CN101002733A - 一种稳定的脂质体组合物 - Google Patents

一种稳定的脂质体组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN101002733A
CN101002733A CNA2006101487072A CN200610148707A CN101002733A CN 101002733 A CN101002733 A CN 101002733A CN A2006101487072 A CNA2006101487072 A CN A2006101487072A CN 200610148707 A CN200610148707 A CN 200610148707A CN 101002733 A CN101002733 A CN 101002733A
Authority
CN
China
Prior art keywords
liposome
cholesterol
paclitaxel
phospholipid
hydrogenation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CNA2006101487072A
Other languages
English (en)
Other versions
CN100496609C (zh
Inventor
潘弘
刘善奎
郭建辉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai Allist Medicine Polytron Technologies Inc
Original Assignee
Shanghai Allist Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai Allist Pharmaceuticals Inc filed Critical Shanghai Allist Pharmaceuticals Inc
Priority to CNB2006101487072A priority Critical patent/CN100496609C/zh
Publication of CN101002733A publication Critical patent/CN101002733A/zh
Priority to PCT/CN2008/000014 priority patent/WO2008080369A1/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN100496609C publication Critical patent/CN100496609C/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1277—Processes for preparing; Proliposomes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/14—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for lactation disorders, e.g. galactorrhoea
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Abstract

一种稳定的脂质体组合物，由氢化饱和磷脂、胆固醇、以及胆固醇硫酸酯的钠盐或钾盐作为主要的成膜脂质，以蔗糖作为冻干赋形剂，采用薄膜蒸发－冷冻干燥的方法制备。这种脂质体可作为抗癌药物紫杉醇的载体，稳定性试验结果表明其在放置过程中稳定，动物试验结果表明制得的紫杉醇脂质体组合物具有与市售紫杉醇注射液相当的抑瘤作用，而耐受性提高。

