CN103596582B

CN103596582B - 药用组合物

Info

Publication number: CN103596582B
Application number: CN201280027310.1A
Authority: CN
Inventors: 克斯廷·尤芙纳斯-莫伯格; A·卡尔松
Original assignee: PeP-Tonic Medical AB
Current assignee: PeP-Tonic Medical AB
Priority date: 2011-04-14
Filing date: 2012-04-13
Publication date: 2016-03-16
Anticipated expiration: 2032-04-13
Also published as: KR101940341B1; JP5993442B2; ES2535521T3; US20140171369A1; AU2012241805B2; ZA201308157B; PL2696882T3; IL228821A0; SE1150324A1; SG194074A1; AU2012241805A1; JP2014515747A; EP2696882B1; BR112013026153A2; CA2832664A1; CA2832664C; SE536091E5; KR20140019830A; IL228821A; CN103596582A

Abstract

本发明涉及一种新颖的药用组合物，该药用组合物包括催产素和/或其一个或多个片段和/或变体，以及至少一种非离子型纤维素醚，例如甲基羟基丙基纤维素，所述药用组合物具有一个低pH。本药用组合物已经示出为催产素提供一种格外适合的环境，因为其稳定性与具有此分子的在先组合物相比有显著的增长。根据本发明所述的药用组合物可以被用于医学目的，例如在更年期失调的治疗中。

Description

药用组合物

技术领域

本发明涉及基于非离子型纤维素醚的药用组合物，并且更确切地涉及包括催产素、和/或如在此所披露的其一个或多个片段和/或变体的这样的药用组合物，所述药用组合物具有一种改进的稳定性。催产素是一种天然肽，本领域中熟知它具有不同治疗应用，例如在更年期失调和癌症、尤其是与之相关的前期癌性病况的治疗中。

背景技术

催产素是待分离和测序的第一肽类激素之一。它是带有两个半胱氨酸残基的九肽，这些残基在位置1和6之间形成了一个二硫桥键并对应下式

催产素（SEQIDNO:1）

在很长一段时间中归因于催产素的仅有的作用是它对排乳和子宫收缩的刺激作用，但在过去的几十年中，已经示出催产素在中枢神经系统（CNS）中发挥出广泛作用。也有人提出，催产素参与控制记忆和学习过程以及不同类型的行为，例如进食、运动、连同母性行为和性行为。催产素还被提出参与控制心血管功能、体温调节、痛阈以及体液平衡、连同伤口愈合。也有证据表明催产素涉及控制不同免疫过程。还已证实，在重复给予之后，催产素注射引起了具有持久租用的血压降低和增加的体重。作为中枢刺激物质，催产素在哺乳动物的母亲和后代之间的互动中起重要的作用。这些产品还可以被用作年幼人类的预防药，例如已经用在新生儿或幼儿中以预防以后生活中疾病（这些疾病依赖于胎儿生命中的胁迫条件）的发展。这类病况可以是心脏/血管疾病，例如中风、心脏梗塞、高血压、以及糖尿病。在人身体中，催产素是在下丘脑的室旁核（PVN）和视上核（SON）中产生的。它与加压素（也在这些核团中产生）仅有两个氨基酸不同。SON和PVN的大细胞的催产素能神经元向垂体后叶（从这里释放催产素至循环系统中）发送oxons。源于PVN的小细胞神经元投入CNS内的多个区域中。这些产催产素细胞受胆碱能的、儿茶酚胺能的、血清素能的连同肽能的神经元支配。在大脑外不同组织例如子宫、卵巢、睾丸、胸腺、肾上腺髓质和胰脏中催产素的存在已被证实，并且催产素也被提出在这些器官中发挥局部作用。催产素向大脑区域和向循环系统中平行分泌的发生响应一些刺激，例如哺乳，但其他刺激可以引起在大脑或脑垂体中终止的催产素能神经元的单独激活。

纤维素醚以纤维素命名并基于纤维素，纤维素是一种可再生材料并且是有机自然中最常见的化合物。在市场上存在广泛的可获得的纤维素醚，都是离子的和非离子的，例如羧基甲基纤维素钠、羟乙基乙基纤维素、羧基乙基纤维素、羧基丙基纤维素、羟乙基甲基纤维素以及羟丙基甲基纤维素。

纤维素醚在以下这样的多种多样的应用中被用作添加剂：例如食物、涂料、油回收、纸、化妆品、药物、粘合剂、印染、农业、陶瓷、织物、洗涤剂和建筑材料。纤维素醚改进了这些应用中的产品质量并在如分散涂料、钻井泥浆、冰淇淋、片剂涂料、墙纸糊剂和瓷砖胶这样的不同的产品中充当增稠剂、保水剂、助悬浮剂、保护胶体、成膜剂或热塑性塑料。

非离子型纤维素醚例如甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素（也称作羟丙甲纤维素）和甲基羟基乙基纤维素在制药工业中是广泛使用的，这归因于它们以下的能力：增稠、结合水和保水、连同乳化和悬浮颗粒以及成膜。关于非离子型纤维素醚的另外的信息可以在WO92/09307中找到。

催产素的肽结构使它容易降解，并且所熟知的一个事实是：包括催产素的药用组合物应被储存在冷环境（约4℃）以避免大量的降解和/或聚合由此失去它的生物学功能。例如，建议（Novartis公司）（用于注射或输液的催产素的一种浓缩水溶液）正常应被储存在2℃-8℃。这个产品在25℃下的保质期被限制在3个月。另一个实例是鼻用喷雾，该鼻用喷雾也应该被保存在2℃-8℃。这些水性配制品包括缓冲剂、防腐剂、酸类、盐、共溶剂和其他水溶性添加剂但不包括胶凝剂。

包括离子型胶凝剂羧基甲基纤维素钠（CMC）的具有催产素的以上配制品已经示出不能为催产素提供一个适合的环境。例如这在本发明的实验部分中说明。

因此，鉴于包括催产素的以上药用组合物相关的问题，在本领域中存在以下需要：通过提供其中改进了催产素稳定性的药用组合物以克服或至少缓解本领域中的缺点。此类药用组合物将提供更方便的储存（例如在室温下）并也应该保留其生物活性更长时段。

发明内容

此处进一步解释的是，在上面提出的问题现在已被本发明解决。

因此，本发明涉及多种新的药用组合物，这些组合物包括催产素、和/或如在此所披露的其一个或多个片段和/或变体、连同其药学上可接受的盐、以及如在此所披露的至少一种非离子型纤维素醚，其中所述的药用组合物具有在约3和4之间的范围内的一个pH。

已出人意料地示出：一种中性的、非离子型纤维素醚（例如羟丙基甲基纤维素（HPMC））显著改进了药用组合物中催产素的稳定性，由此提供了一种优异的用于药用用途的药用组合物。因此，本发明涉及包括以下的药用组合物：催产素（SEQIDNO:1）和/或根据SEQIDNO:2所述的其一个或多个片段和/或变体（或如此处另外定义的）、连同其药学上可接受的盐以及至少一种非离子型纤维素醚（例如羟丙基甲基纤维素（HPMC））。

通过具有低pH（例如在约3和4之间的范围内，例如在约3和3.5之间的范围内）的所述药用组合物，该非离子型纤维素醚的这种稳定效应被进一步支持。当存在于这样一种药用组合物中时，与先前可能的相比，这将使可能在室温下储存催产素更长时段。一种对于催产素肽（在这样一种药用组合物中）有利的环境也应该正向地影响它的生物活性由此改进它的治疗效果，因为更多生物活性的物质自始至终存在其中。

