CN103830708A - 一种治疗艾滋病特效中药的组方及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明“艾力康胶囊”公开了一种治疗艾滋病的组方及其制备方法。该组方主要由下述25味草药或由下述草药的水和醇提取物作活性成分制成:灵芝孢子粉30g,紫花地丁60g,天花粉60g,忍冬藤60g,紫草60g,夏枯草60g,穿心莲60g,海藻30g,黄连60g,仙灵脾60g,半枝莲30g,白花蛇草30g,连翘30g,重楼30g,人参20g,黄芪60g,丹参20g,当归20g,玫瑰花60g,熟地60g,虫草15g,干姜30g,肉桂30g,蒲公英30g,五味子20g。本发明25味草药组方经临床及动物实验表明,可显著降低病人体内HIV病毒载量,提高CD4+细胞数量,增强病人免疫功能,无任何毒副作用,适合艾滋病人长期服用。
Description
技术领域
本发明公开了一种治疗艾滋病的中药组方及其制备方法。
背景技术
艾滋病(Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS)是人获得性免疫缺陷综合症,因为感染人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)后导致免疫缺陷,并发一系列机会性感染及肿瘤,可导致死亡的综合征。自1981年美国发现第一个艾滋病例以来,全球已有210个国家发现艾滋病,HIV感染者已超过4800万人,死亡2500万人。我国自1985年发现第一个艾滋病例以来,已有100万HIV感染者,并以每年30-50%速度增加。至2014年以来美国宣布艾滋病疫苗研制失败,现尚无有效疫苗出现。而西药:抗逆转录酶病毒疗法“鸡尾酒疗法”所用化学药的毒副作用、价格昂贵导致60%患者治疗失败。中草药是我国传统医药,有几千年历史,通过从天然草药中筛选具有抑制、杀灭HIV草药,经组方、加工提取、浓缩制剂、服用成剂,达到有效治疗AIDS的目的。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗艾滋病的中药组方及其制备方法。
本发明筛选草药25味组方:忍冬藤、紫花地丁、天花粉、夏枯草、黄连、仙灵脾、紫草、穿心莲、玫瑰花、人参、丹参、黄芪、当归、五味子、连翘、蒲公英、半枝莲、白花蛇草、重楼、干姜、肉桂、山萸肉、熟地、冬虫夏草、灵芝孢子粉进行组合,能够有效治疗艾滋病。
本组方剂量如下:
[1]灵芝孢子粉30g
[2]紫花地丁60g
[3]天花粉60g
[4]忍冬藤60g
[5]紫草60g
[6]夏枯草60g
[7]穿心莲60g
[8]黄连60g
[9]仙灵脾60g
[10]半枝莲30g
[11]白花蛇草30g
[12]连翘30g
[13]重楼30g
[14]人参20g
[15]黄芪60g
[16]丹参20g
[17]当归20g
[18]五味子20g
[19]玫瑰花60g
[20]蒲公英30g
[21]干姜30g
[22]山萸肉60g
[23]熟地60g
[24]虫草15g
[25]肉桂30g
本发明所述的醇为乙醇,浓度为5-95%。
本发明草药组方可加入保健品或药品中可接受的赋型剂制备成剂型。
本发明剂型可以是片剂、口服液、颗粒剂、胶囊剂、煎膏剂、滴丸剂、丸剂、散剂中的任意一种。
本发明所述制备工艺如下:1.按组方药量提取草药原料。2.提取浓缩:【1】用浓度为5-95%乙醇或6-10倍量水对上述草药提取,得到提取液加入赋形剂,制成各种剂型。【2】草药原料加6-10倍水泡30-60分钟后,加热煎煮3次,每次0.4-2小时,过滤,合并滤液并浓缩,冷却后离心除杂备用,浓缩液加入辅料,制成所需制剂。
3.制备制剂:将除杂后浓缩液加入辅料,制成所需制剂。
为对本发明理解其组方安全性、有效性的动物实验及结果说明其可有效治疗艾滋病。
动物实验如下:
艾力康急性毒性试验报告
摘要
以小鼠能耐受的最大浓度(0.20833g生药/ml)、最大容积(0.8ml/18.61g体重/次)的艾力康粉剂药量26.87g生药/kg一日内分三次给予小鼠灌胃,给药后立即观察小鼠的反应,并连续观察7天。结果,26只小鼠未见明显毒性反应,也未发生死亡,且小鼠体重增加。上述给药量相当于临床人用量的174.48倍,为临床安全用药提供了初步依据。
试验目的
