CN103565866A

CN103565866A - 一种三七总皂苷的制备方法

Info

Publication number: CN103565866A
Application number: CN201210268391.6A
Authority: CN
Inventors: 谢波; 孙刚; 张红峰; 海龙宇; 王文灿; 吴桂萍; 谢科
Original assignee: Kunming Pharmaceutical Corp
Current assignee: Kunming Pharmaceutical Corp
Priority date: 2012-07-30
Filing date: 2012-07-30
Publication date: 2014-02-12

Abstract

本发明属于医药领域，公开了一种三七总皂苷的制备方法。本发明所述三七总皂苷的制备方法为取三七提取液采用弱碱性阴离子交换树脂与苯乙烯骨架型大孔吸附树脂吸附，收集洗脱液，吸附脱色后干燥即得。本发明所述制备方法操作简便快速，制得的三七总皂苷及其制成的注射剂的异常毒性、溶血与凝聚检测指标明显提高，异常毒性项目检测，加氯化钠注射液溶解的三七总皂苷浓度可以达到22mg/mL以上；溶血与凝聚项目检测，加氯化钠注射液溶解的三七总皂苷浓度可以达到40mg/mL以上。

Description

一种三七总皂苷的制备方法

技术领域

本发明属于医药领域，尤其涉及一种三七总皂苷的制备方法。

背景技术

三七总皂苷是根据提取、分离技术从优质三七中提取有效的药用成分包括20多种皂苷活性物质、17种微量元素、蛋白、丰富的维生素、多糖等，具有活血祛瘀、通脉活络、抑制血小板聚集和增加脑血流量的作用，主要用于脑血管后遗症，视网膜中央静脉阻塞，眼前房出血等症的治疗，是临床上用于治疗心脑血管疾病的一种常用药。

目前三七总皂苷的制剂除了有口服用的三七总苷片、三七总苷胶囊外，还有注射用的三七总皂苷注射液，如商品名为血塞通、血栓通等注射液和冻干剂型。由于注射用的三七总皂苷注射液通过血管给药方式大大提高了中药对人身的药物有效供给和生物利用率，进而提高了功效，因而目前被广泛使用。

〖异常毒性〗和〖溶血与凝聚〗是中药注射剂的重要安全性的控制指标。异常毒性检查法是将一定剂量的供试品溶液注入小鼠体内或口服给药，在规定时间内观察小鼠死亡情况，以判定供试品是否符合规定的一种方法。溶血与凝聚检查法是将一定量供试品与2%免红细胞混悬液混合，温育一定时间后，观察其对红细胞的溶血与凝聚反应，以判定供试品是否符合规定。2011年执行的三七总皂苷的标准中，对注射剂中〖异常毒性〗和〖溶血与凝聚〗的规定如表1所示。

表1三七总皂苷的〖异常毒性〗和〖溶血与凝聚〗标准

由表1可见，注射用三七总皂苷和三七总皂苷的异常毒性的耐受指标供试品浓度必须≥15mg/mL，注射用三七总皂苷溶血与凝聚耐受指标供试品浓度必须≥35mg/mL。

中药注射剂，特别是静脉给药的中药注射剂，对其异常毒性和溶血与凝聚试验的把关是非常重要的，而异常毒性和溶血与凝聚试验指标越高，中药注射剂的安全性越好。因此提供异常毒性和溶血与凝聚检测指标高的三七总皂苷的制备方法对三七总皂苷制剂的生产具有重要意义。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种异常毒性和溶血与凝聚检测指标高的三七总皂苷的制备方法。

一种三七总皂苷的制备方法，取三七提取液采用弱碱性阴离子交换树脂与苯乙烯骨架型大孔吸附树脂吸附，收集洗脱液，吸附脱色后干燥即得；其中所述弱碱性阴离子交换树脂与苯乙烯骨架型大孔吸附树脂的先后顺序没有限定。

三七总皂苷主要成分为三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd。其中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re为三七三醇皂苷，人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd为三七二醇皂苷。三七三醇皂苷部分其异常毒性检查可耐受供试品浓度为30mg/mL，而三七二醇皂苷部分其异常毒性检查可耐受供试品浓度为6mg/mL。

本发明采用弱碱性阴离子交换树脂与苯乙烯骨架型大孔吸附树脂联合使用，可以提高三七三醇皂苷部分即三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re在原料中的比例，降低三七二醇皂苷部分即人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd在原料中的比例，从而使制得的三七总皂苷该及其制成的注射剂的异常毒性和溶血与凝聚检测指标提高。而且苯乙烯骨架型大孔吸附树脂与弱碱性阴离子交换树脂使用的先后顺序并不影响三七三醇皂苷与三七二醇皂苷在原料中的比例改变的程度。

实验表明，取三七提取液采用弱碱性阴离子交换树脂与苯乙烯骨架型大孔吸附树脂吸附，异常毒性项目检测，加氯化钠注射液溶解的三七总皂苷浓度可以达到22mg/mL以上；溶血与凝聚项目检测，加氯化钠注射液溶解的三七总皂苷浓度可以达到40mg/mL以上。

