CN103833715A - 一种发酵提取茅岩莓茶中二氢杨梅素的方法 - Google Patents

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Abstract

一种发酵提取茅岩莓茶中二氢杨梅素的方法，涉及一种茅岩莓茶中有效成分的提取方法，包括以下步骤：将茅岩莓茶叶粉碎并回流提取，将滤液浓缩处理后静置得到茶汁；在茶汁中添加蔗糖并灭菌；将酿酒活性干酵母与蔗糖溶液混合，恒温水浴使酿酒活性干酵母活化后接入灭菌后的茶汁中；将接种后的茶汁放入摇床中发酵；浓缩后得到浸膏，干燥后得到二氢杨梅素粗粉重结晶后得到纯的二氢杨梅素。本发明利用液体发酵法提取茅岩莓茶中的二氢杨梅素，可以消耗茅岩莓水提取液中的糖分、蛋白质等营养物质，从而降低了热水提取液浓缩后的黏度，使二氢杨梅素能快速的沉降下来，有效的利用了茅岩莓茶叶资源，提高二氢杨梅素的产率。

Description

一种发酵提取茅岩莓茶中二氢杨梅素的方法
技术领域
本发明涉及一种茅岩莓茶中有效成分的提取方法，尤其涉及一种发酵提取茅岩莓茶中二氢杨梅素的方法。
背景技术
目前，国内中小企业主要采用热水提取法制取茅岩莓茶中的二氢杨梅素，热水提取法包括热水浸提法和热水回流法，方法操作简单，水安全无毒成本低，提取率较高，一级提取率可达30%，二级提取率在6%左右。但是二级提取率较低，提高了生产的成本和能耗；茅岩莓水提取液中含有较多的糖分、蛋白质等营养物质，浓缩后黏度大，二氢杨梅素很难沉降下来；直接倾倒废料则会浪费大量的茶叶资源。
长期以来，茅岩莓茶中的黄酮二氢杨梅素进行热水提取后茶叶残渣的利用集中在渥堆发酵，具体为：渥堆固态发酵，直接接种酿酒酵母或黑曲霉进行发酵，温度控制在10-80℃，发酵时间控制在1-10天。发酵后可用来做肥料或者再次提取黄酮二氢杨梅素的原料。废液的利用途径单一，导致茶叶和黄酮二氢杨梅素资源浪费，不能达到最佳经济效益。
发明内容
本发明要解决的技术问题是：提供一种发酵提取茅岩莓茶中二氢杨梅素的方法，能够提高二氢杨梅素的提取产率，减少茶叶一次利用后的资源浪费，并利用废料制造附加应用价值。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种发酵提取茅岩莓茶中二氢杨梅素的方法，包括以下步骤：
步骤一：原料处理:
将茅岩莓茶叶成品粉碎得到茶粉，按照1g茶粉加入10-25mL蒸馏水的料液比将茶粉与蒸馏水混合，80-100℃回流提取1-2小时，回流提取后趁热过滤，得到残渣和滤液，残渣按照上述方法与蒸馏水混合后再回流提取一次，过滤的滤液与前次滤液合并；
步骤二：制备茶汁：
将所得滤液浓缩处理后，在4℃静置1天后，收集上清液，得到茶汁；
步骤三：糖度调节、灭菌：
在所得茶汁中添加蔗糖，调节糖度为2-10%；然后将茶汁放入高压灭菌锅中于121℃灭菌20分钟；
步骤四：酵母菌活化、接种：
将2%蔗糖溶液经121℃灭菌20分钟后，按照1g酿酒活性干酵母与20 mL蔗糖溶液混合的比例将两者混合，在35-40℃下恒温水浴20-30 分钟使酿酒活性干酵母活化，之后转入豆芽汁葡萄糖培养基，于摇床中培养24小时，温度28℃；取达到对数期的酿酒酵母按1-2%的接种量接入步骤三中灭菌后的茶汁中；
步骤五：发酵、灭菌：
将接种后的茶汁放入摇床中于温度28-30℃下培养3-5天；发酵完成后进行巴氏消毒并去除沉淀；
步骤六：浓缩干燥：
将去除沉淀后的发酵液经浓缩后得到浸膏，将浸膏置于冷冻干燥箱中干燥得到二氢杨梅素粗粉；
步骤七：重结晶纯化：
所得二氢杨梅素粗粉经5次重结晶后可得到纯度为90-95%的二氢杨梅素。
所述步骤四和步骤五中，摇床的转速均为150r/min。
所述步骤五中，发酵过程中每12小时采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖和总糖；采用紫外分光光度法测定发酵液中二氢杨梅素的含量。
本发明带来的有益效果为：本发明利用液体发酵法提取茅岩莓茶中的二氢杨梅素，采用酵母菌发酵，可以消耗茅岩莓水提取液中的糖分、蛋白质等营养物质，从而降低了热水提取液浓缩后的黏度，使二氢杨梅素能快速的沉降下来，减少了茅岩莓黄酮二氢杨梅素的损失，有效的利用了茅岩莓茶叶资源，提高二氢杨梅素的产率。采用液态发酵工艺提取茅岩莓黄酮二氢杨梅素操作简单，提取率较传统提取方法可提高10%左右。
具体实施方式
下面结合具体实施例对发明作进一步的详细说明。
 一种发酵提取茅岩莓茶中二氢杨梅素的方法，包括以下步骤：
步骤一：原料处理:
将茅岩莓茶叶成品粉碎得到茶粉，按照1g茶粉加入10-25mL蒸馏水的料液比将茶粉与蒸馏水混合，80-100℃回流提取1-2小时，回流提取后趁热过滤，得到残渣和滤液，残渣按照上述方法与蒸馏水混合后再回流提取一次，过滤的滤液与前次滤液合并；
步骤二：制备茶汁：
将所得滤液浓缩处理后，在4℃静置1天后，收集上清液，得到茶汁；
步骤三：糖度调节、灭菌：
在所得茶汁中添加蔗糖，调节糖度为2-10%；然后将茶汁放入高压灭菌锅中于121℃灭菌20分钟；
步骤四：酵母菌活化、接种：
