CN103735900A

CN103735900A - 一种抑石镇痛的中药组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN103735900A
Application number: CN201310743193.5A
Authority: CN
Inventors: 张栩颜; 郑志远; 刘冠萍; 林艳英; 梁云飞; 陈瑛; 兰星
Original assignee: Guangxi Wuzhou Pharmaceutical Group Co Ltd
Current assignee: Guangxi Wuzhou Pharmaceutical Group Co Ltd
Priority date: 2013-12-30
Filing date: 2013-12-30
Publication date: 2014-04-23

Abstract

本发明涉及一种抑石镇痛的中药组合物及其制备方法，制成该中药组合物的方法主要为：取广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根共8味药材，石韦、海金沙草、玉米须用碱性水溶液提取，车前草用碳酸氢钠-乙醇溶液提取，广金钱草、白茅根、鸡骨草、茯苓水提，最后合并三种提取方法所得流浸膏。通过动物药效实验及临床试验，结果证明：本发明提供的中药组合物在治疗泌尿系统结石时，抑石镇痛效果优于现有技术。

Description

一种抑石镇痛的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及治疗泌尿系统结石的中药组合物，具体涉及一种抑石镇痛的中药组合物及其制备方法。

背景技术

泌尿系统结石属中医淋病中的“砂淋”、“石淋”及“血淋”范围，主要包括4种证型：

(1)气滞血瘀型：症见腰部隐痛，钝痛，脉正常或弦紧，舌正常；或溺时小便突然中断，疼痛剧烈，上连腰腹，砂石排出后疼痛即缓；或腰、侧腹部疼痛如掣如绞，痛引少腹，频频发作，痛时面色苍白、冷汗、呕恶，伴尿血或尿色黄赤，舌质暗红或有瘀点、瘀斑，脉弦紧或缓涩。

(2)湿热下注型：证见恶寒发热，腰痛，少腹急满，小便频数短赤，溺时涩痛难忍，淋沥不爽。苔黄腻，脉弦滑或滑数。

(3)肾阴虚型：结石久停，邪热久郁。真阴亏损，头昏耳鸣，腰酸腿痛，小便淋沥或不爽，失眠多梦，时有低热，心悸气短，五心烦热，盗汗，眼干或涩，腹胀便秘，纳差，脉细数，舌质红或少苔。

(4)肾阳虚型：结石久留，肾阳虚衰，腰腿酸重，精神不振，全身怯冷，四肢欠温或下半身常有冷感，尿频或小便不利，夜尿多，面色皓白，脉沉细弱，苔白舌质淡。

《卫生部药品标准》第13册公开的结石通片公开了如下信息：

1）组成：广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根。

2）制法：以上八味，取茯苓96g粉碎成细粉，剩余茯苓与其余玉米须等七味加水煎煮二次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.19—1.20(90℃)的清膏，加入茯苓细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，制颗粒，混匀，压制成1000片，包糖衣，即得。

3）功能与主治：清热利湿，通淋排石，镇痛止血。用于泌尿系统感染，膀胱炎，肾炎水肿，尿路结石，血尿，淋沥混浊，尿道灼痛等。

但是在所述部颁标准中没有明确各成分的配比量。

关于结石通的提取方法有以下报道：

中国专利申请01100318.9明确了结石通的制备方法为：所有药材粉碎为纳米级，微波萃取，减压浓缩，干燥。

中国专利申请200510032580.3公开了结石通丸、滴丸、微丸、分散片、微丸胶囊等制剂。该专利公开的制备方法采用部分茯苓粉碎，剩余茯苓与其余7味药材水提，或全部药材水提。

中国专利申请200510047400.9公开了一种用于治疗尿路结石的中药无糖颗粒剂及其制备方法。该专利原料为结石通片原料，公开的制备方法为部分茯苓粉碎，剩余茯苓与其余7味药材水提，采用低温干燥方法。

中国专利申请200910224023.x公开了治疗泌尿系统疾病的药物组合物及其组份的检测方法。该专利使用的原料为结石通片原料，公开的制备方法为部分茯苓粉碎，剩余茯苓与其余7味药材水提。公开了制剂中鸡骨草、绿原酸的检测方法。