因此，本发明涉及包括以下的药用组合物：催产素（SEQIDNO:1）、和/或根据SEQIDNO:2所述的其一个或多个片段和/或变体、连同其药学上可接受的盐以及至少一种非离子型纤维素醚（例如羟丙基甲基纤维素（HPMC）），所述的药用组合物具有在约3和4（例如约3和3.5）之间的范围内的或如此处另外例示的一个pH，其中催产素和/或其一个或多个片段和/或变体的稳定性已被改进。非离子型纤维素醚（例如HPMC）稳定催产素的能力不是先前已知的并且是令人非常希望的，因为提供不总是需要储存在寒冷环境中并由此更容易处理的包括催产素的药用组合物在本领域中已经是一种长期感觉的需要。

本发明还涉及如在此所披露的一种药用组合物的医学用途，例如在阴道萎缩的治疗中的用途。因此，在本发明的其他方面中也涉及催产素、和/或其一个或多个片段和/或变体、以及如在此所披露的至少一种非离子型纤维素醚在制造一种药物中的用途，用于更年期失调（例如阴道萎缩）的治疗的所述的药物具有在约3和4之间的范围内的一个pH。此外，本发明涉及用于制备所述药用组合物的方法，连同用根据本发明所述的一种药用组合物治疗患者的方法。

具体实施方式

定义

每当此处提到“催产素”、“催产素肽”和/或“催产素分子”时，这涵盖催产素（SEQIDNO:1）和/或如在此所定义的根据通式SEQIDNO:2的其一个或多个片段和/或变体、或如此处提到的任何其他变体和/或片段连同其类似物和/或同系物。每当设想一个催产素分子/肽的一个片段、变体或同系物时，应被理解为这样一种变体、片段或同系物涵盖与该催产素分子本身（SEQIDNO:1）可比较的生物活性。作为实例，通过执行示出实际物质的活性的测试，例如通过执行如在WO0178758（实例1）中所述的双盲交换随机协议，可以示出物质具有催产素活性。

因此，如此处所指的催产剂的“变体”是指如下的一种肽：与该催产素分子相比，在它的氨基酸结构上已经被改变，其中可能已经通过在一些氨基酸位置上引入其他氨基酸（例如在此所示例的天然的或非天然的氨基酸）使这样的位置发生变化，或通过在该肽的任一端被添加一个或多个天然或非天然的氨基酸而使其延伸。此外，对如此处所指的本发明的肽也可能已经执行其他结构性变异，例如合成修饰。所述“变体”仍然保持着与催产素相似的生物活性，并且所述的催产素变体还通过存在于根据本发明所述的药用组合物中而被稳定。

此外，如此处所指的催产素的一个“片段”是一种肽，该肽包括催产素的氨基酸序列的一部分，但是其中一个或多个氨基酸可能已被从该氨基酸的末端的一端或两端去除。这个术语也指如在SEQIDNO:2中所定义的催产素变体的一个片段，因此意味着如由SEQIDNO:2所呈现的肽的任一片段也都涵盖在本发明中。

一种“pH调节剂”是能够调节和/或维持所述药用组合物的pH的任何药剂（例如一种液体药剂，例如一种水性液体），其中所述pH被大致保持在一个所选范围内，其中所选范围是此示例的。这样的一种pH调节剂例如可以是一种缓冲剂，例如一种柠檬酸盐、乳酸盐或磷酸盐缓冲剂。一种“缓冲剂”是一种离子化合物（通常是一种弱酸或弱碱的盐），该化合物被添加至一种溶液中以抵挡它的酸度或碱度的变化并因此稳定它的pH。一种缓冲溶液是一种包含这样一种化合物的溶液。pH调节剂的其他实例是有机的和无机的酸类和碱类，例如乙酸、柠檬酸、磷酸、盐酸和氢氧化钠。

已知催产素遭受归因于降解和/或聚合的问题，这些问题使得保存包括催产素的药用组合物优选是在冷环境下以避免它损失它的生物活性。令人惊讶地地，现已经示出可能的是，结合一个低pH通过利用至少一种非离子型纤维素醚作为用于所述催产素分子的一种药物载体，制备包括如在SEQIDNO:1和SEQIDNO:2中所阐明的催产素和/或其一个或多个片段和/或变体的、具有改进的稳定性的药用组合物。因此，本发明涉及包括以下的药用组合物：催产素（SEQIDNO:1）和/或根据SEQIDNO:2所述的其一个或多个片段和/或变体（或如此处另外定义的）、连同其药学上可接受的盐以及至少一种非离子型纤维素醚（例如羟丙基甲基纤维素（HPMC））。

当提到所述药用组合物的改进的稳定性时，它是生物物质（即催产素和/或如在此所定义的其一个或多个片段和/或变体）的稳定性被改进。从而因此，如在此所呈现的药用组合物的生物活性和治疗效果通过避免过多的降解和/或聚合、或催产素物质的其他结构变化,应被改进。

不被任何特定理论所限制，非离子型纤维素醚（是一种不带电分子）似乎通过避免与其（即与所述催产素分子）不必要的干扰来稳定催产素分子。此外，使用一个适合的pH，例如在约3和4之间的范围内，例如在约3和3.5之间的范围内，进一步有助于对非离子型纤维素醚的催产素的稳定作用。因此，再次不希望受一个特定理论的限制，低pH似乎不仅稳定催产素自身，而也有利于该组合物的非离子型纤维素醚部分。

结合起来，这里提供了用于药用用途的一种优异的组合物，其中催产素和/或如在此所示例的其一种变体和/或一个片段的生物活性和/或治疗活性应被提升和延长。这种药用组合物对于使用者还是更易操作的，如归因于它的改进的生物活性，它不需要总被储存在冷环境下而可以被代之以更便利的被保存在室温中，例如在使用或储存期间，仍保持它的生物活性。

非离子型纤维素醚对本发明的药用组合物中的催产素分子的稳定作用与使用的其他药物载体（例如羧基甲基纤维素钠（CMC），其中配制品催产素已经示出会更快速地降解和/或聚合）形成对照（参见例如在实验部分中的对比实例）。不受特定理论的限制，这可能归因于以下事实：CMC聚合物是带负电的并且可以被认为是可以与该催产素肽产生不利相互作用的聚阴离子。

因此，本发明涉及一种药用组合物，包括

a.催产素（SEQIDNO:1）、根据SEQIDNO:2所述的其一个或多个片段和/或变体、连同其药学上可接受的盐、以及

b.至少一种非离子型纤维素醚；

其中SEQIDNO:2是

X₁-X₂-X₃-X₄-Asn-Cys-X₅-X₆-X₇-X₈-NH₂

其中

X₁选自下组，该组由以下各项组成：Cys和没有；

X₂选自下组，该组由以下各项组成：Tyr、Phe、和没有；

X₃选自下组，该组由以下各项组成：Ile、Val、Hoph、Phe、Cha、和没有；

X₄选自下组，该组由以下各项组成：Gln、Ser、Thr、Cit、Arg、和Daba；

X₅选自下组，该组由以下各项组成：Pro和没有；

X₆选自下组，该组由以下各项组成：Ile、Leu、没有、Val、Hos、Daba、Thr、Arg、和Cit；

X₇选自下组，该组由以下各项组成：Gly、没有、和Ala；

X₈选自下组，该组由以下各项组成：Gly和没有；

其中所述药用组合物具有在约3和约4之间的范围内的一个pH。

在本发明的一个方面，当X₁是Cys时，那么在X₁和Cys之间形成了一个二硫键。

因此，应理解，当在化学式(I)中的X₁是半胱氨酸（Cys）时，那么X₁的硫醇基团可与半胱氨酸的硫醇基团形成一个二硫键（位于天冬酰胺（Asn）和X₅之间），由此形成具有化学式(Ia)的一个环结构：

