CN103585311A - 一种高山绣线菊提取物的制备方法 - Google Patents

一种高山绣线菊提取物的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种高山绣线菊提取物的制备方法,属于医药领域。其制备方法是以高山绣线菊为原料,用30%-75%乙醇提取,通过大孔吸附树脂等纯化得到。可与药学上可接受的载体或其他适宜赋形剂相结合,按照常规方法制成口服给药的剂型。

Description

一种高山绣线菊提取物的制备方法
技术领域
本发明属于生物医药领域,涉及一种中药材提取物的制备方法,具体是涉及一种高山绣线菊提取物的制备方法。
背景技术
高山绣线菊为蔷薇科植物高山绣线菊Spiraea alpina Turcz.的干燥花、叶。花期采集,晒干。收载于1998年《中华人民共和国卫生部药品标准 蒙药分册》性凉,味甘。具有清骨热,生津,止血,敛黄水之功效。用于治疮疡,黄水病,腹水,肺瘀血,子宫出血。为我国藏蒙等少数民族地区的常用药物。但有关高山绣线菊的基础研究尚十分有限,使该药材的后续推广和应用受到限制。现代研究表明,高山绣线菊含有生物碱类成分;高山绣线菊乙醇提取物对家蚕乙酰胆碱酯酶具有抑制作用,对纯酶的IC50达到了0.091×10-3g ·mL-1,其他药理作用研究未见报道。 
国内专利检索结果,未见高山绣线菊相关专利。
上述文献及专利等,尚未见高山绣线菊提取物制备方法的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种高山绣线菊提取物的制备方法。
本发明是通过如下技术方案实现的:
本发明所用原料高山绣线菊为蔷薇科植物高山绣线菊Spiraea alpina Turcz.的干燥花、叶。
一种高山绣线菊提取物的制备方法,其特征在于按以下步骤制备:
(1)高山绣线菊,用浓度30%-75%乙醇溶液作为溶剂,提取温度50℃-95℃,提取次数为1-3次,每次提取时间为1-4小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的6-15倍,滤过,得提取液A和药渣A;提取液A,回收乙醇,浓缩至相对密度d=1.10-1.18,滤过,得药液B;
(2)将步骤(1)得到的药液B,通过大孔吸附树脂,先用水洗脱,再用浓度30%-95%的乙醇溶液洗脱,收集不同浓度乙醇洗脱液,浓缩干燥,即得高山绣线菊提取物A; 
(3)将步骤(1)得到的药渣A,用浓度1%-5%盐酸溶液作为溶剂,提取温度60℃-80℃,提取次数为1-3次,每次提取时间为1-3小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的10-15倍,滤过,合并提取液,浓缩至相对密度d=1.10-1.18,用氨水调PH9-10,用乙酸乙酯萃取1-4次,乙酸乙酯萃取液用水洗3次后,回收乙酸乙酯,浓缩,干燥,得高山绣线菊提取物B;
(4)上述高山绣线菊提取物A、高山绣线菊提取物B,其中一种或两种按一定比例混匀,即得本发明的高山绣线菊提取物。
优选的一种高山绣线菊提取物的制备方法,其特征在于按以下步骤制备:
(1)高山绣线菊,用浓度30%-75%乙醇溶液作为溶剂,提取温度50℃-95℃,提取次数为1-3次,每次提取时间为1-4小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的6-15倍,滤过,得提取液A和药渣A;提取液A,回收乙醇,浓缩至相对密度d=1.10-1.18,滤过,得药液B;
(2)将步骤(1)得到的药液B,通过大孔吸附树脂,先用水洗脱,再用浓度30%-95%的乙醇溶液洗脱,收集不同浓度乙醇洗脱液,浓缩干燥,即得高山绣线菊提取物A; 
(3)将步骤(1)得到的药渣A,用浓度1%-5%盐酸溶液作为溶剂,提取温度60℃-80℃,提取次数为1-3次,每次提取时间为1-3小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的10-15倍,滤过,合并提取液,浓缩至相对密度d=1.10-1.18,用氨水调PH9-10,用乙酸乙酯萃取1-4次,乙酸乙酯萃取液用水洗3次后,回收乙酸乙酯,浓缩,干燥,得高山绣线菊提取物B;
(4)上述高山绣线菊提取物A和高山绣线菊提取物B混匀,即得本发明的高山绣线菊提取物。
优选的一种高山绣线菊提取物的制备方法,其特征在于按以下步骤制备:
(1)高山绣线菊,用浓度60%乙醇溶液作为溶剂,提取温度70℃,提取次数为2次,每次提取时间为2小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的10倍;滤过,得提取液A和药渣A;提取液A,回收乙醇,浓缩至相对密度d=1.12,滤过,得药液B;
