CN103588784A - 一种制备高纯度尼莫克汀的方法 - Google Patents

Abstract

一种制备高纯度尼莫克汀的方法，属于药物化学领域。尼莫克汀是一种十六元大环内脂类驱虫抗生素，主要用于合成驱虫药效更好的莫西克汀。这种制备高纯度尼莫克汀的方法，通过乙醇水溶液萃取尼莫克汀得到萃取液，该萃取液经过离子交换树脂脱色、大孔吸附树脂脱蛋白和脱糖，最后由适当的大孔吸附树脂吸附和分离，可以制得纯度大于90%的尼莫克汀产品。该方法通过各树脂搭配使用，针对性强，制得的高纯度尼莫克汀对于合成高纯度莫西克汀具有重要意义。

Description

一种制备高纯度尼莫克汀的方法

技术领域

本发明涉及一种制备高纯度尼莫克汀的方法，属于药物化学领域。

背景技术

尼莫克汀是一种十六元大环内酯类驱虫抗生素，可以用于治疗牛羊等动物体内及体外的寄生虫。尼莫克汀由蓝灰链霉菌发酵生产，主要用于合成药效更好的莫西克汀。因而，高纯度的尼莫克汀对于制备高纯度的莫西克汀具有特别重要的意义。

目前已知的文献中报道提纯尼莫克汀的方法较少，主要有以下两种：

1.中国专利CN101372492A公开了一种大孔吸附树脂柱层析提纯的方法。这种方法得到的尼莫克汀纯度为40%～50%，其后合成莫西克汀的过程中需进一步的柱层析提纯。

2.中国专利CN102336796A中公开了另外一种方法：尼莫克汀发酵液经喷雾干燥，得到固体粉末。萃取该固体粉末，萃取液经大孔吸附树脂柱层析分离，可得到纯度约90%的尼莫克汀。该方法中使用的大孔吸附树脂价格昂贵，难以在工业化生产中应用；并且该方法对使用的大孔吸附树脂缺乏保护，其使用寿命堪忧。

大孔吸附树脂对于分离提纯尼莫克汀具有积极的作用，我们发现，通过大孔吸附树脂与其他树脂的配合使用，可以制备高纯度的尼莫克汀产品。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种制备高纯度尼莫克汀的方法。

本发明采用的技术方案是：一种制备高纯度尼莫克汀的方法采用的步骤为：

（1）乙醇水溶液萃取尼莫克汀，所述乙醇水溶液中乙醇与纯化水的重量比为50:50～60:40，乙醇水溶液与发酵得到的含有尼莫克汀的干燥固体粉末重量比为5:1～6:1，搅拌4～6小时，过滤得到尼莫克汀的萃取液；

（2）萃取液经离子交换树脂脱色，流速不大于每小时1床层体积；

（3）脱色液经大孔吸附树脂1和大孔吸附树脂2吸附，大孔吸附树脂1与大孔吸附树脂2的床层体积比为1:10～1:5，大孔吸附树脂1和大孔吸附树脂2为不同牌号非离子非极性大孔吸附树脂，其中大孔吸附树脂1用于吸附萃取液中的蛋白质、多糖和色素等杂质，大孔吸附树脂2用于吸附、分离尼莫克汀；

（4）梯度洗脱大孔吸附树脂2，分段收集洗脱液，洗脱用乙醇水溶液的梯度为55%～70%重量比，收集尼莫克汀纯度大于90%的洗脱液，负压脱溶，过滤得到白色固体粉末，45℃真空干燥至恒重，得到尼莫克汀产品。

本发明的有益效果是：这种制备高纯度尼莫克汀的方法，通过乙醇水溶液萃取尼莫克汀得到萃取液，该萃取液经过离子交换树脂脱色、大孔吸附树脂脱蛋白和脱糖，最后由适当的大孔吸附树脂吸附和分离，可以制得纯度大于90%的尼莫克汀产品。该方案通过各树脂搭配使用，针对性强，制得的高纯度尼莫克汀对于合成高纯度莫西克汀具有重要意义。

具体实施方式

通过下述实施例有助于进一步理解本发明。

实施例1

10L釜内投入尼莫克汀干燥菌丝体1.0kg（其中尼莫克汀外标含量为5.5%）、55%乙醇水溶液6.0kg，23℃搅拌4小时。过滤，得到棕色滤液4.84kg；滤饼返釜，投入55%乙醇水溶液6.0kg继续搅拌4小时。过滤，得到浅棕色滤液6.15kg。合并2次滤液，其中尼莫克汀外标含量为0.50%，纯度为58.4%。

