CN103638096A - 一种治疗心律失常的尖叶假龙胆提取物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗心律失常的尖叶假龙胆提取物。该提取物是由

酮类化合物、环烯醚萜类化合物、黄酮类化合物组成。本发明还公开了尖叶假龙胆提取物的制备方法和用途。本发明公开的尖叶假龙胆提取物中含有：

酮类化合物占提取物总重量比的20～40％，包括：1，3，5，8-四羟基四氢

酮，去甲当药苷，3，8-O-β-D-双吡喃葡萄糖-1，5-二羟基

酮，去甲雏菊叶龙胆酮，1，3，5-三羟基

酮，2-O-β-D-n吡喃葡萄糖-1-羟基-5，6-二甲氧基

酮，1，2，8-三羟基-5，6-二甲氧基

Description

一种治疗心律失常的尖叶假龙胆提取物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种中草药有效成分提取物，尤其涉及尖叶假龙胆(Gentianella acuta(Michx.)Hulten)治疗心律失常的一种提取物及其制备方法和医药用途，属于中药有效部位提取物领域。

背景技术

尖叶假龙胆(Gentianella acuta(Michx.)Hulten)也叫苦龙胆，为龙胆科假龙胆属一年生草本植物，蒙药名为阿古特-其其格，分布于我国的东北、华北地区的各省。全草入蒙药，味苦、性凉，具有清热、利湿的功效，是蒙医用于治疗黄疸、头痛、发烧、口干的主药，大兴安岭地区鄂仑春族猎民用其治疗心律失常等疾病，疗效显著。文献中报道的该植物中主要含有的化学成分有：

酮类、环烯醚萜类、萜类及甾体类化合物。

大量研究显示，大多数缺血性心肌疾病患者死于缺血性心律失常。因此，防治缺血性心律失常具有长远而重大的意义。随着分子药理学和电生理学研究发展，抗心律失常药物的开发也有了长足的进展，现已用于临床的抗心律失常药物有数十种。据药物对受体和离子通道的作用分为四类：I类是钠通道阻滞剂，II类是受体阻滞剂，Ⅲ类是钾通道阻滞剂，Ⅳ类是钙通道阻滞剂。但是抗心律失常药物的总有效率仅30％～60％，且对某些顽固性心律失常无效。因此，针对缺血性心律失常寻找防治的有效措施，研究高效低毒的药物势在必行。尖叶假龙胆因其抗心律失常疗效显著被民间称作“稳心草”，所以对于尖叶假龙胆的内在成分和抗心律失常药理作用的研究具有重要意义。

我们从尖叶假龙胆中分离得到了

酮类化合物，包括：1，3，5，8-四羟基四氢酮，去甲当药苷，3，8-O-β-D-双吡喃葡萄糖-1，5-二羟基

酮，去甲雏菊叶龙胆酮，1，3，5-三羟基

酮，2-O-β-D-吡喃葡萄糖-1-羟基-5，6-二甲氧基

酮和1，2，8-三羟基-5，6-二甲氧基

酮；得到了环烯醚萜类化合物，包括：龙胆苦苷、獐芽菜苦苷和decentapicrin；(3)得到了黄酮类化合物包括：异荭草素和异牡荆素。

尖叶假龙胆提取物的药理学实验研究表明，其具有治疗室上性心动过速，改善心肌缺血，预防缺血再灌注性心律失常的发生作用。

发明内容

本发明目的之一是提供一种尖叶假龙胆有效部位提取物。

本发明目的之二是提供一种制备上述尖叶假龙胆有效部位提取物的方法。

本发明的目的之三是提供尖叶假龙胆有效部位提取物的一种医药用途，将有效部位提取物制成各种剂型的药物，将其用于治疗心律失常。

本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：

尖叶假龙胆有效部位提取物中，

酮类化合物占提取物总重量比的20～40％，包括：1，3，5，8-四羟基四氢

酮，去甲当药苷，3，8-O-β-D-双吡喃葡萄糖-1，5-二羟基酮，去甲雏菊叶龙胆酮，1，3，5-三羟基酮，2-O-β-D-吡喃葡萄糖-1-羟基-5，6-二甲氧基酮，1，2，8-三羟基-5，6-二甲氧基

酮；含有的环烯醚萜类化合物占总重量比的5～15％，包括：龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、decentapicrin；含有少量的黄酮类化合物包括：异荭草素、异牡荆素。