中国专利申请200910249899.x公开了治疗泌尿系统疾病的药物组合物的制备方法及其组份的检测方法。该专利使用的原料为结石通片原料，公开的制备方法为部分茯苓粉碎，剩余茯苓与其余7味药材水提。公开了制剂中石韦的检测方法。

由于八味药材中活性成分的性质各不相同，如上述专利中制备方法均采用水提法，会导致一些活性成分无法提出，或提取率低，影响药效的发挥。

因此，需要提供一种可以提高药品的活性成分提取率，以提高药品疗效的制备方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种疗效确切的抑石镇痛的中药组合物。

本发明提供的一种抑石镇痛的中药组合物，其活性成分的制备方法包括以下步骤：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456份、玉米须302份、石韦228份、鸡骨草228份、茯苓228份、车前草165份、海金沙草165份、白茅根228份；

2）石韦、海金沙草、玉米须使用碱性水溶液为提取溶媒提取，提取物制成流浸膏；

3）车前草使用碳酸氢钠-乙醇溶液为提取溶媒提取，提取物制成流浸膏；

4）广金钱草、白茅根、鸡骨草、茯苓加水提取，提取物制成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，即得。

上面所述制备抑石镇痛的中药组合物步骤中：

所述步骤2）中碱性水溶液优选为：质量-体积百分比为0.1-5%的碳酸氢钠溶液。

所述步骤2）碱性水溶液进一步优选为：质量-体积百分比为0.5-1%的碳酸氢钠溶液。

所述步骤2）提取方法优选为：

石韦、海金沙草、玉米须加碱性水溶液提取2-3次，每次加药材总重量10-20倍量的碱性水溶液，每次提取时间为1-4小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

步骤3）中所述碳酸氢钠-乙醇溶液配比浓度优选为：0.1-5%碳酸氢钠的10-40%乙醇溶液。

步骤3）所述碳酸氢钠-乙醇溶液配比浓度进一步优选为：碳酸氢钠-乙醇溶液为：0.5-1%碳酸氢钠的20%乙醇溶液。

本发明所述的碳酸氢钠-乙醇溶液制备方法如下：

按所需提取溶媒总体积计算出碳酸氢钠含量为0.1-5%时所需的碳酸氢钠重量，以及配制成10-40%乙醇溶液所需的95%乙醇体积量，配制时先加入95%乙醇，再加入碳酸氢钠，最后加水至所需溶媒总体积，搅拌均匀，即得。

步骤3）所述提取方法优选为：

车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取2-3次，每次加药材总重量10-20倍量的碳酸氢钠-乙醇溶液，每次提取时间为1-4小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

步骤4）所述提取方法优选为：

广金钱草、白茅根、鸡骨草、茯苓加水提取2-3次，每次加药材总重量6-12倍量的水，每次煎煮1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

步骤4）所述提取方法进一步优选为：

广金钱草、白茅根、鸡骨草、茯苓加水提取2-3次，每次加药材总重量8-10倍量的水，每次煎煮2-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

步骤4）所述提取方法更进一步优选为：

广金钱草、白茅根、鸡骨草、茯苓加水提取2次，每次加药材总重量8-10倍量的水，每次煎煮2-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

本发明还提供了含上述中药组合物的制剂，该制剂由中药组合物单独制成或由中药组合物和药学上可接受的载体组成。

所述制剂为固体制剂或液体制剂，固体制剂为片剂、胶囊剂或颗粒剂；液体制剂为合剂或口服液。

所述药学上可接受的载体为乳糖、淀粉、糊精、甘露醇、蔗糖、羟丙甲基纤维素、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素、微粉硅胶、预胶化淀粉、山梨醇、硬脂酸镁、滑石粉、羟丙甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、苯甲酸钠、山梨酸钾、蔗糖或阿斯巴甜、味精、蜂蜜、甜橙香精中的一种或几种。

本发明中药组合物制剂的制备方法，该方法可以采用常规制剂工艺制备为各种常见剂型。

例如：

方法1：本发明中药组合物胶囊剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，干燥成干膏粉，加入胶囊剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的胶囊剂。

