및 염증성 사이토카인의 mRNA 발현량 억제능이 우수하였으나, 천연물 복합 추출물을 처리한 경우보다는 떨어짐을 확인할 수 있었다(표 2 및 도 2 내지 3).

	NO 생성량	사이토카인 발현량
		IL-6	TNF-a	IL-1b
무처리	0.14 ± 0.02	1	1	1
LPS 처리	0.48 ± 0.13	2.64 ± 0.02	2.27 ± 0.01	3.42 ± 0.03
산수유추출물	0.24 ± 0.12	0.82 ± 0.01	1.71 ± 0.01	2.61 ± 0.01
홍경천추출물	0.21 ± 0.09	1.49 ± 0.04	1.43 ± 0.03	2.46 ± 0.01
감초추출물	0.23 ± 0.05	1.68 ± 0.02	1.52 ± 0.04	2.51 ± 0.02
어성초	0.22 ± 0.11	1.67 ± 0.03	1.51 ± 0.01	2.53 ± 0.04
자소	0.23 ± 0.13	1.64 ± 0.05	1.49 ± 0.02	2.51 ± 0.02
녹차	0.21 ± 0.09	1.53 ± 0.03	1.53 ± 0.02	2.43 ± 0.01
복합 추출물	0.19 ± 0.06	1.12 ± 0.05	1.14 ± 0.01	2.11 ± 0.03

실시예 3 내지 4 및 비교예. 두피가려움증 개선용 조성물의 제조

두피 가려움증 개선용 조성물은 실시예 1 내지 2에서 제조한 피부보습용 복합물과 천연물 복합추출물, 농축 미네랄수, 비타민 B5, 페퍼민트 오일을 유효성분으로 하여 제조하였으며 각 성분들의 혼합비율은 하기 표 4에 나타내었다. 표 4에 나타낸 성분 및 함량을 이용하여, 각 성분을 균일하게 혼합한 후 여과하여 조성물을 제조하였다.

원료명	비교예 1	비교예 2	실시예 3	실시예 4
피부보습용 조성물	1	2	1	2
천연물 복합추출물	-	-	1	1
미네랄수	-	-	0.2	0.2
비타민 B5	0.2	0.2	0.2	0.2
페퍼민트 오일	2	2	2	2
유화안정제	7.3	7.3	7.3	7.3
피부컨디셔닝제	3.35	3.35	3.35	3.35
계면활성제	0.7	0.7	0.7	0.7
산화방지제	0.7	0.7	0.7	0.7
에탄올	11.65	11.65	11.65	11.65
멘톨	1	1	1	1
정제수	잔량	잔량	잔량	잔량
합계	100	100	100	100

(단위: 중량부)

실험예 4. 실험동물에서 가려움증 개선 효과 확인

수컷 ICR 마우스를 대상으로 가려움 유발물질로 가려움을 유발한 후 마우스가 피부를 긁는 횟수를 측정하였다. 구체적으로, 실험군별 ICR 마우스 5마리를 각각 투명 아크릴 케이지에 한 마리씩 넣고, 안정을 위해 30분 동안 동일한 실험 환경에 방치하였다. 표 4의 실시예 및 비교예의 조성물 100ul를 마우스 등 양쪽 어깨 사이에 떨어뜨려 잘 스며들도록 문지른 다음, Compound 48/80 (50ug/부위)를 생리식염수에 용해한 것을 마우스 등의 양쪽 어깨 사이 높이에 피하주사 하여, 30분 뒤 뒷발로 가려움 유발 물질이 주입된 부위를 긁는 횟수를 계수하여 평가하였다. 반대로, 가려움을 유발한 뒤 30분 후 그 부위에 실시예 및 비교예의 조성물이 함유된 복합조성물을 떨어뜨려 잘 스며들도록 문지른 다음 긁는 횟수를 측정하였다.

하기 표 5 및 도 5에 나타난 바와 같이, 정상 대조군의 긁는 횟수에 비하여 Compound 48/80을 투여한 대조군에서는 그 횟수가 현저히 증가하였다. 그러나 실시예 및 비교예의 조성물이 함유된 복합조성물을 전처리 혹은 후처리 하였을 때에는 유의적으로 그 횟수가 현저히 감소하였으며, 실시예 및 비교예의 조성물이 함유된 복합조성물을 후처리 하였을 때에 전처리 보다 더 감소됨을 확인하였다.

