CN103589776A - 小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒 - Google Patents

小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒 Download PDF

Info

Publication number
CN103589776A
CN103589776A CN201310414650.6A CN201310414650A CN103589776A CN 103589776 A CN103589776 A CN 103589776A CN 201310414650 A CN201310414650 A CN 201310414650A CN 103589776 A CN103589776 A CN 103589776A
Authority
CN
China
Prior art keywords
density lipoprotein
small
lipoprotein cholesterol
dense low
reagent
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201310414650.6A
Other languages
English (en)
Inventor
石丽萍
夏春伟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
SHAOXING SHENGKANG BIOLOGY TECHNOLOGY Co Ltd
Original Assignee
SHAOXING SHENGKANG BIOLOGY TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SHAOXING SHENGKANG BIOLOGY TECHNOLOGY Co Ltd filed Critical SHAOXING SHENGKANG BIOLOGY TECHNOLOGY Co Ltd
Priority to CN201310414650.6A priority Critical patent/CN103589776A/zh
Publication of CN103589776A publication Critical patent/CN103589776A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Abstract

本发明公开了一种小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒，包括R1和R2两种独立液态试剂，R1试剂各成分浓度为：PH值为7.0的MOPS缓冲液20～24g/L，过氧化氢酶1.8～2.2g/L，胆固醇氧化酶0.09～0.11g/L，胆固醇酯酶1.2～1.4g/L，作为表面活性剂I的PEG-2000含量为9～11g/L，N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐(TOOS)1.4～1.8g/L，其余为纯化水；R2试剂各成分浓度为：PH值为7.0的MOPS缓冲液20～24g/L，过氧化物酶0.12～0.15g/L，作为表面活性剂Ⅱ的PEG-6000含量为13～17g/L，4-氨基安替比林0.45～0.55g/L，作为稳定剂的乙二胺四乙酸0.9～1.1g/L，其余为纯化水。本发明能适合临床实验室对小而密低密度脂蛋白胆固醇含量测定的需要。