方法2：本发明中药组合物片剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，干燥成干膏粉，加入片剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的片剂。

方法3：本发明中药组合物颗粒剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，干燥成干膏粉，加入颗粒剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的颗粒剂。

方法4：本发明中药组合物合剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，加入合剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的合剂。

方法5：本发明中药组合物口服液

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，加入口服液常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的口服液。

方法6：本发明中药组合物糖浆剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，加入糖浆剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的糖浆剂。

本发明还提供了上述中药组合物或制剂在制备治疗泌尿系统结石疾病时提高抑石镇痛效果的应用。

泌尿系统结石在中医淋病中属石淋、砂淋，由于湿热下注，化炎灼阴，煎熬尿液，结为砂石，淤积水道，而为石淋。积于下则膀胱气化失司，尿出不利，甚则欲出不能，窘迫难受，痛引少腹；滞留于上，则影响肾脏司小便之职，郁结不得下泄，气血滞涩，不通则痛，由肾而波及膀胱、阴部；砂石伤络则为尿血。患者因为石不得出，经常会突然剧痛。因此，治疗石淋应在涤除砂石、通淋利尿的同时，为患者缓解结石未除时出现的剧烈疼痛。

本发明所公开的中药组合物有效成分是由广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根等原料制备而成。发明人在多年的制剂研究过程中发现，相同的药物用量，不同提取工艺制备所得的活性成分，其药理作用也会存在较大的差异和侧重点，为此，申请人对本发明的中药组合物结合药理实验进行了一系列的工艺研究，总结出本发明的提取工艺方法，并且经实验验证这样的改进带来了药效增效：石韦、海金沙草、玉米须用碱性水溶液提取，车前草用碳酸氢钠-乙醇溶液提取，广金钱草、白茅根、鸡骨草、茯苓水提，最后合并三种提取方法所得的流浸膏用于治疗泌尿系统结石时，其抑石镇痛作用远远优于相同处方的现有提取技术，临床疗效显示，本发明的提取物与现有技术相比，抑石镇痛疗效有显著差异，具有显著性进步。

发明人对本发明中药组合物检测，发现：

1、总黄酮成分含量很高，与现有提取工艺所得产品相比，两者有明显差异，可能是由于石韦、海金沙草、玉米须中此类成分易溶于碱性水溶液，所以在碱性水溶液中提取较完全。

2、以桃叶珊瑚苷为代表的环烯醚萜苷类成分含量很高，与现有提取工艺所得产品相比，两者有明显差异，可能是由于此类成分易溶于碱性乙醇溶液，所以在碳酸氢钠-乙醇溶液中提取较完全。

上述检测结果从侧面表明了各组成分中某些有效成分的提取优于现有技术。由于每味中药材均含有诸多的活性成分，至少尚未有任何一味中药被完完全全地分析清楚所有成分，不同的中药合并在一起用不同提取方式提取时，由于溶剂、温度及不同成分之间的相互影响和作用，会产生极为复杂的化学反应。因此，上述有效成分只是中药提取物活性成分的一部分，对于整体药物的药效作用影响尚不明确。目前我们只能通过药效实验来对比不同提取方式在某个治疗用途方面的优劣，尚无法从部分有效成分的变化指标来判断复方中成药的疗效变化。

我们通过“对乙二醇和活性维生素D3诱导的大鼠结石的影响”对比不同提取方式在抑制结石方面的疗效；通过“小鼠热板舔足反应的影响”实验对比不同提取方式在镇痛方面的作用。

发明人对结石通的各个药材的提取方法与药物优效进行了大量系统性的研究实验，通过把药材拆分为多组，用不同的方法提取，最后得到了本发明的提取技术方案，使相同配方的药材，发挥出治疗目的更明确、疗效更显著的作用。

本发明提供的一种抑石镇痛的中药组合物具有以下优点：

1、本发明提供的中药组合物可有效抑制结石形成，对乙二醇和活性维生素D3诱导的大鼠肾结石，可明显抑制其形成（P﹤0.01或P﹤0.05），能有效稀释尿液Ca²⁺浓度和UA浓度。且本发明与对比例组比较，存在显著性差异（P﹤0.01或P﹤0.05）。