在另一个方面，提供的是一种药用组合物，该组合物包括催产素（SEQIDNO:1）和羟丙基甲基纤维素，并且其中所述药用组合物的pH是在约3和4之间（例如在约3和3.5之间）的范围内或如在此另外示例的。

在另一个方面，本发明还涉及一种药用组合物，该组合物由一种非离子型纤维素醚和催产素（SEQIDNO:1）、和/或如在此所呈现的（SEQIDNO:2）其一种变体和/或片段、连同其药学上可接受的盐、和一种pH调节剂组成，其中所述药用组合物具有在约3和4之间的范围内（例如在约3和约3.5之间的范围内）的pH。在一个方面，所述药用组合物由催产素（SEQIDNO:1）、羟丙基甲基纤维素（HPMC）和一种pH调节剂组成，其中所述药用组合物具有在约3和4之间（例如在约3和约3.5之间）的范围内的或如在此另外示例的pH。在一个方面，所述pH调节剂是一种缓冲剂，例如一种柠檬酸盐或一种乳酸盐缓冲剂。

在本发明的一个方面，所述药用组合物包括催产素，即在SEQIDNO:2中当X₁是Cys时，X₂是Tyr，X₃是Ile，X₄是Gln，X₅是Pro，X₆是Leu，X₇是Gly，并且X₈是没有（Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH₂）（SEQIDNO:1）。

所述药用组合物的催产素的一种或多种变体和/或片段（SEQIDNO:2）还可选自下组，该组由以下化合物组成（连同其药学上可接受的盐）：

中催产素：Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Ile-Gly-NH₂（SEQIDNO:3）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Ile，X₄是Gln，X₅是Pro，X₆是Ile，X₇是Gly，并且X₈是没有；

丝异亮催产素：Cys-Tyr-Ile-Ser-Asn-Cys-Pro-Ile-Gly-NH₂（SEQIDNO:4）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Ile，X₄是Ser，X₅是Pro，X₆是Ile，X₇是Gly，并且X₈是没有；

产卵激素（Annetocin）：Cys-Phe-Val-Arg-Asn-Cys-Pro-Thr-Gly-NH₂（SEQIDNO:5）

X₁是Cys，X₂是Phe，X₃是Val，X₄是Arg，X₅是Pro，X₆是Thr，X₇是Gly，并且X₈是没有；

催产加压素：Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Arg-Gly-NH₂（SEQIDNO:6）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Ile，X₄是Gln，X₅是Pro，X₆是Arg，X₇是Gly，并且X₈是没有；

加压素：Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-Arg-Gly-NH₂（SEQIDNO:7）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Phe，X₄是Gln，X₅是Pro，X₆是Arg，X₇是Gly，并且X₈是没有；

Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-NH₂（SEQIDNO:8）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Ile，X₄是Gln，并且X₅-X₈是没有；

Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-NH₂（SEQIDNO:9）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Ile，X₄是Gln，X₅是Pro，并且X₆-X₈是没有；

Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-NH₂（SEQIDNO:10）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Ile，X₄是Gln，X₅是Pro，X₆是Leu，并且X_7-8是没有；

Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH₂（SEQIDNO:11）

X₁是没有，X₂是Tyr，X₃是Ile，X₄是Gln，X₅是Pro，X₆是Leu，X₇是Gly，并且X₈是没有；

Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH₂（SEQIDNO:12）

X₁-X₂是没有，X₃是Ile，X₄是Gln，X₅是Pro，X₆是Leu，X₇是Gly，并且X₈是没有；

Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH₂（SEQIDNO:13）

X₁-X₃是没有，X₄是Gln，X₅是Pro，X₆是Leu，X₇是Gly，并且X₈是没有；

Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-NH₂（SEQIDNO:14）

X₁-X₂是没有，X₃是Ile，X₄是Gln，X₅是Pro，并且X₆-X₈是没有；

Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-Gly-NH₂（SEQIDNO:15）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Ile，X₄是Gln，X₅是Pro，X₆是Leu，X₇是Gly，并且X₈是Gly；

Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Leu-NH₂（SEQIDNO:16）

X₁-X₃是没有，X₄是Gln，X₅是Pro，X₆是Leu，X₇是Leu，并且X₈是没有；

Cys-Tyr-Val-Thr-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH₂（SEQIDNO:17）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Val，X₄是Thr，X₅是Pro，X₆是Leu，X₇是Gly，并且X₈是没有；

Cys-Tyr-Hoph-Thr-Asn-Cys-Pro-Val-Gly-NH₂（SEQIDNO:18）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Hoph，X₄是Thr，X₅是Pro，X₆是Val，X₇是Gly，X₈是没有；

Cys-Tyr-Phe-Cit-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH₂（SEQIDNO:19）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Phe，X₄是Cit，X₅是Pro，X₆是Leu，X₇是Gly，并且X₈是没有；

Cys-Tyr-Cha-Arg-Asn-Cys-Pro-Hos-Ala-NH₂（SEQIDNO:20）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Cha，X₄是Arg，X₅是Pro，X₆是Hos，X₇是Ala，并且X₈是没有；

Cys-Tyr-Val-Daba-Asn-Cys-Pro-Daba-Ala-NH₂（SEQIDNO:21）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Val，X₄是Daba，X₅是Pro，X₆是Cit，X₇是Ala，并且X₈是没有；

Cys-Tyr-Hoph-Daba-Asn-Cys-Pro-Cit-Ala-NH₂（SEQIDNO:22）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Hoph，X₄是Daba，X₅是Pro，X₆是Cit，X₇是Ala，并且X₈是没有；

Cys-Tyr-Phe-Arg-Asn-Cys-Pro-Val-Ala-NH₂（SEQIDNO:23）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Phe，X₄是Arg，X₅是Pro，X₆是Val，X₇是Ala，并且X₈是没有；

Cys-Tyr-Cha-Cit-Asn-Cys-Pro-Arg-Gly-NH₂（SEQIDNO:24）

X₁是Cys，X₂是Tyr，X₃是Cha，X₄是Cit，X₅是Pro，X₆是Arg，X₇是Gly，并且X₈是没有；

因此，在一个方面，本发明涉及一种药用组合物，其中催产素的所述的一个或多个片段和/或变体选自下组，该组由对应于SEQIDNO:3-SEQIDNO:24的多个肽组成。

所述物质中的非天然氨基酸具有以下结构：

环己基丙氨酸，在此称为Cha，

高苯丙氨酸，在此称为Hoph，

瓜氨酸，在此称为Cit，

二氨基丁酸，在此称为Daba，以及

高丝氨酸，在此称为Hos，

当在SEQIDNO:2中的一个位点被声明为“没有”时，意思是它代表在这些项（字母、原子或基团）之间的一个单键。

催产素的其他变体还可以用在根据本发明所述的药用组合物中，例如催产素、中催产素、丝异亮催产素、和/或产卵激素的天然发生的或人工修改的变体、类似物、和/或衍生物。这些变体可以通过这些激素中至少一个氨基酸的添加、插入、消除、或取代获得。其他物质包括在此提到的显示同样特性的物质的前体、代谢物（例如代谢衍生物（例如代谢性降解产物））、激动剂、或类似物。

