CN103735901A - 一种利尿抗炎的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种利尿抗炎的中药组合物及其制备方法，制成该中药组合物的方法主要为：取广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根共8味药材，鸡骨草用酸性水溶液提取，车前草、石韦、白茅根三味用低浓度乙醇提取后，车前草、石韦、白茅根的醇提药渣合并广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草一起水提，最后合并三种提取方法所得流浸膏。通过动物药效实验及临床试验，结果证明：本发明提供的中药组合物在治疗泌尿系统结石时，利尿抗炎效果优于现有技术。

Description

一种利尿抗炎的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及治疗泌尿系统结石的中药组合物，具体涉及一种利尿抗炎的中药组合物及其制备方法。

背景技术

泌尿系统结石属中医淋病中的“砂淋”、“石淋”及“血淋”范围，主要包括4种证型：

(1)气滞血瘀型：症见腰部隐痛，钝痛，脉正常或弦紧，舌正常；或溺时小便突然中断，疼痛剧烈，上连腰腹，砂石排出后疼痛即缓；或腰、侧腹部疼痛如掣如绞，痛引少腹，频频发作，痛时面色苍白、冷汗、呕恶，伴尿血或尿色黄赤，舌质暗红或有瘀点、瘀斑，脉弦紧或缓涩。

(2)湿热下注型：证见恶寒发热，腰痛，少腹急满，小便频数短赤，溺时涩痛难忍，淋沥不爽。苔黄腻，脉弦滑或滑数。

(3)肾阴虚型：结石久停，邪热久郁。真阴亏损，头昏耳鸣，腰酸腿痛，小便淋沥或不爽，失眠多梦，时有低热，心悸气短，五心烦热，盗汗，眼干或涩，腹胀便秘，纳差，脉细数，舌质红或少苔。

(4)肾阳虚型：结石久留，肾阳虚衰，腰腿酸重，精神不振，全身怯冷，四肢欠温或下半身常有冷感，尿频或小便不利，夜尿多，面色皓白，脉沉细弱，苔白舌质淡。

《卫生部药品标准》第13册公开的结石通片公开了如下信息：

1）组成：广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根。

2）制法：以上八味，取茯苓96g粉碎成细粉，剩余茯苓与其余玉米须等七味加水煎煮二次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.19—1.20(90℃)的清膏，加入茯苓细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，制颗粒，混匀，压制成1000片，包糖衣，即得。

3）功能与主治：清热利湿，通淋排石，镇痛止血。用于泌尿系统感染，膀胱炎，肾炎水肿，尿路结石，血尿，淋沥混浊，尿道灼痛等。

但是在所述部颁标准中没有明确各成分的配比量。

关于结石通的提取方法有以下报道：

中国专利申请01100318.9明确了结石通的制备方法为：所有药材粉碎为纳米级，微波萃取，减压浓缩，干燥。

中国专利申请200510032580.3公开了结石通丸、滴丸、微丸、分散片、微丸胶囊等制剂。该专利公开的制备方法采用部分茯苓粉碎，剩余茯苓与其余7味药材水提，或全部药材水提。

中国专利申请200510047400.9公开了一种用于治疗尿路结石的中药无糖颗粒剂及其制备方法。该专利原料为结石通片原料，公开的制备方法为部分茯苓粉碎，剩余茯苓与其余7味药材水提，采用低温干燥方法。

中国专利申请200910224023.x公开了治疗泌尿系统疾病的药物组合物及其组份的检测方法。该专利使用的原料为结石通片原料，公开的制备方法为部分茯苓粉碎，剩余茯苓与其余7味药材水提。公开了制剂中鸡骨草、绿原酸的检测方法。

中国专利申请200910249899.x公开了治疗泌尿系统疾病的药物组合物的制备方法及其组份的检测方法。该专利使用的原料为结石通片原料，公开的制备方法为部分茯苓粉碎，剩余茯苓与其余7味药材水提。公开了制剂中石韦的检测方法。

由于八味药材中活性成分的性质各不相同，如上述专利中制备方法均采用水提法，会导致一些活性成分无法提出，或提取率低，影响药效的发挥。

因此，需要提供一种可以提高药品的活性成分提取率，以提高药品疗效的制备方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种疗效确切的利尿抗炎的中药组合物。

本发明提供的一种利尿抗炎的中药组合物，其活性成分的制备方法包括以下步骤：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456份、玉米须302份、石韦228份、鸡骨草228份、茯苓228份、车前草165份、海金沙草165份、白茅根228份；