1，3，5，8-四羟基四氢

酮     去甲当药苷

3，8-O-β-D-双吡喃葡萄糖-1，5-二羟基

酮     去甲雏菊叶龙胆酮

1，3，5-三羟基

酮   2-O-β-D-吡喃葡萄糖-1-羟基-5，6-二甲氧基

酮

1，2，8-三羟基-5，6-二甲氧基

酮     龙胆苦苷

獐牙菜苦苷     decentapierin

异荭草素     异牡荆素

本发明还提供了一种制备上述尖叶假龙胆有效部位提取物的方法，该方法包括以下步骤：

a.将尖叶假龙胆用水或低分子醇加热回流提取，2～3次，每次1～3小时，过滤，合并滤液；

b.将滤液减压浓缩至稠膏状(比重为1.01～1.25)，加入稠膏1～2倍体积比的水混悬均匀；

c.将b步骤中所得的混悬溶液上样到大孔吸附树脂柱色谱进行吸附，先用1～4倍柱体积的水洗脱，再用4～6倍柱体积的40～70％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，浓缩，得尖叶假龙胆提取物。

本发明所述的尖叶假龙胆为龙胆科假龙胆属植物尖叶假龙胆(Gentianella acuta(Michx.)Hulten)的干燥全草。

具体实施方式

实施例1

取尖叶假龙胆原料5000g，先用原料20倍重量的75％乙醇回流提取3次，每次提取1.5小时，合并上述提取液，减压浓缩至膏状，再用水混悬，得混悬药液。

将所得的混悬药液用水混悬后上样到D101型大孔吸附树脂柱色谱(树脂重80g，柱体积100ml，柱径∶柱高=1∶2)进行吸附，上样流速为每小时1.2倍柱体积，上完样后用蒸馏水冲洗柱子，直至水洗脱液近无色，弃去水洗脱液，用6倍柱体积含60％的乙醇水溶液洗脱，洗脱液流速控制在每小时0.5倍柱体积，洗脱过程中用TCL检测是否洗脱完全，收集洗脱液，合并，减压浓缩，减压干燥，得到尖叶假龙胆有效部位提取物。

实施例2

取尖叶假龙胆原料5000g，先用原料20倍重量的75％乙醇回流提取3次，每次提取1.5小时，合并上述提取液，减压浓缩至膏状，再用水混悬，得混悬药液。

将所得的混悬药液用水混悬后上样到AB-8型大孔吸附树脂柱色谱(树脂重80g，柱体积100ml，柱径∶柱高=1∶2)进行吸附，上样流速为每小时1.2倍柱体积，上完样后用蒸馏水冲洗柱子，直至水洗脱液近无色，弃去水洗脱液，用6倍柱体积含60％的乙醇水溶液洗脱，洗脱液流速控制在每小时0.5倍柱体积，洗脱过程中用TCL检测是否洗脱完全，收集洗脱液，合并，减压浓缩，减压干燥，得到尖叶假龙胆有效部位提取物。

实施例3

取尖叶假龙胆原料5000g，先用原料20倍重量的75％乙醇回流提取3次，每次提取1.5小时，合并上述提取液，减压浓缩至膏状，再用水混悬，得混悬药液。

将所得的混悬药液用水混悬后上样到H103型大孔吸附树脂柱色谱(树脂重80g，柱体积100ml，柱径∶柱高=1∶2)进行吸附，上样流速为每小时1.2倍柱体积，上完样后用蒸馏水冲洗柱子，直至水洗脱液近无色，弃去水洗脱液，用6倍柱体积含60％的乙醇水溶液洗脱，洗脱液流速控制在每小时0.5倍柱体积，洗脱过程中用TCL检测是否洗脱完全，收集洗脱液，合并，减压浓缩，减压干燥，得到尖叶假龙胆有效部位提取物。

实施例4

取尖叶假龙胆原料5000g，先用原料20倍重量的75％乙醇回流提取3次，每次提取1.5小时，合并上述提取液，减压浓缩至膏状，再用水混悬，得混悬药液。

将所得的混悬药液用水混悬后上样到HPD500型大孔吸附树脂柱色谱(树脂重80g，柱体积100ml，柱径∶柱高=1∶2)进行吸附，上样流速为每小时1.2倍柱体积，上完样后用蒸馏水冲洗柱子，直至水洗脱液近无色，弃去水洗脱液，用6倍柱体积含60％的乙醇水溶液洗脱，洗脱液流速控制在每小时0.5倍柱体积，洗脱过程中用TCL检测是否洗脱完全，收集洗脱液，合并，减压浓缩，减压干燥，得到尖叶假龙胆有效部位提取物。