	대조군	비교예 1	비교예 2	실시예 3	실시예 4
전 처리	195±21	109±14	118±11	73±9	72±11
후 처리	186±15	98±9	95±12	65±6	67±5

실험예 5. 실험동물에서 히스타민 유리 억제효과 확인

복합 조성물의 가려움증 개선효과가 비만세포 탈과립의 억제효과인지 검토하기 위하여 복강비만세포를 이용하여 히스타민 유리 억제효과를 확인하였다. BALB/c 마우스 복강에 Tyrode 완충용액 B (137mM NaCl, 5.3mM glucose, 12mM NaHCO₃, 2.7mM KCl, 0.3mM NaH₂PO₄, pH 7.4)를 주입하고 복부를 약 2분정도 마사지 한 후 복막을 열어 파스퇴르 피펫으로 복강 내 세포가 함유된 Tyrode 완충용액 B를 수거하였다. 1500 rpm에서 10분 동안 원심 분리하여 세포를 침전시키고 침전된 세포에 Tyrode 완충용액 B를 가하여 피펫팅하며 풀어준 다음, percoll density gradient법으로 비만세포만을 회수하였다. 0.1% FBS를 포함하는 Tyrode 완충용액 A (137mM NaCl, 1.8mM CaCl₂, 1.1mM MgCl₂, 12mM NaHCO₃, 2.7mM KCl, 0.4mM NaH₂PO₄, 5.6mM glucose, pH 7.4)를 가하여 2×10⁵씩 세포를 분주한 다음 37°C에서 20분 동안 배양하고 시료를 20분 동안 처리하였다. 표 4의 실시예 및 비교예의 조성물을 처리한 다음, 1시간 후 Compound 48/80 5ug/ml을 30분간 처리하였다. 30분이 지난 후, 2000 rpm에서 원심분리하여 상등액과 세포를 분리하였다. 그 다음, 상기와 같이 얻은 상층액 시료를 히스타민 ELISA kit를 통해 정량하였다.

하기 표 6 및 도 6에 나타난 바와 같이, 정상 복강비만세포를 Compound 48/80으로 처리하였을 때 유리된 히스타민은 159±20.2 ng/ml로 증가하였는데, 피부보습용 조성물만 처리하였을 때(비교예 1 내지 2) 유리된 히스타민은 92.4±12.5, 79.5±11.5 ng/ml로 감소되었다. 한편, 본 발명의 가려움증 개선용 조성물(실시예 3 내지 4)을 처리하였을 때 유리된 히스타민은 82.7±9.5, 60.8±8.7 ng/ml로 감소하였는 바, 혼합 조성물의 상승효과를 확인할 수 있었으며 결과적으로 약 49~62%의 억제율을 나타내었다.

	대조군	비교예 1	비교예 2	실시예 3	실시예4
유리 히스타민 양 (ng/ml)	159±20.2	92.4±12.5	79.5±11.5	82.7±9.5	60.8±8.7

실험예 6. 임상시험을 통한 두피 보습개선 효과확인

실시예 4에 따른 제품을 사용하여 지원자 22명의 두피에 아침, 저녁 하루 2회씩 4주 동안 자가 도포하도록 하고, Hydration pin을 이용하여 시험전, 시험 2주, 시험 4주 후의 두피 보습 개선 효과를 측정하였다. 코끝으로부터 약 20cm 떨어진 지점을 측정부위로 지정하여 기기측정을 실시하였으며, 제품 사용 전후 두피 보습량의 변화를 Skin Hydration pin 값을 통해 비교하고 하기 수학식 1에 따라 개선 정도를 다음과 같이 % 값으로 계산하였다.

<수학식 1>

인체적용시험 기간동안 홍반, 부종, 인설, 가려움 등 기타 이상증이 나타나지 않았으며, 복합 조성물의 사용 전, 2주 후, 4주 후 두피 수분량(Hydration pin value) 측정결과, 시험 전에 비해 시험 2주 후부터 통계적으로 유의한 수준 (p<0.05)으로 각질층 수분량이 증가하여, 각각 38.92% 및 72.16%의 개선율을 나타냄에 따라 시험 시료가 두피 보습개선 효과가 있는 것으로 생각된다(도 7).

실험예 7. 임상시험을 통한 두피 각질개선 효과 확인

실시예 4에 따른 제품을 사용하여 지원자 22명의 두피에 아침, 저녁 하루 2회씩 4주 동안 자가 도포하도록 하고, Comeofix F20(Courage & Khazaka, Germany)와 Visosan VC98(Courage & Khazaka, Germany)을 이용하여 시험전, 시험 2주, 시험 4주 후의 두피 보습 개선 효과를 각질의 변화로 측정하였다. 코끝으로부터 약 20cm 떨어진 지점을 측정부위로 지정하여 기기측정을 실시하였으며, 제품 사용 전후 각질양의 변화를 Visioscan의 DI (Desquamation Index) 값을 통해 비교하고 아래의 수식에 따라 개선 정도를 다음과 같이 % 값으로 계산하였다.