2）鸡骨草使用酸性水溶液为提取溶媒提取，提取物制成流浸膏；

3）车前草、石韦、白茅根三味药材加体积百分比为20-40%的乙醇提取，提取物制成流浸膏；

4）广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取，提取物制成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，即得。

上面所述制备利尿抗炎的中药组合物步骤中：

所述步骤2）中酸性水溶液优选为：质量-体积百分比为0.1-5%的柠檬酸溶液。

所述步骤2）中酸性水溶液进一步优选为：质量-体积百分比为0.5-1%的柠檬酸溶液。

所述步骤2）中提取方法优选为：

鸡骨草加酸性水溶液提取2-3次，每次加药材总重量8-20倍量的酸性水溶液，每次提取时间为1-4小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

所述步骤3）优选为：

车前草、石韦、白茅根三味药材加体积百分比为20-40%的乙醇提取2-3次，每次加两味药材总重量6-12倍量乙醇，每次提取时间为1-5小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏。

所述步骤3）进一步优选为：

车前草、石韦、白茅根三味药材加体积百分比为30%的乙醇提取2-3次，每次加两味药材总重量8-10倍量乙醇，每次提取时间为2-4小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏。

所述步骤4）优选为：

广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取2-3次，每次加中药总重量6-12倍量的水，每次煎煮1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

所述步骤4）进一步优选为：

广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取2-3次，每次加中药总重量8-10倍量的水，每次煎煮2-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

所述步骤4）更进一步优选为：

广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取2次，每次加中药总重量8-10倍量的水，每次煎煮2-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

本发明还提供了含上述中药组合物的制剂，该制剂由中药组合物单独制成或由中药组合物和药学上可接受的载体组成。

所述制剂为固体制剂或液体制剂，固体制剂为片剂、胶囊剂或颗粒剂；液体制剂为合剂或口服液。

所述药学上可接受的载体为乳糖、淀粉、糊精、甘露醇、蔗糖、羟丙甲基纤维素、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素、微粉硅胶、预胶化淀粉、山梨醇、硬脂酸镁、滑石粉、羟丙甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、苯甲酸钠、山梨酸钾、蔗糖或阿斯巴甜、味精、蜂蜜、甜橙香精中的一种或几种。

本发明中药组合物制剂的制备方法，该方法可以采用常规制剂工艺制备为各种常见剂型。

例如：

方法1：本发明中药组合物胶囊剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，干燥成干膏粉，加入胶囊剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的胶囊剂。

方法2：本发明中药组合物片剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，干燥成干膏粉，加入片剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的片剂。

方法3：本发明中药组合物颗粒剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，干燥成干膏粉，加入颗粒剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的颗粒剂。

方法4：本发明中药组合物合剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，加入合剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的合剂。

方法5：本发明中药组合物口服液

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，加入口服液常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的口服液。

方法6：本发明中药组合物糖浆剂

取中药组合物制备步骤5）中所得中药组合物，加入糖浆剂常用辅料，按常规生产方法制备得本发明中药组合物的糖浆剂。

本发明还提供了上述中药组合物或制剂在制备治疗泌尿系统结石疾病时提高利尿抗炎效果的应用。

泌尿系统结石在中医淋病中属石淋、砂淋，由于湿热下注，化炎灼阴，煎熬尿液，结为砂石，淤积水道，而为石淋。积于下则膀胱气化失司，尿出不利，甚则欲出不能，窘迫难受，痛引少腹；滞留于上，则影响肾脏司小便之职，郁结不得下泄，气血滞涩，不通则痛，由肾而波及膀胱、阴部；砂石伤络则为尿血。因此，治疗石淋应在涤除砂石、通淋利尿的同时，对泌尿系统出现的感染症状及时治疗，防止炎症进一步扩大，影响到其他正常器官。

本发明所公开的中药组合物有效成分是由广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根等原料制备而成。发明人在多年的制剂研究过程中发现，相同的药物用量，不同提取工艺制备所得的活性成分，其药理作用也会存在较大的差异和侧重点，为此，申请人对本发明的中药组合物结合药理实验进行了一系列的工艺研究，总结出本发明的提取工艺方法，并且经实验验证这样的改进带来了药效增效：鸡骨草用酸性水溶液提取，车前草、石韦、白茅根三味用低浓度乙醇提取后，车前草、石韦、白茅根的醇提药渣合并广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草一起水提，最后合并三种提取方法所得的流浸膏用于治疗泌尿系统结石时，其利尿抗炎作用远远优于相同处方的现有提取技术，临床疗效显示，本发明的提取物与现有技术相比，利尿抗炎疗效有显著差异，具有显著性进步。