2、本发明中药组合物镇痛效果显著，与空白对照组比较，显著提高小鼠在热板仪上的舔足时间（P＜0.01）；且本发明与对比例比较，存在极显著性差异（P＜0.01）或显著性差异（P＜0.05）。

3、临床试验结果显示：本发明在治疗泌尿系结石有很好的疗效，且本发明的治疗效果较对照组更为显著（P<0.05）。治疗后的疼痛程度检查结果也提示，实验组和对照组患者疼痛均减轻，而实验组的治疗效果优于对照组（P<0.05）。本发明药物的排石效果优于结石通片存在显著性差异；未排出的结石与服药前的相比，直径保持不变或减小，抑制结石继续生长的效果优于结石通片，而且本发明药物具有更显著的止痛作用。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

如无特殊说明，本发明中的乙醇浓度均为体积百分比。

实施例1：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）石韦、海金沙草、玉米须加质量-体积百分比为0.1%的碳酸氢钠溶液提取2次，每次分别加药材总重量20倍、15倍量的0.1%碳酸氢钠溶液，每次提取时间分别为4小时、2小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取2次，每次分别加药材总重量20倍、15倍量的0.1%碳酸氢钠的10%乙醇溶液，每次提取时间分别为4小时、2小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、白茅根、鸡骨草、茯苓加水提取2次，每次分别加药材总重量12倍、10倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例2：

2）石韦、海金沙草、玉米须加质量-体积百分比为1%的碳酸氢钠溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、10倍量的1%碳酸氢钠溶液，每次提取时间分别为4小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩至80℃时相对密度为1.10的清膏，干燥成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、10倍量的5%碳酸氢钠的40%乙醇溶液，每次提取时间分别为4小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、白茅根、鸡骨草、茯苓加水提取3次，每次分别加药材总重量12倍、10倍、6倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时、1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

实施例3：

2）石韦、海金沙草、玉米须加质量-体积百分比为0.5%的碳酸氢钠溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、10倍量的0.5%碳酸氢钠溶液，每次提取时间分别为3小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、10倍量的0.5%碳酸氢钠的30%乙醇溶液，每次提取时间分别为3小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

4）石韦、海金沙草、玉米须广金钱草、白茅根、鸡骨草、茯苓加水提取3次，每次分别加药材总重量10倍、8倍、8倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

实施例4：

2）石韦、海金沙草、玉米须加质量-体积百分比为5%的碳酸氢钠溶液提取2次，每次分别加药材总重量20倍、10倍量的5%碳酸氢钠溶液，每次提取时间分别为2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取2次，每次分别加药材总重量20倍、10倍量的1%碳酸氢钠的30%乙醇溶液，每次提取时间分别为2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、白茅根、鸡骨草、茯苓加水提取2次，每次分别加药材总重量10倍、10倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

实施例5：

2）石韦、海金沙草、玉米须加质量-体积百分比为2%的碳酸氢钠溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、15倍量的2%碳酸氢钠溶液，每次提取时间分别为2小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、15倍量的0.1%碳酸氢钠的40%乙醇溶液，每次提取时间分别为2小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、白茅根、鸡骨草、茯苓加水提取2次，每次分别加药材总重量10倍、8倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

实施例6：

2）石韦、海金沙草、玉米须加质量-体积百分比为0.1%的碳酸氢钠溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、15倍量的0.1%碳酸氢钠溶液，每次提取时间分别为2小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、15倍量的5%碳酸氢钠的10%乙醇溶液，每次提取时间分别为2小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

实施例7：

2）石韦、海金沙草、玉米须加质量-体积百分比为0.05%的氢氧化钠溶液提取2次，每次分别加药材总重量15倍、8倍量的碳酸氢钠溶液，每次提取时间分别为2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草加碳酸氢钠-乙醇溶液提取2次，每次分别加药材总重量15倍、8倍量的0.1%碳酸氢钠的30%乙醇溶液，每次提取时间分别为2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