代谢衍生物或代谢性降解产物可以是从其羧基末端亦或氨基末端亦或羧基末端和氨基末端两端都删除了一个或多个氨基酸（例如从每个末端删除1-3个氨基酸）的催产素样肽（例如带有9个氨基酸），例如催产素、中催产素、丝异亮催产素、和产卵激素。在某些方面，可能已经从羧基末端删除一个、两个或三个氨基酸，即仅Gly、Gly和Leu，或Gly、Leu和Pro。优选地，从氨基末端可能已删除一个、两个或三个氨基酸，即仅Cys、Cys和Tyr，或Cys、Tyr和Ile。

在某些方面，可能已经从羧基末端删除一个、两个或三个氨基酸，即仅Gly、Gly和Leu，或Gly、Leu和Pro；并且可能已从氨基末端删除一个、两个或三个氨基酸，即仅Cys、Cys和Tyr，或Cys、Tyr和Ile。通过免疫学方法（例如RIA（放射免疫测定）、IRMA（辐射计法）、RIST（放射免疫吸附测定）、以及RAST（放射变应原吸附测定））可以确定这些变体是催产素、中催产素、丝异亮催产素、或产卵激素的类似物。本发明还包括与催产素具有至少50%、60%、70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、或99%序列一致性的催产素的变体，如在此定义，所述变体示出了催产素活性。

产卵激素已经从蚯蚓中分离，如在Oumi（近江）T.Ukena（浮穴）K,Matsushima（松岛）O,Ikeda（池田）T,Fujita（藤田）T,Minakata（南方）H,Nomoto（野本）K,Annetocin:anoxytocin-relatedpeptideisolatedfromtheearthworm,Eiseniafoetida（产卵激素：从蚯蚓中分离的一种催产素相关肽）,BiochemBiophysResCommun（《生物化学与生物物理研究通讯》）1994,1月14;198(1);393-399中所述。

也存在一种可能，借助计算机模拟创建具有催产素活性的新化合物。用于计算机模拟的方法是本领域的普通技术人员已知的，例如在EP0660210A2中所述。

本发明还涉及一种药用组合物，包括催产素或都处于D形式和L形式的其一种变体、连同其外消旋体。在某些方面，本发明涉及L形式。通过其肽序列的反转，D形式可被转换为L形式。这些和以上的肽类可以通过本领域的普通技术人员已知的方法产生，例如根据Merrifield（梅里菲尔德）,P.B.,"SolidPhaseSynthesis（固相合成）",Angew.Chemie（《德国应用化学》），1985,97期,p.801。

根据本发明所述的药用组合物可能在某些情况下包含延伸或加强催产素效果的物质。这类物质可增加催产素的释放和/或增加催产素受体的成员或亲和力，这类物质例如雌激素，或具有[α]₂-激动作用的药物，例如可尼丁。

应该指出，根据本发明所述的化合物的药学上可接受的盐是包括在本发明的范围内的。这些化合物的盐的实例是药学上可接受的酸和碱加成盐。

表述“药学上可接受的酸加成盐”旨在是以下这些化合物的任何无毒有机酸或无机酸加成盐：SEQIDNO:1或SEQIDNO:2和/或催产素的如此处所述的任何其他变体和/或片段。说明的形成适合盐的无机酸的实例是盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸和酸金属盐，例如磷酸氢二钠和硫酸氢钾。说明的形成适合盐的有机酸的实例是一羟酸、二羟酸和三羟酸。此类酸的实例是乙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、马来酸、羟马来酸、苯甲酸、羟基苯甲酸、苯乙酸、肉桂酸、水杨酸、2-苯氧基苯甲酸、以及磺酸，例如对甲苯磺酸、甲磺酸、以及2-羟基乙磺酸。这类盐可以处于水合的亦或无水的形式。这些化合物的酸加成盐通常是水溶性的，和不同亲水性的有机溶剂，并且与其游离碱形式相比通常显示更高的熔点。

表述“药学上可接受的碱加成盐”指的是以下这些化合物的任何无毒有机碱或无机碱加成盐：SEQIDNO:1或SEQIDNO:2、和/或催产素的如此处所述的任何其他变体和/或片段。说明的形成适合盐的无机碱的实例是碱金属和碱土金属氢氧化物以及碳酸盐，例如氢氧化钠、碳酸钠、氢氧化钾、碳酸钾、氢氧化钙、碳酸钙、氢氧化镁、碳酸镁和氨。说明的形成适合盐的有机碱的实例是甲胺、二甲胺、三甲胺和甲基吡啶。可与这些化合物形成单碱盐亦或二碱盐。这些化合物的碱加成盐通常是水溶性的，和不同亲水性的有机溶剂，并且与其游离碱形式相比通常显示更高的熔点。

本发明的药用组合物的非离子型纤维素醚是基于纤维素的，为了实现在水中的溶解度，已经通过取代其纤维素主链上多个基团进行了化学改性。这些取代基特征在于当溶解于水（在中性pH下）中时没有电荷。

这些非离子型纤维素醚的特性决定于分子量（例如聚合程度）、取代基的类型并也决定于沿着该分子的取代基的数目和分布。因此，取决于存在于该药用组合物中的催产素和/或其片段和/或变体，该非离子型纤维素醚可具有不同特性并根据主导环境而被确定。

根据本发明所述的纤维素醚是非离子的，其中烷基和/或羟烷基通过醚键附接至脱水葡萄糖单元，这形成羟烷基烷基纤维素，其中该烷基基团具有从1至4个碳原子。

用于在根据本发明所述的药用组合物中使用的代表性的纤维素醚是：甲基纤维素（MC）、羟乙基甲基纤维素（HEMC）、羟丙基甲基纤维素（HPMC）、羟乙基乙基纤维素（HEEC）、以及羟基丙基纤维素（HPC）。这些聚合物具有非极性的（例如甲基）亦或略有极性的（例如羟乙基）的取代基，它们与亲水性纤维素主链结合提供一种两亲的聚合物。

因此，本发明涉及多种药用组合物，其中该至少一种非离子型纤维素醚选自以下纤维素醚的一种或多种：MC、HPMC、HEEC、HEMC和/或HPC、或如在此另外示例的。在根据本发明所述的药用组合物的一个方面，所述的非离子型纤维素醚是羟基丙基甲基纤维素（HPMC）。

根据本发明所述的并适用于如在此所定义的所有实施例和其方面的药用组合物的pH可以是在约3和4.5之间的范围内，例如在约3.5和约4.5之间、在约3.5和4之间、在约3和4之间、在约3和3.5之间、在约3和3.1之间、在约3和3.2之间、在约3和3.3之间、在约3和3.4之间、在约3和3.6之间、在约3和3.7之间、在约3和3.8之间、在约3和3.9之间、在约3.1和3.2之间、在约3.1和3.3之间、在约3.1和3.4之间、在约3.1和3.5之间、在约3.1和3.6之间、在约3.1和3.7之间、在约3.1和3.8之间、在约3.1和3.9之间、在约3.2和3.3之间、在约3.2和3.4之间、在约3.2和3.5之间、在约3.2和3.6之间、在约3.2和3.7之间、在约3.2和3.8之间、在约3.2和3.9之间、在约3.3和3.5之间、在约3.3和3.6之间、在约3.3和3.7之间、在约3.3和3.8之间、或在约3.3和4之间。应该指出，这些值不是精确的，意味着它们可以围绕提供的这些值略微变化。

如在此所定义的药用组合物的pH可以通过向所述药用组合物中添加一种pH调节剂（例如一种缓冲剂）来调节。在本发明的上下文中，所述缓冲剂可以是一种乳酸盐缓冲剂、一种柠檬酸盐缓冲剂、一种磷酸盐缓冲剂或其一种混合物，而且不限于此。