实施例5

取尖叶假龙胆原料5000g，先用原料20倍重量的75％乙醇回流提取3次，每次提取1.5小时，合并上述提取液，减压浓缩至膏状，再用水混悬，得混悬药液。

将所得的混悬药液用水混悬后上样到HPD300型大孔吸附树脂柱色谱(树脂重80g，柱体积100ml，柱径∶柱高=1∶2)进行吸附，上样流速为每小时1.2倍柱体积，上完样后用蒸馏水冲洗柱子，直至水洗脱液近无色，弃去水洗脱液，用6倍柱体积含60％的乙醇水溶液洗脱，洗脱液流速控制在每小时0.5倍柱体积，洗脱过程中用TCL检测是否洗脱完全，收集洗脱液，合并，减压浓缩，减压干燥，得到尖叶假龙胆有效部位提取物。

实施例6

取尖叶假龙胆原料5000g，先用原料20倍重量的75％乙醇回流提取3次，每次提取1.5小时，合并上述提取液，减压浓缩至膏状，再用水混悬，得混悬药液。

将所得的混悬药液用水混悬后上样到NKA型大孔吸附树脂柱色谱(树脂重80g，柱体积100ml，柱径∶柱高=1∶2)进行吸附，上样流速为每小时1.2倍柱体积，上完样后用蒸馏水冲洗柱子，直至水洗脱液近无色，弃去水洗脱液，用6倍柱体积含60％的乙醇水溶液洗脱，洗脱液流速控制在每小时0.5倍柱体积，洗脱过程中用TCL检测是否洗脱完全，收集洗脱液，合并，减压浓缩，减压干燥，得到尖叶假龙胆有效部位提取物。

本发明有效部位提取物的制备工艺条件的考察试验

实施例7胶囊剂的制备

取尖叶假龙胆有效部位提取物1kg，药用淀粉0.5kg，用80％乙醇液湿法制粒，整粒，装1#胶囊，每粒0.2g。

实施例8片剂的制备

取尖叶假龙胆有效部位提取物1kg，药用淀粉0.5kg，糊精1kg，50％乙醇液适量制粒，整粒，干燥，压片，每粒0.3g。

实施例9口服液的制备

取尖叶假龙胆有效部位提取物1kg，加入适量增溶剂，研磨，再加少量水稀释，混匀，然后加入矫味剂及防腐剂，混匀，加水至规定量。混匀，分装，灭菌，即得。

实施例10注射液的制备

取尖叶假龙胆有效部位提取物100g，75％乙醇液溶解成5％的总溶液，活性炭脱色，滤过，减压浓缩干燥，加注射用水制成5％的水溶液，用微孔滤膜滤过至澄明，灭菌，无菌分装，每瓶1ml，封口，即得。

上样流速的考察

将尖叶假龙胆水提取液(用尖叶假龙胆药材10～30倍重量的水渗漉提取尖叶假龙胆得到)(每12.5ml提取液相当于1g浸膏或3g原药材)上样于AB-8型大孔树脂柱(树脂重80g，，柱体积100ml，柱径∶柱高=1∶2)的过程中，分别采用不同的流速，以TLC检测，考察了上样流速与吸附量的关系，检测结果见表1。

结果表明∶上样液流速与上样量呈负相关，流速越大，吸附量越小，考虑到流速小于1ml/min(1.1倍柱体积)时，耗时较长，而流速大于3ml/min(1.3倍柱体积)时，吸附量有偏低，耗用树脂量大，所以上样时采用2ml/min的流速，即上样流速为每小时1.2倍柱体积。

表1上样流速与吸附量之间关系表

试验例1洗脱溶剂的考察

将已交换于AB-8型大孔吸附树脂柱(树脂重80g，柱体积100ml，柱径∶柱高=1∶2)上的尖叶假龙胆提取液(实施例1-3所述的药液2)，分别采用以下系统进行洗脱：含不同浓度的乙醇系统：TCL检测，考察了不同洗脱系统的洗脱效率，洗脱流速采用2ml/min，其结果如下：