Description

一种稳定的脂质体组合物
技术领域
本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种稳定的脂质体组合物，及该脂质体组合物在包封紫杉醇方面的应用及制备方法，以及该紫杉醇脂质体的用途。
背景技术
抗癌药物紫杉醇(paclitaxe)是从短叶红豆杉(Taxus brevifolia Nutt.)的树皮中提取的天然产物，用于治疗卵巢癌、乳腺癌及非小细胞肺癌。但因其在水中的溶解度极微，仅在甲醇、乙醇、二甲基亚砜等有机溶剂中可溶，因而给紫杉醇静脉给药带来极大困难。解决其溶解性的公知的方法之一，是采用表面活性剂聚氧乙烯蓖麻油和乙醇作为溶剂溶解紫杉醇，如1992年美国食品药品管理局(FDA)批准的紫杉醇注射液(美国百时美施贵宝公司生产，商品名为Taxol，在中国注册的商品名为泰素)。聚氧乙烯蓖麻油虽能增加紫杉醇的水溶性，但由于其在体内降解时能释放组织胺，从而可能发生严重的超过敏反应。此外，紫杉醇本身亦有血液学毒性、骨髓抑制、白细胞减少、血小板减少、贫血及其它毒性。
因此，我们期望制备一种稳定的能够降低紫杉醇毒副作用的制剂，一方面避免由聚氧乙烯蓖麻油和乙醇复合溶媒带来的过敏反应，一方面降低紫杉醇的系统毒性。
将脂质体(liposome)作为紫杉醇给药的载体不失为达到该目的的一种方法。脂质体常用的成膜材料有磷脂类、胆固醇类、鞘磷脂类等两亲性物质，其中磷脂通常作为脂质双分子膜的主要构成成分，而胆固醇对调整膜的流动性、柔韧性起着重要的作用。
从1990年代初开始进行的紫杉醇脂质体的基础研究表明，紫杉醇脂质体制剂与注射剂相比，疗效相似，但毒性降低，耐受性提高。目前在紫杉醇脂质体研究领域，有多个公开的技术方案，如Sharma-A在《Int-J-Cancer》1997，71，103-107中报导用三种合成磷脂制成的紫杉醇脂质体，CN1378443A中提及的阳离子脂质体，CN1399958A中提及的采用超细磁流体制备的紫杉醇纳米磁性靶向制剂，WO9513053中提及的以磷脂酰甘油酯(PG)制备的荷电的紫杉醇脂质体，WO9318751、US5424073、US5648090、CN1275076A、CN1714094A中提及的以特别的磷脂--心磷脂(cardiolipid)制备的脂质体，CN1291474A中提及的含有氨基酸的紫杉醇脂质体，CN1391891A中提及的以两亲性聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)修饰脂质体膜制备的紫杉醇隐形脂质体。
在中国已经上市的注射用紫杉醇脂质体由南京思科药业有限公司生产(国药准字H20030357，商品名为力扑素)，据其说明书称，仍存在发生超敏反应的风险，需要提前注射地塞米松等进行抗过敏性预处理，与紫杉醇注射液相比，在耐受性方面并无明显改善。
在上述提及的这些技术方案中，未明确饱和磷脂的使用。而正如本领域技术人员所公知的，常用的脂质材料如天然卵磷脂、天然大豆磷脂中中含有不饱和的脂肪酸基，易氧化水解成过氧化物、丙二醛、脂肪酸及溶血磷脂，后者可进一步水解成甘油磷酸复合物及脂肪酸等。磷脂的氧化水解还可使膜的流动性降低，促进药物渗漏。这些不稳定因素不利于脂质体产品的制备、贮存和临床上的安全使用。此外，带电荷的脂质体与血清或血液、细胞、组织的兼容性或相容性常是不可预期的，如强阳离子电性在血液中形成的大型聚集物导致有机体内血栓的形成。同时，如本领域技术人员所公知的，电荷可预料地影响双分子膜的稳定性，荷电磷脂形成的脂质体增加脂质体囊之间的排斥力，使之不易凝聚沉淀，但同时，双分子膜中荷同种电荷的磷脂会导致膜结构的不稳定性，因此过高的电荷对脂质体稳定的包封药物并非总是有益的。另外，隐形脂质体可使脂质体稳定，有效延长脂质体在体内的循环时间，但其采用两亲性聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)价格昂贵。此外，心磷脂(cardiolipid)这种特殊的脂质材料同样存在价格过高的问题。
在脂质体中，将胆固醇结合到磷脂形成的双分子膜中，可实现膜的稳定性以及适当的流动性和柔韧性。胆固醇的含量对药物包覆率、粒径均有显著影响。胆固醇的衍生物也经常用作脂质体的制备。如US4891208中提及的胆固醇半琥珀酸酯被用于与磷脂酰乙醇胺混合以制备pH敏感的脂质体。这种脂质体带有完全的负电荷，被细胞吸收的效率很低。CN1492876A中公开的基于固醇骨架的两性化合物，环的3-位被1个或多个等电点在4到9之间的两性基团取代，根据该专利公开的技术方案，需要复杂的合成工艺来生产这种胆固醇衍生物。体内多种因素影响pH值，但正如本领域技术人员所认识到的，基于体内pH值来控制药物的释放并不总是可靠的。
因此，如果能以来源广泛的普通脂质材料制备稳定的脂质体，同时控制其荷电量从而使其在体内过程更可预期，将有望弥补上述提到的技术方案的不足，提供一种新型的、质量稳定的、适合于工业化的药物载体。
发明内容
本发明提供了一种脂质体组合物，所述的脂质体不采用特殊的荷电磷脂，也避免使用昂贵的聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)和心磷脂(cardiolipid)，而采用普通的氢化饱和磷脂、胆固醇、胆固醇硫酸酯的钠盐或钾盐作为主要载体，包裹活性成分，本发明所得脂质体组合物荷电量低、质量非常稳定，具备工业化前景，弥补了现有脂质体技术之不足。
本发明还提供了一种脂质体组合物的制备方法，系采用薄膜蒸发-冷冻干燥的方法获得了稳定的脂质体组合物。
本发明还提供了一种同时提高脂质体稳定性和药物包封稳定性的方法，即在接近中性的成膜脂质材料中加入微量胆固醇硫酸酯的钠盐或钾盐，使脂质体分散体系的zeta电位保持在-15到-35毫伏(mV)的范围内。
本发明尤其提供了一种稳定的紫杉醇脂质体组合物及其制备方法，以及其在制备抗肿瘤药物方面的应用。
本发明通过优化脂质体组成来达到上述目的。制备本发明脂质体的必需组分之一是氢化饱和磷脂。通常，这种饱和磷脂含有的饱和脂肪酸基的碳原子数为14～18。碳原子数小于14，脂质体容纳内水相的能力降低，并且给予后，脂质体在血中的稳定性降低。另一方面，碳原子数过多，生物相容性降低，并且由于其碳链增长，相变温度升高，生产脂质体过程中需要非常高的温度，这对药物及脂质体的稳定性都是不利的因素。因此，本发明所使用的饱和磷脂选自例如：氢化饱和的大豆磷脂或卵磷脂、二棕榈酰磷酯胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱。本发明使用的饱和磷脂不限于以上磷脂种类，凡含有的饱和脂肪酸基的碳原子数为14～18的磷脂，均适用于本发明的目的。
本发明优选的饱和磷脂选自氢化饱和的大豆磷脂、氢化饱和的卵磷脂、二棕榈酰磷酯胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱，更优选氢化饱和的大豆磷脂、氢化饱和的卵磷脂。氢化饱和大豆磷脂优选纯度97％以上，其主要成分为磷脂酰胆碱，同时含有微量的磷酯酰乙醇胺和肌醇磷脂，由于其脂肪链氢化饱和，从而防止水解氧化。