待被添加至根据本发明所述的药用组合物中的缓冲剂在水溶液中的浓度可以在约20和100mM之间，例如在约25mM和100mM之间、或约25至50mM、约25mM至75mM、或约50至70mM，而且不限于此。应该指出这些值不是精确的，意味着它们可以围绕提供的这些值略微变化。取决于根据本发明所述的药用组合物中所要求的pH和所使用的缓冲剂，该缓冲剂的浓度将根据以上而变化。

在本发明一个方面，一种药用组合物包括催产素（SEQIDNO:1）和羟丙基甲基纤维素，可任选地与如在此所示例的一种缓冲剂、其他pH调节剂或附加组分（例如一种防腐剂（例如苯甲酸））组合。在一个方面，所述的催产素和HPMC的组合物pH是在约3-4之间的范围内，例如约3-3.5，例如约3.1-3.6或约3-3.8，或如在此另外定义的。

在根据本发明所述的一种药用组合物中，催产素和/或如在此所定义的其一个片段或一种变体的浓度可以是如在此所定义的总药用组合物的约0.1至1.5mg/g（例如约0.5至约1.5mg/g、约0.5至约1mg/g、约0.5至约1.2mg/g、约0.2至约0.5mg/g、约0.1至约0.8mg/g、或约0.2至约1.2mg/g）之间。

在此，鉴于所使用的药用组合物，可认为mg/g约相当于mg/ml。因此，催产素和/或如在此所定义的其一个片段或一种变体的浓度可以是如在此所定义的总药用组合物的约0.1至1.5mg/ml（例如约0.5至约1.5mg/ml、约0.5至约1mg/ml、约0.5至约1.2mg/ml、约0.2至约0.5mg/ml、约0.1至约0.8mg/ml、或约0.2至约1.2mg/ml）之间。因此，这意味着1ml的总药用组合物可以包含约0.1至1.5mg/ml的催产素。

在一个方面，根据本发明所述的一种药用组合物包括约：1mg/g催产素、在约25mM柠檬酸盐或乳酸盐缓冲剂中约2wt%的羟丙基甲基纤维素、以及可任选地约1mg/g苯甲酸。

在另一个方面，根据本发明所述的一种药用组合物包括约0.9mg/g催产素、约1.1mg/g苯甲酸、以及在约25mM乳酸盐缓冲剂中约2wt%的羟丙基甲基纤维素（HPMC）。

以上所述的药用组合物的pH是在约3和4之间的范围内，例如约3至约3.5、或约3.1至约3.6、或约3.2至约3.5，或如在此另外示例的。

该至少一种非离子型纤维素醚（例如羟丙基甲基纤维素（HPMC））的浓度被提供与该药用组合物的pH调节剂（例如，如在此所呈现的一种缓冲剂）相关，例如在25mM缓冲剂中2wt%或3wt%的非离子型纤维素醚提供某一粘性，归因于在所述缓冲剂中存在的该至少一种非离子型纤维素醚的量。因此，该非离子型纤维素醚的浓度是按所述缓冲剂或其他pH调节剂中的重量%（wt%）计呈现的。在总药用组合物中，非离子型纤维素醚的量稍少，归因于向所述组合物中添加治疗物质（催产素和/或如在此所披露的其一个或多个片段和/或变体）。

催产素和/或如在此所定义的其一个或多个片段和/或变体的浓度被提供与总药用组合物（即该缓冲剂和该非离子型纤维素醚，以及可任选地其他添加剂（例如一种防腐剂））相关。因此，1mg/g催产素意指在1g的总药用组合物中存在1mg的催产素。此外，如在此先前提到，1mg/ml意指在1ml的总药用组合物中存在1mg的催产素。

在本发明的上下文中，向对其有需要的受试者给予的催产素、和/或其一个或多个片段和/或变体的剂型可以包括约50和600IU之间的催产素和/或如在此所定义的其一个或多个片段和/或变体，例如约100、200、250、300、350或400IU。一个国际单位（IU）的催产素是约1.67毫克纯肽的等价物。因此，1g催产素凝胶（400IU）的一种组合物等价于约0.67mg/g（PhEur）。

本发明还涉及如在此所披露的用于用作药物的药用组合物。在本发明的一个方面，本发明涉及用于用作药物的一种药用组合物，包括：催产素（SEQIDNO:1）、和/或根据SEQIDNO:2所述的其一个或多个片段和/或变体、连同其药学上可接受的盐以及羟丙基甲基纤维素（HPMC）、可任选地与如在此所示例的缓冲剂、其他pH调节剂和/或附加组分（例如一种防腐剂（例如苯甲酸））组合。这样的一种药用组合物具有如在在此所示例的范围内的一个pH。本发明的药用组合物的医学用途的一个实例是用于阴道用途（例如阴道萎缩）。催产素的这样一种医学用途被本发明的诸位发明人在WO0178758中示出。

关于催产素的其他医学用途的实例（根据本发明所述的药用组合物是有用的），我们指的是WO02102832、WO02067974、WO03017922、WO0018424、WO9843661、WO9843662、和WO9843660。因此，本发明还涉及如在此所呈现的一种药用组合物用于如在以上专利文献中任一项所示例的医学用途。当根据本发明含义所述的药用组合物适于在这样一种疾病状态的治疗中使用时（例如当一种局部治疗适于其治疗时），这类医学用途是例如用来创建eustasis、原位癌和子宫颈炎、炎症、细胞再生、创伤愈合、偏好（preference）和创建接纳（acceptance），以及用于治疗疼痛。

通过表述“eustasis”，它是指一种心理生理状态，即心理与生理状态的一种组合。该心理状态特征在于平静的和积极的社会交往，例如信赖，例如在母乳喂养过程中。该生理状态特征在于肌肉松弛、降低的心血管活动和增强的胃肠活动。此外，脉冲率和血压被保持在一个低的、健康的和平衡的水平，并且迷走神经（vagally）控制的胃肠道被激活，促进消化和营养储存。

通过表述“原位癌和子宫颈炎”，它是指阴道和子宫颈中疾病的后果，源于感染连同炎症。在本发明的上下文中，原位癌与该子宫颈相关。除了原位癌和子宫颈炎之外，这些疾病还包括癌症前期疾病状态、鳞状细胞癌、以及中空细胞病。通过原位癌是指一种肿瘤实体，其中肿瘤细胞限于起源的上皮，不侵入基膜。通过子宫颈炎是指子宫颈（即子宫的下部的和狭窄端，在狭部和子宫口之间）的炎症。子宫颈的上皮与子宫其余部分的上皮是大不一样的。中空细胞病是孢疹病毒的后果。

涵盖所有的如在在此所定义的药用组合物都是用于局部用途的，例如用于阴道用途。当用于阴道用途时，这可能是用于治疗一种更年期失调，例如阴道萎缩或在WO0178758中提到的任何其他失调。因此，在一个方面，本发明涉及一种药用组合物，包括：催产素（SEQIDNO:1）、和/或根据SEQIDNO:2所述的其一个或多个片段和/或变体、连同其药学上可接受的盐以及羟丙基甲基纤维素（HPMC）、可任选地与如在此所示例的缓冲剂、其他pH调节剂或附加组分（例如苯甲酸）组合，该药用组合物用于阴道用途，例如用于治疗一种更年期失调，例如阴道萎缩。这样一种药用组合物的pH可以是在约3至约4的范围内，例如约3至约3.5、或约3.1至约3.6、或约3.1至约3.8，或如在此另外示例的。