洗脱系统：分别用含有5％，10％，20％，30％，40％，50％，60％的乙醇洗脱；10％，20％，30％，40％的乙醇洗脱效率无明显差别，50％的乙醇可见柱上有一条黄色的色带被洗下，洗脱至10倍柱体积时都不能将总

酮完全洗下，TCL阳性，树脂颜色仍较深，呈暗黄色。60％的乙醇洗脱时，10倍柱体积时能将总

酮完全洗下，TCL阴性，树脂颜色仍较深，呈暗红色。60％乙醇洗脱效率高。

药理学研究表明：本发明尖叶假龙胆有效成分提取物能够明显减轻氯仿诱导的小鼠室颤，延长小鼠的存活时间；能够推迟氯化钙所致小鼠心律失常出现时间，缩短心律失常持续时间；能够明显改善大鼠离体工作心脏的左室收缩压(LVESP)、左室舒张末压(LVDP)、左室发展压(LVDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)等血流动力学指标，并降低心率(HR)，减少心肌耗氧量；能够明显降低由过氧化氢诱导的H9e2心肌细胞的凋亡，提升细胞的存活率，保护细胞的形态，降低细胞培养液中LDH的漏出，降低细胞内MDA的含量，提高细胞内SOD，GSH-PX，CAT等内源性抗氧化酶的活性，抑制Caspase-3的活化，增加Bcl-2的表达，减少Bax的表达，进而减少心肌细胞的凋亡。

试验例2尖叶假龙胆有效部位对氯仿致小鼠颤模型的影响

动物分组：

筛选后正常心电图小鼠48只随机分为5组，每组12只(雌雄各6只)，即模型组，阳性药组，尖叶假龙胆有效部位提取物高、中、低剂量组，连续给药7d，1次/d。模型组、空白组：给予等体积的生理盐水。阳性对照组：给予盐酸维拉帕米0.065g/kg；

造模方法：

末次给药后1h，将小鼠逐一放入装有3-4ml氯仿棉球的倒置500ml烧杯内，之后每换1只小鼠加入1ml氯仿，至小鼠呼吸停止，立即剖开胸腔，肉眼观察心脏跳动节律，计算心室纤颤发生率。

观测指标：

观测小鼠的心室纤颤发生情况，计算每组心室纤颤的发生率。

实验结果：尖叶假龙胆有效部位提取物对氯仿致小鼠室颤发生率的影响：

表2尖叶假龙胆有效部位提取物对氯仿诱发小鼠室颤的影响

与模型组比较(x²检验)，**P<0.01，*P<0.05

研究结果表明：

尖叶假龙胆有效部位提取物在0.8g/kg剂量条件下，能够显著降低氯仿诱发的小鼠室颤发生率，对氯仿诱发室颤的心律失常小鼠有明显的保护作用。

实验例3尖叶假龙胆有效部位对氯化钙致小鼠心律失常模型的影响

动物分组：

取心电图正常小鼠60只随机分为5组，每组12只，即模型组，尖叶假龙胆有效部位提取物高、中、低剂量组，阳性对照组，连续给药7d，1次/d。模型组：给予等体积的生理盐水。阳性对照组：给予盐酸维拉帕米0.065g/kg；

造模方法：

末次给药后1h，小鼠腹腔注射20％乌拉坦(1500mg/kg)麻醉，仰卧固定，右前肢、左后肢及右后肢安插针状电极，描记标准II导联正常心电图，10min后尾静脉注射3.5％氯化钙(120mg/kg)，10s内快速完成推注。记录心电图的变化，统计每组首次注射氯化钙后心律失常出现时间及持续时间。

观测指标：

记录小鼠心电图的变化，统计每组首次注射氯化钙后心律失常出现时间及持续时间。

实验结果：

注射氯化钙后小鼠心率加快，心电图发生变化，示造模成功，如Fig.1、Fig.2所示。

Fig.1模型组小鼠注射氯化钙前的正常心电图

Fig.2注射氯化钙后心律失常心电图

表4尖叶假龙胆有效部位提取物对氯化钙所致小鼠心律失常的影响(n=12)

与模型组比较(t检验)，**P<0.01，*P<0.05

研究结果表明：

尖叶假龙胆有效部位提取物高剂量组能够推迟氯化钙所致小鼠心律失常出现时间，缩短心律失常持续时间，与模型组比较具有显著性差异(P<0.05)，表明尖叶假龙胆有效部位提取物对氯化钙所致小鼠心律失常具有明显对抗作用。