发明人对本发明中药组合物检测，发现：

1、以相思子碱为代表的生物碱类成分含量很高，与现有提取工艺所得产品相比，两者有明显差异，可能是由于鸡骨草中此类成分易溶于酸性水溶液，所以在酸性水溶液中提取较完全。

2、以熊果酸为代表的有机酸类成分含量很高与现有提取工艺所得产品相比含量较高，可能是由于车前草、石韦、白茅根的有机酸类成分易溶于低浓度醇溶液，所以在20-40%乙醇中提取较完全。

上述检测结果从侧面表明了各组成分中某些有效成分的提取优于现有技术。由于每味中药材均含有诸多的活性成分，至少尚未有任何一味中药被完完全全地分析清楚所有成分，不同的中药合并在一起用不同提取方式提取时，由于溶剂、温度及不同成分之间的相互影响和作用，会产生极为复杂的化学反应。因此，上述有效成分只是中药提取物活性成分的一部分，对于整体药物的药效作用影响尚不明确。目前我们只能通过药效实验来对比不同提取方式在某个治疗用途方面的优劣，尚无法从部分有效成分的变化指标来判断复方中成药的疗效变化。

我们通过“对大鼠腹腔毛细血管通透性的影响”动物实验对比不同提取方式在保护抗炎的疗效；通过“对大鼠的利尿作用”动物实验对比不同提取方式在利尿面的作用。

发明人对结石通的各个药材的提取方法与药物优效进行了大量系统性的研究实验，通过把药材拆分为多组，用不同的方法提取，最后得到了本发明的三组提取技术方案，使相同配方的药材，发挥出治疗目的更明确、疗效更显著的作用。

本发明提供的一种利尿抗炎的中药组合物具有以下优点：

1、本发明中药组合物利尿作用明显，与对比例1-3相比，本发明对大鼠的利尿作用显著优于现有技术（P<0.01或P<0.05）。

2、干预大鼠毛细血管通透性的影响试验结果显示：本发明对大鼠毛细血管通透性有降低作用，与对比例1-3组相比，具有显著性差异（P＜0.01或P＜0.05）。

3、临床试验结果显示：本发明对结石引起的炎症有明显的改善作用，能加强利尿效果，便结石易于排出。本发明在治疗泌尿系炎症和尿少的效果非常显著，使用本发明样品治疗后，消炎总有效率为95.07%、利尿总有效率为91.55%，与对照组相比均有显著性差异（P<0.05），优于现有技术的疗效。结果表明，本发明药物的抗炎和利尿效果与现有技术结石通片相比，疗效更优。。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

如无特殊说明，本发明中的乙醇浓度均为体积百分比。

实施例1：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加质量-体积百分比为0.1%的柠檬酸溶液提取2次，每次分别加药材总重量20倍、15倍量的柠檬酸溶液，每次提取时间分别为4小时、2小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草、石韦、白茅根三味药材加体积百分比为20%的乙醇提取2次，每次分别加两味药材总重量12倍、8倍量乙醇，每次提取时间分别为5小时、3小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取2次，每次分别加中药总重量12倍、10倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例2：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加质量-体积百分比为1%的柠檬酸溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、8倍量的柠檬酸溶液，每次提取时间分别为4小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草、石韦、白茅根三味药材加体积百分比为40%的乙醇提取3次，每次分别加两味药材总重量12倍、8倍、6倍量乙醇，每次提取时间分别为3小时、3小时、1小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取3次，每次分别加中药总重量12倍、10倍、6倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时、1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例3：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加质量-体积百分比为0.5%的柠檬酸溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、10倍量的柠檬酸溶液，每次提取时间分别为3小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草、石韦、白茅根三味药材加体积百分比为30%的乙醇提取3次，每次分别加两味药材总重量10倍、8倍、8倍量乙醇，每次提取时间分别为4小时、3小时、2小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取3次，每次分别加中药总重量10倍、8倍、8倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例4：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加质量-体积百分比为5%的柠檬酸溶液提取2次，每次分别加药材总重量20倍、10倍量的柠檬酸溶液，每次提取时间分别为2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草、石韦、白茅根三味药材加体积百分比为35%的乙醇提取2次，每次分别加两味药材总重量10倍、8倍量乙醇，每次提取时间分别为4小时、2小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取2次，每次分别加中药总重量10倍、10倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例5：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加质量-体积百分比为0.1%的柠檬酸溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、15倍量的柠檬酸溶液，每次提取时间分别为2小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草、石韦、白茅根三味药材加体积百分比为25%的乙醇提取2次，每次分别加两味药材总重量10倍、8倍量乙醇，每次提取时间分别为4小时、2小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取2次，每次分别加中药总重量10倍、8倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例6：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加体积百分比为1%的醋酸溶液提取3次，每次分别加药材总重量20倍、15倍、10倍量的醋酸溶液，每次提取时间分别为2小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草、石韦、白茅根三味药材加体积百分比为20%的乙醇提取2次，每次分别加两味药材总重量10倍、10倍量乙醇，每次提取时间分别为3小时、2小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取2次，每次分别加中药总重量10倍、8倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例7：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