制备本发明脂质体的另一个必需组分是胆固醇。胆固醇与饱和磷脂一起作为成膜脂质，可以调节脂质双分子膜的流动性。
制备本发明脂质体的第三个必需组分是一类胆固醇的3位的衍生物，优选胆固醇硫酸酯的钠盐或钾盐。胆固醇硫酸酯钠盐系一种两亲性物质，美国上市的两性霉素胶质分散体(商品名AMPHOCIL)即采用其作为脂质材料，与药物形成一种板状的分散体。在US4822777、US5032582、US5194266描述了这种组合物。在本发明中，创造性地将胆固醇硫酸酯的钠盐或钾盐，见式I和式II所示的分子结构，微量地添加在上述的脂质材料中，取得了意想不到的效果，得到稳定的平均粒径为100-300nm的脂质体。
Figure A20061014870700071
式I胆固醇硫酸酯钠       式II胆固醇硫酸酯钾
胆固醇硫酸酯的钠盐或钾盐为一种荷负电的两亲性物质，其作用在于：(1)微量地加入到成膜脂质中，不会因电荷间的排斥而影响膜的形成；(2)由于其亲水端与磷脂亲水端的亲和作用，使脂质体的双分子膜更加稳定，增加了膜的柔韧性，形成粒径集中于100-300nm范围内的脂质体，同时，减少了药物的泄漏；(3)这种胆固醇的衍生物在体内可安全降解，不存在使用风险。
实现本发明脂质体的一个技术方案如下：
脂质体双分子层的成膜脂质由以下比例的物质组成：氢化饱和磷脂、胆固醇、胆固醇硫酸酯钠盐或钾盐的摩尔比例为：100∶20-50∶0.2-5，更优选这三类物质的摩尔比例为：100∶35-45∶0.5-2，以紫杉醇作为活性成分，其与氢化饱和磷脂的摩尔比例为：2-8∶100。在该方案中，还可进一步包含天然型或合成维生素E作为抗氧化剂，其与氢化饱和磷脂的重量比为0.3-1∶100。将上述物质按比例配制，以常用的脂质体制备方法可以得到本发明的脂质体，例如采用高压匀化法、微孔挤压法、超声分散法，优选采用高压匀化法。采用上述方法制备得到的脂质体的平均粒径在100纳米至300纳米范围内。上述提到的参考文献中的制备方法均引入本文作为参考。
如本领域技术人员所容易理解的，本发明脂质体不仅可用作紫杉醇的载体，同时适用于其它的紫杉烷类物质，而不论其在水中溶解度的大小。同样，其他抗癌药物，如羟基喜树碱，也同样可以本发明的脂质体作为给药载体。其他药物，不论其水溶性的差异，在其性价比可以接受的前提下，同样可采用本发明的脂质体作为载体。
其中含有活性化合物的脂质体可用冷冻干燥来稳定，以制成适宜的组合物形式。在该过程中，需要加入冻干保护剂，依靠其稳定膜作用，保证脂质体的完整性。已知的冻干保护剂是多元醇类，如甘油、葡萄糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、氨基酸等。在本发明中，优选蔗糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖作为冻干赋形剂，更优选蔗糖。按照本发明，冻干保护剂为氢化饱和磷脂重量的2至10倍。
本发明的载药脂质体组合物形式可通过上述冷冻干燥的方法来制备。例如，将活性成分、脂类物质，如果必要，和抗氧化剂，按比例溶解在适宜的溶剂中成澄明溶液，在50℃～65℃恒温下，按照常规方法，如减压蒸发法，如果必要，在惰性气体存在下减压蒸发，除去该液体混合物中的溶剂，使之成膜，再加入溶有按比例计算的冻干赋形剂的水溶液，水化、超声或匀浆至细度为0.1～0.30微米之间，以0.22微米的微孔滤膜过滤除菌，分装入西林瓶等适宜的容器中，通过冷冻干燥从该混合物中除去溶剂，得到干燥的含药脂质体，再将包装容器封口或压盖，在封口和压盖之前可通惰性气体。
在上述脂质体的制备方法中，不限制所使用的与脂质相关的溶剂的量，并且使脂质体溶解的液体的量是适宜的。通常，适宜的溶剂为非极性的或弱极性的并且能够蒸发后不留下毒性残余物。按照常规方法，如就通常所使用的有机溶剂而言，选自甲醇、乙醇、氯仿或它们的混合物。在本发明中，优选乙醇。本发明中采用的惰性气体选自氮气、氦气、氩气。以该制备方法制得的干燥的含药脂质体薄膜能够长期稳定贮存。
在本发明中，一个优选的方案是：活性成分为紫杉烷及其衍生物，更优选紫杉醇。本发明制备所得的紫杉醇注射给药制剂，其不含聚氧乙基代蓖麻油，避免了含聚氧乙基代蓖麻油导致的超敏反应，与常规紫杉醇注射液相比，提高了耐受性。
本发明所得紫杉醇脂质体取得了有益的效果：
(一)半成品及制剂的稳定性
本发明制备的紫杉醇脂质体组合物在冻干之前测定其Zeta电位，为-35mV-15mV之间，室温放置24小时，在此期间测定其Zeta电位，基本保持不变。脂质体在混悬的组合物中保持悬浮状态，不发生聚集。复溶后按照同样方法测定24小时，同样不会发生脂质体的聚集。粒径以及复溶以后的测定结果表明其粒径分布在100-250nm。而以同样组方但不含有硫酸胆固醇的脂质体在放置两个小时后，即发生沉降。
(二)治疗癌症的有效性及使用安全性
在动物试验中，紫杉醇脂质体给药组小鼠未表现出毒副反应，各项生理指标正常，而等剂量泰素组动物在给药后出现短暂昏迷。初步抗肿瘤试验结果表明，脂质体与等剂量泰素的抑瘤率无统计学差异。由此可知，本发明紫杉醇脂质体在抑瘤率相当的情况下，提高了生物体的耐受性。
(三)产业化的可能性
本发明脂质体组合物，采用饱和磷脂和胆固醇作为成膜脂质，这些均为商业上可得到的药用制剂材料。本发明制备工艺简单，步骤少，采用的制剂设备为常规设备，便于投入工业化生产。以紫杉醇作为活性成分制得的脂质体组合物，避免了含聚氧乙基代蓖麻油的紫杉醇制剂导致的超敏反应。根据复溶后紫杉醇脂质体的粒径分布和初步急毒试验结果，可分析得知其静脉注射后具有被动靶向特性，定向分布于网状内皮系统，从而降低紫杉醇的全身毒性，提高了患者用药的耐受性。
本发明所得的紫杉醇脂质体组合物可以适当方式和合理剂量安全地用于哺乳动物，可用作哺乳动物抗肿瘤的治疗剂，尤其可应用于人卵巢癌、卵巢转移性癌、乳腺癌、非小细胞肺癌的治疗，也可与顺铂联合用于癌症的治疗。
下面对本文所用术语作特别说明：
本文所用的术语“脂质体”，如本领域技术人员所公知，指由具有两亲性的磷脂分子和胆固醇聚合而成的封闭性小囊。在本文中，指一般意义上的单室脂质体。
本文所用术语“成膜脂质”，指构成脂质体双分子层的材料，在本文中指磷脂和胆固醇及胆固醇衍生物所构成的总体，本文中“双分子层材料”与“成膜脂质具有同样的含义。
本文所用术语“饱和磷脂”，指磷脂分子中的脂肪酸基是饱和的，即脂肪酸基中基本不含“C＝C”双键。文中“氢化磷脂”、“氢化饱和磷脂”与该术语是同样的含义。
本文所用术语“粒径”，是指以激光粒径测定仪测得的脂质体的平均粒径。
本文所用术语“胆固醇硫酸酯钠盐或钾盐”，是指式I和式II所示结构的化合物，与其他文献中提到的“硫酸胆固醇”、“胆固醇酰硫酸酯”为同样的含义。
下面结合实施例对本发明作进一步详细的说明，实施例中由摩尔比换算得到的物料的重量投料，由于磷脂多为混合物，故在计算时取其大约分子量。涉及到的物质的分子量如下：
紫杉醇860
氢化饱和大豆磷脂760
氢化饱和卵磷脂780
二硬脂酰磷脂酰胆碱760
二棕榈酸磷脂酰胆碱740
胆固醇380
胆固醇硫酸酯钠489
胆固醇硫酸酯钾523
实施例作为例证的目的给出，不构成对本发明范围的限制。
附图说明：
图1实施例1制得的脂质体的电镜照片
图2实施例1制得的脂质体冻干前粒径分布