实验例4：尖叶假龙胆有效部位对离体工作心脏的影响

动物分组：

SPF级SD大鼠32只，雄性，体重330-380g，随机分为4组，每组8只，分别为空白组，低剂量组，中剂量组，高剂量组。空白组给予相同剂量的灌流液。

动物处理：

各组大鼠腹腔注射肝素钠(25mg/kg)行肝素化。30min后断头开胸，迅速取出心脏，修剪后立即悬挂于Langendorff灌流装置上，恒温(37℃)，充二元气(95％O₂、5％CO₂)，用K-H液持续逆行灌流15min进行平衡，流速为10～15ml/min。采用左心室内水囊传递压力测定心室内压，通过BL-420生物信号采集系统记录左室收缩曲线，计算左心室各项心功能指标。

观测指标：

各组采用Langendorff方法逆灌稳定15min后，分别记录给药前(平衡时)、给药后5min、15min、30min、60min、90min、120min时左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)及心率(HR)等血流动力学指标。

实验结果：

表5尖叶假龙胆有效部位对大鼠离体工作心脏LVSP(mmHg)的影响(n=8)

与空白对照组相比较，*P<0.05，**P<0.01

表6尖叶假龙胆有效部位对大鼠离体工作心脏LVDP(mmHg)的影响(n=8)

与空白对照组相比较，*P＜0.05，**P<0.01

表7尖叶假龙胆有效部位对大鼠离体工作心脏+dp/dt_max(mmHg/s)的影响(n=8)

与空白对照组相比较，*P<0.05，**P<0.01

表8尖叶假龙胆有效部位对大鼠离体工作心脏-dp/dt_max(mmHg/s)的影响(n=8)

与空白对照组相比较，*P<0.05，**P<0.01

表9尖叶假龙胆有效部位对大鼠离体工作心脏HR(次/min)的影响(n=8)

与空白对照组相比较，*P<0.05，**P<0.01

研究结果表明：

尖叶假龙胆中、高剂量组给药30min到120min LVSP、LVDP、+dp/dtmax明显升高，同时HR减慢，即尖叶假龙胆有效部位有增强心肌收缩力的作用，同时减少心肌耗氧量。

实验例5：尖叶假龙胆有效部位对大鼠心肌缺血再灌注心律失常的影响

动物分组：

清洁级SD雄性大鼠48只，体重250-300g，将48只大鼠随机分为6组，分别为：假手术组，模型组，尖叶假龙胆高剂量组、中剂量组、低剂量组，阳性药(地奥心血康70mg/kg)组。假手术组与模型组分别给予相应剂量的生理盐水，连续灌胃7天，末次灌胃1h后开始手术。

造模方法：

腹腔注射10％水合氯醛300mg/kg麻醉后，将大鼠仰卧位固定于手术台上，用针形电极插入四肢皮下，连续记录II导联心电图。然后颈部正中切口，气管插管，接动物呼吸机。于胸骨左侧2mm，第4，5肋间切口开胸，并立即打开人工呼吸机进行人工呼吸，频率为60次/min，呼吸比率为3∶1，通气量20mg/kg。剪开心包膜，轻压胸壁，挤出心脏，在冠状动脉左心支发出后的2mm处，用5-0医用无损伤缝合针于左心耳下缘进针，肺动脉圆锥处出针，将1号丝线穿过冠状动脉前降支下，然后将线穿入自制的尖端球形冠状动脉阻断塑料管，将心脏复位，稳定5min后，腹腔给药。对照组给等容量的生理盐水，15min后拉紧丝线，以塑料管球端压迫冠状动脉造成心肌缺血，冠状动脉阻断10min后，松开结扎线，恢复被阻断的冠状动脉循环，再灌15min，在此期间连续记录心电图(ECG)。依肢体II导联心电图的ST段抬高及恢复作为判断冠状动脉断流及再通的指标。

观测指标：

实验中观察心律失常出现的类型，VP：连续出现5个以下的室性异位搏动；VT：连续出现5个以上的室性早搏；VF：QRS波及T波消失，代之一系列大小、形状不同的不规则波动。记录再灌注15min内的VP数目，VP，VT，VF的出现时间及心律变化。实验结束后，颈总动脉取血，检测血清中LDH的含量。并取心肌组织，检测其中SOD，MDA的含量。

实验结果：

表10尖叶假龙胆对心肌缺血再灌注心率失常VP、VT、VF出现时间的影响(n=8)

与模型组相比较，*P<0.05，**P<0.01

表11尖叶假龙胆对心肌缺血再灌注损伤大鼠SOD，MDA，LDH含量变化的影响(n=8)

与假手术组相比较，#P<0.01；与模型组相比较，*P<0.05，**P<0.01.