(2)将步骤(1)得到的药液B,通过ADS-3大孔吸附树脂,先用水洗脱,再用浓度80%的乙醇溶液洗脱,收集80%浓度乙醇洗脱液,浓缩干燥,即得高山绣线菊提取物A; 
(3)将步骤(1)得到的药渣A,用浓度2%盐酸溶液作为溶剂,提取温度70℃,提取次数为2次,每次提取时间为2小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的12倍;滤过,合并提取液,浓缩至相对密度d=1.16,用氨水调PH9-10,用乙酸乙酯萃取4次,乙酸乙酯萃取液用水洗3次后,回收乙酸乙酯,浓缩,干燥,得高山绣线菊提取物B;
(4)上述高山绣线菊提取物A、高山绣线菊提取物B混匀,即得本发明的高山绣线菊提取物。
本发明的一种高山绣线菊提取物的制备方法,其特征在于:所述的高山绣线菊提取物主要含有:绣线菊碱A(spiradine A)、绣线菊碱D(spiradine D)、阿替生(atisine)、绣线菊新碱Ⅳ(spirasine Ⅳ)、绣线菊新碱                                               
Figure 2013105254118100002DEST_PATH_IMAGE002
(spirasine 
Figure 701271DEST_PATH_IMAGE002
)、绣线菊内酯B。
本发明的一种高山绣线菊提取物的制备方法,其特征在于:所采用的大孔吸附树脂为HP20大孔吸附树脂、ADS-3大孔吸附树脂、ADS-17大孔吸附树脂。
本发明的高山绣线菊提取物,通过加入药剂学允许的各种辅料,制成药剂学上的片剂、颗粒剂、胶囊剂等口服剂型。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明的一种高山绣线菊提取物的制备方法做进一步说明,但不限于本发明。
下面通过具体实施例作进一步详述。
实施例1:高山绣线菊提取物的制备及单体成分研究
(1)高山绣线菊19kg,用浓度60%乙醇溶液作为溶剂,提取温度70℃,提取次数为2次,每次提取时间为2小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的10倍,滤过,得提取液A和药渣A;提取液A,回收乙醇,浓缩至相对密度d=1.12,滤过,得药液B;
(2)将步骤(1)得到的药液B,通过ADS-3大孔吸附树脂,先用水洗脱,再用浓度80%的乙醇溶液洗脱,收集80%浓度乙醇洗脱液,浓缩干燥,即得高山绣线菊提取物A; 
(3)将步骤(1)得到的药渣A,用浓度2%盐酸溶液作为溶剂,提取温度70℃,提取次数为2次,每次提取时间为2小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的12倍,滤过,合并提取液,浓缩至相对密度d=1.16,用氨水调PH9-10,用乙酸乙酯萃取4次,乙酸乙酯萃取液用水洗3次后,回收乙酸乙酯,浓缩,干燥,得高山绣线菊提取物B;
(4)上述高山绣线菊提取物A、高山绣线菊提取物B,混匀,即得本发明的高山绣线菊提取物。
高山绣线菊提取物进行硅胶柱色谱、制备薄层色谱、以及Sephadex LH一2O柱色谱,分别得到绣线菊碱A(spiradine A)、绣线菊碱D(spiradine D)、阿替生(atisine)、绣线菊新碱Ⅳ(spirasine Ⅳ)、绣线菊新碱(spirasine )、绣线菊内酯B。以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证,纯度经高效液相色谱检测均大于98%。
实施例2:高山绣线菊提取物的制备及单体成分研究
(1)高山绣线菊25kg,用浓度30%乙醇溶液作为溶剂,提取温度95℃,提取次数为1次,每次提取时间为4小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的15倍;滤过,得提取液A和药渣A;提取液A,回收乙醇,浓缩至相对密度d=1.18,滤过,得药液B;
(2)将步骤(1)得到的药液B,通过HP20大孔吸附树脂,先用水洗脱,再用浓度30%的乙醇溶液洗脱,收集30%浓度乙醇洗脱液,浓缩干燥,即得高山绣线菊提取物A; 
(3)将步骤(1)得到的药渣A,用浓度1%盐酸溶液作为溶剂,提取温度80℃,提取次数为3次,每次提取时间为1小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的15倍;滤过,合并提取液,浓缩至相对密度d=1.18,用氨水调PH9-10,用乙酸乙酯萃取1次,乙酸乙酯萃取液用水洗3次后,回收乙酸乙酯,浓缩,干燥,得高山绣线菊提取物B;