图3实施例1制得的脂质体复溶后粒径分布
实施例1紫杉醇脂质体的制备
处方：
紫杉醇              0.37g
氢化大豆磷脂        4g
胆固醇              1g
胆固醇硫酸酯钠      0.05g
维生素E             0.055g
蔗糖                15g
注射用水            120ml
分别称取处方量的紫杉醇、氢化大豆磷脂、胆固醇、胆固醇硫酸酯钠、维生素E加入100ml无水乙醇，溶解后，以旋转蒸发仪在氮气存在情况下，抽干溶剂，制备成膜，置真空干燥器中过夜放置，除去残留溶剂。加入以注射用水溶解的蔗糖溶液，55℃水浴，磁力搅拌1小时，超声分散，用高压均质机均质，0.22微米PVDF膜无菌过滤，分装入西林瓶，冷冻干燥。将西林瓶通氮气，压盖密封。
按照中国药典2005版二部附录XIX E中方法，测得样品的包封率为93.0％。
按照中国药典2005版二部附录XIX E中方法，以激光粒径测定仪测定冻干前脂质体样品，其平均粒径为138.6纳米，注射用水复溶样品的平均粒径为178.5纳米。其电镜照片见图1，粒径分布图见图2和图3。
实施例2紫杉醇脂质体的制备
处方：
紫杉醇             0.09g
氢化大豆磷脂       4g
胆固醇             0.4g
胆固醇硫酸酯钾     0.006g
维生素E            0.012g
乳糖               10g
注射用水          150ml
分别称取处方量的紫杉醇、氢化大豆磷脂、胆固醇、胆固醇硫酸酯钾、维生素E加入100ml无水乙醇，溶解后，用旋转蒸发仪制备成膜，置真空干燥器中过夜放置，除去残留溶剂。加入以注射用水溶解的蔗糖溶液，58℃水浴，磁力搅拌1小时，超声分散，依次采用0.8，0.4，0.2微米聚碳酸酯膜，用挤出器高压挤出，分装入西林瓶，冷冻干燥，压盖密封。
与实施例1同样方法测定，冻干前样品的平均粒径为164.6纳米，包封率为92.1％。
实施例3紫杉醇脂质体的制备
处方：
紫杉醇              0.18g
氢化大豆磷脂        4g
胆固醇               0.9g
胆固醇硫酸酯钠       0.13g
维生素E              0.04g
蔗糖                 25g
注射用水             150ml
分别称取处方量的紫杉醇、氢化大豆磷脂、胆固醇、胆固醇硫酸酯钠、维生素E加入100ml无水乙醇，溶解后，用旋转蒸发仪制备成膜，置真空干燥器中过夜放置，除去残留溶剂。加入以注射用水溶解的蔗糖溶液，60℃水浴，磁力搅拌1小时，超声分散，用高压均质机均质，用0.2微米聚碳酸酯膜挤出，0.22微米PVDF膜无菌过滤，分装入西林瓶，冷冻干燥，压盖密封。
与实施例1同样方法测定，冻干前样品的平均粒径为152.6纳米，包封率为90.6％。
实施例4紫杉醇脂质体的制备
处方
紫杉醇               0.2g
氢化大豆磷脂         4g
胆固醇               0.7g
胆固醇硫酸酯钾       0.012g
维生素E              0.04g
蔗糖                 15g
注射用水             150ml
分别称取处方量的紫杉醇、氢化大豆磷脂、胆固醇、胆固醇硫酸酯钾、维生素E加入100ml无水乙醇，溶解后，用旋转蒸发仪制备成膜，置真空干燥器中过夜放置，除去残留溶剂。加入以注射用水溶解的蔗糖溶液，50℃水浴，磁力搅拌1小时，超声分散，用高压均质机均质，用0.2微米聚碳酸酯膜挤出，0.22微米PVDF膜无菌过滤，分装入西林瓶，冷冻干燥，压盖密封。
与实施例1同样方法测定，冻干前样品的平均粒径为143.8纳米，包封率为88.2％。
实施例5紫杉醇脂质体的制备
处方
紫杉醇                     0.15g
二棕榈酰磷脂酰胆碱         2g
胆固醇                     0.5g
胆固醇硫酸酯钠             0.005g
维生素E                    0.025g
蔗糖                       6.5g
注射用水                   75ml
分别称取处方量的紫杉醇、二棕榈酰磷脂酰胆碱、胆固醇、胆固醇硫酸酯钠维生素E加入100ml无水乙醇，溶解后，用旋转蒸发仪制备成膜，置真空干燥器中过夜放置，除去残留溶剂。加入以注射用水溶解的蔗糖溶液，58℃水浴，磁力搅拌1小时，超声分散，依次采用0.8，0.4，0.2微米聚碳酸酯膜，用挤出器高压挤出，分装入西林瓶，冷冻干燥，压盖密封。
与实施例1同样方法测定，冻干前样品的平均粒径为138.6纳米，包封率为86.4％。
实施例6紫杉醇脂质体的制备
处方
紫杉醇          0.15g
氢化卵磷脂      4g
胆固醇          0.4g
胆固醇硫酸酯钾  0.001g
蔗糖            35g
注射用水        200ml
分别称取处方量的紫杉醇、氢化卵磷脂、胆固醇、胆固醇硫酸酯钾加入100ml无水乙醇，溶解后，用旋转蒸发仪制备成膜，置真空干燥器中过夜放置，除去残留溶剂。加入以注射用水溶解的蔗糖溶液，55℃水浴，磁力搅拌1小时，超声分散，用高压均质机均质，用0.2微米聚碳酸酯膜挤出，0.22微米PVDF膜无菌过滤，分装入西林瓶，冷冻干燥，西林瓶中通以氩气，压盖密封。
与实施例1同样方法测定，冻干前样品的平均粒径为178.5纳米，包封率为92.4％。
实施例7紫杉醇脂质体组合物的稳定性试验
该试验旨在考察实施例中制备的脂质体样品的贮存稳定性和使用稳定性。
将实施例1、2、3中制得的干燥的紫杉醇脂质体组合物在2～10℃长期稳定贮存，观察其外观，以注射用水复溶后，以显微镜观察，结果见表1；将此溶液室温存放12小时，定时观察，结果见表2。由结果可知，紫杉醇脂质薄膜在2～10℃贮存12个月后，复溶后不发生聚集，无紫杉醇结晶析出；复溶后放置12小时，不发生聚集，无紫杉醇结晶析出。
表1紫杉醇脂质体低温(2-10℃)放置稳定性试验结果
样品来源 放置时间(月)   外观 复溶后显微镜检测
实施例1 0   类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
1 类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
3   类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
6   类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
12   类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
实施例2 0   类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
1 类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