在一些实施例中，本发明所述三七总皂苷的制备方法具体为：取三七提取液，进行预处理，以0.1BV/小时以上的流速过弱碱性阴离子交换树脂，收集流出液，浓缩至无醇味，加水稀释后，用苯乙烯骨架型大孔吸附树脂吸附，水洗至清澈后，用10-80%的醇溶液洗脱，收集洗脱液，吸附脱色、干燥得三七总皂苷；其中所述预处理为取三七提取液浓缩至无醇味后加水稀释或取三七提取液用水稀释成10-80%的醇溶液。

在一些实施例中，本发明所述三七总皂苷的制备方法具体为：取三七提取液浓缩至无醇味加水稀释后，以0.1BV/小时以上的流速过苯乙烯骨架型大孔吸附树脂，水洗至清澈后，用10-80%的醇溶液洗脱，收集洗脱液，进行后处理，然后过弱碱性阴离子交换树脂，收集流出液，吸附脱色、干燥得三七总皂苷；其中所述后处理为取洗脱液浓缩至无醇味后加水稀释或取洗脱液用水稀释成10-80%的醇溶液。

按照本发明，所述三七总皂苷的制备方法中所述弱碱性阴离子交换树脂与三七提取液的体积比为1:0.2-10。

本发明所述三七总皂苷的制备方法中所述苯乙烯骨架型大孔吸附树脂与三七提取液的体积比为1:0.2-10。

本发明所述三七提取液可以通过商业渠道购买得到，也可按照现有方法制备得到。在一些实施例中，所述三七提取液的制备方法为取三七粉碎成粗粉加入10-90%醇溶液，10℃以上，提取2次以上，每次1小时以上，合并提取液，过滤，收集滤液即得；其中所述10-90%醇溶液的加入量按mL/g计为三七粉的2倍以上。

进一步的，作为优选所述弱碱性阴离子交换树脂与三七粉的质量比为0.2:1-10:1。

进一步的，作为优选所述苯乙烯骨架型大孔吸附树脂与三七粉的质量比为1:1-10:1。

其中，所述三七提取液的制备方法中所述10℃以上为加热温度为10℃到溶剂回流的温度。如提取溶剂为50%的乙醇的水溶液，其加热温度为10℃到50%的乙醇的水溶液回流的温度。

作为优选，本发明所述三七提取液的制备方法中所述提取次数为3~5次，更优选为4次。本发明所述三七提取液的制备方法中所述提取时间优选为每次2小时。

按照本发明，所述三七提取液的制备方法中所述三七为三七根、三七根茎或三七根与三七根茎的混合物。

本发明所述三七提取液的制备方法中，所述醇溶液为甲醇的水溶液或乙醇的水溶液。

本发明所述弱碱性阴离子交换树脂选自D301、D315、D370、D371、D392、D380、D382、D941、D900等树脂，优选为D941树脂或D900树脂。

本发明所述苯乙烯骨架型大孔交换树脂可以为D101、HPD100、HPD200、HPD300、HPD700等树脂，优选为D101树脂或HPD100树脂。

吸附脱色就是依靠吸附剂的吸附作用来脱除色度。当样品为固体时，一般是先用适当溶剂将其溶解，加入吸附剂，停留或搅拌片刻，有色杂质即被吸附剂吸附，然后过滤，被吸附的有色杂质与吸附剂结合在一起，而与样品分离，如活性碳脱色。也有将固体样品先用适当溶剂溶解后，以一定流速通过装有吸附剂的柱子，有色杂质即被吸附剂吸附，被吸附的有色杂质与吸附剂结合在一起，而与样品分离，如氧化铝脱色、离子交换树脂脱色。

作为优选，本发明所述吸附脱色为活性碳脱色、氧化铝脱色、离子交换树脂脱色中的一种或几种。

本发明提供了一种三七总皂苷的制备方法。本发明所述方法取三七提取液采用弱碱性阴离子交换树脂与苯乙烯骨架型大孔吸附树脂吸附，收集洗脱液，吸附脱色后干燥即得。本发明所述制备方法操作简便快速，制得的三七总皂苷及其制成的注射剂的异常毒性和溶血与凝聚检测指标明显提高，异常毒性项目检测，加氯化钠注射液溶解的三七总皂苷浓度可以达到22mg/mL以上；溶血与凝聚项目检测，加氯化钠注射液溶解的三七总皂苷浓度可以达到40mg/mL以上。

具体实施方式

本发明实施例公开了一种三七总皂苷的制备方法。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明进行详细说明。

实施例1：

取三七500g，粉碎成粗粉，用10倍70%乙醇加热回流提取4次，每次2小时，合并提取液，过滤，收集滤液，以流速为0.2BV/小时过1倍（药材：树脂=W/V）D900型弱碱性阴离子交换树脂，收集流出液，流出液浓缩至无醇味，加水稀释后，再通过3倍（药材：树脂=W/V）D101苯乙烯骨架型大孔吸附树脂，水洗至清澈后，再用50%的乙醇进行洗脱，收集洗脱液，依次过离子交换树脂、氧化铝柱进行脱色，收集流出液，回收溶剂至干后，用95%乙醇溶解后，加入0.5g活性碳进行脱色、滤过，回收乙醇后，干燥，即得三七总皂苷。