实施例8：胶囊剂

1、组成：实施例1所得的流浸膏，干燥成干膏粉，得298g，加入微晶纤维素64g，硬脂酸镁5.6g，滑石粉5.6g。

2、制备方法：参照常规中药制剂的方法制成胶囊剂。

实施例9：片剂

1、组成：实施例2所得的流浸膏，干燥成干膏粉，得297g，加入微晶纤维素100g，交联羧甲基纤维素钠8.1g，微粉硅胶5.5g。

2、制备方法：参照常规中药制剂的方法制成片剂。

实施例10：颗粒剂

1、组成：实施例3所得的流浸膏，干燥成干膏粉，得315g，加入蔗糖1310g，预胶化淀粉156g。

2、制备方法：参照常规中药制剂的方法制成颗粒剂。

实施例11：口服液

1、组成：实施例4所得流浸膏4.8L(相对密度1.050～1.065/30℃)，蔗糖560g，苯甲酸钠5.5g。

2、制备方法：将流浸膏加热至80℃以上，然后加入蔗糖及防腐剂，灌封，灭菌，制成口服液。

实施例12：糖浆剂

1、组成：实施例5所得流浸膏9.1L(相对密度1.015～1.035/30℃)，蔗糖8.3kg，蜂蜜1.0kg，山梨酸钾22g。

2、制备方法：参照常规中药制剂的方法制成糖浆剂。

对比例1：

参考《卫生部药品标准》第13册公开的结石通片提取及制备方法，具体如下：

称取广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

以上八味，取茯苓96g粉碎成细粉，剩余茯苓与其余玉米须等七味加水煎煮二次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.19(90℃)的清膏，加入茯苓细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，即得。

对比例2：全水提

以上八味，加水提取3次，每次加药材总重量10倍量的水，每次煎煮3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时相对密度为1.10的清膏，加浓度为95%的乙醇使得含醇量达到60%，静置12小时，滤过，滤液浓缩至70℃时相对密度为1.15的清膏，干燥成干膏粉，即得。

对比例3：全醇提

以上八味，用乙醇提取3次，每次加药材总重量10倍量80%乙醇，每次提取2小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩至60℃时相对密度为1.15的清膏，干燥成干膏粉，即得。

实验例1：石韦、海金沙草、玉米须提取方法比较

用不同的提取方法对石韦、海金沙草、玉米须进行提取，通过动物药效实验比较不同提取物的抑制结石效果。

1提取溶媒：0.5%的碳酸氢钠溶液、30%乙醇溶液、水。

2提取方法：石韦、海金沙草、玉米须按处方量称取，加上述不同溶媒分别提取3次，每次分别加药材总重量12倍、10倍、10倍量的溶媒，每次提取时间分别为5小时、4小时、3小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏。

3抑石效果试验方法：对乙二醇和活性维生素D3诱导的大鼠结石的影响

4分析结果见表1

表1各组大鼠肾脏损伤评分结果

注：与空白对照组比较，**P<0.01，*P<0.05；与0.5%碳酸氢钠实验比较，#P＜0.05。

表1结果显示：以0.5%的碳酸氢钠溶液为溶媒提取所得的提取物，肾脏结晶损伤最小，抑制结石效果最好。0.5%碳酸氢钠溶液与30%乙醇实验组、水实验组相比，抑制结石效果具有显著性差异(P<0.05)。

实验例2：车前草提取方法比较

用不同的提取方法对车前草进行提取，通过动物药效实验比较不同提取物的镇痛作用。

1提取溶媒：0.5%碳酸氢钠的20%乙醇、20%乙醇溶液、水。

2提取方法：按处方量称取车前草，加上述不同溶媒分别提取3次，每次分别加药材总重量12倍、10倍、10倍量的溶媒，每次提取时间分别为5小时、4小时、3小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏。

3镇痛效果试验方法：小鼠热板舔足反应的影响

4分析结果见表2

表2不同提取方法对小鼠热板舔足反应痛阈值的影响

注：与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01；与0.5%碳酸氢钠的20%乙醇溶液实验组比较，#P<0.05，##P<0.01。

表2结果显示：以0.5%碳酸氢钠的20%乙醇为溶媒提取所得的提取物，小鼠热板舔足反应痛阈值最高，镇痛效果最好。0.5%碳酸氢钠溶液与30%乙醇实验组、水实验组相比，镇痛效果具有显著性差异。