研究结果表明：尖叶假龙胆能够明显减少VP发生数，延长VP、VT、VF的发生时间，缩短心律失常持续时间；能够明显降低血清中LDH的含量，降低心肌组织中MDA的含量，提升心肌组织中SOD的含量。

实验例6：尖叶假龙胆对过氧化氢诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用

H9c2心肌细胞分组：

取对数生长期的细胞，以1×104个/孔的密度接种于96孔板中，在5％CO₂、37℃条件下培养36h，分为空白组，模型组，尖叶假龙胆高、中、低剂量组，阳性药(槲皮素40μM)组。空白组与模型组给予相同的无血清培养液。

过氧化氢诱导H9c2心肌细胞氧化应激性损伤模型的建立：

取对数生长期的细胞，以1×104个/孔的密度接种于96孔板中，在5％CO2、37℃条件下培养36h，然后更换不同药物的无血清含药培养液，相互作用4小时后，加入终浓度为150μM的过氧化氢作用6小时。随后加入5mg/ml的MTT溶液20μl，37℃孵育4小时后，小心移除培养液，每孔加入100μl的DMSO，充分震荡，使结晶充分溶解后，在微孔板扫描酶标仪测490nm处吸光度(OD值)。将各测试孔的OD值减去本底OD值(无血清培养基加MTT，无细胞)，根据各孔OD值计算平均值±SD。细胞存活率％=(加药细胞OD值-本底OD值)/(对照细胞OD值-本底OD值)×100％。

实验结果：

与空白组相比较，#P<0.01；与模型组相比较，*P<0.05，**P<0.01.

研究结果表明：尖叶假龙胆对H₂O₂诱导的H9c2心肌细胞损伤，具有保护作用。

Claims (5)

1.一种尖叶假龙胆(Gentianella acuta(Michx.)Hulten)提取物，其特征在于：该提取物由酮类化合物、环烯醚萜类化合物、黄酮类化合物组成，该提取物具有治疗心律失常的医药用途。 

2.一种尖叶假龙胆提取物，其特征在于：(1)含有的酮类化合物占提取物总重量比的20～40％，包括：1，3，5，8-四羟基四氢

酮，去甲当药苷，3，8-O-β-D-双吡喃葡萄糖-1，5-二羟基

酮，去甲雏菊叶龙胆酮，1，3，5-三羟基酮，2-O-β-D-吡喃葡萄糖-1-羟基-5，6-二甲氧基

酮，1，2，8-三羟基-5，6-二甲氧基酮；(2)含有的环烯醚萜类化合物占总重量比的5～15％，包括：龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、decentapicrin；(3)含有少量的黄酮类化合物包括：异荭草素、异牡荆素。 

3.一种尖叶假龙胆提取物的制备方法，包括以下步骤： 

a.将尖叶假龙胆用水或低分子醇加热回流提取，2～3次，每次1～3小时，过滤，合并滤液； 

b.将滤液减压浓缩至稠膏状(比重为1.01～1.25)，加入稠膏1～2倍体积比的水混悬均匀； 

c.将b步骤中所得的混悬溶液上样到大孔吸附树脂柱色谱进行吸附，先用1～4倍柱体积的水洗脱，再用4～6倍柱体积的40～70％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，浓缩，得尖叶假龙胆提取物。 

4.按照权利要求3所述的尖叶假龙胆提取物的制备方法，其所制得的提取物具有治疗心律失常、冠心病和缺血性心脏病的医药用途。 

5.按照权利要求1、2、4所述的一种尖叶假龙胆提取物，具有治疗心律失常的医药用途，其可以作为原料药与其他药物配伍，也可以单独以提取物为原料，加上药学上常用的辅料制成临床常用的各种剂型，用于治疗冠心病、缺血性心脏病所致的心律失常。