将2%蔗糖溶液经121℃灭菌20分钟后，按照1g酿酒活性干酵母与20 mL蔗糖溶液混合的比例将两者混合，在35-40℃下恒温水浴20-30 分钟使酿酒活性干酵母活化，之后转入豆芽汁葡萄糖培养基，于摇床中培养24小时，温度28℃；取达到对数期的酿酒酵母按1-2%的接种量接入步骤三中灭菌后的茶汁中；
步骤五：发酵、灭菌：
将接种后的茶汁放入摇床中于温度28-30℃下培养3-5天；发酵完成后进行巴氏消毒并去除沉淀；
步骤六：浓缩干燥：
将去除沉淀后的发酵液经浓缩后得到浸膏，将浸膏置于冷冻干燥箱中干燥得到二氢杨梅素粗粉；
步骤七：重结晶纯化：
所得二氢杨梅素粗粉经5次重结晶后可得到纯度为90-95%的二氢杨梅素。
所述步骤四和步骤五中，摇床的转速均为150r/min。
所述步骤五中，发酵过程中每12小时采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖和总糖；采用紫外分光光度法测定发酵液中二氢杨梅素的含量。
实施例一
将茅岩莓茶叶成品粉碎过40目筛得到茶粉，茶粉按1：10料液比(1g茶粉中加入10mL蒸馏水)混合，80℃热水回流提取1小时后趁热过滤，收集残渣和滤液，残渣按照上述方法与蒸馏水混合后再回流提取一次，过滤的滤液与前次滤液混合。将所得滤液浓缩后4℃静置1天后将上清液与沉淀分离，收集上清液，得到茶汁。在所得茶汁中添加蔗糖，糖度达到2%，然后将茶汁放入高压灭菌锅中于121℃灭菌20分钟。2%蔗糖水经121℃灭菌20分钟后，按照1g酿酒活性干酵母与20 mL蔗糖溶液混合的比例将两者混合，35℃恒温水浴30分钟，使酿酒活性干酵母活化，活化后接入豆芽汁葡萄糖培养基在摇床中进行扩大培养24小时，温度28℃，摇床的转速为150r/min。取达到对数期的酿酒酵母按1%的接种量接入灭菌后的茶汁。接种后的茶汁在摇床中28℃条件下培养3天，摇床转速150r/min。发酵过程中每12小时采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖和总糖；采用紫外分光光度法测定发酵液中二氢杨梅素的含量。发酵完成后采用巴氏消毒法灭菌并去除沉淀。将去除沉淀后的发酵液于旋转蒸发仪中70℃浓缩后得到浸膏，将浸膏置于冷冻干燥箱中干燥得到二氢杨梅素粗粉；二氢杨梅素粗粉经5次重结晶后可得到纯度为90%的二氢杨梅素。
实施例二
将茅岩莓茶叶成品粉碎过40目筛得到茶粉，茶粉按1：15料液比(1g茶粉中加入15mL蒸馏水)混合，100℃热水回流提取1小时后趁热过滤，收集残渣和滤液，残渣按照上述方法与蒸馏水混合后再回流提取一次，过滤的滤液与前次滤液混合。将所得滤液浓缩后4℃静置1天后将上清液与沉淀分离，收集上清液，得到茶汁。在所得茶汁中添加蔗糖，糖度达到5%，然后将茶汁放入高压灭菌锅中于121℃灭菌20分钟。将2%蔗糖水经121℃灭菌20分钟后，按照1g酿酒活性干酵母与20 mL蔗糖溶液混合的比例将两者混合，40℃恒温水浴20分钟，使酿酒活性干酵母活化，活化后接入豆芽汁葡萄糖培养基在摇床中进行扩大培养24小时，温度28℃，摇床的转速为150r/min。取达到对数期的酿酒酵母按1%的接种量接入灭菌后的茶汁。接种后的茶汁在摇床中在30℃条件下培养5天，摇床转速为150r/min。发酵过程中每12小时采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖和总糖；采用紫外分光光度法测定发酵液中二氢杨梅素的含量。发酵完成后采用巴氏消毒法灭菌并去除沉淀。将去除沉淀后的发酵液于旋转蒸发仪中70℃浓缩后得到浸膏，将浸膏置于冷冻干燥箱中干燥得到二氢杨梅素粗粉；二氢杨梅素粗粉经5次重结晶后可得到纯度为95%的二氢杨梅素。
实施例三
将茅岩莓茶叶成品粉碎过40目筛得到茶粉，茶粉按1：25料液比(1g茶粉中加入25mL蒸馏水)混合，95℃热水回流提取2小时后趁热过滤，收集残渣和滤液，残渣按照上述方法与蒸馏水混合后再回流提取一次，过滤的滤液与前次滤液混合。将所得滤液浓缩后4℃静置1天后将上清液与沉淀分离，收集上清液，得到茶汁。在所得茶汁中添加蔗糖，糖度达到10%，然后将茶汁放入高压灭菌锅中于121℃灭菌20分钟。将2%蔗糖水经121℃灭菌20分钟后，按照1g酿酒活性干酵母与20 mL蔗糖溶液混合的比例将两者混合，37℃恒温水浴26分钟，使酿酒活性干酵母活化，活化后接入豆芽汁葡萄糖培养基在摇床中进行扩大培养24小时，温度28℃，摇床的转速为150r/min。取达到对数期的酿酒酵母按2%的接种量接入灭菌后的茶汁。接种后的茶汁在摇床中29℃条件下培养4天，摇床转速150r/min。发酵过程中每12小时采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖和总糖；采用紫外分光光度法测定发酵液中二氢杨梅素的含量。发酵完成后采用巴氏消毒法灭菌并去除沉淀。将去除沉淀后的发酵液于旋转蒸发仪中70℃浓缩后得到浸膏，将浸膏置于冷冻干燥箱中干燥得到二氢杨梅素粗粉；二氢杨梅素粗粉经5次重结晶后可得到纯度为93%的二氢杨梅素。 