    3   类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
    6   类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
    12   类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
实施例3     0   类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
1 类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
    3   类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
    6   类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
    12   类白色疏松块状物 溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
表2紫杉醇脂质体复溶后室温放置稳定性试验结果
样品来源 复溶后放置时间(小时)     显微镜检测
实施例1 0     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
1     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
3     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
6     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
12     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
实施例2 0     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
1     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
3     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
6     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
12     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
  实施例3     0     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
    1     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
    3     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
    6     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
    12     溶解后无结晶析出，外观均匀，不聚集
实施例8紫杉醇脂质体的急性毒性试验
该实施例旨在考察本发明紫杉醇脂质体按常规方式给药后的即时毒性反应和多次给药的耐受性。
将实施例1中制备的紫杉醇脂质体以注射用水复溶。试验动物：昆明种雌性小鼠，体重18～20g，随机分为4组，每组5只，阴性组给以与试验组最高体积的相应溶剂。在第1，4，7天对各组以静脉注射给药。
试验结果：(1)即时毒副反应观察：各组小鼠给药后即时观察，无明显毒副反应。(2)小鼠体重变化：紫杉醇组给药后小鼠体重变化不大，第三次给药后小鼠体重有下降，之后体重逐步上升。空白溶剂组小鼠体重逐步上升。
具体结果见表3。
表3紫杉醇脂质体急性毒性试验中动物体重变化
时间(天)              各组小鼠体重动态变化称量结果(g)
    阴性 紫杉醇脂质体低剂量组(40mg/kg/次) 紫杉醇脂质体高剂量组(50mg/kg/次)
    1     22.2±1.5  22.2±1.2  22.0±1.4
    2     23.6±0.5  23.2±0.7  22.6±1.0
    3     24.4±0.8  24.0±0.6  23.4±1.2
    4     24.4±0.5     24.0±0.9     23.4±1.0
    5     25.0±0.6     24.0±0.6     23.6±0.5
    6     25.6±0.5     22.8±0.7     24.0±0.6
    7     25.6±0.5     20.0±1.4     24.2±0.7
    8     26.0±0.6     19.0±0.7     22.6±0.8
    9     26.6±1.0     17.5±1.1     21.6±1.0
    10     26.4±0.5     19.8±1.5     21.4±1.0
    11     26.6±0.8     23.0±0.7     23.2±1.2
    12     27.0±0.6     24.0±0.7     23.2±0.7
实施例9抗肿瘤作用试验
以实施例1中制备的紫杉醇脂质体组合物进行初步抗肿瘤试验。实验动物采用C57BL/6黑小鼠，雄性，体重19～22g，随机分组，每组10只。取B16黑色素瘤源，采用匀浆法，以生理盐水1∶6制备成瘤细胞悬液，右腋皮下接种B16黑色素瘤，肿瘤接种后24小时，小鼠尾静脉注射给药，观察即时反应及体重变化。实验结束后，剖取肿瘤称重，按下式计算肿瘤抑制率。
肿瘤抑制率％＝[(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)/对照组平均瘤重]*100％
试验结果：(1)即时反应观察：紫杉醇脂质体各组给药后无即时明显毒副性反应。泰素各组小鼠静脉给药后(注速为1ml/min)，即时小鼠呈半昏迷状态，15分钟左右可逐渐恢复。(2)各组动物体重均无明显变化。(3)在总剂量相等的情况下，紫杉醇脂质体与泰素的抑瘤效果无明显差异(见表4)。
表4紫杉醇脂质体不同给药方案对小鼠黑色素瘤B16(皮下接种)疗效试验
         分组 给药方案 动物数(只)始/终 抑瘤率(％)
样品 剂量(mg/kg)
紫杉醇脂质体     50 第1、7天静注给药     10/10     64.87
33.3 第1、5、9天静注给药 10/10 65.38
    25 第1、4、7、10天静注给药     10/10     65.77
泰素     33.3 第1、5、9天静注给药     10/10     68.11
    25 第1、4、7、10天静注给药     10/10     69.18

