CN103667082B - 一种蜜环菌浓缩液的制备方法 - Google Patents

一种蜜环菌浓缩液的制备方法 Download PDF

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Abstract

一种蜜环菌浓缩液的制备方法，包括：将菌株接种到无菌培养基上，27℃±1℃培养3～4天得到菌丝体；按重量份数比例取葡萄糖3～5份、蛋白胨1～3份、酵母浸膏1～3份、KH2PO4 0.1～0.5份、MgSO4 0.1～0.5份、NaCl 0.001～0.003份、维生素B1 0.05～0.1份，加入纯化水100-150份后混合均匀得培养液：将菌丝体接种于培养液中，在27℃±1℃、转速100rpm～500rpm、通气量100～150L/h、PH值为5.0左右的条件下发酵3～5天；收集发酵液，将发酵液过滤后减压浓缩至密度为1.030～1.035（20℃）即得。本发明的积极效果是：明确了培养基组成，利于生产操作。缩短了生产周期。发酵液产量较高。发酵液中腺苷含量较原生产工艺高。

Description

一种蜜环菌浓缩液的制备方法
技术领域：
本发明属于制药领域，具体涉及中药原料药蜜环菌浓缩液的制备方法。
背景技术：
蜜环菌[Armillaria mellea(Vahl ex Fr.)Quel]是属于白磨科(Tricholomataceae)蜜环菌属[Armillaria(Fr.)Staude.]的药食兼用菌是一种与传统中药天麻(GastrodiaelataBlume)共生的著名的药用真菌。经国内外多年的研究，分离得到了蜜环菌多糖、倍半萜类化合物和嘌呤类化合物等多种活性成分。蜜环菌子实体具有催眠、镇静、抗眩晕、改善心脑血液循环及较强的脑保护作用，可以治疗多种疾病，并可提高机体免疫功能。蜜环菌是我国滋补保健类中药材之一，倍受国内外学者青睐。目前，蜜环菌已在药品和保健食品领域应用广泛，特别是以其为重要成分的中成药脑心舒，在市场上颇有影响。蜜环菌是天麻的共生菌，有研究证明，蜜环菌的菌丝及发酵液有与天麻相类似的药理作用。因此，加大蜜环菌液体发酵培养，优化发酵培养条件可满足该品种的需求。但由于法定标准中对蜜环菌浓缩液的培养基组成不明确，现有的蜜环菌浓缩液制备方法存在培养周期长，腺苷含量不确定等不足，影响大规模的生产。
发明内容
本发明的目的是提供一种蜜环菌浓缩液的制备方法，克服现有的浓缩液制备方法存在的上述不足。
本发明的蜜环菌浓缩液制备方法包括以下步骤：
1、将蜜环菌菌株接种到无菌培养基上，27℃±1℃培养3～4天，得到菌丝体备用；
2、制备无菌培养液：按重量份数比例取葡萄糖3～5份、蛋白胨1～3份、酵母浸膏1～3份、KH2PO40.1～0.5份、MgSO40.1～0.5份、NaCl0.001～0.003份、维生素B10.05～0.1份，加入纯化水100-150份后混合均匀。
3、发酵：将步骤1所得到的菌丝体接种于步骤2制得的液体培养液中，在27℃±1℃、转速100rpm～500rpm、通气量100～150L/h、PH值为5.0左右的条件下发酵3～5天；
4、浓缩：收集发酵液，将发酵液过滤后减压浓缩至密度为1.030～1.035（20℃）即得。
本发明的积极效果是：明确了培养基组成，利于生产操作。缩短了生产周期，本发明周期6-9天，现有的方法10-13天。发酵液产量较高，是现有方法的1.15倍。发酵液中腺苷含量较原生产工艺高。本发明制备的蜜环菌浓缩液腺苷含量高于0.45mg/ml，现有方法制备的蜜环菌浓缩液腺苷含量低于0.40mg/ml.
具体实施方式
实施例1
1、将蜜环菌菌株接种到无菌培养基上，27℃±1℃培养3天得到菌丝体备用；
2、制备无菌培养液：按重量份数比例取葡萄糖3份、蛋白胨3份、酵母浸膏1份、KH2PO40.1份、MgSO40.5份、NaCl0.003份、维生素B10.05份，加入纯化水100份后混合均匀；
3、发酵：将菌丝体接种于液体培养液中，于27℃±1℃，转速100rpm，通气量100L/h，PH值为5.0左右发酵3天；浓缩：收集发酵液，将发酵液过滤后减压浓缩至密度为1.032（20℃）即得。
实施例2
1、将蜜环菌菌株接种到无菌培养基上，27℃±1℃培养4天得到菌丝体备用；
2、制备无菌培养液：按重量份数比例取葡萄糖5份、蛋白胨1份、酵母浸膏3份、KH2PO40.5份、MgSO40.1份、NaCl0.001份、维生素B10.1份，加入纯化水150份后混合均匀。
3、发酵：将步骤1所得到的菌丝体接种于步骤2制得的液体培养液中，在27℃±1℃、转速500rpm、通气量150L/h、PH值5.0左右的条件下发酵5天；
4、浓缩：收集发酵液，将发酵液过滤后减压浓缩至密度为1.030～1.035（20℃）即得。

Claims (1)

1.一种蜜环菌浓缩液的制备方法，其特征是包括以下步骤；
(1)将蜜环菌菌株接种到无菌培养基上，27℃±1℃培养3～4天得到菌丝体备用；
(2)制备无菌培养液：按重量份数比例取葡萄糖3～5份、蛋白胨1～3份、酵母浸膏1～3份、KH2PO40.1～0.5份、MgSO40.1～0.5份、NaCl 0.001～0.003份、维生素B10.05～0.1份，加入纯化水100～150份后混合均匀；
(3)发酵：将步骤(1)所得到的菌丝体接种于步骤(2)制得的液体培养液中，在27℃±1℃、转速100rpm～500rpm、通气量100～150L/h、pH值为5.0左右的条件下发酵3～5天；
(4)浓缩：收集发酵液，将发酵液过滤后减压浓缩至密度为20℃时1.030～1.035，即可。
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