CN103637993A

CN103637993A - 单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂及其制备方法

Info

Publication number: CN103637993A
Application number: CN201310706008.5A
Authority: CN
Inventors: 龚俊
Original assignee: HUBEI LINGSHENG PHARMACEUTICAL Co Ltd
Current assignee: HUBEI LINGSHENG PHARMACEUTICAL Co Ltd
Priority date: 2013-12-20
Filing date: 2013-12-20
Publication date: 2014-03-19

Abstract

本发明涉及一种单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂及其制备方法。本发明采用膜乳化技术制备单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂，直接将无菌硫酸头孢喹肟悬浮于注射用水中，加入无菌L-赖氨酸调节PH值，使其全部溶解，得硫酸头孢喹肟/l赖氨酸的水溶液，为连续相；将含有抗氧化剂的注射用磷脂、胆固醇溶解于乙醇中，为分散相；将分散相在压力作用下透过多孔质膜分散在连续相中，减压除去乙醇，经除菌、分装，冷冻干燥即得注射用单分散纳米硫酸头孢喹肟制剂。该发明所提供的制备方法简单，制备的微粒尺寸均一、包封率高、稳定性好，乳化过程能耗较低、条件温和，重现性较好，增加硫酸头孢喹肟药物的稳定性，降低了其毒副作用，提高了药物利用度，并且制备工艺简单，适合工业化生产。

Description

单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种含有纳米硫酸头孢喹肟的药物组合物及其制备方法，特别是一种单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂及其制备方法。

背景技术

头孢喹诺又名头孢喹肟、头孢喹咪，商品名为克百特(Cobactan，是德国Hoechst AG研制开发的第1个动物专用第4代头孢类抗生素，l993年首次批准上市，1994年英国英特威公司(Intervet)也随之上市。头孢喹诺的分子式为C₂₃H₂₄N₆0₅S₂，相对分子质量528.60Da，化学名称为：(6R一7R)一7一[(Z)一2一(2一氨基一4一噻唑基)一2一甲氧亚氨基乙酰氨基]一3一[(5,6，7，8一四氢喹啉基一1一甲基]一8一氧代一5一硫杂一1一氮杂双环[4.2.0]辛一2一烯一羧酸盐。头孢喹诺以抗菌谱广、抗菌活性强、耐受性低等优点深受兽医临床工作者欢迎。国外学者研究发现，头孢喹诺对革兰阳性菌(G+)和革兰阴性菌(G^-)均显示良好的抗菌活性。对β-内酰胺酶高度稳定。目前已被欧盟兽用药品委员会(CVMP)批准用于猪、牛的呼吸道细菌感染和奶牛乳房炎等疾病的临床治疗。

目前市场上现有的注射用硫酸头孢喹肟主要是硫酸头孢喹肟的混悬剂、硫酸头孢喹肟与碳酸钠复配粉和冻干粉，在实际使用过程中硫酸头孢喹肟混悬剂出现聚集沉降等现象，尤其在低温下表现明显。而粉针剂由于采用碳酸钠作为助溶剂，在使用过程中易产生气泡和崩瓶等现象，同时，目前的硫酸头孢喹肟制剂的稳定性较差，长期存放，聚合物增加较快，有关物质增加较多，在使用过程中存在较为严重的质量风险。

中国专利文件CN10347407A公开了一种制备硫酸头孢喹肟注射剂的制备方法，是将硫酸头孢喹肟微粉加入到混有抗氧剂的酯类或脂类有几溶剂中，用胶体磨磨细，制成混悬剂、分装、灭菌而成。这样制成的混悬剂产品的粒度和均一性难以保障，能耗大、生产效率低、微粒粒径大且分布范围广、体系重现性差等缺点。且胶体磨本身容易脱落异物、未经灭菌的硫酸头孢喹肟本身会含有不溶性颗粒，生产的硫酸头孢喹肟注射剂质量极不稳定，不溶性微粒难以合格。

中国专利文件CN101987100A公开了一种硫酸头孢喹肟混悬剂注射液的制备方法，其采采用硫酸头孢喹肟微粉加入到注射用油中，用高压匀质机进行匀质，钴60照射灭菌。由于该产品在钴60照射下极不稳定，易分解产生杂质，不良反应增加，且用该法进行灭菌是产品灭菌不彻底。

脂质体（liposome）自60年代末问世以来，70年代初便开始作为药物载体应用。它是一种定向药物载体，具有类细胞结构，进入体内主要被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能并改变被包封药物的体内分布，使得药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积累，从而提高药物的治疗指数、减少药物治疗剂量和降低药物毒性。

中国抗生素杂志【2001，26（2）：123-126】报道了两性霉素B是一种有效的抗真菌药物，但对多数哺乳动物的毒性也较大。若用脂质体包封，则可使其毒性显著降低而不影响抗真菌活性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂及其制备方法，主要解决现有技术制备注射用硫酸头孢喹肟制剂的稳定性和均一性较差，灭菌过程中产品不稳定，无菌生产过程中难以保证不溶性微粒，长期放置有关物质增加很多，且在常温下难以储存，不能满足有效期时间内的质量要求等技术问题，为硫酸头孢喹肟的使用和储存提供了更加可靠的技术支持，降低了产品的毒性，提高了产品的疗效。