以最大耐受量方法,测定小鼠对艾力康粉剂的最大耐受量,用来反映其急性毒性情况。
试验材料
一、受试药物:艾力康,由北京友和攀宝科技发展有限公司(徐焘先生委托)针对治疗艾滋病研制的中草药大复方胶囊,临床前将其粉剂进行两次粉碎后,用蒸馏水配制成所需浓度。
二、受试动物:健康昆明种小鼠46只,二级,体重18-20克,雌雄各半,随机分组。合格证号为SCK京2002-0006,由中国科学院遗传与发育生物学研究所动物中心提供。饲养在20-220C的室温环境中,自由摄取饲料及水。
方法与结果
一、 临床用法用量:口服胶囊,成人每日8-10粒,0.4g/粒,3次/天,平均10.8g/天。按平均体重70kg计算,临床成人日用量为0.154g生药/kg。
二、 给药浓度与剂量:根据小鼠一日内对艾力康药粉能耐受的最大浓度(0.20833g生药/ml)和最大容积(0.86ml/20g体重)计算,小鼠一日总给药量为26.87生药/kg。
三、 给药途径:该药临床采用口服给药,所以试验选用与临床一致的给药途径:灌胃给药。
四、 最大给药量试验:取小鼠26只,雌雄各半,试验前禁食12小时,以浓度为0.10833g生药/ml的艾力康粉剂给每只小鼠灌胃,每次0.8ml/18.61体重,一日内给药三次,间隔8小时,累计剂量为26.87g生药/kg,相当于人临床用量的174.48倍。给药立即观察动物反应,包括外观、活动、摄食、饮水、排泄等情况,连续7天。于实验结束时称体重。
五、 结果:除少数小鼠在灌胃后活动稍减少外,未见其他异常反应。小鼠毛发、肤色、精神、活动、饮食、饮水、排便等均正常,且小鼠体重均有所增长(见表),亦无一只小鼠死亡。重复试验一次,结果相同。
结论
本试验以一日最大耐受量的方法测定艾力康对小鼠的急性毒性,艾力康以小鼠能耐受的最大浓度(0.20833g生药/ml)、最大容积(0.86ml/20g体重)给小鼠灌胃给药,一日内分三次给予,最大给药量为26.87g生药/kg体重。相当于临床用药量的174.48倍。连续观察期间,未发现动物有明显的中毒症状,无一只小鼠死亡,体重均有增长。试验结果说明该药无明显毒性反应,为临床安全用药提供了初步依据。
中国中医研究院基础理论研究所
2005.9.21
艾力康对HIV-1作用的实验研究
提要:为研究艾力康对艾滋病病毒1型(HIV-1)的作用,按照下列方法进行了实验研究。结果显示,艾力康在488.281-976.563ug/ml剂量范围内,与阳性对照药AZT相比,该药对HIV-1有较好的抑制作用,其抑制率为58.50-70.42%,治疗指数为6.767。
材料和方法
细胞:MT-4细胞,由中国预防医学科学院病毒学研究所提供。
病毒:人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1),感染滴度为100TCID50,由中国预防医学科学院病毒学研究所提供。
药物:艾力康,由北京友和攀宝科技发展有限公司(徐焘先生委托)提供。
试剂:所用的噻唑兰剂MTT,为美国进口试剂,以pH7.2PBS配制成1ml/ml溶液置40C冰箱保存备用。其他如RPMI1640细胞培养液,96孔细胞培养板等,均为美国进口试剂和材料。
仪器:测定光密度所用酶标仪为法国生产的LP400全自动酶标仪。
步骤:
一、 药样艾力康对实验所用MT-4细胞的毒性作用
1. 向全板各孔加入100ul含10%胎牛血清的1640细胞培养液;向第1行加入药样100ul,用多头加样器吹打混匀,吸取100ul下移第2行,混匀,以此类推直至最后1行,弃去100ul,使各行呈2倍梯度稀释。留1行不加药作正常细胞对照。
2. 将生长旺盛的MT-4细胞悬液100ul加入板中各孔,使每孔中含有105/ml个细胞。
3. 置细胞板于370C 5% CO2孵箱中,培养5天。
4. MTT染色试验(方法同下所述)。
5. 计算药样艾力康对MT-4细胞的50%毒性浓度(CC50),方法见后。
二、 药样艾力康对HIV-1的作用
1. 药样倍比稀释,方法同上,设细胞对照、病毒对照和阳性药对照组。
2. 将生长旺盛的MT-4细胞悬液50ul加入板中各孔,使每孔中含有105个细胞。
3. 将400TCID50的HIV-1病毒液50ul,加入除正常细胞对照外的各孔中,置试验细胞板于370C、5%CO2孵箱中,培养5天后,进行MTT染色。