2）鸡骨草加体积百分比为0.1%的稀盐酸溶液提取2次，每次分别加药材总重量10倍、8倍量的稀盐酸溶液，每次提取时间分别为2小时、2小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

3）车前草、石韦、白茅根三味药材加体积百分比为40%的乙醇提取3次，每次分别加两味药材总重量10倍、8倍、8倍量乙醇，每次提取时间分别为2小时、2小时、1小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏；

4）广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取2次，每次分别加中药总重量10倍、10倍量的水，每次分别煎煮3小时、2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，得中药组合物。

实施例8：胶囊剂

1、组成：实施例1所得的流浸膏，干燥成干膏粉，得290g，加入乳糖63g，硬脂酸镁5.5g，微粉硅胶5.5g。

2、制备方法：参照常规中药制剂的方法制成胶囊剂。

实施例9：片剂

1、组成：实施例2所得的流浸膏，干燥成干膏粉，得312g，加入乳糖103g，预胶化淀粉8.7g，微粉硅胶5.6g。

2、制备方法：参照常规中药制剂的方法制成片剂。

实施例10：颗粒剂

1、组成：实施例3所得的流浸膏，干燥成干膏粉，得300g，加入糊精1280g，淀粉148g。

2、制备方法：参照常规中药制剂的方法制成颗粒剂。

实施例11：口服液

1、组成：实施例4所得流浸膏4.2L(相对密度1.050～1.065/30℃)，蔗糖500g，味精8.5g，山梨酸钾5.1g。

2、制备方法：将流浸膏加热至80℃以上，然后加入蔗糖及防腐剂，灌封，灭菌，制成口服液。

实施例12：糖浆剂

1、组成：实施例6所得流浸膏9.1L(相对密度1.015～1.035/30℃)，蔗糖8.3kg，蜂蜜1.0kg，山梨酸钾22g。

2、制备方法：参照常规中药制剂的方法制成糖浆剂。

对比例1：

参考《卫生部药品标准》第13册公开的结石通片提取及制备方法，具体如下：

称取广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

以上八味，取茯苓96g粉碎成细粉，剩余茯苓与其余玉米须等七味加水煎煮二次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.19(90℃)的清膏，加入茯苓细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，即得。

所得中药组合物干品重量为270.8kg。

对比例2：全水提

称取广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

以上八味，加水提取3次，每次加药材总重量10倍量的水，每次煎煮3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至70℃时相对密度为1.10的清膏，加浓度为95%的乙醇使得含醇量达到60%，静置12小时，滤过，滤液浓缩至70℃时相对密度为1.15的清膏，干燥成干膏粉，即得。

对比例3：全醇提

称取广金钱草456g、玉米须302g、石韦228g、鸡骨草228g、茯苓228g、车前草165g、海金沙草165g、白茅根228g；

以上八味，用乙醇提取3次，每次加药材总重量10倍量80%乙醇，每次提取2小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩至60℃时相对密度为1.15的清膏，干燥成干膏粉，即得。

实验例1：鸡骨草提取方法比较

用不同的提取方法对鸡骨草进行提取，通过动物药效实验比较不同提取物的抗炎效果。

1提取溶媒：0.5%的柠檬酸溶液、30%乙醇溶液、水。

2提取方法：按处方量称取鸡骨草，加上述不同溶媒分别提取3次，每次分别加药材总重量12倍、10倍、10倍量的溶媒，每次提取时间分别为5小时、4小时、3小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏。