为实现上述目的，本发明是这样实现的。

一种单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂，其特征在于：该制剂含有如下重量比的组分：

优选（重量比）：

进一步优选（重量比）：

更优选（重量比）：

所述的单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂，其特征在于：所述的磷脂选自蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、双硬脂酸卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、双软脂酸卵磷脂和双肉豆蔻酸卵磷、双肉豆蔻酸磷脂酰甘油、双月桂酸磷脂酰甘油、双硬脂酸磷脂酰甘油、双肉豆蔻酸磷脂酸、双硬脂酸磷脂酸、双月桂酸磷脂酸、双软脂酸磷脂酸、双油酸磷脂酰丝氨酸或双亚油酸磷脂酰肌醇中的一种或几种。该磷脂没有特别限制，只要能用于注射剂即可。这些磷脂可以单独使用，也可以两种或以上混合使用，当混合使用时，配方磷脂的量是指混合磷脂的总量。

所述的单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂，其特征在于：所述的抗氧化剂为亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、抗坏血酸、维生素E中的一种或者几种。其中优选为维生素E。

所述的单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂，其特征在于：所述的氨基酸是赖氨酸、精氨酸、色氨酸或半胱氨酸中的一种。氨基酸优选为L-赖氨酸；可以列举的氨基酸有L-精氨酸、L-赖氨酸、L-组氨酸/L-半胱氨酸等。

所述的单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂的制备方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

1）连续相的制备：室温下向反应釜中加入无菌硫酸头孢喹肟悬浮于注射用水中；加入无菌氨基酸调节pH值至5～7，使其全部溶解，得硫酸头孢喹肟/氨基酸的水溶液；硫酸头孢喹肟与注射用水的重量比为1：5～100（优选1：5～50，更优选1：5－10）；

2）分散相的制备：向反应釜中将注射用磷脂、胆固醇、抗氧化剂溶解于乙醇中，得到分散相；磷脂与乙醇的重量比为1：10～40（优选1：10～30，最优选1：20）；

3）单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂的制备：将分散相在压力作用下透过多孔质膜均匀注入到连续相中，再用0.45μm的微孔滤膜过滤，最后通过0.22μm的微孔滤膜过滤，分装，经冷冻干燥即得单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂。

本发明硫酸头孢喹肟脂质体制剂是由硫酸头孢喹肟、L-赖氨酸、注射用水、磷脂、胆固醇、抗氧化剂、乙醇制备而成，由于本发明脂质体制剂的最终剂型为冻干粉针剂，因此，制备过程中用做溶剂的注射用水和乙醇均会通过减压或者冻干过程出去，因此最终的制剂中并不含有水和乙醇，但由于工艺等因素，最终制剂中存在药学允许含量的溶剂也是可以理解的，例如制剂中可能含有重量百分含量0～0.5％的乙醇。

所述的单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂的制备方法，其特征在于：所述的步骤3）多孔质膜为无机陶瓷膜或玻璃膜，膜的孔径为100nm～500nm。

本发明采用膜乳化技术制备单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂，直接将无菌硫酸头孢喹肟悬浮于注射用水中，加入无菌L-赖氨酸调节PH值，使其全部溶解，得硫酸头孢喹肟/赖氨酸的水溶液，为连续相；将含有抗氧化剂的注射用磷脂、胆固醇溶解于乙醇中，为分散相；将分散相在压力作用下透过多孔质膜分散在连续相中，减压除去乙醇，经除菌、分装，冷冻干燥即得注射用单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂。该发明所提供的制备方法简单，制备的微粒尺寸均一、包封率高、稳定性好，乳化过程能耗较低、条件温和，重现性较好，脂质体增加硫酸头孢喹肟药物的稳定性，降低了其毒副作用，提高了药物利用度。

附图说明

图1是实施例2制备得到的单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体的粒径分布图。测量仪器：Mastersizer粒度分析仪（英国MALVERN公司）。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明做进一步说明，但不限于此。

实施例1：

配方：

制备工艺：

1）连续相的制备：室温下向反应釜中加入无菌硫酸头孢喹肟悬浮于注射用水中；加入无菌L-赖氨酸调节ph值，使其全部溶解，得硫酸头孢喹肟/赖氨酸的水溶液。加入完毕，调节ph值5.6；其中无菌硫酸头孢喹肟的重量以C₂₃H₂₄N₆O₅S₂·H₂SO₄·H₂O计。

2）分散相的制备：向反应釜中将注射用磷脂、胆固醇、抗氧化剂溶解于乙醇中，搅拌得到分散相溶液；

3）单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂的制备：将分散相在压力（0.1千帕）作用下透过多孔质膜均匀注入到连续相中，减压除去乙醇，再用0.45μm的微孔滤膜过滤，最后通过0.22μm的微孔滤膜过滤，分装，经冷冻干燥即得单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂。