Claims (17)

1.一种稳定的脂质体，其特征在于，脂质体的成膜脂质包含氢化饱和磷脂、胆固醇和胆固醇的3位取代衍生物，活性成分包裹在脂质体中。
2.如权利要求1所述的脂质体，其特征在于，所述胆固醇的3位取代衍生物选自胆固醇硫酸酯钠盐、胆固醇硫酸酯钾盐。
3.如权利要求2所述的脂质体，其特征在于，包含紫杉烷类物质作为活性成分。
4.如权利要求2或3所述的脂质体，其特征在于，所述氢化饱和磷脂选自氢化饱和大豆磷脂、氢化饱和卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱。
5.如权利要求4所述的脂质体，其特征在于，所述氢化饱和磷脂、胆固醇、胆固醇硫酸酯钠盐或钾盐的摩尔比例为：100∶20-50∶0.2-5。
6.如权利要求5所述的脂质体，其特征在于，所述氢化饱和磷脂、胆固醇、胆固醇硫酸酯钠盐或钾盐的摩尔比例为：100∶35-45∶0.5-2。
7.如权利要求6所述的脂质体，其特征在于，所述脂质体组合物进一步包含天然型或合成维生素E作为抗氧化剂，其与氢化饱和磷脂的重量比为0.3-1∶100。
8.如权利要求1至3、5至7任一所述的脂质体，其特征在于，所述活性成分为紫杉醇。
9.如权利要求8所述的脂质体，其特征在于，所述紫杉醇与氢化饱和磷脂的摩尔比例为：2-8∶100。
10.如权利要求1至3，5至7，权利要求9任一所述的脂质体，其特征在于，脂质体的平均粒径在100纳米至300纳米范围内。
11.一种包含权利要求1至10任一所述的脂质体的组合物，其特征在于，该组合物进一步包含冻干防护剂，其制剂形式为冻干剂。
12.如权利要求11所述的脂质体组合物，其特征在于，所述冻干防护剂选自蔗糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖。
13.如权利要求12所述的脂质体组合物，其特征在于，所述冻干防护剂为氢化饱和磷脂重量的2-10倍。
14.如权利要求11至13任一所述的脂质体组合物的制备方法，步骤为：将活性成分与成膜脂质，如有必要，和抗氧化剂，按比例搅拌溶于乙醇中，恒温50℃～65℃，减压除去溶剂后成膜，加入冻干赋形剂的水溶液，水化、超声或匀浆或挤出至细度为0.1～5.0微米之间，以0.22微米的微孔滤膜过滤除菌，分装，冷冻干燥后，得到白色块状的紫杉醇脂质体组合物，以西林瓶包装。
15.权利要求11至13任一所述的脂质体组合物在制备抗癌药物方面的用途，其中癌症种类为卵巢癌、卵巢转移性癌、乳腺癌、非小细胞肺癌。
16.如权利要求15所述的用途，其特征在于，使用之前以注射用水复溶，再以5％葡萄糖溶液稀释，其使用方式为静脉注射或腹腔注射或瘤体注射。
17.如权利要求16所述的用途，可与顺铂联合用于癌症的治疗。
CNB2006101487072A 2006-12-30 2006-12-30 一种稳定的脂质体组合物 Active CN100496609C (zh)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2006101487072A CN100496609C (zh) 2006-12-30 2006-12-30 一种稳定的脂质体组合物
PCT/CN2008/000014 WO2008080369A1 (fr) 2006-12-30 2008-01-02 Composition liposomale stable