在本发明的所有方面中，应理解的是，每当提到所述药用组合物的某一医学用途（例如在治疗阴道萎缩的用途中）时，这还指催产素和/或如在此所定义的其一个或多个片段和/或变体的用途、以及至少一种非离子型纤维素醚在制造一种用于治疗某一疾病（例如在此所示例的）的药物中的用途，其中所述的药物具有在约3和4（例如约3和3.5）之间的范围内的或如在此另外示例的一个pH。

如在此所示出，在该药用组合物中的至少一种非离子型纤维素醚的存在有效地改进了其中的催产素分子的稳定性。因此，本发明还涉及至少一种非离子型纤维素醚用于稳定、可替代地改进一种药用组合物的稳定性的用途，该药用组合物包括催产素（SEQIDNO:1）和/或如SEQIDNO:2中所定义（或如此处另外定义）的催产素的一个或多个片段和/或变体。在一个方面，本发明涉及至少一种非离子型纤维素醚羟丙基甲基纤维素（HPMC）用于稳定、可替代地改进一种药用组合物的稳定性的用途，该药用组合物包括催产素（SEQIDNO:1）和/或如SEQIDNO:2中所定义（或如此处另外定义）的催产素的一个或多个片段和/或变体连同其药学上可接受的盐，所述的药用组合物可选择地另外包括如在此所示例的一种缓冲剂、其他pH调节剂和附加组分，例如一种防腐剂。如在此先前所提到的，在该药用组合物中组合使用一个低pH进一步改进了该至少一种非离子型纤维素醚的稳定效果。不受一种特定理论的限制，该至少一种非离子型纤维素醚通过使其更少倾向于降解和/或聚合或其他结构性改变、潜在地通过不与该催产素分子产生干扰似乎稳定了如在此所定义的催产素分子和/或其一个或多个片段和/或变体。

每当此处提到一个改进的稳定性/稳定效果时，这可能意思是在此定义的药用组合物中的催产素分子的聚合和/或降解或其他结构性改变的减少，而不限于此特定理论。根据这样一个理论，在聚合和/或降解或其他结构性改变的减少中伴随着催产素分子改进的稳定性。由包括至少一种非离子型纤维素醚的药用组合物带来稳定性的改进，进一步在实验部分中说明，该实验部分包括与凝胶CMC的对比实例。

在另一个方面，本发明涉及用于制备具有改进的稳定性的药用组合物的一种方法，包括以下步骤：

a)制备一种缓冲溶液并调节其pH，

b)向所述缓冲剂中添加催产素（SEQIDNO:1）和/或根据SEQIDNO:2所述的其一个或多个片段和/或变体（或如此处另外定义的）、连同其药学上可接受的盐，以及

c)向在步骤b)中获得的溶液中添加至少一种非离子型纤维素醚；

其中在向所述缓冲溶液中添加所述催产素（SEQIDNO:1）和/或根据SEQIDNO:2所述的其一个或多个片段和/或变体（或如此处另外定义的）之前，可任选地一种防腐剂（例如苯甲酸）被添加至步骤a)的缓冲溶液中，并且其中所述药用组合物的pH被调节降至约3和约4之间的范围内，例如在约3和约3.5之间的范围内，或如在此另外示例的。在步骤c)之后，将该溶液停留一段时间以获得一种粘性溶液或一种凝胶。典型地，所述粘性溶液或凝胶是在约1-2天之后获得的。所述方法还在一些方面中涵盖其他pH调节剂（除缓冲剂外）（例如有机的和无机的酸类和碱类，例如乙酸、柠檬酸、磷酸、和盐酸以及氢氧化钠）的使用，因此这些调节剂被用于所述方法的步骤a)中。

在本方法中，旨在通过与至少一种非离子型纤维素醚一起制备该组合物来改进催产素和/或如在此所披露的其一个或多个片段和/或变体的稳定性。在本方法的一个方面，所述的至少一种非离子型纤维素醚是羟基丙基甲基纤维素（HPMC）。在一个方面，该方法涉及制备包括催产素（SEQIDNO:1）和羟丙基甲基纤维素（HPMC）的一种药用组合物。

一种催产素分子的给予在某些方面可能通过应用导致皮肤渗透性加强的触摸、压迫、按摩、加热或对皮肤进行红外照射来促进。Hirvonen（赫沃宁）,J.,Kalia（卡利亚）,YN和Gay（盖伊）,RH.Transdermaldeliveryofpeptidesbyiontophoresis（通过离子电渗疗法的肽经皮递送）.NatBiotechnol（《自然生物技术》）1996年12月；14(13):1710-1713描述了如何使用外加电场的驱动力加强经由皮肤的输送。离子电渗疗法可以在一个略碱的pH下实现。

存在描述的用于催产素合成生产的不同方法；商业方法是如在美国专利号2,938,991和3,076,797中所述的。

在一个方面，本发明涉及一种药用组合物，包括

a)催产素（SEQIDNO:1）、根据SEQIDNO:2所述的其一个或多个片段和/或变体、连同其药学上可接受的盐；以及

b)至少一种非离子型纤维素醚；

其中SEQIDNO:2是

X₁-X₂-X₃-X₄-Asn-Cys-X₅-X₆-X₇-X₈-NH₂

其中

X₁选自下组，该组由以下各项组成：Cys和没有；

X₂选自下组，该组由以下各项组成：Tyr、Phe、和没有；

X₅选自下组，该组由以下各项组成：Pro和没有；

X₇选自下组，该组由以下各项组成：Gly、没有、和Ala；

X₈选自下组，该组由以下各项组成：Gly和没有；

其中催产素和/或所述的其一个或多个片段和/或变体是以总组合物的约0.1至1.5mg/g（例如0.5至约1.5mg/g、约0.5至约1mg/g、约0.5至约1.2mg/g、约0.2至约0.5mg/g、约0.1至约0.8mg/g、或约0.2至约1.2mg/g）的量存在的，并且其中所述的至少一种非离子型纤维素醚是以约1-3wt%的量（例如约2wt%或3wt%）存在于一种pH调节剂（例如一种缓冲剂）中，所述缓冲剂具有约25mM至约100mM的浓度。在一个方面，所述的至少一种非离子型纤维素醚是羟基丙基甲基纤维素。

在一些方面，根据本发明所述的药用组合物可以任选地包括其他组分，例如惰性组分或具有物理或生物功能的组分。在一些方面，根据本发明所述的一种药用组合物中额外地存在抗生素或镇痛剂。

本发明还涉及用于治疗对其有需要的患者的一种更年期失调（例如阴道萎缩）的方法，包括给予适合量的药用组合物，该药物组合物包括

a.催产素（SEQIDNO:1）、根据SEQIDNO:2所述的其一个或多个片段和/或变体、连同其药学上可接受的盐；以及

b.至少一种非离子型纤维素醚；

至对其有需要的患者，其中所述药用组合物的pH在约3和4之间的范围内，或如在此另外示例的。用于在治疗更年期失调的方法中使用的所述药用组合物可以是如在此所披露的任何药用组合物。在一个方面，给予对其有需要的患者的所述药用组合物包括催产素和羟丙基甲基纤维素（HPMC）。

本发明还涉及一种用于治疗如在此先前提到的任何失调的方法，包括给予适合量的药用组合物，该药用组合物包括

b.至少一种非离子型纤维素醚；

至对其有需要的患者，其中所述药用组合物的pH在约3和4之间的范围内，或如在此另外示例的。用于在治疗如在此先前提到的任何失调的方法中使用的所述药用组合物可以是如在此所披露的任何药用组合物。在一个方面，给予对其有需要的患者的所述药用组合物包括催产素和羟丙基甲基纤维素（HPMC）。

