CN103749036B - 一种铁皮石斛蒴果的消毒灭菌方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种铁皮石斛蒴果的消毒灭菌方法，属于生物技术领域。该方法包括以下步骤：a、挑选蒴果：挑选健康饱满的铁皮石斛蒴果，切除花托和花瓣残留；b、清洗消毒：将挑选好的蒴果用洗涤液清洗干净后，晾干至蒴果表面无水，再用重量百分比为75%的酒精浸泡，擦干，备用；c、在播种前4小时，将上述备用的蒴果置入密闭容器中，按8～12g/m3的量，取质量浓度为2%的二氯异氰尿酸钠气雾剂点燃后置入所述密闭容器中进行灭菌，即可。本发明的有益效果是：消毒灭菌好，不会损害人体健康，且还能促进石斛种子提取萌发。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种铁皮石斛蒴果的消毒灭菌方法。
背景技术
铁皮石斛在自然条件下，坐果率极低，因此需要人工授粉实行异花授粉，提高坐果率，从而满足工厂化育苗的需求。授粉后，待果实由绿色变黄、种子散开即可采收蒴果。
一个铁皮石斛的蒴果中有几万粒种子，因种子中缺乏胚乳，导致铁皮石斛种子在自然环境下无法萌发。因此，工业化生产种苗都采用人工授粉结合无性扩繁的方式进行，把铁皮石斛种子撒在适宜培养基上，并在合适的温度、湿度、光照强度下培育。
在这个过程中，污染成为了影响铁皮石斛种苗成苗率和成本的最重要的因素。控制污染的关键就是控制撒播前的消毒灭菌效果，即铁皮石斛蒴果的消毒灭菌。
铁皮石斛蒴果的常规消毒灭菌方式是：清洁+75%酒精搽拭+0.1%升汞溶液浸泡+无菌水冲洗，搽干表面水分后再在无菌室撒播在培养基上。
常规消毒灭菌方式主要存在以下缺陷：1、无法对已经开裂的铁皮石斛蒴果进行消毒灭菌。2、升汞溶液有较强的毒性，能通过呼吸、皮肤接触的方式被人体吸收，从而易造成急慢性中毒，危害人体健康。3、汞为重金属，易造成重金属污染。
发明内容
本发明的目的是提供了一种消毒灭菌好，不会损害人体健康的铁皮石斛蒴果的消毒灭菌方法。
本发明所采取的技术方案是一种铁皮石斛蒴果的消毒灭菌方法，该方法包括以下步骤：
a、挑选蒴果：挑选健康饱满的铁皮石斛蒴果，切除花托和花瓣残留；
b、清洗消毒：将挑选好的蒴果用洗涤液清洗干净后，晾干至蒴果表面无水，再用重量百分比为75%的酒精浸泡，擦干，备用；
c、在播种前4小时，将上述备用的蒴果置入密闭容器中，按8～12g/m3的量，取质量浓度为2%的二氯异氰尿酸钠气雾剂点燃后置入所述密闭容器中进行灭菌，即可。
优选的，所述步骤b中浸泡的时间为30秒。
优选的，所述步骤c中灭菌的时间为1小时。
本发明的有益效果在于：
（1）气雾消毒法能解决已经开裂的铁皮石斛蒴果消毒问题，在不损伤铁皮石斛种子的前提下进行消毒灭菌。而常规升汞消毒法在灭菌过程中需要把铁皮石斛蒴果浸泡在升汞溶液中，铁皮石斛蒴果种子极其细小（像面粉一般细小），在升汞溶液中蒴果容易开裂，导致果实中的种子散出漂浮在升汞溶液中，从而无法播种。
（2）气雾消毒法灭菌效果好。常规升汞消毒法灭菌播种后，20天内的污染率为20%，气雾消毒法灭菌播种后，20天内的污染率为8%，大大提高了播种成功率，降低了生产成本。
（3）气雾消毒法能促进铁皮石斛种子提前萌发。采用常规升汞消毒法灭菌的铁皮石斛种子播种后，9天种子变绿；采用气雾消毒法播种的铁皮石斛种子，6天种子变绿，提前3天。
（4）气雾消毒法不含汞等有毒有害物质，不危害操作人员的人身健康，无重金属残留。
（5）气雾消毒法操作简便，一次点燃，能同时对多颗铁皮石斛蒴果进行消毒灭菌，灭菌后在无菌环境下能直接播种；升汞消毒法灭菌后，需用无菌水冲洗后，搽干才能播种，操作工序增加2道，更易造成新的二次污染。
具体实施方式
为使本领域技术人员详细了解本发明的生产工艺和技术效果，下面以具体的生产实例来进一步介绍本发明的应用和技术效果。
实施例一：
挑选健康饱满的铁皮石斛蒴果，切除花托和残留花瓣；将挑选好的蒴果用洗涤液清洗干净后，晾干至蒴果表面无水，再用重量百分比为75%的酒精浸泡30秒，擦干，备用；在播种前4小时，将上述备用的蒴果置入密闭容器中，按10g/m3的量，取质量浓度为2%的二氯异氰尿酸钠气雾剂点燃后置入所述密闭容器中进行灭菌1小时，即可。
实施例二：
挑选健康饱满的铁皮石斛蒴果，切除花托和花瓣残留；将挑选好的蒴果用洗涤液清洗干净后，晾干至蒴果表面无水，再用重量百分比为75%的酒精浸泡30秒，擦干，备用；在播种前4小时，将上述备用的蒴果置入密闭容器中，按8g/m3的量，取质量浓度为2%的二氯异氰尿酸钠气雾剂点燃后置入所述密闭容器中进行灭菌1小时，即可。
实施例三：
挑选健康饱满的铁皮石斛蒴果，切除花托和花瓣残留；将挑选好的蒴果用洗涤液清洗干净后，晾干至蒴果表面无水，再用重量百分比为75%的酒精浸泡30秒，擦干，备用；在播种前4小时，将上述备用的蒴果置入密闭容器中，按12g/m3的量，取质量浓度为2%的二氯异氰尿酸钠气雾剂点燃后置入所述密闭容器中进行灭菌1小时，即可。
采用经上述各实施例消毒灭菌后的铁皮石斛蒴果，取出铁皮石斛种子直接进行播种后，5-6天种子变绿，发芽率达98%左右。
最后应说明的是，以上实施例仅用以说明而非限制本发明的技术方案，尽管参照上述实施例对本发明进行了详细说明，本领域技术人员应当理解，依然可以对本发明进行修改或者等同替换，而不脱离本发明的精神和范围的任何修改或局部替换，其均应涵盖在本发明的权利要求范围中。
Claims (1)
1.一种铁皮石斛蒴果的消毒灭菌方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
a、挑选蒴果：挑选健康饱满的铁皮石斛蒴果，切除花托和花瓣残留；
b、清洗消毒：将挑选好的蒴果用洗涤液清洗干净后，晾干至蒴果表面无水，再用重量百分比为75％的酒精浸泡，擦干，备用；
c、在播种前4小时，将上述备用的蒴果置入密闭容器中，按8～12g/m3的量，取质量浓度为2％的二氯异氰尿酸钠气雾剂点燃后置入所述密闭容器中进行灭菌，即可；
所述步骤b中浸泡的时间为30秒；
所述步骤c中灭菌的时间为1小时。
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