实验例3：中药组合物提取方法的比较

1样品分组

实施例1-7、对比例1-3分别制成干膏粉，分组。

2对比项目

环烯醚萜苷类含量：用高效液相色谱法测定以桃叶珊瑚苷为对照的环烯醚萜苷类有效成分；

总黄酮含量：用比色法测定总黄酮含量。

3实验结果，见表3

表3不同提取方法对药材的提取效果

表3结果显示：与对比例1-3组相比，本发明实施例1-7组的总黄酮含量、以桃叶珊瑚苷为代表的环烯醚萜苷类有效成分含量高于对比例1-3组。实验结果提示本发明技术提取的环烯醚萜苷类成分及总黄酮与现有技术相比，提取较完全。

抑石镇痛药效实验

一、对乙二醇和活性维生素D3诱导的大鼠结石的影响

1、实验材料

（1）动物

健康SPF级SD大鼠，雄性，体重180±20g，购买自广西医科大学实验动物中心（生产许可证号：SCXK桂2009-0002）。

（2）药物与试剂

本发明实施例1-7、对比例1-3、乙二醇（阿拉丁）、活性维生素D3（青岛双鲸鱼药业）、0.9%生理盐水（广西南宁百会药业集团有限公司）

（3）仪器

解剖显微镜（上海比目仪器）、BS-190全自动生化分析仪（迈瑞）

2、实验方法

（1）造模

大鼠每天自由摄取含0.5%乙二醇水溶液（饮水），隔日灌胃给予活性维生素D3[la(OH)VD3]0.5μg/（mL/只），造模天数为21天；模型组大鼠去除背毛，做B超检测，确定模型是否成功建立。

（2）实验分组

取造模成功大鼠110只，随机分为11组，每组10只，分别为空白对照组、实施例1-7组、对比例1-3组。

（3）给药

实施例1-7组、对比例1-3组大鼠（于造模结束后）每天按生药量3.1g/kg剂量灌胃给予相应药物，1次/天，灌胃量为2mL/100g体重，连续21天。空白对照组每天给予等容量的生理盐水。

（4）指标检测

实验结束前一天对各组大鼠禁食，收集24h尿液，采用铬酸钾氧化甲基红催化光度法测尿酸（UA）含量，采用全自动生化分析仪测尿钙含量。制定评分标准判定肾脏草酸钙结晶及肾小管扩张程度，判定标准如下：（1）结晶观察程度：0分：无结晶；1分：有散在的结晶亮点；2分：广泛的不成堆或局限结晶；3分：有成堆结晶散在不连接；4分：结晶成堆且互相连接；5分：广泛成堆结晶，连接成片。（2）肾小管扩张程度：0分：无扩张；1分：散在轻度扩张；2分：广泛轻度扩张伴散在中度扩张；3分：广泛中度扩张伴散在重度扩张；4分：广泛重度扩张。所有数据均采用SPSS16.0统计软件统计，两两比较采用t检验，以“均数±标准差”表示。

表4各组大鼠肾脏损伤评分结果

注：与空白对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与对比例1组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；与对比例2组比较，▲P＜0.05，▲▲p＜0.01；与对比例3组比较，◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

表5各试验药物对大鼠尿Ca²⁺、尿酸含量的影响

由表4、表5可知，与空白对照组相比，实施例1-7组、对比例1-3组显著抑制大鼠结石形成和肾小管扩张，及明显降低尿液（24h）Ca²⁺浓度和尿酸浓度（P<0.05，P<0.01）。且实施例1-7组与对比例1-3组比较，均存在显著性差异（P<0.05，P<0.01），且肾皮质、髓质结晶量很少，肾乳头钙化斑极少，肾盂和肾小管未见明显扩张积水。

结果表明：本发明提供的中药组合物可有效抑制结石形成，利尿效果明显（肾孟积水少），且能有效稀释尿液Ca²⁺浓度和UA浓度，效果优于现有技术。二、对疼痛模型—小鼠热板舔足反应的影响