3抗炎效果试验方法：对大鼠腹腔毛细血管通透性的影响

4分析结果见表1

表1不同提取方法干预大鼠毛细血管通透性的影响

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；与0.5%的柠檬酸溶液实验组比较，#P<0.05，##P＜0.01。

表1结果显示：以0.5%的柠檬酸溶液为溶媒提取所得的提取物能显著降低大鼠毛细血管通透性，抗炎效果最好，与30%乙醇实验组、水实验组相比具有显著性差异(P<0.05)。

实验例2：车前草、石韦、白茅根三味药材提取方法比较

用不同的提取方法对车前草、石韦、白茅根三味药材进行提取，通过动物药效实验比较不同提取物的利尿效果。

1提取溶媒：30%乙醇溶液、70%乙醇溶液、水。

2提取方法：按处方量称取车前草、石韦、白茅根，加不同溶媒提取3次，每次分别加药材总重量12倍、10倍、8倍的溶媒，每次提取时间分别为5小时、4小时、3小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏。

3利尿试验方法：对大鼠的利尿作用。

4分析结果见表2

表2不同提取方法所得提取物对大鼠的利尿作用

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；与30%乙醇实验组比较，#P<0.05，##P＜0.01。

表2结果显示：以30%乙醇为溶媒提取所得的提取物，给药5小时后尿量最多，利尿效果最好，与30%乙醇实验组、水实验组相比具有显著性差异(P<0.05)。

实验例3：中药组合物提取方法的比较

1样品分组

实施例1-7、对比例1-3分别制成干膏粉，分组。

2对比项目

生物碱类含量：用高效液相色谱法测定以相思子碱为对照的生物碱类有效成分；

熊果酸含量：用高效液相色谱法测定熊果酸含量。

3实验结果，见表3

表3不同提取方法对药材的提取效果

组别	相思子碱（mg·g-1）	熊果酸（mg·g-1）
			实施例1	0.813±1.58	1.615±1.51
实施例2	0.788±1.63	1.587±1.43
			实施例3	0.804±1.54	1.631±1.58
实施例4	0.763±1.66	1.553±1.62
			实施例5	0.746±1.53	1.533±1.64
实施例6	0.714±1.56	1.524±1.57
			实施例7	0.729±1.55	1.512±1.69
对比例1	0.438±1.60	1.164±1.56
			对比例2	0.461±1.57	1.139±1.61
对比例3	0.487±1.62	1.128±1.59

表3结果显示：本发明实施例1-7以相思子碱为代表的生物碱类成分、以熊果酸为代表的有机酸类成分含量优于对比例1-3。实验结果提示本发明技术提取生物碱成分及有机酸类成分与现有技术相比，提取较完全。

利尿抗炎药效实验：

一、对大鼠的利尿作用

1、实验材料

（1）动物

健康SPF级SD雄性大鼠，体重200±20g，购买自广西医科大学实验动物中心（生产许可证号：SCXK桂2009-0002）。

（2）药品

本发明实施例1-5、对比例1-3、0.9%生理盐水（贵州科伦药业有限公司）、氢氯噻嗪片（上海信谊药厂有限公司）

（3）仪器

大鼠代谢笼

2、实验方法

（1）预选动物：SD大鼠以生理盐水灌胃2.5mL/100g，用代谢笼收集24小时尿液，计算尿量/灌胃量大于40%者为合格。

（2）取预选大鼠120只，随机分为12组，分别为空白对照组、氢氯噻嗪组、本发明实施例1-7组和对比例1-3组，每组10只。实验动物先禁食（不禁水）12h，然后各组大鼠按2.5mL/100g体重，以生理盐水灌胃给予一定的水负荷，并按压大鼠下腹使膀胱排空。然后各组大鼠灌胃给药，氢氯噻嗪组剂量为10mg/kg，实施例1-7组和对比例1-3组剂量均按生药量3.1g/kg计，空白组以等容量生理盐水代替。给药后将大鼠放入代谢笼，收集5h的尿量。

3、实验结果

表4各试验药物对大鼠的利尿作用

注：与空白对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与对比例1组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；与对比例2组比较，▲P＜0.05，▲▲p＜0.01；与对比例3组比较，◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