Description

小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒
技术领域
本发明属于血清检测试剂技术领域，尤其与一种用于血清小而密低密度脂蛋白胆固醇测定的试剂盒有关。
背景技术
低密度脂蛋白是血清脂蛋白中的一种。血清低密度脂蛋白胆固醇对动脉粥样硬化斑块的形成有极大的作用，是冠心病的重要风险因子。根据其密度和大小的不同，低密度脂蛋白（LDL）又可分为大而轻低密度脂蛋白和小而密低密度脂蛋白(sdLDL),其中sdLDL因其颗粒小、易氧化等特点是LDL致动脉粥样硬化的主要亚型，所以目前临床实验室普遍开展对小而密低密度脂蛋白胆固醇含量的测定工作。
发明内容
本发明目的就是要适应临床实验室对小而密低密度脂蛋白胆固醇含量测定的需要，提供一种用于血清小而密低密度脂蛋白胆固醇测定的试剂盒。
为此，本发明采用以下技术方案：小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒，包括R1和R2两种独立液态试剂，其特征是：所述的R1试剂各成分浓度为：PH值为7.0的MOPS缓冲液20～24g/L，过氧化氢酶1.8～2.2 g/L，胆固醇氧化酶0.09～0.11 g/L，胆固醇酯酶1.2～1.4 g/L，作为表面活性剂I的PEG-2000含量为9～11 g/L，N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐(TOOS) 1.4～1.8 g/L，其余为纯化水；
所述的R2试剂各成分浓度为：PH值为7.0的MOPS缓冲液20～24g/L，过氧化物酶0.12～0.15 g/L，作为表面活性剂Ⅱ的PEG-6000含量为13～17 g/L，4-氨基安替比林0.45～0.55 g/L，作为稳定剂的乙二胺四乙酸0.9～1.1 g/L，其余为纯化水。
本发明用于测定血清小而密低密度脂蛋白胆固醇时，首先制作测定样本，使用含肝素150U/ml、氯化镁90mmol/L、加速剂5mmol/L的前处理液与等体积血清混合，在温度37℃下孵育10min，然后直立冰水浴15min，在温度4℃下以1300r/min离心旋转15min后收集上清液作为sdLDL-C直接测定的待测标本；测定标本制作好后，选用两根试管分别作为校准管和样品管，校准管中加入10微升校准液，样品管中加入10微升待测标本，然后在校准管和样品管中各加入本发明所述的R1试剂240微升混匀，在温度37℃下孵育5分钟，使用全自动生化分析仪在主波长546nm时测定各管的吸光度A1，然后再在校准管和样品管中各加入本发明所述的R2试剂80微升混匀，在温度37℃下孵育5分钟，使用全自动生化分析仪在主波长546nm时测定各管的吸光度A2，可以计算出使用R1和R2测得的吸光度差值△A=A2-A1，血清小而密低密度脂蛋白胆固醇含量就可以通过下述公式计算而得：sdLDL-C（nmol/L）=(△A测定/△A校准)×Cs(校准液sdLDL-C溶度)。本发明产品的性能要求：精密度（CV）≤5.0%，灵敏度在医学决定水平浓度下（0.62mmol/L），试剂与样本反应产生的吸光度值应≥0.010A。
使用本发明可以达到以下有益效果：能够使用全自动生化分析仪直接测定血清小而密低密度脂蛋白胆固醇容量，适合临床实验室对小而密低密度脂蛋白胆固醇含量测定的需要。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行进行详细描述。
实施例一：
本发明试剂盒的R1和R2试剂按下述成分和含量配置： R1试剂各成分浓度为：PH值为7.0的MOPS缓冲液20g/L，过氧化氢酶2.2 g/L，胆固醇氧化酶0.11 g/L，胆固醇酯酶1.2 g/L，作为表面活性剂I的PEG-2000含量为9 g/L，N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐(TOOS) 1.8 g/L，其余为纯化水；所述的R2试剂各成分浓度为：PH值为7.0的MOPS缓冲液20g/L，过氧化物酶0.15 g/L，作为表面活性剂Ⅱ的PEG-6000含量为13g/L，4-氨基安替比林0.45 g/L，作为稳定剂的乙二胺四乙酸1.1 g/L，其余为纯化水。
使用罗氏P800全自动生化分析仪，测定方法采用两点重点法，主波长采用546nm，定标模式采用线性，反应方向正向上升，首先使用含肝素150U/ml、氯化镁90mmol/L、加速剂5mmol/L的前处理液与等体积血清混合，在温度37℃下孵育10min，然后直立冰水浴15min，在温度4℃下以1300r/min离心旋转15min后收集上清液作为sdLDL-C直接测定的待测标本；选用两根试管分别作为校准管和样品管，校准管中加入10微升校准液，样品管中加入10微升待测标本，然后在校准管和样品管中各加入R1试剂240微升混匀，在温度37℃下孵育5分钟，测定各管的吸光度A1，然后再在校准管和样品管中各加入本发明所述的R2试剂80微升混匀，在温度37℃下孵育5分钟，测定各管的吸光度A2，生化分析仪计算出使用R1和R2测得的吸光度差值△A=A2-A1，并通过下述公式自动计算出血清小而密低密度脂蛋白胆固醇含量：sdLDL-C（nmol/L）=(△A测定/△A校准)×Cs(校准液sdLDL-C溶度)。重复测10次取平均值，实测结果如下：平均值为0.43 nmol/L，标准差0.0201；根据精密度公式：精密度=标准差/平均值×100％，精密度为4.7％，小于5％，符合要求。
实施例二：
本发明试剂盒的R1和R2试剂按下述成分和含量配置： R1试剂各成分浓度为：PH值为7.0的MOPS缓冲液24g/L，过氧化氢酶1.8 g/L，胆固醇氧化酶0.09 g/L，胆固醇酯酶1.4 g/L，作为表面活性剂I的PEG-2000含量为11 g/L，N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐(TOOS) 1.4 g/L，其余为纯化水；R2试剂各成分浓度为：PH值为7.0的MOPS缓冲液24g/L，过氧化物酶0.12 g/L，作为表面活性剂Ⅱ的PEG-6000含量为17 g/L，4-氨基安替比林0.55 g/L，作为稳定剂的乙二胺四乙酸0.9，其余为纯化水。
使用罗氏P800全自动生化分析仪，测定方法采用两点重点法，主波长采用546nm，定标模式采用线性，反应方向正向上升，首先使用含肝素150U/ml、氯化镁90mmol/L、加速剂5mmol/L的前处理液与等体积血清混合，在温度37℃下孵育10min，然后直立冰水浴15min，在温度4℃下以1300r/min离心旋转15min后收集上清液作为sdLDL-C直接测定的待测标本；选用两根试管分别作为校准管和样品管，校准管中加入10微升校准液，样品管中加入10微升待测标本，然后在校准管和样品管中各加入R1试剂240微升混匀，在温度37℃下孵育5分钟，测定各管的吸光度A1，然后再在校准管和样品管中各加入本发明所述的R2试剂80微升混匀，在温度37℃下孵育5分钟，测定各管的吸光度A2，生化分析仪计算出使用R1和R2测得的吸光度差值△A=A2-A1，并通过下述公式自动计算出血清小而密低密度脂蛋白胆固醇含量：sdLDL-C（nmol/L）=(△A测定/△A校准)×Cs(校准液sdLDL-C溶度)。重复测10次取平均值，实测结果如下：平均值为0.56 nmol/L，标准差0.0269；根据精密度公式：精密度=标准差/平均值×100％，精密度为4.8％，小于5％，符合要求。
实施例三：
本发明试剂盒的R1和R2试剂按下述成分和含量配置： R1试剂各成分浓度为：PH值为7.0的MOPS缓冲液22.5g/L，过氧化氢酶2.01 g/L，胆固醇氧化酶0.106 g/L，胆固醇酯酶1.32 g/L，作为表面活性剂I的PEG-2000含量为10 g/L，N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐(TOOS) 1.65 g/L，其余为纯化水；R2试剂各成分浓度为：PH值为7.0的MOPS缓冲液22.5g/L，过氧化物酶0.13 g/L，作为表面活性剂Ⅱ的PEG-6000含量为15 g/L，4-氨基安替比林0.51 g/L，作为稳定剂的乙二胺四乙酸1.0，其余为纯化水。
使用罗氏P800全自动生化分析仪，测定方法采用两点重点法，主波长采用546nm，定标模式采用线性，反应方向正向上升，首先使用含肝素150U/ml、氯化镁90mmol/L、加速剂5mmol/L的前处理液与等体积血清混合，在温度37℃下孵育10min，然后直立冰水浴15min，在温度4℃下以1300r/min离心旋转15min后收集上清液作为sdLDL-C直接测定的待测标本；选用两根试管分别作为校准管和样品管，校准管中加入10微升校准液，样品管中加入10微升待测标本，然后在校准管和样品管中各加入R1试剂240微升混匀，在温度37℃下孵育5分钟，测定各管的吸光度A1，然后再在校准管和样品管中各加入本发明所述的R2试剂80微升混匀，在温度37℃下孵育5分钟，测定各管的吸光度A2，生化分析仪计算出使用R1和R2测得的吸光度差值△A=A2-A1，并通过下述公式自动计算出血清小而密低密度脂蛋白胆固醇含量：sdLDL-C（nmol/L）=(△A测定/△A校准)×Cs(校准液sdLDL-C溶度)。重复测10次取平均值，实测结果如下：平均值为0.58 nmol/L，标准差0.0248；根据精密度公式：精密度=标准差/平均值×100％，精密度为4.3％，小于5％，符合要求。