含量检测：按2010年版【中国药典】方法，本品按干燥品计算，三七皂苷R1为10.8％，人参皂苷Rg1为40.5%，人参皂苷Re为4.7%，人参皂苷Rb1为26.7%，人参皂苷Rd为3.7%。三七皂苷R1，人参皂苷Rg1，人参皂苷Re，人参皂苷Rb1，人参皂苷Rd的总和为86.4%。

异常毒性：按2010年版【中国药典】异常毒性检查法对样品进行检测，异常毒性安全检测可到23mg/mL。

溶血与凝聚：按2010年版【中国药典】溶血与凝聚检查法对样品进行检测，溶血与凝聚安全检测上限可到42.5mg/mL。

实施列2：

取三七500g，粉碎成粗粉，用10倍70%乙醇加热提取4次，每次2小时，合并提取液，滤液浓缩至无醇味，加水稀释至2500mL，待冷却后，滤液以流速为0.2BV/小时过3倍（药材：树脂=W/V）苯乙烯骨架型大孔吸附树脂柱HPD100，用水洗至变清澈后，再用50%的乙醇进行洗脱，收集洗脱液，过1倍（药材：树脂=W/V）D941弱碱性阴离子交换树脂柱，收集流出液，过氧化铝柱进行脱色，收集流出液，回收溶剂至干后，用95%乙醇溶解后，加入0.5g活性碳进行脱色、滤过，回收乙醇后，干燥，即得三七总皂苷。

含量检测：按2010年版【中国药典】方法，本品按干燥品计算，三七皂苷R1为10.6％，人参皂苷Rg1为41.5%，人参皂苷Re为4.8%，人参皂苷Rb1为25.7%，人参皂苷Rd为3.6%。三七皂苷R1，人参皂苷Rg1，人参皂苷Re，人参皂苷Rb1，人参皂苷Rd的总和为86.2%。

溶血与凝聚：按2010年版【中国药典】溶血与凝聚检查法对样品进行检测，溶血与凝聚安全检测上限可到41.5mg/mL。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims

1.一种三七总皂苷的制备方法，其特征在于，取三七提取液采用弱碱性阴离子交换树脂与苯乙烯骨架型大孔吸附树脂吸附，收集洗脱液，吸附脱色后干燥即得；其中所述弱碱性阴离子交换树脂与苯乙烯骨架型大孔吸附树脂的先后顺序没有限定。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，该方法具体为：取三七提取液，进行预处理，然后以0.1BV/小时以上的流速过弱碱性阴离子交换树脂，收集流出液，浓缩至无醇味，加水稀释后，用苯乙烯骨架型大孔吸附树脂吸附，水洗至清澈后，用10-80%的醇溶液洗脱，收集洗脱液，吸附脱色、干燥得三七总皂苷；其中所述预处理为取三七提取液浓缩至无醇味后加水稀释或取三七提取液用水稀释成10-80%的醇溶液。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，该方法具体为：取三七提取液浓缩至无醇味加水稀释后，以0.1BV/小时以上的流速过苯乙烯骨架型大孔吸附树脂，水洗至清澈后，用10-80%的醇溶液洗脱，收集洗脱液，进行后处理，然后过弱碱性阴离子交换树脂，收集流出液，吸附脱色、干燥得三七总皂苷；其中所述后处理为取洗脱液浓缩至无醇味后加水稀释或取洗脱液用水稀释成10-80%的醇溶液。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的方法，其特征在于，所述弱碱性阴离子交换树脂与三七提取液的体积比为1:0.2-10。

5.根据权利要求1-3所述的方法，其特征在于，所述苯乙烯骨架型大孔吸附树脂与三七提取液的体积比为1:0.2-10。

6.根据权利要求1-3任意一项所述的方法，其特征在于，所述三七提取液的制备方法为取三七粉碎成粗粉加入10-90%醇溶液，10℃以上，提取2次以上，每次1小时以上，合并提取液，过滤，收集滤液即得；其中所述10-90%醇溶液的加入量按mL/g计为三七粉的2倍以上。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述三七为三七根、三七根茎或三七根与三七根茎的混合物。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述醇溶液为甲醇的水溶液或乙醇的水溶液。

9.根据权利要求1-3任意一项所述的方法，其特征在于，所述弱碱性阴离子交换树脂为D941树脂或D900树脂。

10.根据权利要求1-3任意一项所述的方法，其特征在于，所述苯乙烯骨架型大孔交换树脂为D101树脂或HPD100树脂。

11.根据权利要求1-3任意一项所述的方法，其特征在于，所述吸附脱色为活性碳脱色、氧化铝脱色、离子交换树脂脱色中的一种或几种。