表4结果显示，与空白对照组相比，实施例1-7组、对比例1-3组对大鼠有显著的利尿作用（P＜0.01或P＜0.05）；且对大鼠的利尿作用，实施例1-7组与对比例1-3组相比，存在显著差异（P＜0.01或P＜0.05）。

结果表明：本发明提供的中药组合物的利尿作用优于现有技术。

二、对大鼠腹腔毛细血管通透性的影响（抗炎作用）

1、实验材料

（1）动物

健康SPF级SD大鼠，雌雄各半，体重200±20g，购买自广西医科大学实验动物中心（生产许可证号：SCXK桂2009-0002）。

（2）药品与试剂

本发明实施例1-7、对比例1-3、0.9%生理盐水（广西南宁百会药业集团有限公司）、地塞米松（浙江仙琚制药有限公司）、伊文思蓝（Sigma）、组胺（南宁德江化工有限公司）。

（3）仪器

721w微机式可见光分光光度计（南京皓海仪器仪表有限公司）

2、实验分组

SD大鼠120只，雌雄各半，随机分为12组，每组10只：

空白对照组：灌胃等体积蒸馏水；

实验组：给予实施例1-7、对比例1-3药物；

阳性对照组：灌胃等体积地塞米松药液。

3、实验方法

各组大鼠分别按附表中所列剂量灌胃给药，1次/d，连续7d，空白对照组给等容量的生理盐水。最后一次给药后30分钟，在大鼠背部皮下注射1g/mL组胺0.1mL，立即尾静脉注射1％伊文思兰生理盐水4mL/kg，15分钟后处死大鼠，翻转背部皮肤，并将背部皮肤蓝斑用1.2cm打孔器打下（空白对照组选用正常大鼠皮肤），置于丙酮：生理盐水（7：3）6mL试管内浸泡，次日离心，用721w微机式可见光分光光度计在波长590nm处测定吸收度（OD值），以OD值表示腹腔液中伊文思蓝含量。

4、实验结果

表5各组药物干预大鼠毛细血管通透性的影响

注：与空白对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与对比例1组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；与对比例2组比较，▲P＜0.05，▲▲p＜0.01；与对比例3组比较，◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

表5结果显示，与空白对照组相比，实施例1-7组、对比例1-3组能显著降低大鼠毛细血管通透性（P＜0.01或P＜0.05）；且对大鼠毛细血管通透性的降低作用，实施例1-7组与对比例1-3组相比，具有显著差异（P＜0.01或P＜0.05）。

结果表明：本发明提供的中药组合物抗炎作用优于现有技术。

临床试验：

对本发明利尿抗炎的疗效进行临床观察，通过对比服药前后患者的排尿量及炎症治疗效果分析本发明的利尿消炎效果。

1诊断依据

1.1尿量减少：排出生理性情况下，收集患者24h尿液送检，成年人正常尿量为1000-2000mL/24h。24h尿量少于400mL或每小时尿量少于17mL为尿量减少。

1.2泌尿系统炎症

1.2.1症状

症见寒战、发烧、尿急、尿频、尿痛、腰痛、无力、血尿、脓尿等，慢性期炎症或炎症反复发作可出现浮肿、高血压、蛋白尿等。

1.2.2尿常规检查

尿比重增高或降低、尿蛋白阳性、尿糖阳性，显微镜检查发现红细胞大于3个/HP，发现白细胞和上皮细胞、管型等。

2病例选择

年龄20～70岁，愿意接受2周治疗者，签署进入临床研究知情同意书者。

3治疗药物

实验组：实施例3

对照组：结石通片，广西梧州制药（集团）股份有限公司

4疗效指标

4.1尿常规化验

治愈：临床症状及体征均消失；尿常规化验全部阴性；

好转：临床症状消失；尿常规化验有少许红细胞；

无效：症状无明显改善，尿常规化验有红细胞、尿蛋白、上皮细胞；

4.2利尿效果

疗效标准：显效：尿量24h1500-2500mL；有效：尿量增加；无效：尿量无明显变化或减少者。

5临床分组及治疗方法

入组病例284例患者，男162例，女122例；平均约43岁；所有患者均经彩超或腹平片检查，尿常规确诊为泌尿系统结石伴炎症，且因结石引起尿量减少。病例随机分为两组。