萃取液上脱色柱，树脂为FPA53（罗门哈斯，吸附量30 g～40g/L），流速为2.0L/h。流出液为淡黄色透明溶液。

脱色液上大孔吸附树脂1和大孔吸附树脂2。其中大孔吸附树脂1为XAD1180N（罗门哈斯），用量0.5L；大孔吸附树脂2为XAD1600N（罗门哈斯），用量4L。上样流速为2.0L/h。待脱色液上样完毕，依次使用55%乙醇水溶液、60%乙醇水溶液，65%乙醇水溶液对大孔吸附树脂2洗脱。收集尼莫克汀纯度大于90%的洗脱液，45℃负压脱溶至断流，水相中析出大量白色固体粉末。过滤，滤饼45℃真空干燥，得到白色固体粉末38.8 g，纯度93.6%，含量85.1%。

实施例2

10L釜内投入尼莫克汀干燥菌丝体1.0kg（其中尼莫克汀外标含量为5.5%）、50%乙醇水溶液8.0kg，20℃搅拌6小时。过滤，得到棕色滤液7.78kg；滤饼返釜，投入50%乙醇水溶液8.0kg继续搅拌6小时。过滤，得到浅棕色滤液8.31kg。合并2次滤液，其中尼莫克汀外标含量为0.34%，纯度为58.6%。

萃取液上脱色柱，树脂为DOC2001（苏青树脂，吸附量30 g～40g/L），流速为3.0L/h。流出液为淡黄色透明溶液。

脱色液上大孔吸附树脂1和大孔吸附树脂2。其中大孔吸附树脂1为XAD1180N（罗门哈斯），用量0.8L；大孔吸附树脂2为HP20（三菱），用量4L。上样流速为3.0L/h。待脱色液上样完毕，依次使用55%乙醇水溶液、63%乙醇水溶液，68%乙醇水溶液对大孔吸附树脂2洗脱。收集尼莫克汀纯度大于90%的洗脱液，45℃负压脱溶至断流，水相中析出大量白色固体粉末。过滤，滤饼45℃真空干燥，得到白色固体粉末37.4 g，纯度92.4%，含量84.8%。

实施例3

10L釜内投入尼莫克汀干燥菌丝体1.0kg（其中尼莫克汀外标含量为5.5%）、60%乙醇水溶液5.0kg，21℃搅拌4小时。过滤，得到棕色滤液3.88kg；滤饼返釜，投入60%乙醇水溶液5.0kg继续搅拌4小时。过滤，得到浅棕色滤液5.20kg。合并2次滤液，其中尼莫克汀外标含量为0.61%，纯度为57.9%。

萃取液上脱色柱，树脂为FPA40（罗门哈斯，吸附量30 g～40g/L），流速为1.2L/h。流出液为淡黄色透明溶液。

脱色液上大孔吸附树脂1和大孔吸附树脂2。其中大孔吸附树脂1为H60（西安电力），用量0.4L；大孔吸附树脂2为YP108（扬州三环），用量4L。上样流速为1.2L/h。待脱色液上样完毕，依次使用55%乙醇水溶液、60%乙醇水溶液，63%乙醇水溶液对大孔吸附树脂2洗脱。收集尼莫克汀纯度大于90%的洗脱液，45℃负压脱溶至断流，水相中析出大量白色固体粉末。过滤，滤饼45℃真空干燥，得到白色固体粉末36.2 g，纯度90.2%，含量83.6%。

Claims (1)

1.一种制备高纯度尼莫克汀的方法，其特征是：该方法采用的步骤为：

（1）乙醇水溶液萃取尼莫克汀，所述乙醇水溶液中乙醇与纯化水的重量比为50:50～60:40，乙醇水溶液与发酵得到的含有尼莫克汀的干燥固体粉末重量比为5:1～6:1，搅拌4～6小时，过滤得到尼莫克汀的萃取液；

（2）萃取液经离子交换树脂脱色，流速不大于每小时1床层体积；

（3）脱色液经大孔吸附树脂1和大孔吸附树脂2吸附，大孔吸附树脂1与大孔吸附树脂2的床层体积比为1:10～1:5，大孔吸附树脂1和大孔吸附树脂2为不同牌号非离子非极性大孔吸附树脂，其中大孔吸附树脂1用于吸附萃取液中的蛋白质、多糖和色素等杂质，大孔吸附树脂2用于吸附、分离尼莫克汀；

（4）梯度洗脱大孔吸附树脂2，分段收集洗脱液，洗脱用乙醇水溶液的梯度为55%～70%重量比，收集尼莫克汀纯度大于90%的洗脱液，负压脱溶，过滤得到白色固体粉末，45℃真空干燥至恒重，得到尼莫克汀产品。