1、实验材料

（1）动物

健康SPF级昆明小鼠，18～22g，雌性，购买自广西医科大学实验动物中心（生产许可证号：SCXK桂2009-0002）。

（2）药品

本发明实施例1-5、对比例1-3、0.9%生理盐水（贵州科伦药业有限公司）、阿司匹林（阿斯利康制药有限公司）

（3）仪器

YLS-6B热板仪（济南益延科技发展有限公司）、AE100型1/10000电子分析天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）

2、实验方法

（1）将小鼠置于预热至55±0.5℃的热板仪上，记录小鼠自放入至出现舔足的时间（s），作为该鼠的痛阈值。剔除痛阈值小于5s、大于30s的小鼠。

（2）取预选合格小鼠100只，随机分10组为：空白对照组（生理盐水）、阿司匹林组（0.15g/kg）、实施例1-5组和对比例1-3组（4.5g/kg），每组10只。分别测定灌胃给药前和给药后1h各组小鼠的痛阈值，超过60s无反应的，以60s计。3、实验结果

表6各试验药物对小鼠热板舔足反应痛阈值的影响（

表6结果显示，与空白对照组比较，实施例1-7组及对比例1-3组痛阈值均显著提高（P＜0.01，P＜0.05）；且实施例1-7组与对比例组1-3比较，存在显著性差异（P＜0.01）。

结果表明，本发明提供的中药组合物镇痛作用优于现有技术。

临床试验：

对本发明抑石镇痛的疗效进行临床观察，通过对比服药前后患者的排石情况及疼痛的缓解效果分析本发明的抑制结石、止痛效果。

1诊断依据

1.1肾、输尿管结石

1.1.1腰部或上腹部持续钝痛或阵发性剧烈绞痛，放射至同侧下腹部或外阴，绞痛发作时可伴有出冷汗、呕吐、恶心，双侧同时有梗阻者可有尿闭。

1.1.2可有肉眼或镜下血尿，绞痛发作时血尿加重。

1.1.3X线泌尿系平片大多数可见结石阴影。

1.1.4静脉尿路造影可进一步确定腹部平片中钙化阴影是否与泌尿系有关，可确定结石所在部位，有无梗阻，并可显示X线阴性结石。

1.1.5同位素肾图、B超、CT对诊断有一定帮助。

1.2膀胱结石

1.2.1排尿困难、尿流中断、尿末剧痛和血尿。合并感染时出现尿频、尿急，疼痛加重。

1.2.2膀胱区X线透视或摄片可见结石影。

1.2.3金属尿道探条进入膀胱，有与结石碰击或摩擦感。

1.2.4膀胱镜检查可见结石。

1.2.5B超对诊断有一定帮助。

1.3尿道结石

1.3.1排尿困难，尿流滴沥或尿潴留。

1.3.2沿尿道或肛门指诊可触及结石，或以金属探条触及结石。

1.3.3X线平片可见结石阴影。

1.4疼痛程度

按照WHO疼痛程度分级(VRS)：0级为无痛，1～3级为轻度疼痛，4～7级为中度疼痛，8～10级为重度疼痛。将此评估表发给每个患者，在接受治疗前，由患者根据自己的疼痛情况，在表中圈出自己所处的级别。

2病例选择

年龄20～70岁，愿意接受2周治疗者，签署进入临床研究知情同意书者。

3治疗药物

实验组：实施例3

对照组：结石通片，广西梧州制药（集团）股份有限公司

4疗效指标

4.1排石情况

治愈：临床症状及体征均消失，结石排出，彩超或腹平片示肾积水消失，结石阴影消失；

好转：临床症状消失，结石下移、缩小或部分排出，肾积水基本消失；

无效：症状无明显改善，结石无移动或肾积水无变化。

4.2疼痛治疗效果

疼痛疗效评定用药2周后按照VRS分级再评估。

显效：疼痛减轻二级以上；

有效：疼痛减轻一级；

无效：疼痛未减轻或虽有减轻但疗程中又回到原有程度及以上。总有效率以显效与有效之和计算。

5临床分组及治疗方法

入组病例126例患者，男70例，女56例；平均约41岁；所有患者均经彩超或腹平片检查确诊为泌尿系统结石，结石直径在0.3～1.0cm之间；其中肾结石48例，输尿管结石42例，膀胱结石36例，病例按不同病种随机分为两组（所有患者均有一定疼痛）。