治疗方法：

实验组：本发明实施例5，每次服用量相当于原药材10g，一日三次。

对照组：结石通片，每次1.5g，一日三次。

实验组和对照组在服药同时，加大每日饮水量，平均日饮水量为3000～5000ml，多做运动，以跳跃运动或登楼梯运动为主，双手于背侧交叉叩击后腰部。

6结果

实验例组病例中大部分患者服用本发明实施例3后，尿量增多，且泌尿系统炎症消失或减轻。

表6：治疗后尿常规检查结果

注：实验组与对照组比较，*P＜0.05。

表7：治疗后患者尿量的变化

注：实验组与对照组比较，*P＜0.05。

结果分析：实验组与对照组在治疗泌尿系炎症和尿少的效果均良好，经本发明治疗后消炎总有效率为95.07%、利尿总有效率为91.55%，与对照组相比均有显著性差异（P<0.05），优于现有技术的疗效。结果表明，本发明药物的抗炎和利尿效果与现有技术结石通片相比，疗效更优。

典型病例：

1.李某，男，38岁，左下腹阵发性绞痛多时，伴有小便短赤，恶心，欲吐。舌偏红，苔薄黄腻，脉弦紧。查尿常规检测出白细胞(++)，红细胞(++)。彩超检查出左肾中度积水，近段输尿管扩张，输尿管结石不排除。X线腹部平片可见左侧输尿管中段有一块0.7cm×0.5cm的结石影。中医诊断：石淋，证属湿热蕴结。本发明实施例8胶囊剂，1日3次，每次5粒。服药1天后疼痛消失、尿量增加，继服5天后排出0.7cm×0.5cm结石1枚。尿常规复查白细胞（+），恢复良好，复查彩超右肾积水消失，X线腹平片结石影消失。

2.张某，男，43岁，经常腰痛，且小便短少，排尿不正常。B超检查为双肾多发性结石，大的直径为0.8×0.7cm，查尿常规发现：红细胞++、蛋白+、上皮细胞++，中医证候：石淋。予本发明实施例9片剂，1日3次，每次5片。日饮开水3600ml左右。服药3天后小便正常，腰痛基本消失；第7天小便时排出结石1枚，直径约0.5cm，质硬，捻不易破碎；第9天尿液清亮畅利，复查尿常规正常，B超检查提示双肾、输尿管、膀胱均未见结石，腰痛消失并未再发作。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (9)

1.一种利尿抗炎的中药组合物，其特征在于其活性成分的制备方法包括以下步骤：

1）取以下重量份的药材：广金钱草456份、玉米须302份、石韦228份、鸡骨草228份、茯苓228份、车前草165份、海金沙草165份、白茅根228份；

2）鸡骨草使用酸性水溶液为提取溶媒提取，提取物制成流浸膏；

3）车前草、石韦、白茅根三味药材加体积百分比为20-40%的乙醇提取，提取物制成流浸膏；

4）广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取，提取物制成流浸膏；

5）将步骤2）、3）、4）所得三种流浸膏混匀，即得。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤2）所述酸性水溶液为：质量-体积百分比为0.1-5%的柠檬酸溶液。

3.根据权利要求2所述的中药组合物，其特征在于，所述酸性水溶液为：质量-体积百分比为0.5-1%的柠檬酸溶液。

4.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤2）所述鸡骨草的提取方法为：

鸡骨草加酸性水溶液提取2-3次，每次加药材总重量8-20倍量的酸性水溶液，每次提取时间为1-4小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

5.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤3）所述车前草、石韦、白茅根三味药材提取方法为：

车前草、石韦、白茅根三味药材加体积百分比为20-40%的乙醇提取2-3次，每次加两味药材总重量6-12倍量乙醇，每次提取时间为1-5小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏。

6.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤3）所述车前草、石韦、白茅根三味药材提取方法为：

车前草、石韦、白茅根三味药材加体积百分比为30%的乙醇提取2-3次，每次加两味药材总重量8-10倍量乙醇，每次提取时间为2-4小时，合并提取液，滤过，回收药渣，滤液浓缩成流浸膏。

7.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤4）所述水提方法为：

广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取2-3次，每次加中药总重量6-12倍量的水，每次煎煮1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

8.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤4）所述水提方法为：

广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取2-3次，每次加中药总重量8-10倍量的水，每次煎煮2-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。

9.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，步骤4）所述水提方法为：

广金钱草、玉米须、茯苓、海金沙草加水提取2次，每次加中药总重量8-10倍量的水，每次煎煮3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成流浸膏。