在另一个方面，本发明涉及一种药用组合物，包括：约1mg/g催产素、在约25mM柠檬酸盐或乳酸盐缓冲剂中约2wt%的羟丙基甲基纤维素（HPMC）以及可任选地约1mg/g苯甲酸，并且其中所述组合物的pH是约3。

在另一个方面，本发明涉及一种药用组合物，包括：约1mg/g催产素、在约25mM乳酸盐缓冲剂中约2wt%的羟丙基甲基纤维素（HPMC），并且其中所述组合物的pH是约3.8。

在另一个方面，本发明涉及一种药用组合物，包括：约0.9mg/g催产素、约1.1mg/g苯甲酸、在约25mM乳酸盐缓冲剂中约2wt%的羟丙基甲基纤维素（HPMC），并且其中所述组合物的pH是约3.8。

在一个方面，本发明涉及一种药用组合物，包括：催产素、羟丙基甲基纤维素、一种柠檬酸盐或一种乳酸盐缓冲剂、以及可任选地苯甲酸。在一个方面，所述的药用组合物包括约：1mg/g催产素、在约25mM柠檬酸盐或乳酸盐缓冲剂中约2wt%的羟丙基甲基纤维素、以及可任选地约1mg/g的苯甲酸。

在另一个方面，本发明涉及一种药用组合物，包括约：1mg/g催产素、在25mM乳酸盐缓冲剂中2wt%的羟丙基甲基纤维素、以及可任选地1mg/g的苯甲酸。

在另一个方面，本发明涉及一种药用组合物，包括约：0.8mg/g催产素、在22mM乳酸盐缓冲剂中3wt%的羟丙基甲基纤维素、以及可任选地1mg/g的苯甲酸。

在另一个方面，本发明涉及一种药用组合物，包括约：0.4mg/g催产素、在22mM乳酸盐缓冲剂中3wt%的羟丙基甲基纤维素、以及可任选地1mg/g的苯甲酸。

在另一个方面，本发明涉及一种药用组合物，包括约：0.2mg/g催产素、在22mM乳酸盐缓冲剂中3wt%的羟丙基甲基纤维素、以及可任选地1mg/g的苯甲酸。

如在此先前提到的，包括催产素（SEQIDNO:1）、和/或如在此所定义的其一个或多个片段和/或变体的药用组合物的一个剂型可以包括约50和600IU之间的催产素和/或如在此所定义的其一个或多个片段和/或变体，例如约100、200、250、300、350或400IU。

本发明还涉及一种试剂盒，该试剂盒包括一种药用化合物，该药用组合物包括

b.至少一种非离子型纤维素醚；

以及一个用于分配所述药用组合物的分配器可任选地结合所述药用组合物的使用说明，其中所述药用组合物的pH在约3和4之间的范围内，或如在此另外示例的。在一个如在此所呈现的试剂盒中，可以使用如在此所披露的任何药用组合物。存在于所述试剂盒中的所述分配器可能例如是处于一种塑料管的形式。该试剂盒也可以包括一个或多个容器，每个容器包括一种或多种药学上可接受的载体、辅助剂和/或赋形剂。

如在此所披露的药用组合物可以例如是一种包括该催产素和该非离子型纤维素醚的水性组合物。

在如下的实验部分中对本发明进行了说明，但不意在受其限制。

实验部分

在柠檬酸盐/乳酸盐缓冲剂中的催产素与Na-CMC/HPMC在70℃下的应力稳定性研究

概述

在70℃下持续两周，研究在柠檬酸盐缓冲剂中的催产素在有或没有苯甲酸和有或没有Na-CMC的情况下的稳定性。

在另一样品集合中，在70℃下持续三周，研究在柠檬酸盐缓冲剂中的催产素在有或没有苯甲酸和有或没有HPMC（羟丙甲纤维素或羟丙基甲基纤维素）的情况下的稳定性。

在第三个样品集合中，在70℃下持续二周，研究在乳酸盐缓冲剂中的催产素在有HPMC和有或没有苯甲酸的情况下的稳定性。

背景

更早已经研究¹了在不同pH的水溶液中的催产素的稳定性。在本研究中，结论是：最佳稳定性是在pH4.5时获得的。在近期稳定性研究²中，示出催产素的稳定性高度依赖于配制条件和储存条件。

在第三个研究中，在乳酸盐缓冲剂和柠檬酸盐缓冲剂中的催产素的稳定性分别是在用苯甲酸作为防腐剂（代替在先前研究³中使用的对羟基苯甲酸酯）的情况下研究的。对羟基苯甲酸酯可以引起胶凝剂Na-CMC⁴的降解。然而，用苯甲酸的情况下同样观察到了减少的粘性。

在本研究中，胶凝剂（Na-CMC/HPMC）的作用是在柠檬酸盐/乳酸盐缓冲剂中以及有或没有苯甲酸作为防腐剂的情况下研究的。

设备

根据Ph.Eur.2.2.29的HPLC-系统

HPLC系统：来自Waters公司的Alliance2695，在220nm下UV（紫外）检测

柱：YMC.-PACODS-AC18250*4.6mm，5μm

流动相：A:15.6g/l磷酸二氢钠

B：乙腈:水（50:50）

色谱学软件：来自Waters公司的MassLynxversion4.1

pH计：Jenway370

化学品

乙腈HPLC级S（CAN公司），Rathburn化学品

消毒水，Baxter（巴克斯特公司）

磷酸二氢钠，Merck公司，6346

催产素是从Grindeks公司获得，Riga（里加），拉脱维亚

样品制备

通过将适量的柠檬酸亦或乳酸溶解于蒸馏水（总体积的约90%）中来制备缓冲溶液。在磁力搅拌下通过滴加5MNaOH（aq.）将该pH调整至所希望的值。最后，将该溶液转移至容量瓶中，并且将体积通过蒸馏水调整至最终体积。

在一个玻璃烧瓶中称量该防腐剂苯甲酸并添加所需体积的缓冲溶液。将该烧瓶密封以后，通过将该烧瓶在温（约50℃）超声波浴中处理约30min来溶解苯甲酸。冷却至室温之后，向该清液中添加催产素，并通过轻轻混合将其溶解。最后，添加所需量的非离子型纤维素醚，并用手振荡该混合物然后待其膨胀，并在室温下溶解以给出一种粘性溶液/凝胶。

将最终样品与储存在有丁基橡胶塞和铝制钳口盖的玻璃小瓶中。

实验程序

将这些样品储存在不同的温度下，并且取出样品用于根据以下的稳定性方案进行分析。在分析之前，用1.00ml流动相A稀释30mg的每种液体样品，并且然后注入HPLC-系统。

分析

在分析之前将所有样品进行视觉检查，并测量它们的pH值。

HPLC

流动相：

A：15.6g/l磷酸二氢钠

B：乙腈:水（50:50）

梯度曲线参数：

时间（min）	A（%）	B（%）
			0	95.0	5.0
1	95.0	5.0
			30.0	5.0	95.0
40.0	5.0	95.0
			45.0	95.0	5.0

流量：1.00ml

注入体积：20μl

注射器清洗液：水:乙腈

评估

首先将所有样品进行视觉检查，并分析沉淀在颜色或趋向上的变化以及在粘性上的变化。然后测量pH，并针对催产素和苯甲酸的含量对这些样品作进一步分析。针对催产素和苯甲酸的外部标准曲线分别确定浓度。所有样品一式两份制备，并随后通过单HPLC-注射（EXP-11-AJ1634）进行分析。

结果

表1a)-c)：在储存达2周之后，ACA101108系列样品的pH、催产素和苯甲酸含量。ND=未确定的。

表1a)

表1b)

表1c)