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2006101487072A CN100496609C (zh) 2006-12-30 2006-12-30 一种稳定的脂质体组合物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101002733A true CN101002733A (zh) 2007-07-25
CN100496609C CN100496609C (zh) 2009-06-10

Family

ID=38702262

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB2006101487072A Active CN100496609C (zh) 2006-12-30 2006-12-30 一种稳定的脂质体组合物

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN100496609C (zh)
WO (1) WO2008080369A1 (zh)

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101797264A (zh) * 2010-03-23 2010-08-11 广州朗圣药业有限公司 注射用两性霉素b脂质复合物及其制备方法
CN101889982A (zh) * 2010-04-15 2010-11-24 山东京卫制药有限公司 一种新型的长循环脂质体组合物及其制备方法
CN101642255B (zh) * 2009-07-31 2012-05-23 东北农业大学 薄膜蒸发-冷冻干燥包埋二十二碳六烯酸的方法
CN101584663B (zh) * 2008-05-22 2013-02-20 广州瑞济生物技术有限公司 新型的注射用多西他赛脂质体给药系统及其制备方法
CN107921005A (zh) * 2015-02-13 2018-04-17 友杏生技医药股份有限公司 利用纳米颗粒治疗肿瘤的组合物和方法
CN108348538A (zh) * 2015-11-02 2018-07-31 富士胶片株式会社 包含吉西他滨脂质体组合物的肿瘤治疗药及试剂盒
CN109293927A (zh) * 2009-02-04 2019-02-01 布里格姆及妇女医院股份有限公司 纳米级铂化合物及其使用方法
US11684575B2 (en) 2014-04-30 2023-06-27 Fujifilm Corporation Liposome composition and method for producing same

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT201900019775A1 (it) * 2019-10-25 2021-04-25 Health Progress Italia S R L Composizione nutraceutica liposomiale

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0825869B2 (ja) * 1987-02-09 1996-03-13 株式会社ビタミン研究所 抗腫瘍剤包埋リポソ−ム製剤