实施例2：

配方：

制备工艺：

1）连续相的制备：室温下向反应釜中加入无菌硫酸头孢喹肟悬浮于注射用水中；加入无菌L-赖氨酸调节ph值，使其全部溶解，得硫酸头孢喹肟/赖氨酸的水溶液；加入完毕，调节ph值6.1；其中无菌β-硫酸头孢喹肟的重量以C₂₃H₂₄N₆O₅S₂·H₂SO₄·H₂O计。

2）分散相的制备：向反应釜中将注射用磷脂、胆固醇、维生素E溶解于乙醇中，得到分散相；

3）单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂的制备：将分散相在压力作用下透过多孔质膜均匀注入到连续相中，减压除去乙醇，再用0.45μm的微孔滤膜过滤，最后通过0.22μm的微孔滤膜过滤，分装，经冷冻干燥即得单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂。实施例2制备得到的单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体的粒径分布如图1所示。

实施例3：

配方：

制备工艺：

1）连续相的制备：室温下向反应釜中加入无菌硫酸头孢喹肟悬浮于注射用水中；加入无菌L-赖氨酸调节ph值，使其全部溶解，得硫酸头孢喹肟/赖氨酸的水溶液；加入完毕，调节pH值6.5；其中无菌硫酸头孢喹肟的重量以C₂₃H₂₄N₆O₅S₂·H₂SO₄·H₂O计。

2）分散相的制备：向反应釜中将注射用磷脂、胆固醇、抗氧化剂溶解于乙醇中，得到分散相；

3）单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂的制备：将分散相在压力作用下透过多孔质膜均匀注入到连续相中，减压除去乙醇，再用0.45μm的微孔滤膜过滤，最后通过0.22μm的微孔滤膜过滤，分装，经冷冻干燥即得单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂。

实施例4：

配方：

制备工艺：

1）连续相的制备：室温下向反应釜中加入无菌硫酸头孢喹肟悬浮于注射用水中；加入无菌L-精氨酸调节pH值，使其全部溶解，得硫酸头孢喹肟/赖氨酸的水溶液；加入完毕，调节ph值6.9；其中无菌β-硫酸头孢喹肟的重量以C₂₃H₂₄N₆O₅S₂·H₂SO₄·H₂O计。

实施例5：质量研究考察

对以上4个实施例中制得的样品进行质量检测，并同时进行高温40℃、相对湿度75％±5％条件下加速试验6个月和温度25℃、相对湿度60％±10％条件下长期试验18个月，得到数据结果如下：

表1本发明单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体注射剂0天质量检测结果

样品	性状	pH	总杂	最大单杂	含量
						实施例1	白色块状物	5.0	1.12	0.4	99.7
实施例2	白色块状物	6.1	1.15	0.41	99.8
						实施例3	白色块状物	6.4	1.0	0.39	100.1
实施例4	白色块状物	6.9	0.9	0.38	100.5

表2：本发明单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂长期质量考察结果考察结果：

综上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用来限定本发明的实施范围。即凡依本发明申请专利范围的内容所作的等效变化与修饰，都应为本发明的技术范畴。

Claims

1.一种单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂，其特征在于：该制剂含有如下重量比的组分：

2.根据权利要求1所述的单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂，其特征在于：所述的磷脂选自蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、双硬脂酸卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、双软脂酸卵磷脂和双肉豆蔻酸卵磷、双肉豆蔻酸磷脂酰甘油、双月桂酸磷脂酰甘油、双硬脂酸磷脂酰甘油、双肉豆蔻酸磷脂酸、双硬脂酸磷脂酸、双月桂酸磷脂酸、双软脂酸磷脂酸、双油酸磷脂酰丝氨酸或双亚油酸磷脂酰肌醇中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂，其特征在于：所述的抗氧化剂为亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、抗坏血酸、维生素E中的一种或者几种。

4.据根据权利要求1所述的单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂，其特征在于：所述的氨基酸是赖氨酸、精氨酸、色氨酸或半胱氨酸中的一种。

5.根据权利要求1或2或3或4所述的单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂的制备方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

1）连续相的制备：室温下向反应釜中加入无菌硫酸头孢喹肟悬浮于注射用水中；加入无菌氨基酸调节pH值至5～7，使其全部溶解，得硫酸头孢喹肟/氨基酸的水溶液；硫酸头孢喹肟与注射用水的重量比为1：5～100；

2）分散相的制备：向反应釜中将注射用磷脂、胆固醇、抗氧化剂溶解于乙醇中，得到分散相；磷脂与乙醇的重量比为1：10～40；

6.根据权利要求5所述的单分散纳米硫酸头孢喹肟脂质体制剂的制备方法，其特征在于：所述的步骤3）多孔质膜为无机陶瓷膜或玻璃膜，膜的孔径为100nm～500nm。