Claims (1)

1.  小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒，包括R1和R2两种独立液态试剂，其特征是：所述的R1试剂各成分浓度为：PH值为7.0的MOPS缓冲液20～24g/L，过氧化氢酶1.8～2.2 g/L，胆固醇氧化酶0.09～0.11 g/L，胆固醇酯酶1.2～1.4 g/L，作为表面活性剂I的PEG-2000含量为9～11 g/L，N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐(TOOS) 1.4～1.8 g/L，其余为纯化水；
所述的R2试剂各成分浓度为：PH值为7.0的MOPS缓冲液20～24g/L，过氧化物酶0.12～0.15 g/L，作为表面活性剂Ⅱ的PEG-6000含量为13～17 g/L，4-氨基安替比林0.45～0.55 g/L，作为稳定剂的乙二胺四乙酸0.9～1.1 g/L，其余为纯化水。
CN201310414650.6A 2013-09-12 2013-09-12 小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒 Pending CN103589776A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310414650.6A CN103589776A (zh) 2013-09-12 2013-09-12 小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310414650.6A CN103589776A (zh) 2013-09-12 2013-09-12 小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN103589776A true CN103589776A (zh) 2014-02-19

Family

ID=50080089

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310414650.6A Pending CN103589776A (zh) 2013-09-12 2013-09-12 小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103589776A (zh)