<수학식 2>

인체적용시험 기간동안 홍반, 부종, 인설, 가려움 등 기타 이상증이 나타나지 않았으며, 복합 조성물의 사용 전, 2주 후, 4주 후 각질지수 측정결과, 시험 전에 비해 시험 2주 후부터 통계적으로 유의한 수준 (p<0.05)으로 두피 각질지수가 감소하여, 각각 14.97% 및 29%의 개선율을 나타냄에 따라 시험 시료가 두피 각질 개선 효과가 있는 것으로 생각된다(도 8).

뿐만 아니라 22명의 피험자 중에서 13명(59%)의 피험자가 시험 2주 후 사용 전에 비해 '가려움이 전혀 없음'으로 답하였고, 시험 4주 후에는 18명(82%)의 피험자가 '가려움이 전혀 없음'으로 답한 것을 보아, 복합 조성물이 두피 소양감 완화에 도움을 주는 것으로 생각된다.

실험예 8. 임상시험- 사용 효능 및 품질 시험

실시예 4에 따른 제품의 효능, 효과 측정, 품질검사를 시행한 결과를 하기 표 7과 같이 나타내었다. 패널, 기간, 방법, 각 항목에 대해 1점부터 5점 사이로 점수를 매긴 후, 3점 이상으로 응답한 피험자의 인원 비율을 계산하였다. (1점: 나쁨, 2점: 차이 없음, 3점: 약간 좋음, 4점: 좋음, 5점: 아주 좋음)

No	설문 내용	응답율
1	제품 사용 후 두피 각질이 감소하였다고 생각하십니까	100%
2	제품 사용 후 두피 가려움증이 완화되었다고 생각하십니까?	95%
3	제품 사용 후 두피 건조함이 개선되었다고 생각하십니까?	100%
4	제품 사용 후 끈적임 없이 빠르게 흡수가 됩니까?	95%
5	제품 사용 만족도는 어떻게 됩니까?	100%
6	제품의 향은 좋았습니까?	82%
7	제품 사용 중 두피 자극 및 가려움 등 트러블이 있었습니까? (없다)	91%
8	제품 사용에 만족하십니까? (만족)	95%
9	본 제품이 적당한 가격에 출시된다면 구매의사가 있습니까? (있다)	95%

Claims (7)

1. 유효성분으로서,
   (a) 돈피분쇄균질물, 1%(w/v)의 베타글루칸액, 1%(w/v)의 히알루론산액, 1%(w/v)의 실크펩타이드액 및 해양심층암반 미네랄수를 포함하는 피부보습용 복합물,
   (b) 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소 및 녹차를 포함하는 천연물 복합추출물 및
   (c) 미네랄수를 함유하는, 두피가려움증 개선용 화장료 조성물에 있어서,
   상기 (b)의 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소 및 녹차의 중량비는 1: 1: 1: 2: 1: 1 인, 두피가려움증 개선용 화장료 조성물.
2. 삭제
3. 제1항에 있어서, 피부보습용 복합물 1~2 중량부, 천연물 복합추출물 1~1.5 중량부 및 미네랄수 0.2~0.3 중량부를 포함하는, 두피가려움증 개선용 화장료 조성물.
4. 제1항에 있어서, 상기 피부보습용 복합물은 돈피분쇄균질물, 1%(w/v)의 베타글루칸액, 1%(w/v)의 히알루론산액, 1%(w/v)의 실크펩타이드액 및 해양심층암반 미네랄수를 25: 10: 10: 10: 0.33~0.66의 중량비로 혼합한 것을 전체 피부보습용 복합물 총 중량에 대하여 10 내지 12.5 중량%로 포함하는 것인, 두피 가려움증 개선용 화장료 조성물.
5. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 헤어토닉, 모발 영양화장수, 헤어에센스, 헤어세럼, 두피트리트먼트, 헤어트리트먼트, 헤어컨디셔너, 헤어샴푸, 헤어로션으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는, 두피 가려움증 개선용 화장료 조성물.
6. 제1항에 있어서, 상기 유효성분 외에 약리학적으로 허용 가능한 부형제를 추가로 포함하는, 두피 가려움증 개선용 화장료 조성물.
7. 제1항에 있어서, 사람이나 사육 또는 애완동물에게 적용하기 위한, 조성물.

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