Claims (3)

1.一种发酵提取茅岩莓茶中二氢杨梅素的方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一：原料处理:
将茅岩莓茶叶成品粉碎得到茶粉，按照1g茶粉加入10-25mL蒸馏水的料液比将茶粉与蒸馏水混合，80-100℃回流提取1-2小时，回流提取后趁热过滤，得到残渣和滤液，残渣按照上述方法与蒸馏水混合后再回流提取一次，过滤的滤液与前次滤液合并；
步骤二：制备茶汁：
将所得滤液浓缩处理后，在4℃静置1天后，收集上清液，得到茶汁；
步骤三：糖度调节、灭菌：
在所得茶汁中添加蔗糖，调节糖度为2-10%；然后将茶汁放入高压灭菌锅中于121℃灭菌20分钟；
步骤四：酵母菌活化、接种：
将2%蔗糖溶液经121℃灭菌20分钟后，按照1g酿酒活性干酵母与20 mL蔗糖溶液混合的比例将两者混合，在35-40℃下恒温水浴20-30 分钟使酿酒活性干酵母活化，之后转入豆芽汁葡萄糖培养基，于摇床中培养24小时，温度28℃；取达到对数期的酿酒酵母按1-2%的接种量接入步骤三中灭菌后的茶汁中；
步骤五：发酵、灭菌：
将接种后的茶汁放入摇床中于温度28-30℃下培养3-5天；发酵完成后进行巴氏消毒并去除沉淀；
步骤六：浓缩干燥：
将去除沉淀后的发酵液经浓缩后得到浸膏，将浸膏置于冷冻干燥箱中干燥得到二氢杨梅素粗粉；
步骤七：重结晶纯化：
所得二氢杨梅素粗粉经5次重结晶后可得到纯度为90-95%的二氢杨梅素。
2.如权利要求1所述的一种发酵提取茅岩莓茶中二氢杨梅素的方法，其特征在于：所述步骤四和步骤五中，摇床的转速均为150r/min。
3.如权利要求1所述的一种发酵提取茅岩莓茶中二氢杨梅素的方法，其特征在于：所述步骤五中，发酵过程中每12小时采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖和总糖；采用紫外分光光度法测定发酵液中二氢杨梅素的含量。
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