CN103698429B - 参芎葡萄糖注射液中的丹参素的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开的参芎葡萄糖注射液中的丹参素的检测方法,其包括如下步骤:1)色谱条件与系统适用性试验;2)对照品溶液制备:3)样品溶液制备;4)测定:分别精密量取对照品溶液与样品溶液各5-20μl、注入色谱仪,记录色谱图。本发明降低了检测成本,特别适合实验室对其进行的检测工作。本发明方法检测结果比较稳定,理论塔板数、分离度能达到要求,并且更能够保证检测结果的准确性、有效性;同时,样品易于混匀,避免因混合不均匀带来的检测误差。
Description
技术领域:
本发明涉及丹参素检测方法,尤指参芎葡萄糖注射液中的丹参素的检测方法。
背景技术:
丹参素,酚性芳香酸类化合物。其分子式:C9H10O5,分子量:198.17。其结构式如下:
丹参素来源于唇形科植物丹参和甘西鼠尾草的根,其作用如下:
1.对心肌的作用:丹参素具有缩小心肌梗死范围和减轻病程的作用,同时对心肌缺血,再灌注损伤具有保护作用。
2.抑制血小板聚集及抗凝作用:丹参素能明显抑制血小板的聚集,并明显增加血小板膜的流动性,提示其对冠心病有效。丹参素可提高机体的纤溶活性,改善血液流变性、提高红细胞的变形能力和调解血液的粘滞度,改善全身各脏器(尤其是药物首先到达的心脏、肝脏、肺脏和胰腺)的微循环障碍,有助于机体组织的康复和成人呼吸窘迫综合征等严重并发症的纠正。
3.抗菌消炎及增强机体免疫作用:丹参素阻止钙离子内流,显著抑制巨噬细胞产生前列腺素E2(DGE2)及血栓丸B2(TXB2)。在临床上对感染性休克患者应用丹参素,可望提高生存率。
4.抗动脉粥样硬化及降血脂作用:丹参素抑制细胞内源性胆固醇的合成,还具有抗脂质蛋白氧化作用,降低血胆固醇,因此具有保护血管屏障,防止脂质沉积及动脉粥样硬化(AS)作用。
5.抗血栓形成作用:丹参素能明显抑制由ADP诱导的血小板体外聚集活性,延长电刺激大鼠颈总动脉后血栓形成时间,明显降低血瘀的全血黏度,血液黏度,红细胞压积,卡松屈服应力,红细胞电泳时间以及红细胞聚集指数。丹参素预防脑血栓的发生,丹参素可通过对血小板释放物及凝血酶原的影响,抑制其聚集,降低血液的凝固性而起到活血化淤的作用。
6.防止创面的过度愈合,丹参素具有调节核转录因子NF-1结合活性而起到减少成纤维细胞的胶原合成和分泌作用。
但是目前参芎葡萄糖注射液中的丹参素的检测方法存在着检测成本高、效率低,准确性差的技术问题。
发明内容:
本发明所解决的技术问题在于针对现有技术对丹参素含量测定的方法所存在的问题,而提供一种保证检测准确的同时,减少检验成本、提高检验效率、方便检验工作开展的参芎葡萄糖注射液中的丹参素的检测方法。
本发明所解决的技术问题可以通过以下技术方案来实现:
参芎葡萄糖注射液中的丹参素的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇为流动相A,以0.1%甲酸水溶液为流动相B,按下表中规定时行梯度洗脱;流速为每分钟0.5ml-1.5ml,柱温20-40℃;检测波长为220-270nm,理论塔板数按丹参素钠峰计算应不低于1500;
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0-50 | 5→50 | 95→50 |
50-70 | 50→100 | 50→0 |
70 | 100 | 0 |
2)对照品溶液制备:取丹参素钠对照品适量,精密称定,加甲醇溶液制成每1ml含丹参素钠70-130μg,即得对照品溶液;
3)样品溶液制备精密量取参芎葡萄糖注射液适量,置10ml-20ml容量瓶中,加甲醇溶液稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的膜滤过,即得样品溶液;
4)测定:分别精密量取对照品溶液与样品溶液各5-15μl、注入色谱仪,记录色谱图。
本发明降低了检测成本,特别适合实验室对其进行的检测工作。本发明方法检测结果比较稳定,理论塔板数、分离度能达到要求,并且更能够保证检测结果的准确性、有效性;同时,样品易于混匀,避免因混合不均匀带来的检测误差。
具体实施方式
以下通过本发明的具体实施例来进一步清楚地了解本发明,但它们不是对本发明的限定
检测结果见下表:
实施例1
参芎葡萄糖注射液中的丹参素的检测方法,包括如下步骤:
1)色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇为流动相A,以0.1%甲酸水溶液为流动相B,按下表中规定时行梯度洗脱;流速为每分钟1.5ml,柱温40℃;检测波长为260nm,理论塔板数按丹参素钠峰计算应不低于1500;
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0-50 | 5→50 | 95→50 |
50-70 | 50→100 | 50→0 |
70 | 100 | 0 |
2)对照品溶液制备:取丹参素钠对照品适量,精密称定,加甲醇溶液制成每1ml含丹参素钠70μg,即得对照品溶液;
3)样品溶液制备精密量取参芎葡萄糖注射液适量,置20ml容量瓶中,加甲醇溶液稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的膜滤过,即得样品溶液;
4)测定:分别精密量取对照品溶液与样品溶液各15μl、注入色谱仪,记录色谱图。检测结果见表1