治疗方法：

实验组：本发明实施例5，每次服用量相当于原药材10g，一日三次。

对照组：结石通片，每次1.5g，一日三次。

实验组和对照组在服药同时，加大每日饮水量，平均日饮水量为3000～5000ml，多做运动，以跳跃运动或登楼梯运动为主，双手于背侧交叉叩击后腰部。

6结果

实验例组病例中大部分患者服用本发明实施例3后，阵发性腰痛伴血尿现象减小或消失，经彩超或腹平片检查，结石下移、减小或消失。

表7：泌尿系结石治疗效果

注：实验组与对照组比较，*P＜0.05。

表8：治疗后疼痛程度结果

注：实验组与对照组比较，*P＜0.05。

结果分析：实验组与对照组在治疗泌尿系结石均有很好的疗效，但实验组的治疗效果较对照组更为显著（P<0.05）。治疗后的疼痛程度检查结果也提示，实验组和对照组患者疼痛均减轻，而实验组的治疗效果优于对照组（P<0.05）。本发明药物的排石效果优于结石通片存在显著性差异；未排出的结石与服药前的相比，直径保持不变或减小，抑制结石继续生长的效果优于结石通片，而且本发明药物具有更显著的止痛作用。

典型病例：

1.王某，男性，42岁。反复右腰痛1年，活动后加重，无恶心、呕吐及肉眼血尿，2007-05-17日被诊断为右肾结石（中医证候：石淋）。体查：生命体征平稳，心肺检查阴性，腹部检查未见异常。右肾区未见隆起，有轻压痛和叩击痛，左肾区阴性。肾脏B超检查，右肾多发性结石，最大一枚结石为直径为0.8cm。经KUB+IVP检查，在右肾盂及肾盏内可见多枚大小不等结石致密影，予本发明实施例8胶囊剂，3次/日，每次5粒。并配合跳跃动作及日饮开水4000ml左右，服药5天后疼痛等诸症消失，小便正常，第7天小便时排出结石3枚，直径约0.7cm，质硬，捻不易破碎，第12天再排出结石1枚，直径约0.8cm。第16天复查尿常规正常，B超探查提示双肾、输尿管、膀胱均未见结石。

2.楼某，女性，52岁。3年前曾患肾结石，因自觉左肾区有麻木胀痛，不能用力，用力即感腰酸困，麻木胀痛加重，于2009-03-19日去医院检查，B超示：左肾肾盂内见多个强回声光斑，最大的为0.6cm×0.4cm，后方伴声影。诊断为左肾结石。因患者要求中医保守治疗，经建议，采用本发明实施例10颗粒剂，3次/日，每次2袋。并配合跳跃动作及日饮开水4000ml左右，服药3天后疼痛减轻，6天后诸症消失。10天后复查B超，提示双肾、输尿管、膀胱均未见结石。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims

1.一种抑石镇痛的中药组合物，其特征在于其活性成分的制备方法包括以下步骤：

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，即得。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤2）所述碱性水溶液为：质量-体积百分比为0.1-5%的碳酸氢钠溶液。

3.根据权利要求2所述的中药组合物，其特征在于，所述碱性水溶液为：质量-体积百分比为0.5-1%的碳酸氢钠溶液。

4.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤2）所述提取方法为：

5.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤3）中所述碳酸氢钠-乙醇溶液为：0.1-5%碳酸氢钠的10-40%乙醇溶液。

6.根据权利要求5所述的中药组合物，其特征在于，所述碳酸氢钠-乙醇溶液为：0.5-1%碳酸氢钠的20%乙醇溶液。

7.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤3）所述车前草的提取方法为：

8.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤4）所述水提方法为：

9.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤4）所述水提方法为：

10.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤4）所述水提方法为：

广金钱草、白茅根、鸡骨草、茯苓加水提取2次，每次加药材总重量8-10倍量的水，每次煎煮3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。