(4)上述高山绣线菊提取物A和高山绣线菊提取物B混匀,即得本发明的高山绣线菊提取物。
高山绣线菊提取物进行硅胶柱色谱、制备薄层色谱、以及Sephadex LH一2O柱色谱,分别得到绣线菊碱A(spiradine A)、绣线菊碱D(spiradine D)、阿替生(atisine)、绣线菊新碱Ⅳ(spirasine Ⅳ)、绣线菊新碱
Figure 316688DEST_PATH_IMAGE002
(spirasine 
Figure 159109DEST_PATH_IMAGE002
)、绣线菊内酯B。以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证,纯度经高效液相色谱检测均大于98%。
实施例3:高山绣线菊提取物的制备及单体成分研究
(1)高山绣线菊20kg,用浓度75%乙醇溶液作为溶剂,提取温度50℃,提取次数为3次,每次提取时间为1小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的6倍;滤过,得提取液A和药渣A;提取液A,回收乙醇,浓缩至相对密度d=1.10,滤过,得药液B;
(2)将步骤(1)得到的药液B,通过ADS-17大孔吸附树脂,先用水洗脱,再用浓度95%的乙醇溶液洗脱,收集95%浓度乙醇洗脱液,浓缩干燥,即得高山绣线菊提取物A; 
(3)将步骤(1)得到的药渣A,用浓度5%盐酸溶液作为溶剂,提取温度60℃,提取次数为1次,每次提取时间为3小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的10倍;滤过,合并提取液,浓缩至相对密度d=1.10,用氨水调PH9-10,用乙酸乙酯萃取4次,乙酸乙酯萃取液用水洗3次后,回收乙酸乙酯,浓缩,干燥,得高山绣线菊提取物B;
(4)上述高山绣线菊提取物A和高山绣线菊提取物B混匀,即得本发明的高山绣线菊提取物。
高山绣线菊提取物进行硅胶柱色谱、制备薄层色谱、以及Sephadex LH一2O柱色谱,分别得到绣线菊碱A(spiradine A)、绣线菊碱D(spiradine D)、阿替生(atisine)、绣线菊新碱Ⅳ(spirasine Ⅳ)、绣线菊新碱
Figure 363825DEST_PATH_IMAGE002
(spirasine 
Figure 936627DEST_PATH_IMAGE002
)、绣线菊内酯B。以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证,纯度经高效液相色谱检测均大于98%。
实施例4:高山绣线菊提取物的制备及单体成分研究
(1)高山绣线菊,用浓度55%乙醇溶液作为溶剂,提取温度75℃,提取次数为2次,每次提取时间为1.5小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的10倍;滤过,得提取液A和药渣A;提取液A,回收乙醇,浓缩至相对密度d=1.14,滤过,得药液B;
(2)将步骤(1)得到的药液B,通过ADS-3大孔吸附树脂,先用水洗脱,再用浓度75%的乙醇溶液洗脱,收集75%浓度乙醇洗脱液,浓缩干燥,即得高山绣线菊提取物; 
高山绣线菊提取物进行硅胶柱色谱、制备薄层色谱、以及Sephadex LH一2O柱色谱,分别得到绣线菊碱A(spiradine A)、绣线菊碱D(spiradine D)、阿替生(atisine)、绣线菊新碱Ⅳ(spirasine Ⅳ)、绣线菊新碱
Figure 480872DEST_PATH_IMAGE002
(spirasine 
Figure 851067DEST_PATH_IMAGE002
)、绣线菊内酯B。以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证,纯度经高效液相色谱检测均大于98%。
实施例5:高山绣线菊提取物片剂的制备
取上述各实施例中任一高山绣线菊提取物265g,加入60g淀粉,混匀,制粒,过筛,加15g微晶纤维素,0.5g硬脂酸镁,混匀,压制成1000片, 即为本发明的高山绣线菊提取物片剂。
实施例6:高山绣线菊提取物颗粒剂的制备
取实施例1高山绣线菊提取物260g,加入糊精100g,混匀,制粒,干燥,整粒,即得高山绣线菊提取物颗粒剂。
实施例7:高山绣线菊提取物胶囊的制备
取实施例2高山绣线菊提取物245g,加入淀粉85g,混匀,制粒,干燥,整粒,加入适量硬脂酸镁,混匀,装胶囊1000粒,即得高山绣线菊提取物胶囊。
实施例8:高山绣线菊提取物片剂的制备
取实施例4高山绣线菊提取物255g,加入淀粉85g,微晶纤维素15g,混匀,制粒,干燥,过筛,加入适量硬脂酸镁,混匀,压制成100片,即得高山绣线菊提取物片剂。