表1
批号 | 丹参素含量 | 塔板数 | 分离度 |
20131001-S | 0.19mg/ml | 1800 | 1.8 |
20131002-S | 0.18mg/ml | 1810 | 1.8 |
20131003-S | 0.19mg/ml | 1800 | 1.7 |
实施例2
参芎葡萄糖注射液中的丹参素的检测方法,包括如下步骤:
1)色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇为流动相A,以0.1%甲酸水溶液为流动相B,按下表中规定时行梯度洗脱;流速为每分钟1.0ml,柱温40℃;检测波长为235nm,理论塔板数按丹参素钠峰计算应不低于1500;
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0-50 | 5→50 | 95→50 |
50-70 | 50→100 | 50→0 |
70 | 100 | 0 |
2)对照品溶液制备:取丹参素钠对照品适量,精密称定,加甲醇溶液制成每1ml含丹参素钠110μg,即得对照品溶液;
3)样品溶液制备精密量取参芎葡萄糖注射液适量,置20ml容量瓶中,加甲醇溶液稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的膜滤过,即得样品溶液;
4)测定:分别精密量取对照品溶液与样品溶液各5μl、注入色谱仪,记录色谱图。检测结果见表2
表2
批号 | 丹参素含量 | 塔板数 | 分离度 |
20131101-S | 0.20mg/ml | 1750 | 1.8 |
20131102-S | 0.19mg/ml | 1761 | 1.8 |
20131103-S | 0.19mg/ml | 1821 | 1.7 |
实施例3
参芎葡萄糖注射液中的丹参素的检测方法,包括如下步骤:
1)色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇为流动相A,以0.1%甲酸水溶液为流动相B,按下表中规定时行梯度洗脱;流速为每分钟1.5ml,柱温40℃;检测波长为265nm,理论塔板数按丹参素钠峰计算应不低于1500;
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0-50 | 5→50 | 95→50 |
50-70 | 50→100 | 50→0 |
70 | 100 | 0 |
2)对照品溶液制备:取丹参素钠对照品适量,精密称定,加甲醇溶液制成每1ml含丹参素钠80μg,即得对照品溶液;
3)样品溶液制备精密量取参芎葡萄糖注射液适量,置10ml容量瓶中,加甲醇溶液稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的膜滤过,即得样品溶液;
4)测定:分别精密量取对照品溶液与样品溶液各15μl、注入色谱仪,记录色谱图。检测结果见表3
表3
批号 | 丹参素含量 | 塔板数 | 分离度 |
20131004-S | 0.19mg/ml | 1856 | 1.7 |
20131005-S | 0.19mg/ml | 1895 | 1.8 |
20131006-S | 0.19mg/ml | 1824 | 1.8 |
Claims (1)
1.参芎葡萄糖注射液中的丹参素的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇为流动相A,以0.1%甲酸水溶液为流动相B,按下表中规定实行梯度洗脱;流速为每分钟0.5ml-1.5ml,柱温20-40℃;检测波长为220-270nm,理论塔板数按丹参素钠峰计算应不低于1500;
2)对照品溶液制备:取丹参素钠对照品适量,精密称定,加甲醇溶液制成每1ml含丹参素钠70-130μg,即得对照品溶液;
3)样品溶液制备精密量取参芎葡萄糖注射液适量,置10ml-20ml容量瓶中,加甲醇溶液稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的膜滤过,即得样品溶液;
4)测定:分别精密量取对照品溶液与样品溶液各5-15μl、注入色谱仪,记录色谱图。
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2013
- 2013-12-19 CN CN201310706462.0A patent/CN103698429B/zh active Active
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Denomination of invention: Detection method for danshensu in Shenxiong glucose injection Effective date of registration: 20231122 Granted publication date: 20150128 Pledgee: Qingdao Qishun Investment Management Co.,Ltd. Pledgor: GUIZHOU JINGFENG INJECTION Co.,Ltd. Registration number: Y2023980066820 |
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