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104673879A (zh) * 2015-03-07 2015-06-03 王贤俊 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其制备
US20160139160A1 (en) * 2014-11-17 2016-05-19 Boston Heart Diagnostic Corporation Cardiovascular disease risk assessment
CN108424952A (zh) * 2018-03-21 2018-08-21 天津中成佳益生物科技有限公司 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒
CN108841918A (zh) * 2018-01-15 2018-11-20 中山标佳生物科技有限公司 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇试剂盒
CN109055485A (zh) * 2018-07-27 2018-12-21 金华市强盛生物科技有限公司 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒
CN110794155A (zh) * 2019-11-26 2020-02-14 浙江夸烨生物科技有限公司 一种用于检测小而密低密度脂蛋白胆固醇的试剂盒及其检测方法
CN111269962A (zh) * 2020-03-18 2020-06-12 浙江夸克生物科技有限公司 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒及其应用
CN111690716A (zh) * 2020-07-08 2020-09-22 宏葵生物（中国）股份有限公司 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒的制备方法
CN111690715A (zh) * 2019-03-12 2020-09-22 程明 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒及其测定方法

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20160139160A1 (en) * 2014-11-17 2016-05-19 Boston Heart Diagnostic Corporation Cardiovascular disease risk assessment
US9739790B2 (en) * 2014-11-17 2017-08-22 Boston Heart Diagnostic Corporation Cardiovascular disease risk assessment
CN104673879A (zh) * 2015-03-07 2015-06-03 王贤俊 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其制备
CN108841918A (zh) * 2018-01-15 2018-11-20 中山标佳生物科技有限公司 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇试剂盒
CN108424952A (zh) * 2018-03-21 2018-08-21 天津中成佳益生物科技有限公司 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒
CN108424952B (zh) * 2018-03-21 2021-04-20 天津中成佳益生物科技有限公司 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒
CN109055485A (zh) * 2018-07-27 2018-12-21 金华市强盛生物科技有限公司 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒
CN111690715A (zh) * 2019-03-12 2020-09-22 程明 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒及其测定方法
CN110794155A (zh) * 2019-11-26 2020-02-14 浙江夸烨生物科技有限公司 一种用于检测小而密低密度脂蛋白胆固醇的试剂盒及其检测方法
CN110794155B (zh) * 2019-11-26 2020-06-23 浙江夸烨生物科技有限公司 一种用于检测小而密低密度脂蛋白胆固醇的试剂盒及其检测方法
CN111269962B (zh) * 2020-03-18 2021-03-23 浙江夸克生物科技有限公司 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒及其应用
CN111269962A (zh) * 2020-03-18 2020-06-12 浙江夸克生物科技有限公司 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒及其应用
CN111690716A (zh) * 2020-07-08 2020-09-22 宏葵生物（中国）股份有限公司 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒的制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103589776A (zh) 小而密低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒
CN105296597B (zh) 检测高密度脂蛋白胆固醇含量的试剂盒
US11814669B2 (en) Blood sample assay method
DK2116612T3 (en) REAGENT FOR DETERMINING QUANTITY OF LOW DENSITY LOW DENSITY LIPOPROTEIN
CN106383116A (zh) 一种检测高密度脂蛋白胆固醇的试剂盒
CN103033629A (zh) 一种脂蛋白磷脂酶a2的测定试剂及试剂的制备方法
CN105652021A (zh) 一种测定小而密脂蛋白的试剂、方法和试剂盒
CN106053368A (zh) 一种测定尿微量白蛋白的试剂盒及其制备方法
CN104673879A (zh) 一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其制备
WO2011065212A1 (ja) 生体試料成分の分析方法
BR112014025875B1 (pt) Método de medição
CN104714040B (zh) 血清中葡萄糖氧化酶双试剂测定方法
CN103048282A (zh) 一种胆红素的检测方法及检测试剂盒
CN102539731A (zh) 血清低密度脂蛋白胆固醇的定量测定试剂及测定试剂盒
TWI731088B (zh) 富含三酸甘油酯脂蛋白中之膽固醇之定量方法
CN104048928A (zh) 直接胆红素检测试剂盒
CN102323225B (zh) 一种检测低密度脂蛋白胆固醇的方法和试剂盒
CN101403747B (zh) 补体3检测试剂
CN104048955A (zh) 高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒
US6114134A (en) Method for assaying biological specimens for substances contained in the components thereof and reagent to be used in this method
CN102747133B (zh) 一种腺苷脱氨酶检测试剂盒及其制备方法
WO2011133581A1 (en) Methods and compositions for assaying enzymatic activity of myeloperoxidase in blood samples
Shinya et al. Development of an assay of seven biochemical items, HbA1c, and hematocrit using a small amount of blood collected from the fingertip
CN110736846A (zh) 一种小而密脂蛋白的测定试剂、方法和试剂盒
CN103837487A (zh) 一种尿酸的检测方法及检测试剂盒

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20140219