CN103667268B - 用于与braf基因杂交的dna探针库及采用其富集braf基因片段的方法 - Google Patents
用于与braf基因杂交的dna探针库及采用其富集braf基因片段的方法 Download PDFInfo
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Abstract
Description
反应材料 | 体积 |
纯化后cDNA/DNA样本库 | 50微升 |
磷酸化反应缓冲液 | 10微升 |
脱氧碱基混合物dNTP(每种10mM) | 4微升 |
T4DNA聚合酶 | 5微升 |
Klenow大肠杆菌聚合酶片段 | 1微升 |
T4多聚核苷酸激酶 | 5微升 |
无核酸酶水 | 总体积补至100微升 |
反应材料 | 体积 |
cDNA/DNA样本库 | 约30微升 |
10X Klenow大肠杆菌聚合酶缓冲液 | 5微升 |
脱氧碱基dATP(1mM) | 10微升 |
Klenow大肠杆菌聚合酶片段 | 3微升 |
无核酸酶水 | 总体积补至50微升 |
反应材料 | 体积 |
cDNA/DNA样本库 | 约15微升 |
2X T4DNA连接酶缓冲液 | 5微升 |
DNA两端接头 | 6微升 |
T4DNA连接酶 | 3微升 |
无核酸酶水 | 总体积补至50微升 |
反应材料 | 体积 |
富集cDNA/DNA样本库 | 约30微升 |
10X高准确率超保真DNA聚合酶缓冲液 | 5微升 |
高准确率超保真DNA聚合酶 | 1微升 |
正引物 | 1微升 |
反引物 | 1微升 |
无核酸酶水 | 总体积补至50微升 |
反应材料 | 体积 |
纯化后cDNA/DNA样本库 | 50微升 |
磷酸化反应缓冲液 | 10微升 |
脱氧碱基混合物dNTP(每种10mM) | 4微升 |
T4DNA聚合酶 | 5微升 |
Klenow大肠杆菌聚合酶片段 | 1微升 |
T4多聚核苷酸激酶 | 5微升 |
无核酸酶水 | 总体积补至100微升 |
反应材料 | 体积 |
cDNA/DNA样本库 | 约30微升 |
10X Klenow大肠杆菌聚合酶缓冲液 | 5微升 |
脱氧碱基dATP(1mM) | 10微升 |
Klenow大肠杆菌聚合酶片段 | 3微升 |
无核酸酶水 | 总体积补至50微升 |
反应材料 | 体积 |
cDNA/DNA样本库 | 约15微升 |
2X T4DNA连接酶缓冲液 | 5微升 |
DNA两端接头 | 6微升 |
T4DNA连接酶 | 3微升 |
无核酸酶水 | 总体积补至50微升 |
Ct值第一次重复 | Ct值第二次重复 | Ct值第三次重复 | Ct均值 | Ct差 | 富集倍数 | |
未富集样本 | 34.96 | 34.98 | 35.15 | 35.03 | 0 | 1 |
已优化探针 | 22.01 | 22.04 | 21.97 | 22.01 | 13.02 | 8324.2 |
反应材料 | 体积 |
富集cDNA/DNA样本库 | 约30微升 |
10X高准确率超保真DNA聚合酶缓冲液 | 5微升 |
高准确率超保真DNA聚合酶 | 1微升 |
正引物 | 1微升 |
反引物 | 1微升 |
无核酸酶水 | 总体积补至50微升 |
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CN201310429789.8A CN103667268B (zh) | 2012-09-18 | 2013-09-18 | 用于与braf基因杂交的dna探针库及采用其富集braf基因片段的方法 |
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Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103667268A CN103667268A (zh) | 2014-03-26 |
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-
2013
- 2013-09-18 CN CN201310429789.8A patent/CN103667268B/zh active Active
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---|
BRAF and c-kit gene copy number in mutation-positive malignant melanoma;Carlynn等;《Human Pathology》;20060531;第37卷;全文 * |
mRNA Expression and BRAF Mutation in Circulating Melanoma Cells Isolated from Peripheral Blood with High Molecular Weight Melanoma-Associated Antigen–Specific Monoclonal Antibody Beads;Minoru等;《Clinical Chemistry》;20091231;第55卷(第4期);第759页右栏第2段,第760页左栏第2段第1-5行 * |
Role of Ultrasonographic/Clinical Profile, Cytology,and BRAF V600E Mutation Evaluation in Thyroid Nodule Screening for Malignancy: A Prospective Study;Martina等;《J Clin Endocrinol Metab》;20120731;第97卷(第7期);第2356页左栏第2段及表1 * |
中国黑色素瘤患者BRAF基因突变分析;朱琰琰等;《临床肿瘤学杂志》;20090731;第14卷(第7期);全文 * |
利用基因芯片技术检测BRAF基因在胰腺癌组织中的表达;汤永辉等;《东南大学学报(医学版)》;20060930;第25卷(第5期);全文 * |
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---|---|
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
EE01 | Entry into force of recordation of patent licensing contract |
Application publication date: 20140326 Assignee: Nanjing and the medical equipment Co., Ltd. Assignor: GENESEEQ TECHNOLOGY Inc. Contract record no.: 2016320000197 Denomination of invention: DNA (Deoxyribonucleic Acid) probe library hybridized with BRAF (v-Raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1) gene, and method for enriching BRAF gene segments by adopting same Granted publication date: 20160504 License type: Common License Record date: 20161019 |
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LICC | Enforcement, change and cancellation of record of contracts on the licence for exploitation of a patent or utility model | ||
CP01 | Change in the name or title of a patent holder | ||
CP01 | Change in the name or title of a patent holder |
Address after: 210061, building 609, block A, Spark Road, No. 10, Spark Road, hi tech Zone, Jiangsu, Nanjing Patentee after: Nanjing Shihe gene Biotechnology Co., Ltd Address before: 210061, building 609, block A, Spark Road, No. 10, Spark Road, hi tech Zone, Jiangsu, Nanjing Patentee before: GENESEEQ TECHNOLOGY Inc. |