Claims (6)

1.一种高山绣线菊提取物的制备方法,其特征在于按以下步骤制备:
(1)高山绣线菊,用浓度30%-75%乙醇溶液作为溶剂,提取温度50℃-95℃,提取次数为1-3次,每次提取时间为1-4小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的6-15倍,滤过,得提取液A和药渣A;提取液A,回收乙醇,浓缩至相对密度d=1.10-1.18,滤过,得药液B;
(2)将步骤(1)得到的药液B,通过大孔吸附树脂,先用水洗脱,再用浓度30%-95%的乙醇溶液洗脱,收集不同浓度乙醇洗脱液,浓缩干燥,即得高山绣线菊提取物A; 
(3)将步骤(1)得到的药渣A,用浓度1%-5%盐酸溶液作为溶剂,提取温度60℃-80℃,提取次数为1-3次,每次提取时间为1-3小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的10-15倍,滤过,合并提取液,浓缩至相对密度d=1.10-1.18,用氨水调PH9-10,用乙酸乙酯萃取1-4次,乙酸乙酯萃取液用水洗3次后,回收乙酸乙酯,浓缩,干燥,得高山绣线菊提取物B;
(4)上述高山绣线菊提取物A、高山绣线菊提取物B,其中一种或两种按一定比例混匀,即得本发明的高山绣线菊提取物。
2.根据权利要求1所述的一种高山绣线菊提取物的制备方法,其特征在于按以下步骤制备:
(1)高山绣线菊,用浓度30%-75%乙醇溶液作为溶剂,提取温度50℃-95℃,提取次数为1-3次,每次提取时间为1-4小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的6-15倍,滤过,得提取液A和药渣A;提取液A,回收乙醇,浓缩至相对密度d=1.10-1.18,滤过,得药液B;
(2)将步骤(1)得到的药液B,通过大孔吸附树脂,先用水洗脱,再用浓度30%-95%的乙醇溶液洗脱,收集不同浓度乙醇洗脱液,浓缩干燥,即得高山绣线菊提取物A; 
(3)将步骤(1)得到的药渣A,用浓度1%-5%盐酸溶液作为溶剂,提取温度60℃-80℃,提取次数为1-3次,每次提取时间为1-3小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的10-15倍,滤过,合并提取液,浓缩至相对密度d=1.10-1.18,用氨水调PH9-10,用乙酸乙酯萃取1-4次,乙酸乙酯萃取液用水洗3次后,回收乙酸乙酯,浓缩,干燥,得高山绣线菊提取物B;
(4)上述高山绣线菊提取物A和高山绣线菊提取物B混匀,即得本发明的高山绣线菊提取物。
3.根据权利要求1所述的一种高山绣线菊提取物的制备方法,其特征在于按以下步骤制备:
(1)高山绣线菊,用浓度60%乙醇溶液作为溶剂,提取温度70℃,提取次数为2次,每次提取时间为2小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的10倍;滤过,得提取液A和药渣A;提取液A,回收乙醇,浓缩至相对密度d=1.12,滤过,得药液B;
(2)将步骤(1)得到的药液B,通过ADS-3大孔吸附树脂,先用水洗脱,再用浓度80%的乙醇溶液洗脱,收集80%浓度乙醇洗脱液,浓缩干燥,即得高山绣线菊提取物A; 
(3)将步骤(1)得到的药渣A,用浓度2%盐酸溶液作为溶剂,提取温度70℃,提取次数为2次,每次提取时间为2小时,每次溶剂用量为高山绣线菊重量的12倍;滤过,合并提取液,浓缩至相对密度d=1.16,用氨水调PH9-10,用乙酸乙酯萃取4次,乙酸乙酯萃取液用水洗3次后,回收乙酸乙酯,浓缩,干燥,得高山绣线菊提取物B;
(4)上述高山绣线菊提取物A、高山绣线菊提取物B混匀,即得本发明的高山绣线菊提取物。
4.根据权利要求1、权利要求2、权利要求3所述的一种高山绣线菊提取物的制备方法,其特征在于:所述的高山绣线菊提取物主要含有:绣线菊碱A、绣线菊碱D、阿替生、绣线菊新碱Ⅳ、绣线菊新碱                                                
Figure 958981DEST_PATH_IMAGE001
、绣线菊内酯B。
5.根据权利要求1、权利要求2所述的一种高山绣线菊提取物的制备方法,其特征在于:所采用的大孔吸附树脂为HP20大孔吸附树脂、ADS-3大孔吸附树脂、ADS-17大孔吸附树脂。
6. 根据权利要求1、权利要求2、权利要求3所述的高山绣线菊提取物,通过加入药剂学允许的各种辅料,制成药剂学上的片剂、颗粒剂、胶囊等口服剂型。
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