表2a)-d)：在储存达3周之后，ACA101123系列样品的pH、催产素和苯甲酸含量

表2a)

表2b)

表2c)

表2d)

表3a)-c)：在储存达2周之后，ACA101207系列样品的pH、催产素和苯甲酸含量。

表3a)

表3b)

表3c)

表4.储存达3周之后，样品的外观和粘性。

讨论

在催产素的更早稳定性研究中，其降解率是在不同的pH值下研究的。该研究示出，在pH3的缓冲水溶液中的催产素在70℃下储存7天的降解是约15%（面积%）。在pH4下相应的降解是约35%（面积%）。在上表1中，示出催产素的降解在可比的pH条件下显著地更广泛，分别是ca60%和75%。这些数据表明，催产素的稳定性可能不止依赖于pH而也依赖于用于缓冲的酸的类型。此外，数据提示Na-CMC自身对稳定性具有负面影响。

表2示出了来自催产素溶液的分析数据，其中Na-CMC已被一种中性纤维素衍生物HPMC替代，并且其中该缓冲剂是25mM柠檬酸盐。这些数据再次示出了催产素显著更好的稳定性，并且相应的降解处于约20%的量级。表3示出了在含HPMC的配制品中的催产素的相应的降解，其中乳酸盐被用作缓冲剂。这些数据表明，在可比的pH条件下的乳酸盐和柠檬酸盐中的催产素具有相似的稳定性。前述配制品中使用乳酸盐结合Na-CMC导致了该配制品中的沉淀和浑浊。这在HPMC与乳酸盐一起使用的配制品中没有看到（表4）。

从表4可得出结论，具有苯甲酸的配制品与不具有这种防腐剂的配制品相比略微更黄。在70℃下储存之后，基于乳酸盐的配制品与基于柠檬酸盐的配制品相比略微更粘。

以上呈现的研究也表明，苯甲酸与催产素以及使用的成分是兼容的。

结论

本研究示出，在酸性环境中的催产素的稳定性基本上遵循以上看到的模式，即与在pH4下相比，在pH3下看到了更好的稳定性。得出结论：在具有HPMC作为凝胶剂的配制品中的催产素比在具有Na-CMC的配制品中的更稳定。对于两种凝胶剂，这些配制品的粘性在70℃储存下都降低了。在乳酸盐和柠檬酸盐中（在可比的pH条件下）的催产素的稳定性相似。推断苯甲酸是一种适合的防腐剂。

参考文献

1.Hawe(哈威)A等，Towardsheat-stableoxytocinformulations:Analysisofdegradationkineticsandidentificationofdegradationproducts（对于热稳定催产素配制品：降解动力学分析和降解产品识别），PharmaceuticalResearch（《药学研究》），2009,26:1679-1688。

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4.WO/92/09307

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Claims

1.一种药用组合物，该药用组合物包括

a.催产素SEQIDNO:1连同其药学上可接受的盐；以及

b.至少一种非离子型纤维素醚；

其中所述药用组合物具有在3和4之间的范围内的一个pH。

2.根据权利要求1所述的药用组合物，其中所述pH在3和3.8之间的范围内。

3.根据权利要求1所述的药用组合物，其中所述pH在3和3.5之间的范围内。

4.根据权利要求1所述的药用组合物，其中所述pH在3和3.3之间的范围内。

5.根据权利要求1所述的药用组合物，其中所述组合物的pH是通过向所述组合物中添加一种pH调节剂来调节的。

6.根据权利要求5所述的药用组合物，其中所述pH调节剂是一种缓冲剂。

7.根据权利要求6所述的药用组合物，其中所述缓冲剂是一种乳酸盐缓冲剂或一种柠檬酸盐缓冲剂。

8.根据权利要求1所述的药用组合物，进一步包括一种防腐剂。

9.根据权利要求8所述的药用组合物，所述防腐剂是苯甲酸。

10.根据权利要求1所述的药用组合物，其中所述的至少一种非离子型纤维素醚选自下组，该组由以下组成：甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟基丙基纤维素、羟乙基乙基纤维素以及羟乙基甲基纤维素。

11.根据权利要求1所述的药用组合物，其中所述的至少一种非离子型纤维素醚是羟基丙基甲基纤维素。

12.根据权利要求1所述的药用组合物，该药用组合物包括催产素SEQIDNO:1和羟丙基甲基纤维素。

13.根据权利要求1所述的药用组合物，其中催产素的浓度是所述药用组合物的1mg/g。

14.根据权利要求1所述的药用组合物，所述组合物包括：

1mg/g催产素、

2wt％在25mM柠檬酸盐缓冲剂中的羟丙基甲基纤维素、以及可任选地

1mg/g苯甲酸。

15.根据权利要求1所述的药用组合物，所述组合物包括：

1mg/g催产素、

2wt％在25mM乳酸盐缓冲剂中的羟丙基甲基纤维素、以及可任选地

1mg/g苯甲酸。

16.根据权利要求1所述的药用组合物，其中要给予的催产素的剂量是50和600IU之间的催产素。

17.根据权利要求1所述的药用组合物，其中要给予的催产素的剂量是100、200、250、300、350或400IU的催产素。

18.至少一种非离子型纤维素醚用于改进如在权利要求1-17中任一项所定义的包括催产素SEQIDNO:1的药用组合物的稳定性的用途。

19.用于制备具有改进的稳定性的药用组合物的方法，该方法包括以下步骤：

a)制备一种缓冲溶液并调节其pH，

b)向所述缓冲溶液添加如在权利要求1中定义的催产素，并且此后

其中在将所述催产素添加至所述缓冲溶液之前，将任选地一种防腐剂添加至步骤a)的缓冲溶液中，

并且其中所述药用组合物的pH被调节降至3和4之间的范围内。

20.根据权利要求19所述的方法，所述防腐剂是苯甲酸。

21.根据权利要求19所述的方法，其中所述药用组合物的pH被调节降至3和3.5之间的范围内。

22.根据权利要求19所述的方法，用于根据权利要求1-17或24-27中任一项所述的药用组合物的制备。

23.根据权利要求19-22中任一项所述的方法，其中所述的至少一种非离子型纤维素醚是羟基丙基甲基纤维素。

24.一种药用组合物，该药用组合物包括

a.催产素SEQIDNO:1连同其药学上可接受的盐；以及

b.至少一种非离子型纤维素醚；

其中所述的催产素或其一种药学上可接受的盐是以总药用组合物的0.5至1.5mg/g的浓度存在于所述药用组合物中的，并且所述的至少一种非离子型纤维素醚是以1-3wt％的量存在于一种pH调节剂中，所述pH调节剂具有25mM至100mM的浓度。

25.根据权利要求24所述的药用组合物，所述的至少一种非离子型纤维素醚是以2wt％或3wt％的量存在于一种pH调节剂中。

26.根据权利要求24或25所述的药用组合物，所述pH调节剂是一种缓冲剂。

27.根据权利要求24所述的药用组合物，其中所述的至少一种非离子型纤维素醚是羟丙基甲基纤维素并是以2wt％的量存在于具有25mM的浓度的一种缓冲剂中，所述缓冲剂是一种乳酸盐缓冲剂或一种柠檬酸盐缓冲剂。

28.根据权利要求1-17或24-27中任一项所述的药用组合物在制造一种用于治疗和/或预防更年期失调的药物中的用途。

29.根据权利要求28所述的用途，其中所述失调是阴道萎缩。

30.一种试剂盒，该试剂盒包括根据权利要求1-17或24-27中任一项所述的药用组合物和一个用于所述药用组合物的分配器，可任选地结合所述药用组合物的使用说明。