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101584663B (zh) * 2008-05-22 2013-02-20 广州瑞济生物技术有限公司 新型的注射用多西他赛脂质体给药系统及其制备方法
CN109293927A (zh) * 2009-02-04 2019-02-01 布里格姆及妇女医院股份有限公司 纳米级铂化合物及其使用方法
CN101642255B (zh) * 2009-07-31 2012-05-23 东北农业大学 薄膜蒸发-冷冻干燥包埋二十二碳六烯酸的方法
CN101797264B (zh) * 2010-03-23 2012-05-30 广州朗圣药业有限公司 注射用两性霉素b脂质复合物及其制备方法
CN101797264A (zh) * 2010-03-23 2010-08-11 广州朗圣药业有限公司 注射用两性霉素b脂质复合物及其制备方法
CN101889982A (zh) * 2010-04-15 2010-11-24 山东京卫制药有限公司 一种新型的长循环脂质体组合物及其制备方法
CN101889982B (zh) * 2010-04-15 2012-12-26 山东京卫制药有限公司 一种长循环脂质体组合物及其制备方法
US11684575B2 (en) 2014-04-30 2023-06-27 Fujifilm Corporation Liposome composition and method for producing same
CN107921005A (zh) * 2015-02-13 2018-04-17 友杏生技医药股份有限公司 利用纳米颗粒治疗肿瘤的组合物和方法
CN111632030A (zh) * 2015-11-02 2020-09-08 富士胶片株式会社 包含吉西他滨或其盐的脂质体组合物的制造方法
US11166914B2 (en) 2015-11-02 2021-11-09 Fujifilm Corporation Tumor therapeutic agent and kit containing gemcitabine liposome composition
US11166913B2 (en) 2015-11-02 2021-11-09 Fujifilm Corporation Tumor therapeutic agent and kit containing gemcitabine liposome composition
CN108348538A (zh) * 2015-11-02 2018-07-31 富士胶片株式会社 包含吉西他滨脂质体组合物的肿瘤治疗药及试剂盒

Also Published As

Publication number Publication date
CN100496609C (zh) 2009-06-10
WO2008080369A1 (fr) 2008-07-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN100496609C (zh) 一种稳定的脂质体组合物
CN101926757B (zh) 一种难溶性药物的液体组合物及其制备方法
Jing et al. A novel polyethylene glycol mediated lipid nanoemulsion as drug delivery carrier for paclitaxel
JP2012207042A (ja) 低い水溶性を有する生物学的に活性な化合物を可溶化するための方法および組成物
CN101396346B (zh) 紫杉醇脂质复合物
JP2009507049A (ja) リン脂質のポリエチレングリコール誘導体に包み込まれたビンカアルカロイド系制癌剤のナノミセル製剤
CN101889982B (zh) 一种长循环脂质体组合物及其制备方法
US11684575B2 (en) Liposome composition and method for producing same
CN102686217B (zh) 以类固醇复合物为中间载体的紫杉醇亚微乳
US10646442B2 (en) Liposome composition and method for producing same
CN102302447B (zh) 一种新型紫杉醇脂质微球注射液及其制备方法
CN105853403A (zh) 一种紫杉醇棕榈酸酯脂质体及其制备方法
CN114796111A (zh) 一种含有难溶性药物的浓缩液以及由其制备的乳剂
CN105726494B (zh) 穿心莲内酯纳米混悬剂组合物及其制备方法和应用
CN103585106B (zh) 一种pH敏感性修饰脂质体及其制备方法
CN113384705A (zh) 泊洛沙姆修饰的脂质体的制备及在口服药物递送中的应用
CN105919935B (zh) 索拉非尼药物脂质纳米混悬剂及其制备方法
CN102716089B (zh) 一种盐酸吉西他滨脂质体注射剂
CN104288100A (zh) 一种替尼泊苷纳米混悬剂及其制备方法
CN102085189B (zh) 一种多西他赛长循环脂质体的制备方法
CN101322681A (zh) 一种制备蒽环类抗肿瘤抗生素的纳米胶束制剂的方法
CN102028655B (zh) 扎那米韦固体脂质纳米粒的口服制剂及其制备方法
CN107412172A (zh) 一种紫杉醇白蛋白纳米混悬剂冻干粉及其制备工艺
CN102552149A (zh) 一种注射用肝素钙脂质体制剂
CN1947703A (zh) 一种稳定的脂质体组合物

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CP01 Change in the name or title of a patent holder

Address after: 201210, Zhangjiang hi tech park, Shanghai, Harley Road, No. 5, building 1118

Patentee after: Shanghai ALLIST medicine Polytron Technologies Inc.

Address before: 201210, Zhangjiang hi tech park, Shanghai, Harley Road, No. 5, building 1118

Patentee before: SHANGHAI ALLIST PHARMACEUTICALS, Inc.

CP01 Change in the name or title of a patent holder
CP02 Change in the address of a patent holder

Address after: 201203 floor 5, building 1, No. 1118, Halley Road, No. 1227, zhangheng Road, Shanghai pilot Free Trade Zone

Patentee after: Shanghai ALLIST medicine Polytron Technologies Inc.

Address before: 201210, Zhangjiang hi tech park, Shanghai, Harley Road, No. 5, building 1118

Patentee before: Shanghai ALLIST medicine Polytron Technologies Inc.

CP02 Change in the address of a patent holder
CP02 Change in the address of a patent holder

Address after: No. 268 Lingxiaohua Road, Zhoupu Town, Pudong New Area, Shanghai, 201318

Patentee after: Shanghai ALLIST medicine Polytron Technologies Inc.

Address before: 5 / F, building 1, 1118 Harley Road, 1227 zhangheng Road, Shanghai pilot Free Trade Zone, 201203

Patentee before: Shanghai ALLIST medicine Polytron Technologies Inc.

CP02 Change in the address of a patent holder