4. MTT染色试验:MTT试验的原理是,黄色的MTT被代谢旺盛的活细胞线粒体脱氢酶还原成蓝色的forma结晶 ,溶解后可用分光光度计测量光密度(OD)值,其兰色越深,OD值就越高,反映出活细胞的量就越多,因而可求出药物对病毒感染细胞的保护率。
1) 用多头加样器向细胞板各孔加入40ulMTT溶液,加盖置于避光的370C 5% CO2孵箱中培养2小时。
2) 从培养箱中取出细胞板,用8道加样器从每孔中移去200ul混合液,注意吸取时不得带出下部含有forma结晶的MTT细胞部分。
3) 用多道加样器向各孔中加入100ul二甲基亚砜(DMSO),以溶解forma结晶,轻摇10分钟,使结晶完全溶解。
4) 用酶标仪以550nm和620nm双波长读取吸收值(OD),打印出结果。
5) 结果计算:首先分别计算出各稀释度OD均值和标准差,再以下式计算各稀释度药物对HIV感染细胞的保护率:
感染给药OD—HIV感染对照OD
保护率= —— —— —— —— —— —— ×100%
细胞对照OD—HIV感染对照OD
达到50%保护的剂量,为50%有效剂量(ED50),或50%有效浓度(EC50)。关于ED50或EC50的计算,可根据各稀释度的保护率,利用正规几率单位法(Bliss法)计算ED50或EC50DE 的统计程序求出。对病毒感染细胞避免发生细胞病变(CPE)的保护率,就是对病毒感染细胞发生CPE的抑制率,即抑制率=保护率。药物对细胞毒性CC50,的计算同EC50,只是上述保护率公式中的HIV感染对照OD值应代入0.
实验结果
一、 艾力康对MT-4细胞的毒性作用
按上述方法,将艾力康用1640液稀释若干浓度,测定其对实验所用MT-4细胞的50%毒性浓度(CC50),结果如表1。
二、 艾力康对HIV-1感染细胞的保护作用
将艾力康用1640液配制成亚毒性浓度以下的若干个浓度,进行HIV-1实验。方法如上所述,结果见表2.
小结
艾力康为中草药大复方,以上实验结果显示,用Bliss法求得该药对HIV-1 50%有效浓度即半数有效浓度(EC50)为403.0457ug/ml,在此浓度以上对HIV-1感染细胞的保护率即对HIV-1的抑制率大于70%,其治疗指数(TI)为6.767;与阳性对照药AZT相比,该药对艾滋病病毒HIV-1有较好的抑制作用。
中国中医研究院基础理论研究所
2005年9月21日
具体实施步骤
按份量取25味草药,加水浸泡30分钟,加热煎煮3次,第一次加水15倍量提取2小时,二、三次加水10倍量各1小时,合并3次提取液过滤,滤液浓缩至适量,冷却后高速离心除杂,喷雾干燥成粉,加入辅料混合均匀,制成胶囊。
Claims (7)
1.一种治疗艾滋病的组方:“艾力康胶囊”其特征在于主要由下述草药或由下述草药的水和醇提取物作活性成分制成:
[1]灵芝孢子粉30g.
[2]紫花地丁60g.
[3]天花粉60g.
[4]忍冬藤60g.
[5]紫草60g.
[6]夏枯草60g.
[7]穿心莲60g.
[8]黄连60g.
[9]仙灵脾60g.
[10]半枝莲30g.
[11]干姜30g.
[12]白花蛇草30g.
[13]连翘30g.
[14]重楼30g.
[15]人参15g.
[16]黄芪60g.
[17]丹参20g.
[18]当归20g.
[19]五味子20g.
[20]熟地60g
[21].玫瑰花60g
[22].山萸肉60g
[23].虫草15g
[24]连翘30g
[25]肉桂30g
上述草药,其特征在于:醇提取,所用醇为乙醇,浓度为5-95%。
2.上述草药,其特征在于:可以加入保健品或药品中可接受的赋型剂制备成剂型。
3.上述草药,其特征在于:该剂型可以是片剂、口服液、颗粒剂、胶囊剂、煎膏剂、滴丸剂、丸剂、散剂中的任意一种。
4.根据7所述草药的制备工艺,如下:
按组方药量提取草药原料。
5. 提取浓缩:
【1】用浓度为5-95%乙醇或6-10倍量水对上述草药提取,得到提取液加入赋形剂,制成各种剂型。
6.【2】草药原料加6-10倍水泡30-60分钟后,加热煎煮3次,每次0.4-2小时,过滤,合并滤液并浓缩,冷却后离心除杂备用,浓缩液加入辅料,制成所需制剂。
7.将除杂后浓缩液加入辅料,制成制剂。
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